HAMBATAN PERTUMBUHAN PROBIOTIK STRAIN Lactobacillus acidophilus OLEH ANTIBIOTIK METRONIDAZOL BERDASARKAN PERBEDAAN WAKTU PEMBERIAN SECARA IN VITRO

Transkripsi

1 HAMBATAN PERTUMBUHAN PROBIOTIK STRAIN Lactobacillus acidophilus OLEH ANTIBIOTIK METRONIDAZOL BERDASARKAN PERBEDAAN WAKTU PEMBERIAN SECARA IN VITRO Skripsi I WAYAN SUDIASMARA JURUSAN FARMASI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS UDAYANA 2015

2 Lembar Pengesahan HAMBATAN PERTUMBUHAN PROBIOTIK STRAIN Lactobacillus acidophilus OLEH ANTIBIOTIK METRONIDAZOL BERDASARKAN PERBEDAAN WAKTU PEMBERIAN SECARA IN VITRO Skripsi Skripsi ini diajukan sebagai syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi (S.Farm) di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana Oleh I WAYAN SUDIASMARA NIM Pembimbing I Menyetujui: Pembimbing II Dewa Ayu Swastini, S.F., M.Farm., Apt. NIP Putu S.Yustiantara, S.Farm., M.Si.,Apt. NIP. Mengesahkan: Ketua Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. NIP

3 KATA PENGANTAR Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkat rahmat-nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul Hambatan Pertumbuhan Probiotik Strain Lactobacillus acidophilus oleh Antibiotik Metronidazol Berdasarkan Perbedaan Waktu Pemberian Secara In Vitro tepat pada waktunya. Penyusunan skripsi ini tidak terlepas dari dukungan, saran, dan bimbingan dari berbagai pihak. Maka dari itu, pada kesempatan ini penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada: 1. Ir. A. A. Gde Raka Dalem, M.Sc (Hons), selaku Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana. 2. Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt., selaku Ketua Jurusan Farmasi Fakultas MIPA Universitas Udayana. 3. Dewa Ayu Swastini, S.F., M.Farm., Apt., selaku dosen pembimbing I yang telah membantu dalam membimbing serta tak hentinya memberikan semangat dan dukungan hingga akhir penyusunan proposal ini. 4. Putu Sanna Yustiantara, S.Farm., M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing II yang juga telah banyak membimbing demi kelancaran penyusunan proposal ini. 5. Ibu Cokorda Istri Sri Arisanti, S.Farm., M.si., Apt., selaku penguji tugas akhir. Terima kasih atas saran dan arahannya. 6. Ni Luh Putu Vidya Paramita, S.Farm., M.sc., Apt., selaku penguji tugas akhir. Terima kasih atas saran dan arahannya. 7. Ni Putu Linda Laksmiani, S.Farm., M.sc., Apt., selaku penguji tugas akhir. Terima kasih atas saran dan arahannya. 8. Seluruh dosen pengajar beserta staf/pegawai di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana yang telah banyak membantu penulis.

4 9. Ibu Ni Wayan Nursini, S.Tp., M.P., selaku staf UPT Laboratorium Terpadu Biosains dan Bioteknologi Universitas Udayana yang telah membimbing, memberikan saran serta motivasi kepada penulis. 10. Orang tua yang sangat saya cintai dan hormati, Alm. I Nengah Suelen Bsc. dan Ni Ketut Deliani yang telah mengasuh dan membesarkan penulis, adik Ni Made Widiadnyani, yang selalu memberi motivasi dan dukungan. 11. Tim seperjuangan penulis, Krisna, Agung, dan Tiara yang banyak membantu dan memberikan semangat dalam penyusunan skripsi ini. 12. Seluruh mahasiswa jurusan Farmasi, kak Arya, kak Lia, kak Wida, kak Ages, kak Wahyu, kak Yuda, dan kak Ade. Anggota Ton 7 yaitu Yunita (Unik), Fatwa, Indra, Maitri, Dayu Dewi, Risma, dan GeJe yang selalu memberi semangat dan mengingatkan saya dalam berbagai hal. Kepada teman-teman yaitu Krisna, Prima, Dewa, Dwi, Sastra, Jeffry, Buntil, Indra, Agung, Andre, Sami, Ari, Roni, Redika, West, Butet, dan Yogi yang selalu menemani disaat suka maupun duka. Teman d lab biosain, kak Gung de, Wulan, Adiel, Banu, Gus Ari, dan Gus Nadi. 13. Teman terdekat Ni Made Ria Andini yang dari awal telah memberikan bantuan, motivasi, perhatian, semangat, pengertian, kesabaran, dan doa dalam segala kondisi selama penyusunan skripsi ini, penulis mengucapkan banyak terima kasih. 14. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan skripsi ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu. Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih belum sempurna. Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak yang bersifat membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih baik. Penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang memerlukan. Bukit Jimbaran, 3 Agustus 2015 Penulis

