ISOLASI DAN IDENTIFIKASI KONSTITUEN ORGANIK TANAMAN DAUN PALIASA (Kleinhovia hospita Linn.) PADA KELARUTAN BERDASARKAN KELOMPOK POLARITASNYA

Transkripsi

1 Marina Chimica Acta, Oktober 00, hal. -0 Vol. No. Jurusan Kimia FMIPA, Universitas Hasanuddin ISSN - ISOLASI DAN IDENTIFIKASI KONSTITUEN ORGANIK TANAMAN DAUN PALIASA (Kleinhovia hospita Linn.) PADA KELARUTAN BERDASARKAN KELOMPOK POLARITASNYA Alfian Noor*, A.S. Kumanireng, Rini Kartikasari, Suryaningsih, A. Hakim, dan R. Takbir Jurusan Kimia Fakultas MIPA Universitas Hasanuddin Kampus Tamalanrea, Makassar 0 * Kontak : nuklir@indosat.net.id ABSTRAK Telah dilakukan usaha mengisolasi komponen kimia daun Paliasa, Kleinhovia hospita Linn., berdasarkan variasi kelompok polaritas mulai dari tetapan dielektrik sampai. Proses pemisahan dimulai dari maserasi, fraksinasi, ekstraksi, dan dilanjutkan dengan identifikasi kromatografik lapis tipis. Telah ditemukan 0 isolat yang cukup murni dan dapat dilanjutkan untuk analisis struktural komponen yang bersangkutan. Hasil analisis empat isolat dengan spektrometri IR, UV dan GC-MS menunjukkan adanya kelompok senyawa terpenoid dan fenolik (serapan puncak UV pada 0,, dan nm) sebagaimana yang lazim dijumpai dalam senyawa bahan alam lainnya. Sejauh yang diketahui belum ada rujukan struktural komponen kimia daun Paliasa selain yang telah dilakukan. Perlu penelitian lebih banyak dalam skrining maupun bioassay esktrak yang dihasilkan. Keywords : Isolasi, identifikasi, paliasa, polaritas PENDAHULUAN Daun Paliasa (DP) secara tradisional telah lama dikenal di Sulawesi Selatan sebagai tumbuhan berkhasiat yang digunakan untuk pengobatan alamiah terhadap liver dan penyakit lainnya. Sampai sekarang sangat kurang informasi ilmiah yang dapat diketahui untuk menjelaskan kandungan apa saja dalam DP yang bertanggung jawab sebagai komponen kimia farmasetik untuk menyembuhkan penyakit tersebut. Bahkan buku penuntun terbaru, Prosea Handbook on Medicinal and Poisonous Plants in Southeast Asia 00, yang berisi daftar seluruh jenis tanaman obat dan beracun di Asia Tenggara, sama sekali tidak memuat informasi tentang tanaman DP. Daun Paliasa ( Kleinhovia hospita Linn.) merupakan pohon yang tingginya antara 0 meter. Daunnya bertangkai panjang, berbentuk jantung, lebar, cm dan panjang cm, pada pangkalnya bertulang daun menjari. Berdasarkan pengalaman empiris khasiat DP adalah antara lain dapat menyembuhkan penyakit hepatitis, kolesterol tinggi, gula, dan hipertensi (Herlina ). Bahkan di beberapa tempat kambium pohon paliasa digunakan untuk menyembuhkan pneumonia dan juga menghilangkan kutu rambut (Latif ). Menurut Heyne () daun Paliasa juga banyak dipakai sebagai pengharum rambut dan mengobati iritasi mata. Pemakai DP sebagai obat tersebar di seluruh nusantara utamanya di Sulawesi Selatan, Maluku, Ternate, dan Papua. Bahkan penggunanya sampai di Papua New Guinea (PNG) dan Kepulauan Solomon di Pasifik. Para pemakai DP sebagai obat umumnya berasal dari keluarga ekonomi menengah ke bawah dan kebanyakan digunakan sebagai obat alternatif apabila pengobatan modern tidak lagi efektif. Secara umum kulit pohon Paliasa mengandung minyak atsiri, triterpenoid, senyawa sianogenik yang berfungsi membasmi ektoparasit seperti kutu, juga mengandung asam lemak dan cincin siklopropenil yang terdiri atas scopoletin, kempferol, dan quercetin. Namun bunga daun Paliasa mengandung juga flavonoid yang berkhasiat untuk menstimulasi jantung, memperkuat pembuluh darah kapiler, dan bertindak sebagai antioksidan dan lemak. Atas dasar itu, perlu diadakan penelitian yang diarahkan untuk menjelaskan secara ilmiah aspek khasiatnya melalui analisis kimia keberadaan senyawa-senyawa organik yang dikenal secara umum menjadi kerangka atau back bone suatu senyawa obat. Langkah penelitian ini penting karena hasilnya akan menjadi dasar kajian lebih lanjut untuk uji bioaktivitas, bioassay maupun uji farmakologisnya. Tujuan penelitian adalah mengisolasi dan mengidentifikasi konstituen organik dalam tanaman DP yang dipisahkan berdasarkan kelarutannya dalam pelarut dengan kelompok polaritas tertentu. Dengan strategi ini, kemungkinan identifikasi dan perolehan cepat senyawa-senyawa kimia berkhasiat dapat secara tajam menunjukkan rute pemisahan yang perlu diambil. BAHAN DAN METODE Penelitian dilakukan dengan partisipasi dan pelibatan aktif mahasiswa kimia yang melaksanakan penelitian skripsi yang masing-masing melakukan pemisahan komponen-komponen kimia daun Paliasa dengan kelompok polaritas pelarut yang

