MIKROENKAPSULASI DOUBLE COATING MENGGUNAKAN NATRIUM ALGINAT DAN KITOSAN SEBAGAI PENYALUT DAN PROPRANOLOL HCL SEBAGAI MODEL SKRIPSI

Transkripsi

1 UNIVERSITAS INDONESIA MIKROENKAPSULASI DOUBLE COATING MENGGUNAKAN NATRIUM ALGINAT DAN KITOSAN SEBAGAI PENYALUT DAN PROPRANOLOL HCL SEBAGAI MODEL SKRIPSI TYAS PAWESTRISIWI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM PROGRAM SARJANA FARMASI DEPOK JULI 2011

2 UNIVERSITAS INDONESIA MIKROENKAPSULASI DOUBLE COATING MENGGUNAKAN NATRIUM ALGINAT DAN KITOSAN SEBAGAI PENYALUT DAN PROPRANOLOL HCL SEBAGAI MODEL SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memeperoleh gelar Sarjana Farmasi TYAS PAWESTRISIWI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM PROGRAM SARJANA FARMASI DEPOK JULI 2011 ii

3

4

5 KATA PENGANTAR Puji syukur saya panjatkan kepada Allah SWT, karena atas berkat dan rahmat-nya, saya dapat menyelesaikan skripsi ini. Penulisan skripsi ini dilakukan dalam rangka memenuhi salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Saya menyadari bahwa, tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak, dari masa perkuliahan sampai pada penyusunan skripsi ini, sangatlah sulit bagi saya untuk menyelesaikan skripsi ini. Oleh karena itu, saya mengucapkan terima kasih kepada : 1. Sutriyo, M.Si., Apt selaku pembimbing yang telah menyediakan waktu, tenaga, dan pikiran untuk mengarahkan saya dalam penulisan skripsi ini; 2. Prof. Dr. Yahdiana Harahap, MS., Apt selaku Ketua Departemen Farmasi FMIPA UI; 3. Dr. Berna Elya, M.Si., Apt selaku Ketua Program Sarjana Farmasi Reguler Departemen Farmasi FMIPA UI; 4. Dr. Harmita, Apt. selaku pembimbing akademis yang telah memberikan bimbingan selama penulis menempuh pendidikan di Departemen Farmasi FMIPA UI; 5. Seluruh dosen/staf pengajar Departemen Farmasi FMIPA UI, terutama atas ilmu pengetahuan, didikan, bantuan, dan saran selama ini; 6. Seluruh pegawai dan laboran Departemen Farmasi UI terutama mbak Deva, pak Eri, Mas Slamet, Pak Rustam, Pak Yono, Mbak Tini, pak Ma ruf, dan Pak Suroto atas bantuannya selama penulis melakukan penelitian; 7. PT. Kimia Farma yang telah memberikan bantuan berupa bahan baku selama penelitian; 8. Keluargaku tercinta, Mama, Bapak, Didit, dan seluruh keluarga besar yang selalu memberikan dukungan baik moral maupun material; 9. Teman-teman terdekat Khai, Mega, Hana, Depe, Isna, Purwinda, Fika, Citra, Berwi, Marista, Desy, dan Sandi yang selalu memberikan bantuan dan semangat kepada penulis, serta seluruh teman Farmasi Reguler 2007 yang telah berjuang bersama dalam suka maupun duka; dan v

6 10. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan namanya yang turut berpartisipasi dalam memberikan bantuan selama penelitian dan penyusunan skripsi ini. Akhir kata, saya berharap Allah SWT akan membalas segala kebaikan dari semua pihak yang telah membantu. Penulis menyadari masih banyak kekurangan dalam penelitian dan penyusunan skripsi ini. Semoga skripsi ini memberikan manfaat bagi pengembangan ilmu pengetahuan. Penulis 2011 vi

7

8 ABSTRAK Nama : Tyas Pawestrisiwi Program Studi : Farmasi Judul : Mikroenkapsulasi Double Coating Menggunakan Natrium Alginat dan Kitosan sebagai Penyalut dan Propranolol HCL sebagai Model Natrium alginat merupakan polimer anionik yang akan membentuk gel yang tidak larut air jika berinteraksi dengan kation divalent seperti kalsium. Untuk menjaga stabilitas secara kimia dan mekanik, mikrokapsul alginat disalut kembali dengan polimer kationik, yaitu kitosan. Penelitian ini bertujuan untuk melihat kemampuan double coating natrium alginat dan kitosan dalam menahan pelepasan obat. Model zat aktif yang digunakan adalah propranolol HCl. Mikrokapsul dibuat dengan metode gelasi eksternal dan dikarakterisasi meliputi bentuk dan morfologi, distribusi ukuran, efisiensi proses, efisiensi penjerapan dan uji pelepasan in vitro. Mikrokapsul yang dihasilkan berpori pada permukaan, distribusi terbesarnya berada pada ukuran lebih besar dari 1180 µm dengan efisiensi proses sebesar 74,28% dan efisiensi penjerapan sebesar 29,65%. Uji pelepasan zat aktif dari mikrokapsul dilakukan pada medium asam klorida ph 1,2 dan dapar fosfat ph 6,8. Hasil penelitian menunjukan, pelepasan propranolol HCl dari mikrokapsul alginat dan alginat-kitosan tidak berbeda secara signifikan. Kata Kunci : Mikroenkapsulasi, Double Coating, Natrium Alginat, Kitosan, Propranolol HCl xiv+ 50 halaman; 13 gambar; 4 tabel; 15 lampiran Daftar Acuan : 27 ( ) viii

9 ABSTRACT Name : Tyas Pawestrisiwi Program Study : Pharmacy Title : Double Coating Microencapsulation Using Sodium Alginate and Chitosan as Coating Agent and Propranolol HCl as a Model Sodium alginate is an anionic polymer which will form water-insoluble gel if it interacts with divalent cations such as calcium. To maintain the chemical and mechanical stability, alginate microcapsules coated again with cationic polymers, which is chitosan. This study aims to determine the ability of the double coating of sodium alginate and chitosan in retard drug release. Model of the active substance used is propranolol HCl. Microcapsules were prepared by external gelation method and then characterized include shape and morphology, size distribution, process efficiency, adsorption efficiency and in vitro release test. Microcapsules have porous on the surface, most of particle size distribution is greater than 1180 μ with the process efficiency 74,28% and the adsorption efficiency 29,65%. The release test of active substance from microcapsules performed in ph 1,2 hydrochloric acid and ph 6,8 phosphate buffer. Results showed the release of propranolol HCl from alginate microcapsules and alginate-chitosan microcapsule did not differ significantly. Key Word : Microencapsulation, Double Coating, Sodium Alginate, Chitosan, Propranolol HCL xiv+ 50 pages; 13 pictures; 4 table; 15 appendixes References : 27 ( ) ix

10 DAFTAR ISI HALAMAN SAMPUL...i HALAMAN JUDUL...ii LEMBAR PERNYATAAN ORISINALITAS...iii LEMBAR PENGESAHAN...iv KATA PENGANTAR...v LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI ILMIAH...vii ABSTRAK...viii ABSTRACT...ix DAFTAR ISI...x DAFTAR GAMBAR...xi DAFTAR TABEL...xii DAFTAR LAMPIRAN...xiii BAB 1 PENDAHULUAN Latar Belakang Tujuan Penelitian...3 BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA Mikroenkapsulasi Natrium Alginat Kitosan Sedian Lepas Lambat Propranolol HCl...15 BAB 3 METODE PENELITIAN Lokasi dan Waktu Penelitian Alat Bahan Cara Kerja...16 BAB 4 PEMBAHASAN Optimasi Pembuatan Mikrokapsul Kalsium Alginat Kosong sebagai Uji Pendahuluan Pembuatan Mikrokapsul Kalsium Alginat berisi Propranolol HCl Penyalutan Mikrokapsul Kalsium Alginat Berisi Propranolol HCl dengan Kitosan Pembuatan Kurva Kalibrasi Evaluasi Mikrokapsul...25 BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Saran...35 DAFTAR ACUAN...36 x

11 DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1. Morfologi Mikrokapsul...4 Gambar 2.2. Proses Terjadinya Tautan Silang antara Polimer Natrium Alginat dan Ion Kalsium...8 Gambar 2.3. Struktur Kimia Natrium Alginat...11 Gambar 2.4. Struktur Kimia Kitosan...13 Gambar 2.5. Struktur Kimia Propranolol HCl...15 Gambar 4.1. Kurva Kalibrasi Propranolol HCl dalam Medium Asam Klorida ph 1, Gambar 4.2. Kurva Kalibrasi Propranolol HCl dalam Medium Dapar Fosfat ph 6, Gambar 4.3. Hasil SEM Mikrokapsul Alginat Formula 2 dengan Perbesaran 1000 Kali...25 Gambar 4.4. Hasil SEM Mikrokapsul Alginat Formula 2 yang Disalut Kitosan dengan Perbesaran 500 Kali...25 Gambar 4.5. Profil Pelepasan Propranolol HCl Dari Mikrokapsul Alginat dalam Medium Asam Klorida ph 1, Gambar 4.6. Profil Pelepasan Propranolol HCl Dari Mikrokapsul Alginat dalam Medium Dapar Fosfat ph 6, Gambar 4.7. Profil Pelepasan Propranolol HCl Dari Mikrokapsul Alginat dan alginat-kitosan dalam Medium Asam Klorida ph 1, Gambar 4.8. Profil Pelepasan Propranolol HCl Dari Mikrokapsul Alginat dalam Medium Dapar Fosfat ph 6, xi

12 DAFTAR TABEL Tabel 3.1. Formula Mikrokapsul...17 Tabel 4.3. Data Distribusi Ukuran Partikel Mikrokapsul...26 Tabel 4.4. Data Efisiensi Proses Mikrokapsul Alginat...27 Tabel 4.5. Data Kandungan dan Efisiensi Penjerapan Propranolol HCl dalam Mikrokapsul Alginat...27 xii

13 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Mikrokapsul Alginat Basah...39 Lampiran 2. Mikrokapsul Alginat dan Alginat-Kitosan...39 Lampiran 3. Contoh Serapan Propranolol HCl pada Panjang Gelombang 289 nm...40 Lampiran 4. Data Distribusi Ukuran Partikel Mikrokapsul...41 Lampiran 5. Kurva Kalibrasi Propranolol HCl dalam Medium Asam Klorida ph 1, Lampiran 6. Kurva Kalibrasi Propranolol HCl dalam Medium Dapar Fosfat ph 6, Lampiran 7. Data Disolusi Mikrokapsul Alginat yang Berisi Propranolol pada Medium HCl ph 1, Lampiran 8. Data Disolusi Mikrokapsul Alginat yang Berisi Propranolol HCl pada Medium Dapar Fosfat ph 6, Lampiran 9. Data Disolusi F2 Alginat dan F2 Alginat-Kitosan dalam Medium Asam Klorida ph 1, Lampiran 10. Data Disolusi F2 Alginat dan F2 Alginat-Kitosan dalam Medium Dapar Fosfat ph 6, Lampiran 11. Perhitungan Efisiensi Penjerapan dan Kandungan Zat Aktif dalam Mikrokapsul Lampiran 12. Perhitungan Disolusi Lampiran 13. Sertifikat Analisis Natrium Alginat Lampiran 14. Sertifikat Analisis Kitosan Lampiran 15. Sertifikat Analisis Propranolol HCl xiii

