PENGARUH PARTISI BERTINGKAT CAIR CAIR EKSTRAK ETANOL RIMPANG JAHE (Zingiber officinale Rosc.) TERHADAP PROFIL KANDUNGAN SENYAWA KIMIA DAN AKTIVITAS ANTIRADIKALNYA SKRIPSI Oleh: FIQHANISA DINUL HIKMAH K 100080096 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2012
PENGARUH PARTISI BERTINGKAT CAIR CAIR EKSTRAK ETANOL RIMPANG JAHE (Zingiber officinale Rosc.) TERHADAP PROFIL KANDUNGAN SENYAWA KIMIA DAN AKTIVITAS ANTIRADIKALNYA SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta Oleh: FIQHANISA DINUL HIKMAH K 100080096 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2012
DEKLARASI Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Surakarta, 30 Maret 2012 Peneliti (Fiqhanisa Dinul Hikmah)
KATA PENGANTAR Assalamu alaikum Wr. Wb. Segala puji bagi Allah SWT yang telah melimpahkan karunia nikmat dan iman sehingga penulis dengan segala petunjuk-nya diberikan kelancaran dalam menyelesaikan skripsi ini. Shalawat dan salam kepada Nabi Muhammad SAW sebagai suri tauladan dan pembawa rahmat bagi semesta alam. Skripsi disusun sebagai sumbangsih ilmu kepada masyarakat serta untuk menempuh derajat gelar S.Farm (Sarjana Farmasi) di Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta. Judul skripsi yang dikemukakan adalah PENGARUH PARTISI BERTINGKAT CAIR CAIR EKSTRAK ETANOL RIMPANG JAHE (Zingiber officinale Rosc.) TERHADAP PROFIL KANDUNGAN SENYAWA KIMIA DAN AKTIVITAS ANTIRADIKALNYA. Skripsi ini memberikan informasi mengenai pengaruh yang terjadi dengan sistem pemisahan senyawa dengan partisi bertingkat cair-cair dilihat dari kandungan senyawa yang terdapat dalam fraksinya dan fungsinya sebagai antiradikal bebas. Ucapan terima kasih dan penghargaan setinggi-tingginya penulis ucapkan atas dukungan berbagai pihak dalam penyusunan skripsi yaitu: 1. Bapak Dr. Muhammad Da i, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta serta Pembimbing Akademik dan Pembimbing Utama skripsi. 2. Ibu Rosita Melannisa, M.Si., Apt., selaku Dosen Penguji I dan Bapak Broto Santoso, M.Sc., Apt. selaku Dosen Penguji II. 3. Ibu Ika Trisharyanti D.K, M.Farm., Apt., selaku Kepala Laboratorium Bagian Kimia Farmasi segenap laboran, Pak Tony dan Pak Rahmat. 4. Ibu Ratna yuliani, M. Biotech.,St., selaku Kepala Laboratorium Bagian Mikrobiologi segenap laboran Mb. Noor. 5. Kedua orangtua, Ayahanda Haiban Sodiq serta Ibunda Saidah Khaidatul
Mardiyah, Kakak Inna Nurrila Fahmayanti, Adikku Tamassaka Dinul Haq dan segenap keluarga. 6. Mas ahwan atas bimbingan penelitian serta kritik dan saran dalam penyempurnaan skripsi penulis. 7. Keluarga kost, teman dan sahabat-sahabatku semua, atas dukungan, dorongan semangatnya, dan kebersamaannya selama ini. 8. Para dosen dan staf pengajar Universitas Muhammadiyah Surakarta yang telah memberikan pembekalan pengetahuan. Pihak lain yang telah memberikan bantuan, dukungan serta doa. Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan sehingga sangat mengharapkan kritik dan saran yang membangun demi kesempurnaan hasil skripsi ini. Dengan penuh rasa syukur dan kerendahan hati, penulis berharap karya tulis sederhana ini dapat bermanfaat bagi pembaca pada umumnya dan bagi penulis khususnya. Wassalamu alaikum Wr. Wb. Surakarta, 30 Maret 2012 Penulis