2 Alfian Noor, A.S. Kumanireng, dkk Mar. Chim Acta berbeda berdasarkan variasi tetapan dielektrik, ε = sampai dengan ε =. Tabel- di bawah ini menggambarkan distribusi tugas penelitian (Grup) mahasiswa terhadap kelompok pelarut yang bersangkutan. Polaritas Pelarut Grup Tabel Kategorisasi Kelompok Pelarut Kelompok Pelarut berdasarkan Tetapan Dielektrik, ε Grup-,00;,0;,00;, & Grup-,0; 0.0;.0;,0 & Grup-,0; 0,;,0;,0; & Grup-,0; 0,0;,0;,0; & Pengambilan contoh daun paliasa dilakukan secara acak dan diutamakan daun Paliasa yang pohonnya sudah mulai berbunga. Contoh daun Paliasa diambil pada saat daun tersebut sudah tampak berwarna hijau tua. Contoh dibersihkan dan dianginkan dalam kondisi tidak terpapar sinar matahari secara langsung. Penganginan berlangsung selama tiga hari. Contoh lalu digunting dalam keping kecil ( cm x 0, cm) untuk memperoleh perlakuan selanjutnya. Untuk penentuan kadar air, sebagian kecil potongan daun Paliasa ditimbang sebelum dan sesudah pemanasan dalam oven pada suhu 0 0 derajat Celsius selama jam. Penimbangan ulang dibuat setelah dimasukkan ke dalam dessikator untuk mendapatkan berat tetap. Bahan kimia yang diperlukan antara lain : NaOH 0, N; kloroform; aseton; etanol; MgSO ; asetonitril; NaCl jenuh; n-heksana; etil asetat; n-butanol; dan lain-lainnya) sedangkan material dan peralatan yang dipersiapkan adalah alat gelas serta Kromatografi Lapis Tipis Analitik (KLTA), Kromatografi Lapis Tipis Preparatif (KLTP) dan Rotary Evaporator. Fasilitas analisis instrumentasi optik infra merah, GC-MS, dan UV dilaksanakan melalui kerjasama dengan kelompok peneliti KOBA (Kimia Organik Bahan Alam) Institut Teknologi Bandung dan Tim Analitik Universitas Pajajaran Bandung. Analisis hasil dan interpretasinya secara keseluruhan dibuat setelah melakukan analisis seperti tercantum dalam Gambar-. HASIL DAN PEMBAHASAN Dari hasil analisis dan perhitungan ditemukan kadar air daun paliasa adalah 0,0 %. Setelah maserasi dan evaporasi didapatkan ekstrak yang mengandung komponen-komponen kimia daun Paliasa dengan polaritas tertentu. Setiap kelompok pelarut menghasilkan lima ekstrak. Setiap ekstrak dipisahkan lebih lanjut dengan teknik kromatografi lapis tipis (KLT). Setiap KLT dengan eluen yang sesuai menghasilkan spot atau noda sebagai hasil pemisahan komponen-komponen kimia yang ada dalam ekstrak tersebut. Ekstrak-ekstrak ini menghasilkan noda yang jumlahnya bervariasi. Noda-noda tersebut dilarutkan dalam pelarut yang sesuai untuk selanjutnya dikeringkan menggunakan rotary evaporator menghasilkan isolat tunggal. Sesudah itu dilakukan kembali KLTA untuk memastikan mutu isolat tunggal yang diperoleh khususnya isolat terpilih yang akan dianalisis secara instrumental. Jika dapat diperoleh isolat tunggal dalam kondisi yang baik dan meyakinkan maka fase berikut adalah melakukan elusidasi struktur melalui analisis instrumental berbagai metode spektroskopi. Hasil analisis gravimetrik isolat yang dapat dilihat dalam Tabel- dibawah ini menunjukkan bobot isolat yang mewakili kurang lebih % dari berat contoh awal. Identifikasi isolat dilaksanakan melalui seleksi ekstrak yang diperkirakan dapat memberikan informasi yang berguna. Karena keterbatasan biaya dan waktu, tiga buah ekstrak dipilih untuk dianalisis dengan spektrofotometri UV dan satu diantaranya ditambah dengan spektrofotometri IR dan GC-MS. Khusus GCMS, spesifikasi instrumen dapat dilihat dalam kotak dibawah ini. GC : Model HP 0 series II Detektor MS : Model HP 0 series Kolom : HP- (Crosslinked % phme Silicone), p= m, d= 0, mm, ketebalan fasa diam dalam kolom= 0, μm Fasa gerak : Gas Helium ml/mnt Bankdata : Wiley T injektor : 0 o C T kolom : Initial T 0 o C/ Elevated T o C/ Final T 0 o C/0 T detektor : 0 o C