14 BAB 1 PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Perkembangan di bidang kesehatan dan pengobatan saat ini mengarah pada suatu cara pengobatan yang lebih efektif, efisien dan praktis. Di bidang farmasi, sistem pelepasan obat secara lambat merupakan salah satu cara penghantaran obat yang lebih dipilih. Keuntungan penggunaan sistem lepas lambat diantaranya adalah kemampuan mengatur pelepasan obat sesuai yang diinginkan sehingga dapat menjaga kadar terapi obat dalam darah selama waktu tertentu sehingga diperoleh efek terapi yang lebih lama. Hal ini penting untuk pengobatan jangka panjang atau menahun, misalnya pada pengobatan penyakit jantung, hipertensi, gangguan psikis, dan lain-lain. Sistem penghantaran obat lepas lambat dapat diperoleh dengan berbagai teknik. Salah satu caranya adalah dengan mikroenkapsulasi, yaitu suatu proses penggunaan penyalut yang relatif tipis pada partikel-partikel kecil zat padat atau tetesan cairan dan dispersi. Mikroenkapsulasi digunakan secara luas dalam farmasetika dan bidang lainnya untuk menutupi rasa atau bau, memperpanjang waktu pelepasan obat, meningkatkan stabilitas molekul obat, memperbaiki bioavailabilitas dan sebagai bentuk sediaan multi partikel untuk memproduksi sistem penghantaran obat yang terkontrol dan menuju target (Lachman, Herbert, & Joseph, 1994). Salah satu teknik yang biasa dilakukan untuk mengenkapsulasi zat aktif adalah gelasi ion dengan kation multivalen. Penyalutan dapat dilakukan dengan mengaduk zat aktif bersamaan dengan polimer anionik dan kemudian ditaut-silangkan dengan larutan yang mengandung kation multivalen dengan tujuan membentuk struktur yang dapat menjebak zat aktif didalamnya. Salah satu contoh polimer tersebut adalah karaginan, kitosan, dan alginat (Liouni, Drichoutis, & Nerantzis, 2008). Alginat adalah kopolimer alami yang dibentuk dari dua tipe monosakarida, asam 1,4-β-D-manuronat dan asam 1,4-α-L-guluronat. Kedua senyawa ini merupakan komponen utama ganggang cokelat seperti Macrocystispyrifera, Ascophyllumnodosum, dan Laminariahyperborea (Lisboa, 1

15 2 Valenzuela, Grazioli, Diaz, & Sogayar, 2007). Natrium alginat, bentuk garam yang larut air, akan membentuk gel tak larut air ketika berinteraksi dengan kation divalen seperti Ca 2+. Gelasi terjadi akibat adanya interaksi antara ion kalsium dengan residu asam guluronat yang menyebabkan terjadinya perubahan bentuk tiga dimensinya (Liouni, Drichoutis, & Nerantzis, 2008). Mikrokapsul alginat berbentuk porous, sehingga zat aktif didalamnya dapat mengalami kebocoran (leakage). Untuk mencegah kebocoran dari zat aktif dalam mikrokapsul alginat, mikrokapsul tersebut disalut kembali dengan lapisan luar yang tidak mengandung zat aktif. Penyalutan dengan lapisan luar tersebut juga bertujuan untuk meningkatkan stabilitas mekanik dan stabilitas kimia zat aktif di dalamnya. Secara kimia, gelasi dengan kalsium pada alginat adalah proses yang reversibel. Pengelat seperti laktat, fosfat, dan kation seperti K +, atau Mg 2+ dapat menggantikan ion Ca 2+ pada gel Ca-alginat yang menjadikan gel tersebut kurang stabil (Liouni, Drichoutis, & Nerantzis, 2008). Salah satu contoh polimer alami yang dapat digunakan untuk menyalut mikrokapsul alginat adalah kitosan, yaitu polisakarida alami yang didapat dari kitin yaitu vertebrata yang tersebar luas di lautan dan pantai. Kitosan terdiri dari β (1-4)-2 amino-2-deoksi-d-glukosa (D-glukosamin) dan 2-asetamido-2-deoksi-Dglukosa (N-asetil-D-glukosamin). Kitosan diproduksi dengan deasetilasi kitin, perbedaan dari sifat kitosan yang diproduksi berdasarkan perbedaan derajat deasetilasi (Sakkinen, 2003). Keberadaan gugus amino pada kitosan menjadikan kitosan bersifat polielektrolit kationik yang larut dalam larutan asam lemah. Ketika polimer anionik seperti alginat dan polimer kationik seperti kitosan berada bersama dalam larutan, terbentuk kompleks polielektrolit. Kompleks polielektrolit merupakan kompleks asosiasi yang terbentuk antara poliion dengan muatan yang berlawanan karena adanya interaksi elektrostatik antara poliion yang bermuatan tersebut (Lankalapalli & Kolapalli, 2009). Dalam hal ini, muatan negatif gugus asam karboksilat dari alginat akan berikatan dengan muatan positif gugus amino dari kitosan secara ionik (Liouni, Drichoutis, & Nerantzis, 2008) Dalam penelitian ini akan diuji pelepasan mikrokapsul alginat yang disalut dengan kitosan. Propranolol hidroklorida, suatu obat yang bekerja terhadap reseptor β non selektif dengan menghambat respon stimulan adrenergik,

16 3 digunakan sebagai model obat. Obat ini diabsorpsi baik di saluran cerna, tetapi bioavaibilitasnya rendah serta mempunyai waktu paruh eliminasi yang pendek, yakni 2-6 jam, sehingga cocok dibuat dalam bentuk mikrokapsul (Sutriyo, Djajadisastra, & Novitasari, 2004). 1.2 Tujuan Penelitian Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan double coating alginat dan kitosan dalam pengendalian pelepasan obat dari mikrokapsul menggunakan propranolol HCl sebagai model obat.

17 BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Mikroenkapsulasi Mikroenkapsulasi adalah suatu proses penggunaan penyalut yang relatif tipis pada partikel-partikel kecil zat padat atau tetesan cairan dan dispersi (Lachman, Herbert, & Joseph, 1994). Hasil dari proses mikroenkapsulasi disebut mikrokapsul. Mikrokapsul memiliki ukuran lebih dari 1 µm, biasanya antara µm, dengan bentuk sferis atau tidak beraturan (Ghosh, 2006; Deasy, 1984). Mikrokapsul dapat diformulasikan kembali menjadi berbagai bentuk sediaan, seperti serbuk, kapsul keras, tablet, larutan oral, suspensi, salep, krim, dan suppositoria (Swarbick & Boylan, 1994) Morfologi Mikrokapsul (Ghosh, 2006) Morfologi mikrokapsul yang dihasilkan terutama tergantung pada bahan inti dan proses pembentukan dinding mikrokapsul. Berdasarkan morfologinya, mikrokapsul dapat diklasifikasikan menjadi tiga tipe, yaitu mononuklear, polinuklear, dan matriks. mikrokapsul mononuklear polinuklear matriks [Sumber: Ghosh, 2006] Gambar 2.1. Morfologi mikrokapsul Tipe mononuklear terdiri dari satu inti yang dikelilingi bahan penyalut (dinding mikrokapsul), sedangkan tipe polinuklear terdiri dari banyak inti dalam 4

18 5 satu mikrokapsul. Pada tipe matriks, bahan inti terdistribusi secara homogen pada bahan penyalut Tujuan Mikroenkapsulasi (Ghosh, 2006; Deasy, 1984) Proses mikroenkapsulasi memiliki beberapa tujuan, antara lain : 1. Perlindungan bahan inti yang sensitif atau tidak stabil dari pengaruh lingkungan sebelum digunakan 2. Memperbaiki kelarutan, kemampuan dispersi, dan sifat alir bahan inti 3. Peningkatan waktu simpan dengan mencegah reaksi degradasi (oksidasi, dehidrasi) 4. Mengatur pelepasan bahan inti 5. Mengurangi bahaya dari bahan inti yang toksik 6. Menutupi bau dan rasa yang tidak enak 7. Mengubah bentuk cairan menjadi padatan 8. Mengurangi sifat iritasi bahan inti terhadap lambung dan saluran pencernaan 9. Mencegah inkompatibilitas antara komposisi dalam sediaan 10. Mengurangi sifat higroskopis bahan inti Proses mikroenkapsulasi juga memiliki beberapa kerugian, antara lain sebagai berikut (Lachman, Herbert, & Joseph, 1994; Deasy, 1984) a. Tidak ada proses mikroenkapsulasi tunggal yang dapat diterapkan pada semua calon bahan inti produk b. Proses penyalutan terkadang tidak sempurna c. Kadang-kadang terjadi penggumpalan mikrokapsul Komponen Mikrokapsul Komponen mikrokapsul terdiri dari bahan inti dan bahan penyalut. a. Bahan inti Bahan inti adalah bahan spesifik yang akan disalut, dapat berupa zat padat, cair, maupun gas (Lachman, Herbert, & Joseph, 1994; Ghosh, 2006). Inti zat padat dapat berupa campuran dari bagian-bagian yang aktif, stabilisator, pengencer, pengisi, dan penghambat atau pemacu pelepasan (Lachman, Herbert, & Joseph, 1994). Inti zat cair

19 6 dapat terdiri dari senyawa polar atau nonpolar sebagai bahan aktif atau sebagai media bagi bahan aktif dalam bentuk larutan, suspensi, atau emulsi (Lachman, Herbert, & Joseph, 1994; Mathiowitz, 1999). Kompatibilitas dari bahan inti dengan bahan penyalut menjadi kriteria yang penting untuk meningkatan efisiensi mikroenkapsulasi. Bahan inti sebaiknya tidak larut dan tidak bereaksi dengan bahan penyalut dan pelarut yang digunakan. Ukuran bahan inti juga memegang peranan penting untuk difusi, permeabilitas, dan pengendalian pelepasan bahan inti (Ghosh, 2006; Swarbick & Boylan, 1994). Mikrokapsul dapat mengandung bahan inti sampai 99% dihitung terhadap berat mikrokapsul (Lachman, Herbert, & Joseph, 1994) b. Bahan penyalut Bahan penyalut adalah bahan yang digunakan untuk melapisi bahan inti. Bahan penyalut harus mampu memberikan suatu lapisan tipis yang kohesif dengan bahan inti, dapat bercampur secara kimia dan tidak bereaksi dengan bahan inti, dan dapat memberikan sifat penyalutan yang diinginkan seperti kekuatan, fleksibilitas, impermeabilitas, sifat-sifat optik, dan stabilitas (Lachman, Herbert, & Joseph, 1994). Bahan penyalut yang digunakan dapat berupa karbohidrat, protein, dan polimer sintetik (Ghosh, 2006). Jumlah polimer penyalut dapat bervariasi dari 1 hingga 70% dari berat mikrokapsul, biasanya antara 3 hingga 30% dengan ketebalan 0,1 hingga 60 nm (Swarbick & Boylan, 1994) Metode Pembuatan Mikrokapsul Ada banyak metode enkapsulasi yang dapat digunakan untuk membuat mikrokapsul. Metode pembuatan mikrokapsul yang paling sering diterapkan dalam bidang farmasi antara lain suspensi udara, pemisahan fase koaservasi, semprot kering dan pembekuan, penyalutan dalam panci, proses multi lubang sentrifugal, serta metode penguapan pelarut (Lachman, Herbert, & Joseph, 1994; Swarbick & Boylan, 1994).

