Lampiran 1: Skema Alur Pengujian Efek Antifungal

Lampiran 1: Skema Alur Pengujian Efek Antifungal Pembuatan media Luria Berthani Agar 12 gr Aquadest 240 ml Dipanaskan hingga mendidih Dimasukkan ke dalam 10 tabung reaksi (20ml/tabung) Disterilkan di dalam autoklaf selama 2 jam Dipanaskan kembali Dituangkan ke dalam 10 petri (20 ml/petri) Ditunggu hingga dingin

Pengenceran bahan Kelompok I: kayu manis (kontrol) 4ml m.atsiri+ 100ml Luria Berthani Broth 2ml m.atsiri + 100ml Luria Berthani Broth 1ml m.atsiri+ 100ml Luria Berthani Broth 0,5ml m.atsiri+ 100 ml Luria Berthani Broth 0,25ml m.atsiri+ 100ml Luria Berthani Broth atsiri 4% atsiri 2% atsiri 1% atsiri 0,5% atsiri 0,25% Kelompok II : 0,3 gr 0,3 ml air Kontrol ( 1:1) Kelompok III: minyak atsiri + 4% m.atsiri + 2%m.atsiri + 1% m.atsiri + 0,5% m.atsiri + 0,25% m.atsiri +

Pembiakan spesimen Biakan murni Candida albicans diencerkan dengan NaCl 0,9 % (MC 1 x 10 8 CFU/ml) Disebarkan pada media Luria Berthani Agar dengan menggunakan kapas lidi Dibiarkan selama 24 jam Peletakan masing-masing bahan coba pada petri yang berisi Candida albicans. Pengukuran diameter zona hambat pada masing-masing perlakuan dengan menggunakan kaliper setelah 24 jam pembiakan di inkubator

Lampiran 2: Skema Alur Pengukuran ph atsiri atsiri 4% atsiri 2% atsiri 1% atsiri 0,5% atsiri 0,25% Beberapa tetes Perubahan warna kertas dibandingkan dengan warna indikator. Warna yang mendekati warna indikator dicatat sebagai nilai ph

Kombinasi dengan 0,3 ml minyak atsiri 4%+ 0,3 gr 0,3 ml minyak 0,3 ml minyak atsiri 2%+ atsiri 1%+ 0,3 gr Beberapa 0,3 gr 0,3 ml minyak atsiri 0,5%+ 0,3 gr 0,3 ml minyak atsiri 0,25%+ 0,3 gr Beberapa mg Perubahan warna kertas dibandingkan dengan warna indikator. Warna yang mendekati warna indikator dicatat sebagai nilai ph

0,3 gr 0,3 ml air Beberapa mg Perubahan warna kertas dibandingkan dengan warna indikator. Warna yang mendekati warna indikator dicatat sebagai nilai ph Lampiran 3 : Data hasil pengukuran zona hambat,. Dan kombinasinya atsiri Konsentrasi Diameter Zona Hambat I II III Rata-rata 4% 45 45 45 45 2 % 41,4 46,2 45,26 44,28 1 % 44,6 40,04 42,83 42,49 0,5% 39,42 40,42 41,12 40,32 0,25 % 30,08 30,35 33,12 31,18 Konsentrasi Diameter Zona Hambat I II III Rata-rata 0,3 gr/ml 22,84 15,14 21,92 19,96

Kombinasi Konsentrasi Diameter Zona Hambat I II III Rata-rata atsiri4%+ca(o 16,74 19,18 17,52 17,81 H) 2 atsiri2%+ca(o 14,58 17,38 14,14 15,36 H) 2 atsiri1%+ca(o H) 2 atsiri0,5%+ca( OH) 2 atsiri0,25%+ca 13,64 15,28 13,78 14,23 16,6 16,06 14,02 15,5 16,34 16,8 15,26 16,13 (OH) 2 Lampiran 4 : : Data hasil pengukuran ph,. dan kombinasinya 4% 2% 1% 0,5% 0,25% 0,3gr/ml atsiri 7 6 7 7 7 atsiri+ 12 13 14 14 11 12