3 Vol. No. Isolasi dan Identifikasi Konstituen Organik.. Daun Paliasa (DP) Maserasi berdasarkan polaritas pelarut Maserat I Maserat II Maserat III Maserat IV 0 Ekstrak berdasarkan variasi 0 polaritas dalam bentuk tetapan dielektrik, ε Identifikasi Komponen Isolat Tunggal dengan KLTA 0 Isolat Tunggal yang terdistribusi secara heterogen dalam 0 polaritas, ε Isolasi Kuantitatif Komponen Isolat Tunggal dengan KLTP dan analisis gravimetrik 0 isolat tunggal dengan total konsentrasi ppm (mg/kg DP) Analisis Instrumental (IR, UV, dan GCMS) tiga isolat terpilih Spektra IR, UV, MS dan kromatogram GC Analisis dan Interpretasi Hasil Akhir Riset Gambar. Bagan Analisis Penelitian Daun Paliasa (DP)

4 Alfian Noor, A.S. Kumanireng, dkk Mar. Chim Acta Tabel-. Data Kuantitatif Penelitian Daun Paliasa No. Polaritas ( ) / Pelarut Isolat Tunggal Berat (mg) ppm.,0 / n-heksana., / Kloroform.,0 / Etil Asetat., / Metil Salisilat. / Air, / (as. asetat : metil salisilat) ( : ) 0, / (n-heksan : -propanol) ( : ), / (Kloroform : Aseton) ( : ), / -Propanol 0 / Air., / -Butanol 0,,,,,,,,,,,,,,0, 0,,,0,,0 0,, 0,0 0,0 0,0 0,0 0, 0, 0,0 0,0 0,0 0,,0 0, 0,0 0, 0, 0, 0, 0, 0, 0,0 0,0 0, 0, 0, 0,0 0,0,,0, 0,,,,,,,0,0,0,, 0,, 0, 0, 0, 0,, 0,0,0 0,0,0, 0, 0, 0, 0,

5 Vol. No. Isolasi dan Identifikasi Konstituen Organik.. Lanjutan Data Kuantitatif Penelitian Daun Paliasa No. Polaritas ( ) / Pelarut Isolat Tunggal Berat (mg) ppm. 0, / Aseton., &, / Aseton : Etanol (:) & Etanol. / Air., & 0, / (Etanol : Metanol) ( : ) & (Etanol : Metanol) ( : )., / Metanol., / (Etanol : Air) ( : ) /Air 0 0 0, 0, 0, 0,0 0,0 0. 0,0 0,0 0,0 0,0 0, 0,0 0, 0, 0,0 0, 0,0 0, 0, 0,0 0,0 0, 0,0 0, ,0, 0, 0,0 0, 0, 0, 0, 0, 0,0, 0,0 0. 0, 0,0 0. 0,0 0. 0,0 0,0 0,0 0, 00, 0, 0,0 0, Total 0,, Total berat isolat : 0, mg