20 7 Pada penelitian ini akan digunakan metode gelasi ion dengan penyalut natrium alginat. Prinsip metode gelasi ion adalah proses taut silang antara polimer dengan kation multivalen. Selain alginat, polimer yang dapat digunakan dalam metode gelasi ion antara lain kitosan dan karaginan (Liouni, Drichoutis, &Nerantzis, 2008). Kemampuan natrium alginat membentuk gel tidak larut air dengan adanya kation divalen menjadi dasar penggunaan natrium alginat pada proses penyalutan obat (Manz, Hillgartner, Zimmermann, Zimmermann, Volke, & Zimmermann, 2003). Teknik gelasi ion terdiri dari dua macam, yaitu gelasi eksternal dan gelasi internal. Perbedaan gelasi internal dan gelasi eksternal ini terdapat pada sumber kation divalennya. Dinamakan teknik gelasi internal, jika sumber kation divalen didispersikan bersama dengan natrium alginat. Teknik gelasi internal dilakukan dengan cara mencampur garam kalsium yang tidak larut (misalnya CaCO 3 ) dengan larutan natrium alginat. Hasil campuran tersebut kemudian diemulsifikasikan ke dalam fase minyak yang mengandung surfaktan, gelasi ion dimulai dengan menambahkan asam asetat. CaCO 3 tersebut akan telarut dan melepaskan Ca 2+ kemudian terjadi gelasi ion menbentuk Ca-alginat. Sedangkan pada teknik gelasi eksternal sumber kation divalennya tidak didispersikan bersama dengan natrium alginat (Liu, et al, 2004). Tautan silang pada teknik gelasi eksternal dapat dicapai dengan meneteskan droplet-droplet natrium alginat ke medium yang mengandung ion divalen (misalnya Ca 2+ ), Ca 2+ kemudian akan langsung bereaksi dengan gugus karboksilat dari residu asam guluronat pada permukaan tetesan droplet, selanjutnya Ca 2+ tersebut akan berdifusi ke dalam droplet dan bereaksi membentuk Ca-alginat (Liu, et al, 2002). Ketika natrium alginat dimasukkan ke dalam larutan yang mengandung ion kalsium, ion kalsium akan menggantikan ion natrium pada polimer. Setiap ion kalsium dapat berikatan dengan dua rantai polimer. Proses tersebut disebut tautan silang dan dapat digambarkan seperti gambar 2.2. Gelasi alginat terjadi saat kation divalen berinteraksi dengan gugusan residu asam guluronat pada natrium alginat sehingga terbentuk jaringan gel tiga dimensi dan biasa digambarkan sebagai model egg-box (Liouni, Drichoutis, & Nerantzis, 2008).

21 8 [Royal Society of Chemistry, 2011] Gambar 2.2. Proses terjadinya tautan silang antara polimer natrium alginat dan ion kalsium (telah diolah kembali) Mikrokapsul alginat yang terbentuk kemudian akan disalut kembali dengan kitosan melalui membentuk komplek polielektrolit. Kompleks polielektrolit merupakan kompleks asosiasi yang terbentuk antara poliion dengan muatan yang berlawanan karena adanya interaksi elektrostatik antara poliion yang bermuatan tersebut (Lankalapalli & Kolapalli, 2009). Dalam hal ini, muatan negatif gugus asam karboksilat dari alginat akan berikatan dengan muatan positif gugus amino dari kitosan secara ionik (Liouni, Drichoutis, & Nerantzis, 2008). Pembuatan mikrokapsul double coating alginat dan kitosan dapat dilakukan dengan prosedur dua tahap dan satu tahap. Prosedur dua tahap dilakukan dengan cara meneteskan larutan alginat ke dalam larutan yang mengandung ion kalsium, kemudian mikrokapsul tersebut dipindahkan ke dalam larutan kitosan untu membentuk membran pada permukaan mikrokapsul alginat. Sedangkan prosedur satu tahap dilakukan dengan meneteskan langsung larutan alginat ke dalam larutan kitosan yang berisi ion kalsium. (Gåserød, Smidsrød, & Skjåk-Bræk, 1998) Mekanisme Pelepasan Obat dari Mikrokapsul Pelepasan obat dari bentuk mikrokapsul dapat melalui berbagai cara, yaitu melalui proses difusi melewati lapisan polimer, erosi dari lapisan polimer, atau

22 9 melalui kombinasi dari erosi dan difusi. Proses pelepasan obat yang umum terjadi pada mikrokapsul adalah proses difusi. Cairan dari saluran pencernaan berdifusi melalui membran ke dalam sel, kemudian obat akan berdifusi melalui membran dari daerah berkonsentrasi tinggi di dalam mikrokapsul ke daerah berkonsentrasi rendah pada cairan saluran pencernaan (Krowcynsk, 1987) Evaluasi Mikrokapsul (Sutriyo, Djajadisastra, & Novitasari, 2004) Setiap produk yang dibuat, termasuk mikrokapsul, tidak lepas dari proses evaluasi untuk mengontrol kualitas produk dan mengetahui layak atau tidaknya produk yang dibuat untuk digunakan dan dipasarkan. Evaluasi yang dilakukan pada mikrokapsul meliputi pemeriksaan bentuk dan morfologi mikrokapsul, ukuran dan distribusi ukuran mikrokapsul, faktor perolehan kembali, penentuan kandungan zat inti, efisiensi penjerapan, serta uji disolusi secara in vitro Pemeriksaan bentuk dan morfologi mikrokapsul Bentuk dan morfologi permukaan mikrokapsul diamati dengan scanning electron microscopy (SEM). Mikrokapsul disalut dengan logam emas menggunakan fine coater di bawah vakum, kemudian sampel diuji dengan SEM Ukuran dan distribusi ukuran mikrokapsul (United States Pharmacopoeial Convention, 2007) Ukuran dan distribusi ukuran mikrokapsul dapat dievaluasi dengan particle size analyzer atau dengan ayakan bertingkat (sieve shaker) Faktor perolehan kembali proses Faktor perolehan kembali dapat digunakan dengan menggunakan rumus sebagai berikut : (2.1) Keterangan : Wp : faktor perolehan kembali proses Wm : bobot bahan pembentuk mikrokapsul Wt : bobot mikrokapsul yang diperoleh

23 Penentuan kandungan zat inti Penentuan kandungan obat dalam mikrokapsul dilakukan untuk mengetahui banyaknya zat aktif yang dapat terenkapsulasi. Metode yang digunakan tergantung dari kelarutan bahan inti. Jika bahan inti dan bahan penyalut larut dalam pelarut bukan air, maka penentuan kandungan mikrokapsul dilakukan dengan melarutkan mikrokapsul dalam pelarut organik yang sesuai dan kadar obat kemudian ditentukan dengan metode analitik yang sesuai. Jika hanya bahan inti saja yang larut dalam air sedangkan bahan penyalutnya tidak larut, maka dapat dilakukan pelarutan mikrokapsul dalam air dengan pengadukan kecepatan tinggi sehingga bahan inti akan terlarut atau dapat pula dilakukan penggerusan mikrokapsul sehingga penyalut pecah dan inti dapat terlarut dalam pelarut yang sesuai. Setelah itu, dilakukan penyaringan untuk menghilangkan fragmen polimer yang tidak larut. Bahan inti selanjutnya ditentukan kadarnya dengan metode yang sesuai. Propranolol HCl dapat ditentukan kadarnya dengan metode Spektrofotometri (United States Pharmacopoeial Convention, 2007), Kromatogafi Cair Kinerja Tinggi dan Kromatografi Gas (Moffat, 1986) Efisiensi penjerapan Perhitungan persen penjerapan berguna untuk mengetahui efisiensi metode mikroenkapsulasi yang digunakan. Persen penjerapan diperoleh dengan membandingkan jumlah kandungan zat inti yang diperoleh dengan jumlah zat inti teoritis menggunakan rumus : (2.2) Uji disolusi in vitro Uji disolusi in vitro dilakukan untuk mengukur laju dan jumlah pelarutan obat dalam suatu medium dengan adanya satu atau lebih bahan tambahan yang terkandung dalam produk obat. Proses tersebut sangat berpengaruh terhadap

24 11 kecepatan dan besarnya ketersediaan zat aktif dalam tubuh dan selanjutnya akan mempengaruhi respon klinis yang akan dihasilkan oleh suatu sediaan. Persamaan yang menggambarkan kecepatan disolusi zat padat telah dikembangkan oleh Noyes dan Whitney, yaitu (Martin, Swarbick, & Cammarata, 1993): (2.3) Keterangan : dm/dt = laju disolusi D = koefisien difusi zat yang terlarut dalam larutan S = luas permukaan zat padat yang menyentuh larutan h = ketebalan lapisan difusi Cs = kelarutan zat padat C = konsentrasi zat terlarut pada waktu t 2.2 Natrium Alginat Natrium alginat terdiri dari garam natrium dari asam alginat (Rowe, Sheskey, & Owen, 2006). Alginat diperoleh dari ganggang cokelat Phaeophyceae dalam bentuk polimer linear dari 1,4-β-D-asam mannuronat dan residu 1,4-α-Lasam guluronat (Lisboa, Valenzuela, Grazioli, Diaz, & Sogaray, 2007). O NaOOC O OH OH O OH O O OH OH COONa O O OH COONa OH O O OH NaOOC [Sumber: Rowe, Sheskey, & Owen, 2006] Gambar 2.3. Struktur kimia natrium alginat Natrium alginat berupa serbuk berwarna putih hingga kuning pucat, tidak berbau, dan tidak berasa, larut dalam air membentuk larutan koloidal. Larutan 1%

