UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN BELIMBING WULUH (Averrhoa bilimbi L.) TERHADAP Propionibacterium acnes DAN Pseudomonas aeruginosa SERTA PROFIL KROMATOGRAFINYA SKRIPSI Oleh: FERRY CATUR NUR INDAH SARI K 100 070 049 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2011 i
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN BELIMBING WULUH (Averrhoa bilimbi L.) TERHADAP Propionibacterium acnes dan Pseudomonas aeruginosa SERTA PROFIL KROMATOGRAFINYA SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta Oleh: FERRY CATUR NUR INDAH SARI K 100070049 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA 2011 ii
iii
MOTTO Katakanlah: sesungguhnya sembahyangku, ibadatku, hidupku dan matiku hanyalah untuk Allah, Tuhan semesta alam. (QS. Al An aam : 162) Sesungguhnya Allah tidak akan merubah keadaan suatu kaum sehingga mereka merubah keadaan yang ada pada diri mereka sendiri (QS. Ar ra d : 11). Jadikanlah sabar dan shalat sebagai penolongmu. Dan sesungguhnya yang demikian itu sungguh berat, kecuali bagi orang-orang yang khusyu' ( QS. Al baqarah : 45) PERSEMBAHAN Ku persembahkan dengan segenap hati untuk : Ibu, Alm Ayahanda dan kakak-kakakku yang telah memberikan doa serta bantuan moril maupun materiil untukku, sebagai wujud kasih sayang. Keluarga besarku Untuk seseorang yang selalu ada di hatiku, terima kasih atas dukungan dan semangatnya iv
DEKLARASI Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Surakarta, Juli 2011 (Ferry Catur Nur Indah Sari) v
KATA PENGANTAR Assalamu alaikum Wr. Wb. Alhamdulillah, puji syukur hanya untuk Allah SWT. Hanya kepada-nya penulis mohon maghfiroh dan hidayah. Sholawat serta salam semoga tetap terlimpahkan kepada junjungan kita Nabi Besar Muhammad SAW. Pemimpin mulia yang selalu kita warisi semangat juangnya. Dengan segala kerendahan hati, penulis telah menyelesaikan sebuah skripsi dengan judul Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.) Terhadap Propionibacterium acnes Dan Pseudomonas aeruginosa Serta Profil Kromatografinya. Skripsi ini diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat sarjana S1 pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini jauh dari kesempurnaan, hal ini dikarenakan keterbatasan penulis. Namun berkat bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak, akhirnya skripsi ini dapat terselesaikan. Oleh karena itu pada kesempatan ini penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada : 1. Bapak Dr. Muhammad Da i, M.Si, Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta yang telah memberikan ijin dalam pelaksanaan penelitian ini. 2. Ibu Ratna Yuliani, M. Biotech. St, selaku dosen pembimbing utama yang telah meluangkan waktu dan kesempatan untuk memberikan bimbingan, nasehat, vi
arahan, semangat, serta perhatian selama penelitian, penyusunan, dan penyelesaian skripsi ini. 3. Bapak Peni Indrayudha, M. Biotech. Apt, selaku pembimbing pendamping yang dengan sabar membimbing dan memberi arahan sampai selesainya skripsi ini. 4. Bapak Dr. Haryoto, M. Sc dan Ibu Ika Trisharyanti D. K, M. Farm., Apt selaku penguji atas koreksi, kritik, dan saran yang menyempurnakan karya ini. 5. Bapak dr. EM Sutrisna, M. Kes., selaku pembimbing akademik yang selalu memberikan arahan dan motivasi selama menempuh pendidikan di Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta. 6. Bapak dan Ibu dosen Fakultas Farmasi yang telah memberikan banyak ilmu kepada penulis, semoga menjadi amal jariyah yang akan dibalas oleh-nya. 7. Bapak dan Ibu laboran Fakultas Farmasi : Pak Zaenal, Pak Ghofar, Mbak Noor, Mas Awang, Pak Toni, Pak Rahmad atas kepedulian dan perhatiannya selama ini yang telah memberikan berbagai kemudahan yang penulis peroleh sehingga pelaksanaan penelitian ini dapat berjalan lancar. 8. Ibu, kakak-kakakku di rumah dan keluarga besar di Sragen yang selalu memberikan kepercayaan, dukungan, motivasi, kasih sayang dan do a dalam setiap langkah demi kebaikan penulis. 9. Untuk orang yang sangat spesial dalam hatiku Muhammad Intan Putranto yang selalu setia bersama dalam susah dan sedih, yang selalu menjadi motivator bagi penulis. vii
10. Teman terbaik satu tim yang telah dengan setia melewati berbagai suka duka bersama selama penelitian dan penyusunan skripsi : Hermawati Eva Setyorini dan Widya Ayu kita tetap diberikan kesempatan untuk menjadi sahabat selamanya. 11. Sahabat-sahabat terbaikku : Novita, Neneng Hasanah, Arum, Devita, Annisa, dan Febti terima kasih telah bersedia memberi petuah bijak, menjadi pendengar terbaik dan motivator bagi penulis. 12. Seluruh mahasiswa Fakultas Farmasi angkatan 2007, terima kasih atas bantuan dan dukungan yang kalian berikan. Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi siapa saja yang membacanya dan muncul kritik dan saran untuk perbaikan penulis selanjutnya. Wassalamu alaikum Wr. Wb. Surakarta, Juli 2011 Penulis viii