6 Alfian Noor, A.S. Kumanireng, dkk Mar. Chim Acta Kromatogram hasil GC-MS contoh ekstrak daun Paliasa (kode ε,, solvent asam asetat:metil salisilat :, spot ) dapat dilihat dalam Gambar -, dengan menunjukkan beberapa informasi sebagai berikut :. Komponen puncak dalam kromatogram yang terdiri dari dua puncak, yaitu pada waktu retensi, menit dan, menit, yang mudah dideteksi menunjukkan dua campuran komponen isolat yang bersangkutan. Ini bisa terjadi karena beberapa sebab antara lain belum tuntasnya pemisahan isolat dengan cara KLTP, kolom kapiler yang kurang murni, dan proses verifikasi dan validasi pemastian isolat tunggal kurang sempurna. Adanya noise (bising karena sistem instrumen) yang cukup tinggi telah memberikan tampilan kromatogram yang sangat fluktuatif dekat baseline. Ini adalah faktor yang mempersulit analisis GC-MS (lihat Gambar -). Spektrum massa yang dihasilkan kurang informatif yang mungkin disebabkan terbatasnya senyawa pembanding dalam Wiley Library peralatan dimaksud. Gambar-. Spektrum UV ekstrak dengan polaritas (ε),0 dengan puncak serapan menonjol pada λ 0 nm yang mengindikasikan senyawa aromatik Gambar-. Spektrum UV ekstrak dengan polaritas (ε),dengan puncak serapan menonjol pada λ nm yang mengindikasikan senyawa aromatik Gambar-. Kromatogram contoh ekstrak daun Paliasa dengan dua puncak utama yaitu waktu retensi masing-masing, menit dan, menit. Tujuan utama analisis Ultra Violet adalah untuk melihat kemungkinan transisi elektronik molekul atau isolat yang bersangkutan. Spektrum contoh Rini _ memperlihatkan perbedaan dengan spektrum Rini _. Dalam spektrum -, puncak tunggal dijumpai pada serapan panjang gelombang 0, yang dikenal merupakan kelompok senyawasenyawa terpenoid. Dalam spektrum _, puncak serapan adalah nm sebagai petunjuk adanya senyawa-senyawa fenolik dengan ikatan konyugasi panjang. Perbedaan ini semata-mata menunjukkan adanya campuran kelompok senyawa dalam polaritas dengan tetapan dielektrik,0. Gambar-. Spektrum UV ekstrak dengan polaritas (ε),0 dengan puncak serapan menonjol pada λ 0,, dan nm mengindikasikan senyawa aromatik dengan jumlah inti bervariasi

7 Vol. No. Isolasi dan Identifikasi Konstituen Organik.. Adapun spektrum UV contoh Surya - dan - secara umum memperlihatkan kecenderungan yang serupa yaitu serapan puncak pada 0/0, /, dan yang mengindikasikan kelompok terpenoid dan fenolik baik rantai konyugasi pendek maupun rantai konyugasi panjang. Gambar-. Spektrum infra merah (IR) contoh Surya - yaitu ekstrak dengan spot ketiga pada polaritas (ε),0 Gambar-. Spektrum UV contoh Surya - yaitu ekstrak dengan polaritas (ε),0 dengan puncak serapan menonjol pada λ 0,, dan nm mengindikasikan senyawa aromatik dengan jumlah inti bervariasi Dengan demikian jelas sekali bahwa contoh polaritas rendah (ε =,0) mungkin memiliki jumlah kelompok senyawa bahan alam yang lebih sederhana dibandingkan dengan kelompok senyawa polaritas lebih tinggi (ε =,0). Hasil identifikasi IR contoh mengindikasikan adanya gugus fungsi hidroksil, C-H alifatik dan C-C aromatik. Setelah dilakukan pembandingan dengan kepustakaan KOBA ITB (Kimia Organik Bahan Alam Institut Teknologi Bandung) dijumpai adanya kemiripan dengan korelasi lemah yaitu 0, dengan spektrum molekul sikloartobiloksanton. Jika dibandingkan dengan spektrum UV, contoh ini dapat dipastikan mengandung senyawa fenolik dan kecil kemungkinan mengandung senyawa terpenoid. Pengamatan dalam sinar UV (KLT) tidak menunjukkan pendar fluor dan pada penyemprotan dengan larutan CeSO tidak menunjukkan spot berwarna ungu sebagai indikasi terpenoid. Tampaknya spektrum IR dan UV memberikan data yang saling mendukung pada contoh Surya -. Gambar-. Spektra IR contoh Surya - yang dibandingkan dengan spektra standard Indri-C dan Ati--. Dari hasil isolasi dan identifikasi diatas telah berhasil ditemukan sekurangnya isolat, yang diharapkan telah berbentuk isolat tunggal yang terkandung dalam daun Paliasa. Namun demikian, setelah eksplorasi lebih jauh dengan analisis instrumen sejumlah contoh, isolat tersebut masih mengandung lebih dari satu senyawa. Dapatlah diperkirakan bahwa isolat lainnya kemungkinan besar masih terdiri sejumlah kecil senyawa yang mempunyai polaritas sama tetapi sifat senyawa yang berbeda lemah. Ke- isolat ini adalah modal penting dalam meneruskan riset daun Paliasa yang relatif masih baru dan klassifikasi komponen kimia bahan alamnya masih perlu elaborasi dan konfirmasi struktural lebih lanjut. Hasil identifikasi kimia analisis instrumental dengan UV, IR dan GCMS empat buah contoh menunjukkan adanya kelompok senyawa terpenoid dan fenolik (serapan puncak UV pada 0,, dan