25 12 natrium alginat (b/v) memiliki ph sekitar 7,2. Natrium alginat praktis tidak larut dalam etanol (95%), eter, kloroform, campuran metanol dan air dengan kandungan etanol lebih besar dari 30%, dan juga larutan asam encer dengan ph kurang dari 3 (Rowe, Sheskey, & Owen, 2006). Natrium alginat tersedia secara komersial dalam berbagai tingkat viskositas. Viskositas larutan natrium alginat juga tergantung pada konsentrasi, ph, dan temperatur. Natrium alginat inkompatibel dengan derivat akridin, kristal violet, fenilmerkuri asetat dan nitrat, garam kalsium, logam berat, dan etanol dengan konsentrasi lebih dari 5% (Rowe, Sheskey, & Owen, 2006). Natrium alginat digunakan pada berbagai formulasi sediaan oral dan topikal. Selain sebagai pengisi, pengikat, dan penghancur, natrium alginat juga memiliki sifat sebagai pengental, pensuspensi, dan pembentuk gel (Rowe, Sheskey, & Owen, 2006). Alginat dapat membentuk gel tidak larut air dengan adanya ion divalen seperti Mg 2+, Ca 2+, Sr 2+, Ba 2+ (Lisboa, 2007). Pemilihan natrium alginat sebagai polimer yang digunakan dalam penelitian ini dikarenakan sifatnya yang tidak toksik dan biokompatibel dengan berbagai macam komponen kimia. Selain itu natrium alginat juga digunakan untuk mikroenkapsulasi obat tanpa menggunakan pelarut organik sehingga meminimalisasi efek toksik akibat penggunaan pelarut organik dalam pembuatan mikrokapsul (Rowe, Sheskey, & Owen, 2006). 2.3 Kitosan Kitosan merupakan polisakarida linear yang tersusun dari β (1-4)-2 amino-2- deoksi-d-glukosa (D-glukosamin) dan 2-asetamido-2-deoksi-D-glukosa (N-asetil- D-glukosamin). Kitosan dihasilkan dari deasetilasi senyawa kitin yang terkandung dalam cangkang suku crustaceae seperti udang, lobster, kepiting dan lain-lain. Derajat deasetilasi untuk kitosan umumnya berkisar antara 70%-95% dengan bobot molekul sekitar kda (Sakkinen, 2003). Kitosan terdapat dalam bentuk serbuk atau serpihan berwarna putih atau putih kecoklatan dan tidak berbau. Kitosan sangat sukar larut dalam air dan praktis tidak larut dalam etanol 95%, pelarut organik lain dan larutan netral atau

26 13 basa pada ph di atas 6,5. Kitosan mudah larut dalam larutan asam organik encer maupun pekat (Rowe, Sheskey, & Owen, 2006). Kitosan akan bersifat polikationik dalam lingkungan asam. Hal ini dikarenakan kitosan memiliki gugus amin yang dapat terprotonasi oleh H + dari asam (Rowe, Sheskey, & Owen, 2006). Karena sifat kationik yang dimilikinya, kitosan dapat berinteraksi dengan polianion membentuk suatu kompleks polielektrolit. [Sumber: Sakkinen, 2003] Gambar 2.4. Struktur kimia kitosan (telah diolah kembali) pka kitosan diketahui sekitar 6,5. Kitosan merupakan polimer hidrofilik. Kitosan dapat menahan air di dalam strukturnya dan membentuk gel secara spontan. Pembentukan gel terjadi pada lingkungan ph asam. Penurunan ph akan menyebabkan peningkatan viskositas. Hal ini disebabkan karena terjadi perpanjangan konformasi kitosan pada ph rendah karena adanya gaya tolak menolak antara gugus amino yang bermuatan. Viskositas juga akan meningkat bila derajat deasetilasi meningkat (Sakkinen, 2003). Kitosan memiliki sifat tidak toksik, tidak mengiritasi, biokompatibel dan biodegradabel (Rowe, Sheskey, & Owen, 2006). Kitosan juga dapat diperoleh dari sumber alam yang jumlahnya berlimpah dan dapat diperbaharui. Sifat-sifat tersebut membuat kitosan berpotensi untuk digunakan secara luas sebagai eksipien dalam sediaan farmasi oral dan sediaan farmasi lainnya. Sifat lainnya yang membuat kitosan menarik untuk digunakan sebagai eksipien farmasi adalah kemampuannya untuk terhidrasi dan membentuk gel dalam lingkungan asam. Karena kemampuannya untuk membentuk gel, maka kitosan dapat dimanfaatkan untuk membuat sediaan lepas lambat (Sakkinen, 2003).

27 Sediaan Lepas Lambat Sediaan lepas lambat merupakan sediaan dengan pelepasan termodifikasi di mana laju pelepasan obat terjadi lebih lambat dibandingkan bentuk sediaan konvensional yang diberikan dengan rute yang sama. Suatu sediaan lepas lambat dirancang untuk melepaskan obat secara lambat dan memberi suatu cadangan obat selama terus menerus dalam waktu yang lama (Shargel & Andrew, 1999). Bentuk sediaan seperti ini bertujuan untuk mencegah absorpsi obat yang sangat cepat, yang dapat mengakibatkan konsentrasi puncak obat dalam plasma sangat tinggi. Tujuan dari sediaan lepas lambat antara lain (Krowcynsk, 1987; Remington, 2006) : 1. Untuk mengurangi frekuensi pemberian dosis dalam satu hari sehingga meningkatkan kepatuhan pasien 2. Pada pemberian obat secara parenteral, maka dapat mengurangi frekuensi injeksi yang sering kali menyakitkan dan dapat menyebabkan infeksi. 3. Untuk mempertahankan kadar terapi obat untuk jangka waktu yang lebih lama. 4. Mencegah fluktuasi obat di dalam darah. 5. Untuk mengurangi efek samping yang tidak diinginkan akibat konsentrasi obat yang terlalu tinggi di dalam darah. 6. Pada sediaan oral, dapat mengurangi iritasi mukosa pencernaan. 7. Untuk mencapai aksi farmakologi yang konstan bahkan untuk obat-obat dengan waktu paruh biologis yang pendek. 8. Untuk mengurangi risiko terjadinya resistensi bakteri terhadap suatu obat antibakteri. Adapun syarat obat yang dapat dibuat menjadi sediaan lepas lambat adalah sebagai berikut (Ansel, Allen, & Popovich, 1999): 1. Tidak boleh diabsorpsi dan/atau diekskresi sangat cepat atau sangat lambat. 2. Diabsorpsi secara seragam pada saluran gastrointestinal 3. Memberikan efek terapi pada dosis yang kecil 4. Memiliki indeks terapi yang cukup besar

28 15 5. Lebih digunakan untuk pengobatan kronik daripada pengobatan akut 2.5 Propranolol HCl Propranolol hidroklorida merupakan obat anti hipertensi yang bekerja terhadap reseptor β non selektif, dengan menghambat respon stimulan adrenergik. Propanolol hidroklorida diabsorpsi secara baik (90%) di saluran cerna, tetapi bioavaibilitasnya rendah (tidak lebih dari 50%) serta memiliki waktu paruh eliminasi yang pendek, yakni berkisar 2-6 jam. Metabolit aktif dari propranolol adalah hidroksi propranolol, yang mempunyai aktivitas sebagai β-bloker (Nafrialdi, 2007; Moffat, 1986). Propranolol hidroklorida larut dalam 20 bagian air dan etanol, mudah larut dalam kloroform, praktis tidak larut dalam eter, benzene, dan etil asetat. Panjang gelombang maksimum spektrum ultraviolet propranolol hidroklorida dalam asam encer adalah 288, 305, 319 nm dan dalam metanol 290, 306, 319 nm. (Moffat, 1986) C H 3 O N H C H 3 O H H C l [Sumber : USP 30 & NF 25, 2007) Gambar 2.5. Struktur kimia Propranolol HCl (telah diolah kembali)

29 BAB 3 METODE PENELITIAN 3.1 Lokasi dan Waktu Penelitian Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Farmasetika dan Laboratorium Formulasi Tablet Departemen Farmasi, FMIPA UI. Waktu pelaksanaannya adalah dari bulan Februari 2011 hingga Mei Bahan Natrium alginat grade low viscous (Sigma, Amerika Serikat), kitosan from shrimp cells (Sigma, Amerika Serikat), propranolol HCl (diperoleh dari PT Kimia Farma), kalsium klorida (diperoleh dari PT Brataco), asam asetat glasial (Merck, Jerman), asam klorida (Merck, Jerman), kalium dihidrogen fosfat (Merck, Jerman), natrium hidroksida (Merck, Jerman), dan aquadest. 3.3 Alat Timbangan analitik (Mettler Toledo), syringe needle 26 G (Terumo, Jepang), Magnetic stirrer C-MAG HS7 (IKA), oven, Spektrofotometer UV-vis (Shimadzu, Jepang), Scanning electron microscopy (Oxford model 6599), ayakan (Retsch, Jerman), Dissolution tester (Electrolab, India), ph-meter (Eutech Instruments ph 510, Singapura), dan alat-alat gelas yang biasa digunakan di laboratorium. 3.4 Cara Kerja Pembuatan Mikrokapsul Penentuan Kondisi Optimum (Haque, et al, 2005; Paul, Shum-Tim, & Prakash, 2010) Pembuatan mikrokapsul diawali dengan penentuan kondisi optimum proses mikroenkapsulasi. Dalam pembuatan mikrokapsul alginat kosong, ditentukan kondisi optimum, yaitu konsentrasi natrium alginat, molaritas larutan kalsium klorida yang digunakan, lama pendiaman dalam kalsium klorida dan lama pengeringan dalam oven. 16

30 17 Optimasi konsentrasi natrium alginat dibandingkan kekentalannya untuk melihat kemampuan larutan natrium alginat melewati syringe needle. Larutan natrium alginat yang digunakan tidak boleh terlalu kental agar dapat melewati syringe needle. Konsentrasi yang dibandingkan adalah 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, dan 3%. Molaritas larutan kalsium klorida yang dibandingkan adalah 0,1; 0,15 dan 0,2 M. Lama pendiaman yang dibandingkan adalah 20, 25, dan 30 menit. Sedangkan lama pengeringan di dalam oven yang dibandingkan adalah 1,5 jam dan 2 jam Formula Mikrokapsul Mikrokapsul alginat dibuat dengan formula sebagai berikut: Tabel 3.1. Formula mikrokapsul Bahan Formula Propranolol HCl (g) Natrium alginat (g) CaCl 2 (M) 0,15 0,15 0,15 0,15 Formula terbaik kemudian disalut lagi dengan kitosan 1% (b/v) dalam asam asetat 1% (v/v) Pembuatan Mikrokapsul (Mandal, et al, 2010; Lim, L.Y., &Wan, S. C., 1997) a. Pembuatan mikrokapsul alginat kosong Sejumlah natrium alginat ditambahkan sedikit demi sedikit ke dalam aquadest sambil diaduk terus menerus sampai diperoleh larutan natrium alginat dengan konsentrasi 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, dan 3%. Selanjutnya, campuran tersebut diteteskan ke dalam larutan CaCl 2 dengan menggunakan syringe needle 26 G sambil terus diaduk dengan magnetic stirrer dengan kecepatan 200 rpm, kemudian didiamkan