5 DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL... i LEMBAR PENGESAHAN... ii KATA PENGANTAR... iii DAFTAR ISI. v DAFTAR TABEL. vii DAFTAR GAMBAR.... viii DAFTAR LAMPIRAN. ix DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH... x BAB I PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang Rumusan Masalah Tujuan Penelitian Manfaat Penelitian. 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Definisi dan Prevalensi Diare Diare Akut Patofisiologi diare akut karena infeksi Terapi diare akut karena infeksi Antibiotik Metronidazol Probiotik Lactobacillus acidophilus Metode Difusi Cakram. 14 BAB III METODE PENELITIAN 3.1. Rancangan Penelitian Tempat dan Waktu Penelitian... 16

6 3.3. Alat dan Bahan Alat Bahan Objek Penelitian Variabel Penelitian Variabel bebas Variabel terikat Variabel terkendali Prosedur Penelitian Penyegaran isolat bakteri Lactobacillus acidophilus pada media MRS broth Uji konfirmasi isolat bakteri asam laktat Uji hambatan pertumbuhan probiotik oleh antibiotik Pengamatan dan pengukuran zona bening Analisis Data Skema Penelitian BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Penyegaran Isolat Bakteri Lactobacillus Acidophilus pada Media MRS Broth Hasil Uji Konfirmasi Isolat Bakteri Asam Laktat Hasil Uji Hambatan Pertumbuhan Probiotik oleh Antibiotik Pengamatan dan Pengukuran Zona Bening Analisis Data. 31 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan Saran DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

7 DAFTAR TABEL Halaman Tabel 2.1. Antibiotik Empiris untuk Diare Infeksi Bakteri. 8 Tabel 2.2. Presentase Kejadian Diare Akibat Pengobatan Antibiotik. 9 Tabel 3.1. Perlakuan Masing-masing Kelompok 19 Tabel 3.2. Kategori Kekuatan Aktivitas Antibakteri Metronidazol 21 Tabel 4.1. Pengukuran Zona Bening Masing-masing Kelompok... 31

8 DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1. Ragam Jenis Bentuk Batang Lactobacillus.. 13 Gambar 3.1. Skema Penelitian.. 23 Gambar 4.1. Pertumbuhan Lactobacillus acidophilus pada media MRS broth Gambar 4.2. Streak for single colony pada media MRS Agar. 25 Gambar 4.3. Bentuk Lactobacillus acidophilus yang tampak berbentuk batang dan berwarna ungu dibawah mikroskop dengan perbesaran 1000 kali 27 Gambar 4.4. Pembagian Kelompok Perlakuan dalam Pengujian 29 Gambar 4.5. Hasil Pengamatan Zona Bening dalam Sekali Pengulangan Gambar 4.6. Diagram Perbandingan Nilai Zona Hambat pada Masing-masing Kelompok Perlakuan. 32

9 DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Sterilisasi Alat.. 40 Lampiran 2. Pembuatan Larutan Gliserol 30% Steril Lampiran 3. Pembuatan Media Lampiran 4. Pembuatan Larutan Antibiotik Lampiran 5. Analisis Perbedaan Lampiran 6. Uji Asumsi dan Persyaratan Lampiran 7. Gambar-gambar Zona Bening DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH

10 BAL : Bakteri Asam Laktat Genus : Salah satu bentuk pengelompokan dalam klasifikasi makhluk hidup yang lebih rendah dari familia. Homeostasis : Suatu keadaan tubuh untuk mempertahankan keseimbangan dalam menghadapi kondisi yang dialaminya. Homofermentatif : Fermentasi bakteri asam laktat yang hanya menghasilkan asam laktat sebagai produknya. Inokulasi : Kegiatan pemindahan mikroorganisme dari tempat atau sumber asalnya ke media yang baru dengan tingkat ketelitian yang sangat tinggi dan aseptis. Immunocompromised : Kondisi abnormal di mana kemampuan sistem imun seseorang untuk melawan infeksi menurun. Isolat : Kelompok individu yang dipisahkan oleh batasan geografis, genetik, ekologis, sosial atau buatan yang mencegah perkawinan dengan individu lain di luar batasan tadi. Mikroflora : Istilah yang menggambarkan berbagai macam mikroorganisme seperti bakteri dan fungi yang merupakan penghuni tetap dari bagian-bagian tubuh tertentu khususnya kulit dan usus besar. Patogen : Agen atau mikroorganisme penyebab penyakit. Reprodusibel : Percobaan yang mendapatkan hasil yang sama walaupun dilakukan pada tempat (laboratorium), operator, dan peralatan yang berbeda. Resisten : Mikroorganisme yang mampu menahan efek obat yang mematikan terhadap sebagian besar anggota spesiesnya. Resistensi : Kemampuan alami suatu organisme untuk menjadi tidak terpengaruh oleh agen berbahaya yang ada pada lingkungannya.