Lampiran 5 :UJI STATISTIK Oneway [DataSet1] D:\skripsi\statistik gabungan nilai dan ph\konsentrasi dan kombinasi.sav Descriptives nilai hasil uji atsiri 4% atsiri 2% atsiri 1% atsiri 0,5% atsiri 0,25% Total 95% Confidence Interval for Me an N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum 3 45.0000.00000.00000 45.0000 45.0000 45.00 45.00 3 44.2867 2.54372 1.46862 37.9677 50.6056 41.40 46.20 3 42.4900 2.29893 1.32729 36.7791 48.2009 40.04 44.60 3 40.3200.85440.49329 38.1976 42.4424 39.42 41.12 3 31.1833 1.68263.97147 27.0035 35.3632 30.08 33.12 3 19.9667 4.20525 2.42790 9.5202 30.4131 15.14 22.84 18 37.2078 9.43056 2.22280 32.5181 41.8975 15.14 46.20 Test of Homogeneity of Variances nilai hasil uji Levene Statistic df1 df2 Sig. 4.606 5 12.014 ANOVA nilai hasil uji Between Groups W ithin Groups Total Sum of Squares df Mean Square F Sig. 1445.901 5 289.180 52.577.000 66.002 12 5.500 1511.903 17

Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: nilai hasil uji LSD Me an Difference 95% Confidence Interval (I) atsiri (J) atsiri (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound atsiri 4% atsiri 2%.71333 1.91488.716-3.4588 4.8855 atsiri 1% 2.51000 1.91488.214-1.6622 6.6822 atsiri 0,5% 4.68000* 1.91488.031.5078 8.8522 atsiri 0,25% 13.81667* 1.91488.000 9.6445 17.9888 25.03333* 1.91488.000 20.8612 29.2055 atsiri 2% atsiri 4% -.71333 1.91488.716-4.8855 3.4588 atsiri 1% 1.79667 1.91488.367-2.3755 5.9688 atsiri 0,5% 3.96667 1.91488.061 -.2055 8.1388 atsiri 0,25% 13.10333* 1.91488.000 8.9312 17.2755 24.32000* 1.91488.000 20.1478 28.4922 atsiri 1% atsiri 4% -2.51000 1.91488.214-6.6822 1.6622 atsiri 2% -1.79667 1.91488.367-5.9688 2.3755 atsiri 0,5% 2.17000 1.91488.279-2.0022 6.3422 atsiri 0,25% 11.30667* 1.91488.000 7.1345 15.4788 22.52333* 1.91488.000 18.3512 26.6955 atsiri 0,5% atsiri 4% -4.68000* 1.91488.031-8.8522 -.5078 atsiri 2% -3.96667 1.91488.061-8.1388.2055 atsiri 1% -2.17000 1.91488.279-6.3422 2.0022 atsiri 0,25% 9.13667* 1.91488.000 4.9645 13.3088 20.35333* 1.91488.000 16.1812 24.5255 atsiri 0,25% atsiri 4% -13.81667* 1.91488.000-17.9888-9.6445 atsiri 2% -13.10333* 1.91488.000-17.2755-8.9312 atsiri 1% -11.30667* 1.91488.000-15.4788-7.1345 atsiri 0,5% -9.13667* 1.91488.000-13.3088-4.9645 11.21667* 1.91488.000 7.0445 15.3888 atsiri 4% -25.03333* 1.91488.000-29.2055-20.8612 atsiri 2% -24.32000* 1.91488.000-28.4922-20.1478 atsiri 1% -22.52333* 1.91488.000-26.6955-18.3512 atsiri 0,5% -20.35333* 1.91488.000-24.5255-16.1812 atsiri 0,25% -11.21667* 1.91488.000-15.3888-7.0445 *. The mean difference is significant at the.05 level.

Oneway [DataSet0] Descriptives nilai 4%+ 2%+ 1%+ 0,5%+ 0,25%+ Total 95% Confidence Interval for Me an N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound Mi nimu m Maximum 3 17.8133 1.24617.71948 14.7177 20.9090 16.74 19.18 3 15.3667 1.75742 1.01465 11.0010 19.7323 14.14 17.38 3 14.2333.90914.52489 11.9749 16.4918 13.64 15.28 3 15.5600 1.36074.78562 12.1797 18.9403 14.02 16.60 3 16.1333.79053.45641 14.1696 18.0971 15.26 16.80 3 19.9667 4.20525 2.42790 9.5202 30.4131 15.14 22.84 18 16.5122 2.59868.61251 15.2199 17.8045 13.64 22.84 Test of Homogeneity of Variances nilai Levene Statistic df1 df2 Sig. 5.171 5 12.009 ANOVA nilai Between Groups W ithin Groups Total Sum of Squares df Mean Square F Sig. 63.546 5 12.709 2.975.057 51.257 12 4.271 114.803 17

Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: nilai LSD (I) kons 4%+ 2%+ 1%+ 0,5%+ 0,25%+ (J) kons 2%+ 1%+ 0,5%+ 0,25%+ 4%+ 1%+ 0,5%+ 0,25%+ 4%+ 2%+ 0,5%+ 0,25%+ 4%+ 2%+ 1%+ 0,25%+ 4%+ 2%+ 1%+ 0,5%+ Me an Difference 95% Confidence Interval (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound 2.44667 1.68749.173-1.2301 6.1234 3.58000 1.68749.055 -.0967 7.2567 2.25333 1.68749.207-1.4234 5.9301 1.68000 1.68749.339-1.9967 5.3567-2.15333 1.68749.226-5.8301 1.5234-2.44667 1.68749.173-6.1234 1.2301 1.13333 1.68749.515-2.5434 4.8101 -.19333 1.68749.911-3.8701 3.4834 -.76667 1.68749.658-4.4434 2.9101-4.60000* 1.68749.018-8.2767 -.9233-3.58000 1.68749.055-7.2567.0967-1.13333 1.68749.515-4.8101 2.5434-1.32667 1.68749.447-5.0034 2.3501-1.90000 1.68749.282-5.5767 1.7767-5.73333* 1.68749.005-9.4101-2.0566-2.25333 1.68749.207-5.9301 1.4234.19333 1.68749.911-3.4834 3.8701 1.32667 1.68749.447-2.3501 5.0034 -.57333 1.68749.740-4.2501 3.1034-4.40667* 1.68749.023-8.0834 -.7299-1.68000 1.68749.339-5.3567 1.9967.76667 1.68749.658-2.9101 4.4434 1.90000 1.68749.282-1.7767 5.5767.57333 1.68749.740-3.1034 4.2501-3.83333* 1.68749.042-7.5101 -.1566 4%+ 2%+ 1%+ 0,5%+ 0,25%+ *. The mean difference is significant at the.05 level. 2.15333 1.68749.226-1.5234 5.8301 4.60000* 1.68749.018.9233 8.2767 5.73333* 1.68749.005 2.0566 9.4101 4.40667* 1.68749.023.7299 8.0834 3.83333* 1.68749.042.1566 7.5101

Lampiran 6 : Alur pikir Alur pikir Mikrobiologi Endodontik C.albicans a salah satu mikroorganisme penyebab kegagalan endodonti Siquera dan Senn C.albicans prevalensi jamur yang paling banyak Candida albicans ditemukan 5-20% dari saluran akar yang terinfeksi. (Waltimo, 2003) C. albicans resisten terhadap. (Ballal et al 2007, Waltimo et al 1999) Kunci virulensi C. albicans sekresi enzim aspartil protease. (Waltimo, 2003) Faktor virulensi C.albicans Pembentukan hifa, tigmotropism, sekresi protease dan fenomena phenotypic switching (Waltimo, 2003) Antifungal sifat antimikrobial yang sangat baik,mengeliminasi mikroorganisme setelah cleaning dan shaping,menetralkan sisa2 toxin Antimikroba aksi OH - lingkungan alkalin tidak sesuai bagi perkembangan mikroorganisme. (Athanassiadis et al, 2007) ph>9 reversible maupun irreversible mo kehilangan aktivitas biologi astiri antifungal,antibakteri Komponen terbesar antifungal minyak atsiri sinamaldehid dan eugenol atsiri kayu manis efektif membunuh C.albicans Menurut Guenther bersifat asam lemah dan netral Dari uraian diatas terlihat bahwa kayu manis memiliki efek antimikroba dan bersifat asam lemah atau netral, tetapi sejauh ini belum ada penelitian mengenai efek antifungal dan ph kayu manis dan kombinasinya dengan kalsium hidroksida terhadap Candida albicans.

Timbul permasalahan : 1) Apakah kayu manis memberikan perubahan ph terhadap kalsium hidroksida? 2) Apakah penambahan kayu manis akan menambah daya antifungal terhadap Candida albicans? Tujuan Penelitian : 1. Untuk mengetahui perubahan ph akibat penambahan kayu manis terhadap kalsium hidroksida. 2. Untuk mengetahui daya antifungal kayu manis ketika dikombinasikan dengan kalsium hidroksida terhadap Candida albicans. Judul Penelitian : Efek antifungal dan ph kombinasi kayu manis dengan kalsium hidroksida terhadap Candida albicans secara in vitro