31 18 sesuai waktu yang telah ditentukan pada penentuan kondisi optimum. Setelah itu, saring dan cuci dengan aquadest, lalu dikeringkan dalam oven dengan suhu 50 o C selama waktu yang ditentukan pada penentuan kondisi optimum. b.pembuatan mikrokapsul alginat yang berisi propranolol HCl Pembuatan mikrokapsul dilakukan dengan metode sekuensial, yaitu mikrokapsul alginat kosong yang masih basah dimasukkan kedalam larutan propranolol HCl 5% sambil terus diaduk dengan kecepatan 300 rpm dan didiamkan selama 4 jam. Kemudian mikrokapsul disaring dan dicuci dengan aquadest, lalu dikeringkan dalam oven 50 o C selama 6 jam. c.pembuatan mikrokapsul alginat yang disalut kitosan (Paul, Shum-Tim, & Prakash, 2010; Haque, et al, 2005; Lisboa, Valenzuela, Grazioli, Diaz, & Sogayar, 2007; Gåserød, Smidsrød, & Skjåk-Bræk, 1998) Pembuatan mikrokapsul double coating alginat dan kitosan dapat dilakukan dengan prosedur dua tahap dan satu tahap. Dalam penelitian kali ini digunakan prosedur dua tahap. Mikrokapsul basah yang berisi propranolol HCl dimasukkan kedalam larutan kitosan 1% dalam asam asetat 1% sambil terus diaduk dengan kecepatan 300 rpm dan didiamkan selama 2 jam. Kemudian mikrokapsul disaring dan dikeringkan dalam oven 50 o C selama 4 jam Evaluasi mikrokapsul (Sutriyo, Djajadisastra, & Novitasari, 2004) Evaluasi mikrokapsul dilakukan mencakup: Pemeriksaan bentuk dan morfologi permukaan mikrokapsul Bentuk dan morfologi permukaan mikrokapsul diamati dengan scanning electron microscopy (SEM). Mikrokapsul disalut dengan logam emas menggunakan fine coater di bawah vakum, kemudian sampel diuji dengan SEM.

32 Ukuran dan distribusi ukuran partikel (United States Pharmacopoeial Convention, 2007) Ukuran dan distribusi ukuran mikrokapsul dievaluasi dengan ayakan bertingkat (sieve shaker). Suatu seri empat ayakan dengan nomor ayakan 16, 25, 35, dan 45 disusun secara menurun dari ukuran lubang ayakan yang paling besar. Lima gram mikrokapsul ditempatkan dalam ayakan yang paling atas, kemudian mesin pengayak dijalankan selama 10 menit. Masing-masing fraksi dalam ayakan ditimbang, dan dilakukan tiga kali tiap formula Faktor perolehan kembali proses Faktor perolehan kembali proses ditentukan dengan membandingkan jumlah mikrokapsul yang diperoleh terhadap semua bahan pembentuk mikrokapsul. Rumus yang digunakan adalah sebagai berikut : (3.1) Keterangan : Wp = faktor perolehan kembali proses Wm = bobot bahan pembentuk mikrokapsul Wt = bobot mikrokapsul yang diperoleh Penentuan kadar zat inti dalam mikrokapsul Penentuan kadar zat inti dalam mikrokapsul dilakukan dengan menggunakan alat Spektrofotometri UV-Vis dengan langkah kerja sebagai berikut: a. Pembuatan spektrum serapan dan kurva kalibrasi Propranolol HCl Sebanyak 50 mg propranolol HCl baku ditimbang secara seksama, kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 50,0 ml dan dilarutkan dalam asam klorida 0,1 N sehingga didapatkan larutan propranolol HCl baku dengan konsentrasi 1000 µg/ml. Pipet 10,0 ml larutan diatas, kemudian masukkan ke dalam labu ukur 100,0 ml dan diencerkan dengan asam klorida 0,1 N sehingga didapat larutan propranolol HCl baku dengan konsentrasi 100 µg/ml. Pipet 10,0 ml larutan diatas, kemudian masukkan ke dalam labu ukur 100,0 ml dan diencerkan dengan asam klorida 0,1 N

33 20 sehingga didapat larutan propranolol HCl baku dengan konsentrasi 10 µg/ml. Ukur serapan larutan tersebut pada panjang gelombang nm. Catat panjang gelombang maksimumnya. Untuk pembuatan kurva kalibrasi, larutan 100 µg/ml di atas diencerkan dengan asam klorida 0,1 N hingga diperoleh berbagai konsentrasi, yaitu 10 µg/ml, 16 µg/ml, 20 µg/ml, 28 µg/ml, 30 µg/ml, dan 40 µg/ml. Larutan dari tiap konsentrasi dimasukkan ke dalam kuvet sebanyak 2/3 volume kuvet. Serapan diukur dengan Spektrofotometer UV- Vis pada panjang gelombang maksimum yang didapat dari pengukuran spektrum serapan (Moffat, 1986). b. Penentuan kadar zat inti Sejumlah mikrokapsul dari formula yang terpilih digerus dan ditimbang secara seksama, kemudian dilarutkan dalam asam klorida 0,1 N dan disaring ke dalam labu ukur 100,0 ml. Setelah itu, volume dicukupkan dengan asam klorida 0,1 N hingga garis batas pada labu ukur. Larutan sampel dimasukkan ke dalam kuvet sebanyak 2/3 volume kuvet. Serapan Propranolol HCl ditentukan dengan Spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 289 nm. Kadar Propranolol HCl dihitung dengan membandingkan terhadap kurva kalibrasi sehingga jumlah Propanolol HCl yang terjerap dapat dihitung (Moffat, 1986) Efisiensi penjerapan Perhitungan persen penjerapan berguna untuk mengetahui efisiensi metode mikroenkapsulasi yang digunakan. Persen penjerapan diperoleh dengan membandingkan jumlah kandungan zat inti yang diperoleh dengan jumlah zat inti teoritis menggunakan rumus : (3.2) Uji disolusi in vitro Uji disolusi dilakukan menggunakan alat disolusi tipe dayung pada dua medium yang berbeda, yaitu medium asam klorida 0,1 N ph 1,2 dan medium

34 21 dapar fosfat ph 6,8. Volume medium 900 ml pada suhu 37 ± 0,5 o C dengan kecepatan pengadukan 50 rpm. a. Pembuatan medium asam ph 1,2 Larutkan 8,33 ml asam klorida pekat ke dalam 1 L aquadest, kocok hingga homogen. b. Pembuatan medium basa ph 6,8 Larutkan 21,72 g kalium dihidrogen fosfat dan 4,94 g asam sitrat monohidrat dalam aquadest. Encerkan dengan aquadest sampai 1 L, kocok hingga homogen. c. Cara disolusi Mikrokapsul yang setara dengan 10 mg propranolol HCl dimasukkan ke dalam medium disolusi. Dalam medium asam pengambilan sampel dilakukan pada menit ke 15, 30, 45, 60, 90 dan 120. Dalam medium basa pengambilan sampel dilakukan pada jam ke 0,25; 0,5; 0,75; 1; 2; 4; 6; dan 8. Sampel dianalisa dengan menggunakan Spektrofotometer UV-Vis, diukur pada panjang gelombang 289 nm.

35 BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Optimasi pembuatan mikrokapsul alginat kosong sebagai uji pendahuluan Penelitian ini diawali dengan penentuan kondisi optimum proses pembuatan mikrokapsul alginat kosong, yang mencakup penentuan konsentrasi larutan natrium alginat, konsentrasi larutan kalsium klorida, lama pendiaman dalam larutan kalsium klorida dan lama pengeringan dalam oven. Setelah dilakukan optimasi, mikrokapsul memberikan hasil optimum pada kondisi percobaan dengan kecepatan pengadukan 200 rpm, menggunakan larutan natrium alginat 2%, konsentrasi larutan kalsium klorida sebesar 0,2 M, lama pendiaman dalam larutan kalsium klorida 25 menit, dan lama pengeringan dalam oven 50 o C 2 jam. Optimasi konsentrasi larutan natrium alginat dilakukan untuk melihat syringe ability. Larutan alginat yang digunakan tidak boleh terlalu tinggi viskositasnya agar dapat melewati syringe needle 26 G, sehingga dipilih larutan natrium alginat 2 % yang tidak terlalu tinggi viskositasnya dan dapat melewati syringe needle 26 G yang digunakan. Konsentrasi larutan kalsium klorida akan mempengaruhi bentuk mikrokapsul yang dihasilkan. Konsentrasi larutan kalsium klorida yang dibandingkan adalah 0,1; 0,15; dan 0,2 M. Mikrokapsul yang dibuat dengan larutan kalsium klorida 0,1 M berbentuk pipih dan tidak bulat. Sedangkan mikrokapsul yang dibuat dengan larutan kalsium klorida 0,15 M dan 0,2 M berbentuk bulat. Dipilih larutan kalsium klorida 0,2 M, karena mikrokapsul yang dihasilkan berbentuk paling bulat. Hal ini dikarenakan semakin banyak jumlah kalsium yang mengikat alginat, sehingga semakin besar tautan silang yang terjadi dan bentuk mikrokapsul pun semakin bulat. Optimasi lama pendiaman mikrokapsul alginat dalam larutan kalsium klorida dilakukan untuk menentukan waktu yang dibutuhkan kalsium klorida untuk berikatan dengan alginat. Waktu yang dibandingkan adalah 20 menit, 25 menit, dan 30 menit. Waktu yang dipilih untuk mendiamkan mikrokapsul alginat 22