11 Strain/Galur Streak for single colony Toksin : Kelompok organisme dalam suatu spesies yang ditandai dengan beberapa sifat yang khas. : Metode untuk memisahkan mikroorganisme menjadi koloni tunggal dengan cara menggoreskan isolat pada media agar. : Zat yang dihasilkan oleh organisme hidup (tanaman, hewan dan bakteri tertentu) yang beracun bagi manusia.

12 ABSTRAK Angka kesakitan diare di Indonesia dari tahun ke tahun cenderung meningkat. Jumlah kematian tertinggi terjadi pada anak. Diare yang paling sering menyerang anak adalah diare akut karena infeksi, dan antibiotik diberikan untuk mengeliminasi penyebab infeksi. Antibiotik yang diberikan biasanya tidak bekerja spesifik pada bakteri penyebab diare, sehingga dapat menyebabkan kematian mikroflora usus normal dan dapat memperpanjang episode diare akut. Pemberian probiotik bertujuan untuk menjaga keseimbangan mikroflora usus normal. Probiotik dan antibiotik memiliki aksi yang berbeda, namun pada praktek klinis probiotik dan antibiotik sering dikombinasikan. Tujuan penelitian ini adalah untuk membuktikan ada atau tidaknya perbedaan hambatan pertumbuhan probiotik oleh antibiotik berdasarkan perbedaan waktu pemberian secara in vitro melalui metode difusi cakram. Dalam pengujian digunakan 4 kelompok, yaitu: kelompok 1 (Pemberian probiotik, 2 jam kemudian diberikan antibiotik), kelompok 2 (Pemberian probiotik dan antibiotik secara bersama), kelompok 3 (Pemberian antibiotik, 2 jam kemudian diberikan probiotik), dan kelompok 4 (kontrol negatif). Hasil penelitian menunjukkan bahwa adanya perbedaan hambatan pertumbuhan probiotik strain Lactobacillus acidophilus oleh antibiotik metronidazol berdasarkan perbedaan waktu pemberian kombinasi antibiotik dan probiotik secara in vitro. Perbedaan waktu pemberian menghasilkan diameter zona hambat yang berbeda bermakna dengan nilai signifikan (P<0,05) dan ketiga kelompok uji memiliki zona hambat yang lebih besar dibandingkan kontrol negatif. Kelompok yang memiliki zona hambat yang paling tinggi adalah kelompok 2, dan kelompok yang memiliki zona hambat yang paling kecil adalah kelompok 3. Kata Kunci: Diare, Antibiotik, Probiotik, Zona Hambat, In Vitro

13 ABSTRACT Morbidity of diarrhea in Indonesia from year to year tends to increase. The highest number of deaths occurred in children. Diarrhea is most often affects children is acute diarrhea due to infection, and antibiotics are given to eliminate the cause of the infection. Antibiotics are usually not given specific work on bacteria that cause diarrhea, which can lead to death of the normal intestinal microflora and can prolong episodes of acute diarrhea. Giving probiotics aim to maintain the balance of normal intestinal microflora. Probiotics and antibiotics have different actions, but in clinical practice often combined probiotics and antibiotics. The purpose of this study was to prove whether or not the difference in growth inhibition of probiotics by antibiotics based on timing differences in vitro by disc diffusion method. In the test used 4 groups: group 1 (Giving probiotics, 2 hours and then given an antibiotic), group 2 (Giving probiotics and antibiotics together), group 3 (antibiotics, 2 hours and then given probiotics), and group 4 (control negative). The results showed that the difference in growth inhibition of probiotic strains Lactobacillus acidophilus by antibiotic metronidazole is based on differences in the timing of a combination of antibiotics and probiotics in vitro. Timing differences produce different diameters significant inhibition zone with significant values (P <0.05) and the third test group had a greater inhibitory zone compared to the negative control. The group that had the highest inhibition zone is a group 2, and group having the smallest inhibitory zone is the 3 groups. Keywords: Diarrhea, Antibiotics, Probiotics, Inhibition Zone, In Vitro