9 DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL... HALAMAN PENHGESAHAN... MOTTO DAN PERSEMBAHAN... DEKLARASI... KATA PENGANTAR... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR LAMPIRAN... i ii iii iv v viii xi xii xiii DAFTAR SINGKATAN... xvi INTISARI... xv BAB I. PENDAHULUAN... 1 A. Latar Belakang Masalah... 1 B. Perumusan Masalah... 3 C. Tujuan penelitian... 4 D. Tinjauan Pustaka... 4 1. Tanaman belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.).. 4 2. Metode Penyarian... 6 3. Bakteri... 7 4. Antibakteri... 9 5. Uji Aktivitas Antibakteri... 11 6. Kromatografi Lapis Tipis... 14 ix
10 E. Landasan Teori... 16 F. Hipotesis... 17 BAB II. METODE PENELITIAN... 18 A. Kategori Penelitian... 18 B. Variabel Penelitian... 18 1. Variabel bebas... 18 2. Variabel tergantung... 18 3. Variabel kendali... 18 C. Alat dan Bahan... 18 1. Alat-alat yang digunakan... 18 2. Bahan-bahan yang digunakan... 19 D. Tempat Penelitian... 19 E. Jalannya Penelitian... 19 1. Determinasi tanaman... 19 2. Pengumpulan dan penyiapan bahan... 20 3. Penyarian... 20 4. Uji aktivitas antibakteri... 20 5. Uji kandungan senyawa dengan Kromatografi Lapis Tipis... 26 F. Cara Analisis... 27 BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN... 28 A. Hasil Determinasi Tanaman... 28 B. Penyarian... 28 x
11 C. Identifikasi Bakteri... 29 D. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri... 30 E. Analisis Hasil Kromatografi Lapis Tipis... 36 BAB IV KESIMPULAN... 42 DAFTAR PUSTAKA... 43 LAMPIRAN... 46 xi
12 DAFTAR TABEL Tabel 1. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.) terhadap P. aeruginosa... 33 Tabel 2. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.) terhadap P. acnes... 34 Tabel 3. Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.)... 33 xii
13 DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Skema Pewarnaan Bakteri... 22 Gambar 2. Skema Pembuatan Seri Konsentrasi Ekstrak... 24 Gambar 3. Skema Pembuatan Suspensi Bakteri... 25 Gambar 4. Hasil Pengecatan Gram P. acnes dan P. aeruginosa... 30 Gambar 5. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Belimbing Wuluh terhadap P. aeruginosa... 33 Gambar 6. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Belimbing Wuluh terhadap P. acnes... 33 Gambar 7. Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Belimbing Wuluh... 38 xiii
14 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Tanaman Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.) 47 Lampiran 2. Perhitungan... 51 Lampiran 3. Komposisi Media Bakteri... 59 Lampiran 4. Komposisi Cat Gram... 60 Lampiran 5. Pembuatan Reagen... 61 Lampiran 6. Foto Uji Antibakteri... 62 Lampiran 7. Foto Pewarnaan Bakteri... 63 Lampiran 8. Foto Daun Belimbing Wuluh... 65 xiv
15 DAFTAR SINGKATAN CFU KLT Rf LAF UV CMC-Na b/v v/v KBM Colony Forming Unit Kromatografi Lapis Tipis Retardation factor Laminar Air Flow Ultra Violet Carboxyl Methyl Cellulosa Natrium Berat Per Volume Volume Per Volume Kadar Bunuh Minimum xv
16 INTISARI Bakteri merupakan salah satu penyebab infeksi pada penyakit terutama di negara-negara tropis. Penyakit kulit akibat bakteri merupakan penyakit yang sering muncul di tengah masyarakat Indonesia. Bakteri yang dapat menyebabkan infeksi antara lain Propionibacterium acnes dan Pseudomonas aeruginosa. Salah satu tanaman yang dapat dimanfaatkan sebagai obat adalah tanaman belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) yang telah terbukti mempunyai khasiat sebagai antibakteri. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri daun belimbing wuluh terhadap Propionibacterium acnes dan Pseudomonas aeruginosa serta untuk mengetahui kandungan senyawa kimia yang terdapat pada ekstrak etanol daun belimbing wuluh. Ekstrak etanol daun belimbing wuluh diperoleh dengan cara maserasi dengan penyari etanol 96%. Uji aktivitas antibakteri menggunakan seri konsentrasi 8%; 9%; 10%; 11% untuk P. acnes dan P. aeruginosa. Kandungan senyawa kimia yang terdapat dalam ekstrak etanol daun belimbing wuluh dapat dianalisis dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT), dengan fase diam silika gel GF 254 dan fase gerak kloroform:metanol:asam format (9:0,5:0,5) v/v. Hasil uji antibakteri menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun belimbing wuluh hingga konsentrasi 11% tidak mempunyai aktivitas antibakteri terhadap Propionibacterium acnes dan Pseudomonas aeruginosa. Hasil analisis KLT menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun belimbing wuluh mengandung alkaloid, minyak atsiri, flavonoid, dan tanin. Kata kunci : Averrhoa bilimbi L, Propionibacterium acnes, Pseudomonas aeruginosa, antibakteri. xvi