DAFTAR ISI Halaman JUDUL... PENGESAHAN SKRIPSI... DEKLARASI... KATA PENGANTAR... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR RUMUS DAFTAR GAMBAR... DAFTAR LAMPIRAN... DAFTAR SINGKATAN... INTISARI... i ii iii iv vi ix x xi xiii xiv 1 BAB I. PENDAHULUAN A. Latar Belakang... B. Perumusan Masalah... C. Tujuan Penelitian... D. Tinjauan Pustaka... 1. Tanaman Rimpang Jahe... a. Klasifikasi... b. Nama Daerah... 1 3 3 4 4 4 4
c. Khasiat Tanaman... d. Kandungan Kimia Senyawa yang Berpotensi sebagai Antioksidan... 2. Fraksinasi... 3. Uji Aktivitas Antiradikal... 4. Gas Chromatography Mass Spectrometry (GC-MS)... E. Landasan Teori... 5 6 7 8 7 12 F. Hipotesis... BAB II. METODE PENELITIAN A. Kategori Penelitian... B. Variabel Penelitian... 1. Variabel Bebas... 2. Variabel Tergantung... 3. Variabel Terkendali... C. Alat dan Bahan... 1. Alat yang Digunakan... 2. Bahan yang Digunakan... D. Tempat Penelitian... E. Jalannya Penelitian... 1. Proses ekstraksi rimpang jahe... 2. Fraksinasi Ekstrak Etanol Rimpang Jahe... 3. Uji Aktivitas Antioksidan Metode DPPH... a. Pembuatan Larutan Pereaksi DPPH... 13 13 13 13 13 14 14 14 14 15 15 15 16 16 16
b. Pembuatan Larutan Stok Sampel Ekstrak Rimpang Jahe... c. Penentuan Waktu Inkubasi... d. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum (λ maks )... e. Penentuan IC 50 Ekstrak Etanol Rimpang Jahe... 16 16 16 17 f. Penentuan Aktivitas Antiradikal... 4. Analisis kualitatif (fraksi ekstrak rimpang jahe) dengan metode KLT... 5. Analisis fraksi ekstrak Rimpang Jahe Menggunakan GC-MS.. 6. Skema Prosedur Kerja Penelitian... 17 18 19 20 F. Analisis Data... BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN 21 A. Ekstraksi dan Partisi Bertingkat Cair-cair... B. Penentuan Aktifitas Antiradikal Bebas Hasil Partisi Ekstrak Etanol Rimpang Jahe dengan Metode DPPH... C. Analisis Kualitatif dengan Metode KLT... 22 23 25 D. Analisis Profil Kandungan Senyawa dengan GC MS ( gas chromatograpy Massa Selective )... BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan... B. Saran... DAFTAR PUSTAKA... 30 30 31 36 LAMPIRAN...
DAFTAR TABEL Tabel 1. Antioksidan zat volatil dari ekstrak Z.officinale... Halaman 6 Tabel 2. Macam pelarut dengan tingkat kepolaran... Tabel 3. Identifikasi konstituen kimia minyak menguap dengan GC-MS... Tabel 4. Hasil rendemen fraksi n-heksana, etil asetat, dan metanol:air (1:1).. Tabel 5. Harga Rf fraksi dan kontrol pembanding vitamin E... 6 10 21 24 Tabel 6. Data senyawa fraksi n-heksana, etil asetat, dan metanol:air (1:1) ekstrak jahe (Zingiber officinale)... 27
DAFTAR RUMUS Persamaan (1) Persamaan (2) Halaman Persen aktivitas antiradikal 17 Harga Rf (Retendation factor) 18
DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Rumus struktur kandungan utama jahe... Halaman 5 Gambar 2. Reaksi radikal DPPH dengan antioksidan eugenol... Gambar 3. Gas Chromatography Mass Spectroscopy (GC MS)... 8 10 Gambar 4. Hasil Analisa Oleoresin Ekstrak Etanol Rimpang Jahe menggunakan GC-MS... Gambar 5. Skema Umum Jalannya Penelitian... Gambar 6. Grafik hubungan fraksi versus rata-rata % antiradikal bebas... Gambar 7. Profil KLT fraksi-fraksi rimpang jahe dan vitamin E... 11 19 22 24 Gambar 8. Kromatogram fraksi n-heksana ekstrak etanol jahe (Zingiber officinale) 1 % b/v..... 26 Gambar 9. Kromatogram fraksi etil asetat ekstrak etanol jahe (Zingiber officinale) 1 % b/v... 26 Gambar 10. Kromatogram fraksi etil asetat ekstrak etanol jahe (Zingiber officinale) 1 % b/v..... Gambar 11. Struktur senyawa fenolik dan terpen... 26 28