8 Alfian Noor, A.S. Kumanireng, dkk Mar. Chim Acta nm) sebagaimana yang lazim dijumpai dalam senyawa bahan alam lainnya. Hasil temuan terakhir dengan contoh famili Moraceae (Sukamto, 00) mengungkapkan adanya senyawa-senyawa fenol yang termasuk dalam golongan kumarin, stilben, flavonoid, dan adduct Diels-Alder. Informasi kimia bahan alam saat ini masih sangat terbatas sehingga masih kurang artikel yang dapat dirujuk untuk melengkapi informasi dari hasil penelitian ini. Selain itu, spesies Kleinhovia hospita Linn. yang merupakan satu dari dua spesies dalam jenis familia ini telah membuat hasil studi ini menjadi satu-satunya rujukan struktural kimia saat ini meskpun bentuknya masih sangat sederhana. Selain itu, aktivitas bioassay mulai dikembangkan melalui kerjasama dengan grup Biokimia dan Bioteknologi. Dengan melanjutkan riset ini maka hasilnya akan dapat dimanfaatkan oleh dunia industri farmasi melalui pengujian yang lebih ilmiah tentang khasiat obat daun Paliasa. Ini akan dapat menjawab pertanyaan masyarakat luas tentang pemakaian sederhana dan tradisional daun Paliasa selama ini untuk mengobati berbagai macam penyakit. Bahkan lebih jauh lagi, ada kemungkinan pembuatan sediaan fitofarmaka yang murah dan efektif bagi penduduk Indonesia. Diharapkan tanaman daun Paliasa dapat diperluas menjadi kajian pohon Paliasa dengan segala aspeknya seperti akar, daun, batang dan sebagainya. KESIMPULAN Kegiatan penelitian daun Paliasa tetap dilanjutkan dengan dua strategi yaitu melanjutkan pemeriksaan ekstrak yang telah dihasilkan baik pemurnian maupun elusidasi strukturnya. Kedua, tetap melibatkan mahasiswa penelitian tingkat skripsi maupun tingkat tesis magister sehingga seluruh informasi yang diperlukan akan tuntas diketahui. Ucapan Terima Kasih. Terima kasih kepada pengelola proyek TPSDP Batch II CSP yang telah memberikan bantuan finansial sehingga riset ini dapat diselesaikan pada waktunya dengan bantuan empat mahasiswa yang melakukan penelitian skripsi. DAFTAR PUSTAKA Anonym 00. Prosea Handbook on Medicinal and Poisonous Plants in Southeast Asia, Vol. I & II, No., The Netherlands Backer C.A. Flora of Java, Vol. I, N.V.P. Noordhoff, Groningen, The Netherlands Haeruddin. Isolasi dan Identifikasi Komponen Kimia Ekstrak Metanol Daun Kayu Paliasa Kleinhovia hospital Linn. Asal Ujung Pandang. Tesis Sarjana Farmasi Fakultas MIPA Universitas Hasanuddin. Hembing.W 000. Tumbuhan Berkhasiat Obat Indonesia, Jilid I, PT Prestasi Insan Indonesia, Jakarta Herlina. Pengaruh Infus Daun Kayu Paliasa Kleinhovia hospital Linn. Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah Kelinci. Skripsi, Jurusan Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Hasanuddin Heyne, K. Tumbuhan Berguna Indonesia. Cetakan I, Jilid III, Terjemahan Badan Litbang Kehutanan, Jakarta Latif. A. Kleinhovia hospital Linn., Dalam : Farida Hanum & L.J.G. Van Der Maesen. Plant Resources in Southeast Asia, No., The Netherlands

9 Vol. No. Isolasi dan Identifikasi Konstituen Organik.. Sukamto, N 00. Profil Fitokimia Beberapa Spesies Moraceae Indonesia. Disertasi, ITB, hal. - Suryawati, ST. Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Paliasa Kleinhovia hospital Linn. Terhadap Hati Hewan Uji Mencit. Skripsi, Jurusan Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Hasanuddin 0