36 23 dalam larutan kalsium klorida adalah 25 menit. Mikrokapsul yang dibuat dengan waktu pendiaman dalam larutan kalsium klorida selama 20 menit tidak berbentuk bulat. Hal ini dikarenakan belum cukupnya waktu yang dibutuhkan kalsium untuk berikatan dengan alginat. Mikrokapsul yang dibuat dengan waktu pendiaman dalam larutan kalsium klorida selama 25 menit dan 30 menit berbentuk bulat. Hal tersebut dikarenakan telah cukupnya waktu yang dibutuhkan kalsium untuk berikatan dengan alginat. Pengeringan mikrokapsul basah dalam oven yang dibandingkan adalah 1,5 jam dan 2 jam. Setelah dikeringkan selama 1,5 jam, mikrokapsul alginat dalam oven masih basah sehingga pengeringan dilanjutkan hingga 2 jam. Mikrokapsul yang dikeringkan selama 2 jam dalam oven 50 o C terlihat sudah kering dan berwarna kekuningan. 4.2 Pembuatan mikrokapsul alginat berisi propranolol HCl Mikrokapsul kosong yang masih basah dimasukkan ke dalam larutan propranolol HCl 5% dengan perbandingan bobot zat aktif dan polimer 1:1, 1:2, 1:3, dan 2:3. Pembuatan mikrokapsul dengan zat aktif propranolol HCl dapat dilakukan dengan dua cara, metode simultan dan metode sekuensial. Metode simultan dilakukan dengan meneteskan larutan natrium alginat ke dalam larutan kalsium klorida yang berisi propranolol HCl kemudian mikrokapsul yang terbentuk disaring dan dicuci dengan aquadest selanjutnya dikeringkan. Metode sekuensial dilakukan dengan meneteskan larutan alginat ke dalam larutan kalsium klorida, mikrokapsul alginat kosong yang masih basah tersebut kemudian dimasukkan ke dalam larutan propranolol HCl dan didiamkan beberapa saat, setelah itu mikrokapsul yang terbentuk disaring dan dicuci dengan aquadest. Dipilih metode sekuensial karena metode tersebut berdasarkan penelitian terdahulu menghasilkan efisiensi penjerapan yang lebih besar dibandingkan dengan metode simultan (Mandal, et al, 2010; Lim, L. Y., & Wan, S. C., 1997). Pada pembuatan mikrokapsul alginat berisi propranolol HCl digunakan kecepatan pengadukan sebesar 300 rpm. Hal tersebut agar propranolol HCl dapat berikatan dengan alginat dengan lebih maksimal. Waktu pendiaman pun diperlama dari 2 jam menjadi 6 jam, agar propranolol HCl dapat bereaksi dengan

37 24 mikrokapsul alginat lebih maksimal. Waktu pengeringan di oven berbeda dengan optimasi pada mikrokapsul kosong sebelumnya. Hal ini dikarenakan mikrokapsul baru benar-benar kering setelah dikeringkan selama 4 jam. 4.3 Penyalutan mikrokapsul alginat berisi propranolol HCl dengan kitosan Mikrokapsul yang berisi propranolol HCl dengan hasil terbaik kemudian disalut dengan larutan kitosan 1% dalam asam asetat 1%. Formula yang dipilih adalah formula 2 yaitu formula dengan perbandingan propranolol HCl dan alginat 1:2. Penyalutan mikrokapsul alginat berisi propranolol HCl dilakukan dengan cara memasukan mikrokapsul ke dalam larutan kitosan 1% dan didiamkan selama 2 jam dengan kecepatan pengadukan 300 rpm. Setelah itu, mikrokapsul disaring dan dicuci dengan aquadest untuk memisahkan mikrokapsul dari larutan kitosan yang tersisa. Pencucian juga dilakukan untuk menghilangkan bau asam asetat dari larutan kitosan. Selanjutnya mikrokapsul dikeringkan selama 4 jam dalam oven 50 o C. 4.4 Pembuatan kurva kalibrasi Pembuatan kurva kalibrasi propranolol HCl dalam medium asam klorida ph 1,2 dan dapar fosfat ph 6,8, dengan konsentrasi 10, 16, 20, 28, 30 dan 40 µg/ml menghasilkan persamaan sebagai berikut: a. medium asam klorida ph 1,2 y = x Serapan Konsentrasi (µg/ml) Gambar 4.1. Kurva Kalibrasi Propranolol HCl dalam Medium Asam Klorida ph 1,2 dengan panjang gelombang 289 nm

38 25 b. medium dapar fosfat ph 6,8 y = x Serapan konsentrasi (µg/ml) Gambar 4.2. Kurva Kalibrasi Propranolol HCl dalam Medium Dapar Fosfat ph 6,8 dengan Panjang Gelombang 289 nm 4.5 Evaluasi Mikrokapsul Mikrokapsul dievaluasi secara fisika dan kimia dengan melihat morfologi mikrokapsul, ukuran patikel mikrokapsul, efisiensi proses, kandungan zat inti, persentase zat inti yang tersalut dan profil pelepasan in vitro Pemeriksaan bentuk dan morfologi mikrokapsul Pada pemeriksaan morfologi mikrokapsul formula 2 dan alginat kitosan terlihat pori-pori matriks pada permukaan mikrokapsul, dapat dilihat pada gambar 4.3. dan gambar 4.4. Pada permukaan mikrokapsul alginat dapat dilihat bahwa kitosan tidak menyalut permukaan mikokapsul seluruhnya, hanya pada bagianbagian tertentu. Hal ini mungkin terjadi karena situs tempat kitosan mengikat pada alginat sudah jenuh dengan ikatan kalsium klorida, sehingga hanya sedikit kitosan yang dapatberikatan dan menyalut mikrokapsul alginat.

39 26 Gambar 4.3. Hasil SEM Mikrokapsul alginat formula 2 dengan perbesaran 1000 kali Gambar 4.4. Hasil SEM Mikrokapsul alginat formula 2 yang disalut kitosan dengan perbesaran 500 kali

40 Ukuran dan distribusi ukuran partikel Pada pengukuran partikel yang telah dilakukan, mikrokapsul alginat yang berisi propranolol HCl distribusi ukuran partikel terbesarnya berada pada kisaran μm yaitu 68 % untuk formula 1, 52 % untuk formula 2, 58% untuk formula 3, dan 60 % untuk formula 4. Untuk formula 2 yang disalut kitosan distribusi ukuran partikel terbesarnya berada pada ukuran lebih besar dari 1180 μm. Ukuran mikrokapsul alginat lebih kecil dibandingkan dengan mikrokapsul alginat yang disalut kitosan. Hal tersebut dikarenakan penambahan bobot penyalut dalam mikrokapsul sehingga meningkatkan ukuran mikrokapsul. Tabel 4.1. Data distribusi ukuran partikel Diameter Bobot (%) (μm) F1 F2 F3 F4 F2 alginat-kitosan > < Faktor perolehan kembali proses Penimbangan berat mikrokapsul yang diperoleh penting dilakukan untuk mengetahui jumlah mikrokapsul yang dihasilkan, serta nilai efisiensi proses pembuatan mikrokapsul. Efisiensi proses dari formula 1, 2, 3 dan 4 berturut-turut adalah 80,43%, 83,33%, 90% dan 82%. Data selengkapnya dapat dilihat pada tabel 4.2. Dari hasil tersebut dapat dilihat bahwa semakin besar perbandingan bobot polimer dan zat aktif yang digunakan maka semakin besar pula efisiensi proses yang didapatkan. Pada mikrokapsul alginat yang disalut kitosan didapat efisiensi proses yang diperoleh 74,28%. Hal tersebut dikarenakan kitosan tidak sempurna menyalut mikrokapsul alginat, sehingga efisiensi proses yang didapat pun kecil.

41 28 Tabel 4.2. Data efisiensi proses mikrokapsul alginat Formula Berat Berat Zat Berat Mikrokapsul Efisiensi Polimer (g) aktif (g) yang diperoleh (g) Proses (%) Formula ,043 80,43 Formula ,0 83,33 Formula ,8 90,00 Formula ,2 82,00 Formula 2 alginat-kitosan ,4 74, Penentuan kadar zat inti dalam mikrokapsul Kandungan Propranolol HCl dalam mikrokapsul alginat berkisar antara 13,04% sampai 32,35%. Data selengkapnya dapat dilihat pada tabel di bawah ini. Tabel 4.3. Data kandungan propranolol dalam mikrokapsul alginat Formula Berat mikrokapsul Berat Zat Aktif Kandungan Efisiensi yang diperoleh (g) terjerap (g) zat aktif (%) Penjerapan (%) Formula 1 8,043 2,603 32,35 52,075 Formula 2 10,0 2,244 22,44 56,10 Formula 3 10,8 1,407 13,04 46,93 Formula 4 8,2 1,151 28,06 57,55 Formula 2 alginat-kitosan 10,4 1,028 9,88 29,65 Hasil terbaik didapat pada formulasi 1, dengan rasio alginat dan propranolol HCl 1:1, dengan kandungan zat inti sebesar 32,35 %. Semakin besar rasio alginat dan propranolol HCl, semakin kecil pula kandungan propranolol HCl dalam mikrokapsul. Kandungan propranolol HCl yang kecil ini dikarenakan jumlah propranolol HCl dalam larutan tetap sedangkan jumlah mikrokapsul alginat yang ditambahkan semakin banyak. Hal ini mengakibatkan mikrokapsul tidak terendam seluruhnya di dalam larutan propranolol HCl, sehingga banyak mikrokapsul yang tidak dapat berikatan dengan propranolol HCl. Untuk mengupayakan agar mikrokapsul alginat terendam seluruhnya ke dalam larutan propranolol HCl waktu pendiaman diperlama dari 2 jam menjadi 6 jam. Mikrokapsul alginat yang disalut

42 29 kitosan mempunyai kandungan propranolol HCl sebesar 9,88%, yang lebih kecil dibandingkan mikrokapsul alginat yang tidak disalut kitosan. Hal ini karena propranolol HCl tidak tersalut oleh alginat tetapi hanya masuk ke dalam mikrokapsul melalui pori-pori yang terdapat pada permukaan mikrokapsul sehingga propranolol HCl yang sudah masuk ke dalam mikrokapsul dapat keluar lagi ketika direndam dalam larutan kitosan Efesiensi penjerapan mikrokapsul Penentuan presentase zat inti yang tersalut penting untuk mengetahui efisiensi penjerapan mikrokapsul. Efisiensi penjerapan mikrokapsul berkisar dari 46,93 % sampai 57,55 %. Data selengkapnya dapat dilihat pada tabel 4.3. Formula 4 memberikan hasil terbaik, yaitu 57,55%. Dari formula 2, 3 dan 4 dapat diambil kesimpulan bahwa semakin besar rasio alginat dan propranolol HCl, semakin kecil pula efisiensi penjerapannya. Efisiensi penjerapan formula 1 sebesar 52, 075 % berada diantara efisiensi penjerapan formula 2 dan formula 3. Perbedaan pola efisiensi penjerapan tersebut mungkin dikarenakan pencucian mikrokapsul dengan aquadest yang terlalu lama, sehingga propranolol HCl yang sangat mudah larut dalam air ikut tercuci dari mikrokapsul. Efisiensi penjerapan mikrokapsul yang disalut kitosan sebesar 29,65%. Efisiensi penjerapan yang tidak terlalu besar ini juga dikarenakan jumlah propranolol HCl dalam larutan tetap sedangkan jumlah mikrokapsul alginat yang ditambahkan semakin banyak. Hal ini mengakibatkan mikrokapsul tidak terendam seluruhnya di dalam larutan propranolol HCl, sehingga banyak mikrokapsul yang tidak dapat berikatan dengan propranolol HCl. Untuk mengupayakan agar mikrokapsul alginat terendam seluruhnya ke dalam larutan propranolol HCl waktu pendiaman diperlama dari 2 jam menjadi 6 jam. Hilangnya zat aktif dalam proses pencucian mikrokapsul dapat pula menjadi penyebab kecilnya efisiensi penjerapan mikrokapsul Uji pelepasan in vitro Uji Pelepasan in vitro dilakukan dalam larutan asam klorida ph 1,2 sebagai simulasi ph lambung dan dapar fosfat ph 6,8 sebagai simulasi ph usus. Pada larutan asam klorida ph 1,2 mikrokapsul alginat berisi propranolol HCl