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Penentuan panjang gelombang maksimum DPPH... Halaman 36 Lampiran 2. Orientasi potensi % antiradikal dengan pengambilan 100 µl... 37 Lampiran 3. Contoh perhitungan IC 50 dari data hasil penentuan IC 50 fraksi n-heksana rimpang jahe replikasi I... Lampiran 4. Data hasil penentuan IC 50 fraksi heksan rimpang jahe replikasi II Lampiran 5. Data hasil penentuan IC 50 fraksi heksan rimpang jahe replikasi III 38 39 40 Lampiran 6. Data hasil penentuan IC 50 fraksi etil asetat rimpang jahe replikasi I... 41 Lampiran 7. Data hasil penentuan IC 50 fraksi etil asetat rimpang jahe replikasi II... 42 Lampiran 8. Data hasil penentuan IC 50 fraksi etil asetat rimpang jahe replikasi III... 43 Lampiran 9. Data hasil penentuan IC 50 fraksi metanol:air (1:1) rimpang jahe replikasi I... 44 Lampiran 10. Data hasil penentuan IC 50 fraksi metanol:air (1:1) rimpang jahe replikasi II... 45 Lampiran 11. Data hasil penentuan IC 50 fraksi metanol:air (1:1) rimpang jahe replikasi III... Lampiran 12. Data hasil keseluruhan IC 50 fraksi... 46 47
Lampiran 13. Kromatogram fraksi n-heksan... Lampiran 15. Kromatogram fraksi etil asetat... Lampiran 16. Kromatogram fraksi metanol:air (1:1)... Lampiran 17. Gambar proses partisi bertingkat... Lampiran 18. Gambar hasil fraksi n-heksana, etil asetat, dan metanol:air (1:1)... 48 49 50 51 52
DAFTAR SINGKATAN BHA BHT DPPH FH FEA FMA IC 50 KLT GS-MS Rt Rf UV Butylated hydroxi aniline Butylated hydroxi toluen 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil Fraksi n-heksana Fraksi etil asetat Fraksi metanol:air Inhibitory concentration Kromatografi lapis tipis Gas Chromatography Mass Spectrometry Retention time Retardation faktor Ultraviolet
INTISARI Senyawa fenolik dalam rimpang jahe yang meliputi gingerol, shogaol, gingeron, bideskurkuminoid, kaempferol, flavonoid, terpenoid dan konstituen non polar seperti kurkuminoid, kava piron dan gingerol telah diketahui memiliki aktivitas antiradikal. Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan profil kandungan senyawa kimia antar fraksi pada perbedaan pelarut partisi bertingkat dengan aktifitas antiradikal sehingga dapat diamati senyawa yang diduga menyumbangkan aktivitas antiradikal. Fraksinasi pada penelitian dilakukan dengan metode partisi cair-cair menggunakan pelarut n-heksana, etil asetat, dan metanol:air (1:1). Aktivitas penangkap radikal dilakukan dengan menggunakan metode DPPH (1,1-difenil-2- pikrilhidrazil). Uji kualitatif kandungan senyawa dilakukan dengan metode KLT dan GC MS. Hasil partisi diperoleh tiga komponen fraksi berturut-turut yaitu fraksi n- heksana, etil asetat, dan metanol:air 2,845; 4,548 dan 42,784 %b/v. Hasil uji penangkapan radikal menunjukkan fraksi n-heksana, etil asetat dan metanol:air berturut-turut adalah 44,08; 34,28; dan 1390,36 µg/ml. Hasil uji kualitatif dengan KLT dan GC MS menunjukkan kandungan senyawa fenolik dan terpen pada fraksi heksan dan etil asetat. Secara keseluruhan diduga senyawa-senyawa fenolik (6-shogaol dan zingiberon) dan terpen (β-ionol, hidroksicitronellal, isopulegol, dan nerolidol) berkontribusi terhadap aktivitas penangkap radikal. Kata kunci : DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil), KLT (Kromatografi Lapis Tipis), GC MS (Gas Chromatography-Mass Spectrometry), terpen dan senyawa fenolik.