43 30 melepaskan obat secara cepat. Pada formula 1 propranolol HCl yang terdisolusi mencapai 89,10 % pada menit ke 15, dan telah terdisolusi seluruhnya pada menit ke 30 dengan persentase terdisolusi sebesar 99,07 %. Pada formula 2 propranolol HCl yang terdisolusi mencapai 91,78 % pada menit ke 15 dan pada menit ke 60 semua propranolol HCl telah terdisolusi, dengan persentase terdisolusi sebesar 98,54 %. Pada formula 3 propranolol HCl yang terdisolusi mencapai 98,51 % pada menit ke 15 dan jumlah yang terdisolusi terus meningkat sampai menit ke 120 dengan persentase terdisolusi sebesar 105,72 %. Pada formula 4 propranolol HCl langsung mencapai kadar puncak pada menit ke 15 dengan persentase terdisolusi sebesar 100,93%. Dengan perkataan lain, pada formula 4 semua propranolol HCl terdisolusi pada menit ke % terdisolusi F1 F2 F3 F waktu (menit) Gambar 4.6. Profil pelepasan propranolol HCl dari mikrokapsul alginat dalam medium asam klorida ph 1,2. Setiap titik menggambarkan nilai rata-rata ±SD (n=3) Pada larutan dapar fosfat ph 6,8, mikrokapsul alginat diuji pelepasannya selama 8 jam dengan waktu pengambilan sampel pada jam ke 0,25, 0,5, 0,75, 1, 2, 4, 6, dan 8 jam. Pada formula 1 propranolol HCl yang terdisolusi mencapai 75,89 % pada menit ke 15, selanjutnya jumlah yang terdisolusi terus meningkat sampai propranolol HCl terdisolusi seluruhnya, yaitu pada jam ke 4 dengan jumlah yang terdisolusi sebesar 100,86 %. Pada formula 2 propranolol HCl yang terdisolusi

44 31 pada menit ke 15 sebesar 46,84 %. Propranolol HCl terdisolusi seluruhnya pada jam ke 2 dengan persentase terdisolusi sebesar 99,43%. Pada formula 3 propranolol yang terdisolusi mencapai 29,99 % pada menit ke 15 dan propranolol HCl terdisolusi seluruhnya pada jam ke 4 dengan persentase terdisolusi sebesar 97,91 %. Pada formulasi 4 propranolol HCl yang terdisolusi pada menit ke 15 sebesar 44,05 % dan propranolol HCl terdisolusi seluruhnya pada jam ke 2, dengan persentase terdisolusi sebesar 98,02 %. Data tersebut menunjukan mikrokapsul dengan jumlah natrium alginat lebih sedikit akan melepaskan propranolol HCl lebih cepat. Sebaliknya, mikrokapsul dengan jumlah alginat lebih banyak akan lebih lambat melepaskan propranolol HCl. Hal ini dikarenakan semakin banyak jumlah polimer yang menahan laju pelepasan obat dari mikrokapsul % terdisolusi F1 F2 F waktu (jam) Gambar 4.7. Profil pelepasan propranolol HCl dari mikrokapsul alginat dalam medium dapar fosfat ph 6,8. Setiap titik menggambarkan nilai rata-rata ± SD (n=3) Disolusi cepat dari mikrokapsul alginat yang berisi propranolol HCl tersebut dikarenakan propranolol HCl tidak terenkapsulasi sempurna dalam mikrokapsul alginat. Proses pembuatan mikrokapsul alginat berisi propranolol

45 32 HCl yang berbeda dengan pembuatan mikrokapsul lain dengan metode yang sama, menyebabkan zat aktif tidak berada ditengah-tengah polimer penyalut. Pembuatan mikrokapsul alginat dengan metode gelasi eksternal biasanya dilakukan dengan cara mendispersikan zat aktif ke dalam polimer penyalut, dalam hal ini alginat, namun karena propranolol HCl membentuk endapan dengan natrium alginat, maka metode tersebut tidak dapat digunakan. Propranolol HCl dan natrium alginat akan membentuk asam alginat yang tidak larut air, sehingga akan mengendap jika didispersikan bersamaan. Metode yang sekuensial yang dilakukan untuk membuat mikrokapsul alginat lebih cenderung menghasilkan mikrosfer dibandingkan mikrokapsul. Hal tersebut dikarenakan zat aktif tidak terjerap di dalam polimer, tetapi berikatan dengan tangan-tangan polimer. Hal ini juga dapat menjadi penyebab pelepasan zat aktif yang terlalu cepat. Dalam uji pelepasan mikrokapsul di medium asam klorida ph 1,2, mikrokapsul alginat tetap utuh hanya propranolol HCl saja yang terlarut. Hal tersebut mengindikasikan bahwa propranolol HCl tidak tersalut oleh alginat, melainkan hanya masuk ke dalam mikrokapsul melalui pori-pori yang terdapat pada permukaan mikrokapsul. Sedangkan uji pelepasan dalam medium dapar fosfat ph 6,8, mikrokapsul alginat terlarut sebanding dengan larutnnya propranolol HCl dalam medium disolusi tersebut. Dari hasil disolusi yang dianggap terbaik selanjutnya dibuat mikrokapsul alginat yang disalut dengan kitosan. Formula yang dipilih adalah formula 2 yang pelepasan zat aktif dalam medium asam mencapai puncak pada menit ke 60. Mikrokapsul alginat yang disalut kitosan, pelepasannya dalam larutan asam klorida ph 1,2 lebih lambat dibandingkan dengan mikrokapsul yang tidak disalut kitosan. Pada formula 2 yang tidak disalut kitosan, jumlah propranolol yang terdisolusi pada menit ke 15 sebesar 91,78 % dan propranolol HCl terdisolusi seluruhnya pada menit ke 60 dengan persentase tedisolusi sebesar 98,54 %, sedangkan pada formula 2 alginat-kitosan pada menit ke 15, jumlah propranolol HCl yang terdisolusi sebesar 89,42 % dan pada menit ke 60 propranolol HCl yang terdisolusi sebesar 93,54 %.

46 % terdisolusi F2 alginat F2 alginat-kitosan waktu (menit) Gambar 4.8. Profil pelepasan propranolol HCl dari mikrokapsul alginat dan alginat-kitosan dalam medium asam klorida ph 1,2. Setiap titik menggambarkan nilai rata-rata ± SD (n=3) Terdapat perbedaan jumlah propranolol yang terdisolusi antara mikrokapsul yang disalut kitosan dan yang tidak disalut kitosan. Hal ini dikarenakan kitosan akan mengembang dalam larutan asam klorida, sehingga memberikan barrier yang lebih besar dibandingkan dengan mikrokapsul yang tidak disalut kitosan. Namun perbedaan persentase terdisolusi tersebut tidak terlalu signifikan. Hal tersebut diperkirakan karena kitosan tidak menyalut permukaan mikrokapsul alginat seluruhnya, hanya pada bagian-bagian tertentu. Hal ini dikarenakan situs tempat kitosan berikatan dengan alginat sudah jenuh dengan ikatan kalsium dan alginat. Oleh karena itu kitosan hanya berikatan pada sisi-sisi alginat yang masih kosong. Demikian juga pada larutan dapar fosfat ph 6,8, mikrokapsul yang tidak disalut kitosan lebih cepat melepaskan propranolol HCl dibandingkan dengan yang disalut kitosan. Pada menit ke 15 propranolol yang terdisolusi dari formula 2 alginat sebesar 46,84 %, sedangkan pada formula 2 alginat-kitosan sebesar 65,31 %. Propranolol HCl pada formula 2 alginat terdisolusi seluruhnya pada jam ke 2, yaitu sebesar 99,43 %. Sedangkan pada jam

47 34 ke 2 mikokapsul formula 2 alginat-kitosan telah melepaskan propranolol sebanyak 86,30 % dan terus meningkat sampai jam ke % terdisolusi F2 alginat F2 alginat-kitosan Waktu (Jam) Gambar 4.9. Profil pelepasan propranolol HCl dari mikrokapsul alginat dan alginat-kitosan dalam dapar fosfat ph 6,8. Setiap titik menggambarkan nilai ratarata ± SD (n=3)

48 BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan Pembuatan mikrokapsul alginat-kitosan mengandung propranolol HCl dengan metode gelasi eksternal belum menghasilkan mikrokapsul yang optimal. Pelepasan propranolol HCl dari mikrokapsul alginat dan mikrokapsul alginatkitosan baik dalam medium asam klorida ph 1,2 dan dapar fosfat ph 6,8 tidak berbeda secara signifikan. 5.2 Saran 1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai mikroenkapsulasi double coating propranolol HCl dalam mikrokapsul alginat menggunakan metode gelasi eksternal satu tahap dengan kitosan. 2. perlunya didesain alat pembuat mikrokapsul metode gelasi eksternal untuk pembuatan skala besar. 35

49 36 DAFTAR ACUAN Ansel, H.C., Allen, L.V., dan Popovich, N.G. (1999). Modified Release Dosage Forms and Drug Delivery Systems dalam: Ansel, H.C., Allen, L.V., dan Popovich, N.G. (1999). Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (7 th ed.). USA: Lippincott Williams,dan Wilkins. Deasy, B. P. (1984). Microencapsulation and Related Drug Processes.New York: Marcel Dekker Gåserød, O., Smidsrød, O., & Skjåk-Bræk, G. (1998). Microcapsules of Alginate- Chitosan I A Quantitative Study of the Interaction Between Alginate and Chitosan. Biomaterials, 19, Ghosh, S. K. (2006). Fuctional Coatings and Microencapsulation: A General Perspective. In Functional Coating by Polymer Microencapsulation. Weinheim: WILEY-VCH VerlagGmbH & Co. KGaA. Haque, T., Chen, H., Ouyang, W., Martoni, C., Lawuyi, B., Urbanska, A. M., et al. (2005). In Vitro Study of Alginat-Chitosan Microcapsules an Alternative to Liver Cell Transplants for the Treatment of Liver Failure. Biotechnology Letter, Illum, L. (1998). Chitosan and It's Use as Pharmaceutical Excipient. Pharmaceutical Research, 15 No 9. Krowcynsk, L. (1987). Extended-release Dosage Forms. CRC Press, Inc. Lachman, L., Herbert, L., & Joseph, L. K. (1994). Teori dan Praktek Farmasi Industri (2nd ed.). (S. Suyatmi, Trans.) Jakarta: UI Press Lankalapalli, S., & Kolapalli, V. (2009). Polyelectrolyte Complexes: A Review of Their Applicability in Drug Delivery Technology. Indian Journal Pharmaceutical Science 7 (5), Lim, L. Y., & Wan, S. C. (1997). Propranolol Hydrochloride Binding in Calcium Alginate Beads. Drug Development and Industrial Pharmacy Vol 23 No 10, Liouni, M., Drichoutis, P., & Nerantzis, E. T. (2008). Studies of the Mechanical Properties and the Fermentation Behavior of Double Layer Alginat-

50 37 Chitosan Beads, Using Saccharomyces cerevisiae Entrapped Cells. World J Microbiol Biotechnol 24, Lisboa, A. C., Valenzuela, M. G., Grazioli, G., Diaz, F. R., & Sogayar, M. C. (2007). Polymeric Microcapsules Production from Sodium Alginic Acid for Cell Therapy. Material Research Vol 10 No 4, Liu, X. D., Yu, W. Y., Zhang, Y., Xue, W. M., Yu, W. T., Xiong, Y., et al. (2002). Characterization of Structure and Diffusion Behaviour of Caalginate Beads Preprared with External or Internal Calcium Sources. Journal of Microencapsulation, 19, Liu, X., Xue, W., Liu, Q., Yu, W., Fu, Y., Xin, X., et al. (2004). Swelling Behaviour of Alginate-chitosan Microcapsules Prepared by External Gelation or Internal Gelation Technology. Carbohydrate Polymer, 56, Mandal, S., Kumar, S. S., Khrisnamoorthy, B., & Basu, S. K. (2010). Development and Evaluation of Calcium Alginate Beads Prepared by Sequential and Simultaneous Methods. Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences Vol 46 No 4, Manz, B., Hillgartner, M., Zimmermann, H., Zimmermann, D., Volke, F., & Zimmermann, U. (2003). Cross-linking Properties of Alginat Gels Determined bu Using Advanced NMR Imaging and Cu2+ as Contrast Agent. European Biophysic Journal 33, Mathiowitz, E. (1999). Encyclopedia of Controlled Drug Delivery (Vol. 1 & 2). New York: John Wiley & Sons, Inc. Moffat, A. C. (1986). Clarke's Isolation and Identification of Drugs (2nd ed.). London: The Pharmaceutical Press Nafrialdi. (2007). Antihipertensi. Dalam: Gunawan, G. S. (2007). Farmakologi dan Terapi, Ed. V. Bagian farmakologi FKUI. Jakarta: Gaya Baru Paul, A., Shum-Tim, D., & Prakash, S. (2010). Investigation on PEG Integrated Alginat-Chitosan Microcapsules for Myocardial Therapy Using Marrow Stem Cells Genetically Modified by Recombinant Baculovirus. Cardiovascular Engineering and Technology Vol 1 no 2,

51 38 Remington, J. P. (2006). The Science and Practice of Pharmacy.Maryland: Lippincott William & Wilkinski. Rowe, R. C., Sheskey, P. J., & Owen, S. C. (2006). Handbook of Pharmaceutical Excipients. London: Pharmaceutical Press and American Pharmacists Association , Royal Society of Chemistry. (2011). Retrieved January 22, 2011, from Royal Society of Chemistry: Sakkinen, M. (2003). Biopharmaceutical Evaluation of Microcrystalline Chitosan as Release-rate-controlling Hydrophilic Polymer in Granules for Gastroretentive Drugs Delivery. Academic Dissertation Faculty of Science of the University of Helsinki. Shargel, L., & Andrew, B. C. (1999). Applied Biopharmaceutics and Pharmacokinetics. Appleton Century Croffts. Sutriyo, Djajadisastra, J., & Novitasari, A. (2004). Mikroenkapsulasi Propanolol Hidroklorida dengan Penyalut Etil Selulosa Menggunakan Metoda Penguapan Pelarut. Majalah Ilmu Kefarmasian, I, Swarbick, J., & Boylan, J. C. (1994). Encyclopedia of pharmaceutical Technology (Vol. 9). New York: Marcel Dekker, Inc United States Pharmacopoeial Convention. (2007). The United States Pharmacopoeia, 30 st revision and The National Formulary, 25 th revision. Rockville: United States Pharmacopoeial Convention, Inc. 318, 3047.

52 LAMPIRAN

53 Daftar Lampiran Lampiran Gambar 1-4 Lampiran Tabel 5-10 Lampiran Rumus Perhitungan Lampiran Sertifikat 13-15

54 39 Lampiran 1. Mikrokapsul alginat basah Lampiran 2. Mikrokapsul alginat dan alginat-kitosan Formula 1 Formula 2 Formula 2 alginat-kitosan Formula 3 Formula 4

55 40 Lampiran 3. Contoh serapan propranolol HCl pada panjang gelombang 289 nm serapan Panjang gelombang (nm)

56 41 Lampiran 4. Distribusi ukuran partikel mikrokapsul Bobot (%) > < f1 f2 f3 f4 f2 ALG-CHI diameter (µm)

57 42 Lampiran 5. Data kurva kalibrasi propranolol HCl dalam medium asam klorida ph 1,2 Konsentrasi Serapan (µg/ml) a= 0,0259 b= 0,0183 r= 0, persamaan kurva kalibrasi y= 0,0183x +0,0259 Lampiran 6. Data kurva kalibrasi propranolol HCl dalam medium dapar fosfat ph 6,8 Konsentrasi Serapan (µg/ml) a= 0,0198 b=0,0188 r= 0,9992 Persamaan kurva kalibrasi y= 0,0188x + 0,0198

58 43 Lampiran 7. Data Disolusi mikrokapsul alginat yang berisi propranolol HCl pada medium HCl ph 1,2 Waktu % terdisolusi rata-rata (Menit) F1 F2 F3 F4 0 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0, ,10 ± 1,40 91,78 ± 2,35 98,51 ± 1,76 100,93 ± 1, ,07 ± 1,78 98,43 ± 1,43 101,07 ± 1,12 99,55 ± 0, ,34 ± 4,46 98,43 ± 0,96 101,69 ± 1,12 99,05 ± 0, ,14 ± 1,10 98,54 ± 0,66 102,54 ± 0,08 98,02 ± 0, ,48 ± 2,60 98,21 ± 0,04 103,64 ± 0,08 95,85 ± 1, ,10 ± 2,40 98,21 ± 0,20 105,72 ± 0,10 92,89 ± 0,25 Lampiran 8. Data Disolusi Mikrokapsul Alginat berisi Propranolol HCl pada Medium Dapar Fosfat ph 6,8 Waktu % terdisolusi rata-rata (Jam) F1 F2 F3 F4 0 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,25 75,89 ± 2,67 46,84 ± 0,32 29,99 ± 2,65 44,05 ± 0,10 0,5 87,90 ± 0,40 76,45 ± 2,34 50,24 ± 4,01 73,05 ± 1,43 0,75 97,14 ± 1,30 89,57 ± 0,03 72,01 ± 3,42 90,07 ± 0, ,60 ± 0,07 95,45 ± 0,04 86,35 ± 2,31 96,17 ± 1, ,16 ± 0,06 99,43 ± 0,15 97,58 ± 0,64 98,02 ± 0, ,86 ± 0,91 98,14 ± 0,38 97,91 ± 0,80 96,98 ± 0, ,75 ± 1,53 96,79 ± 0,10 96,55 ± 1,71 96,14 ± 0, ,50 ± 2,50 94,85 ± 0,50 96,14 ± 2,31 95,15 ± 0,71

59 44 Lampiran 9. Data Disolusi F2 alginat dan F2 alginat-kitosan medium HCl ph 1,2 Waktu % terdisolusi (Menit) F2 asam F2 alg-chi asam 0 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0, ,78 ± 2,35 89,42 ± 1, ,43 ± 1,43 93,83 ± 0, ,43 ± 0,96 94,30 ± 0, ,54 ± 0,66 93,04 ± 0, ,21 ± 0,04 93,34 ± 0, ,21 ± 0,20 93,05 ± 0,73 Lampiran 10. Data Disolusi F2 alginat dan F2 alginat-kitosan medium dapar fosfat ph 6,8 Waktu % terdisolusi (Jam) F2 alginat F2 alg-chi 0 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,25 46,84 ± 0,32 65,31 ± 1,77 0,5 76,45 ± 2,34 82,51 ± 0,32 0,75 89,57 ± 0,03 84,45 ± 0, ,45 ± 0,04 84,84 ± 0, ,43 ± 0,15 86,30 ± 1, ,14 ± 0,38 86,32 ± 1, ,79 ± 0,10 87,61 ± 0, ,85 ± 0,50 88,48 ± 0,33

60 45 Lampiran 11. Perhitungan Efisiensi Penjerapan dan Kandungan Zat Aktif dalam Mikrokapsul Persamaan kurva kalibrasi dalam medium asam klorida 0,1 N y= 0,0183x +0,0259 Berat mikrokapsul = 29,7 mg Mikrokapsul digerus kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml, kemudian didispersikan dalam dengan larutan HCl 0,1 N hingga batas. Kemudian larutan disaring dan dipipet sebanyak 5 ml. Setelah itu dimasukkan ke dalam labu ukur 25 ml dan diukur serapannya. mg Berarti dalam 29,7 mg mikrokapsul terdapat 9,609 mg propranolol HCl Berat propranolol teoritis = 14,85 mg Jadi,

61 46 Lampiran 12. Perhitungan Disolusi Persamaan garis yang diperoleh dari y = a + bx Perhitungan kandungan zat dalam sampel Jumlah pelepasan Propranolol HCl dari serbuk campuran Menit ke-15 = Menit ke-30 = Menit ke-45 = Menit ke-n = keterangan : y = serapan propranolol HCl y n x fp M S a b = serapan propranolol HCl pada menit ke-n = konsentrasi propranolol HCl = faktor pengenceran = volume medium disolusi = volume sampling = koefisien intersep = slope Contoh perhitungan : Persamaan garis linear y= 0,0188x + 0,0198 Diketahui : Y 30 = 0,320 Y 15 = 0,222 b = 0,0188 M = 900 ml Fp = 1 S = 10 ml a = 0,0198

62 47 Misalnya, untuk disolusi ditimbang 79,6 mg mikrokapsul Kandungan zat aktif dalam mikrokapsul sebesar 22,44% Berarti, jumlah zat aktif dalam 79,6 mg mikrokapsul sebanyak: = 14,478 mg

63 48 Lampiran 13. Sertifikat Analisis Natrium Alginat

64 49 Lampiran 14. Sertifikat Analisis Kitosan

65 50 Lampiran 15. Sertifikat Analisis Propranolol HCl