Lampiran 1 Tabel-tabel hasil uji kemampuan isolat bakteri A. Tabel nilai diameter zona halo isolat bakteri dengan logam Pb, Zn, dan Hg Logam Pb Kode isolat Pb (1ppm) Sd Rerata 1 0A2E1 0 0 0 0 0 2 0A1E 0 0 0 0 0 3 SA1A 1,05 0,95 0,95 0,057735 0,983333 4 SA2A1 1,1 1,05 1 0,05 1,05 1 1 0 0 1 5 MB1C 6 OA2G 0,75 0,8 0,8 0,028868 0,783333 7 OA2E2 1,05 1,05 1 0,028868 1,033333 Kode isolat Pb (5ppm) Sd Rerata 1 0A2E1 0,8 0 0 0 0 2 0A1E 0 0 0 0 0 3 SA1A 0,7 0,7 0,7 1,36E-16 0,7 4 SA2A1 0 0 0 0 0 5 MB1C 1,4 1,1 1,2 0,152753 1,233333 6 OA2G 0,95 0,85 1,05 0,1 0,95 7 OA2E2 0,85 0,85 0,85 0 0,85 Kode isolat Pb (10 Ppm) Sd Rerata 1 0A2E1 0 0 0 0 0 2 0A1E 0 0 0 0 0 3 SA1A 1 1,2 1,05 0,1040833 1,083333 4 SA2A1 0,75 0,7 0,75 0,028867513 0,733333 5 MB1C 1 1 1 0 1 0,035355339 0,875 6 OA2G 0,9 0,85 0 7 OA2E2 0,9 0,85 0,95 0,05 0,9
Logam Zn Kode isolat Zn (1 Ppm) Sd Rerata 1 0A2E1 1 0,95 0,9 0,05 0,95 2 0A1E 0 0 0 0 0 3 SA1A 0 0 0 0 0 4 SA2A1 1,1 0,95 0,8 0,15 0,95 5 MB1C 0 0 0 0 0 6 OA2G 1,05 1 0,95 0,05 1 7 OA2E2 1,1 1 1.1 0,057735 1,066667 Kode isolat Zn (5 Ppm) Sd Rerata 1 0A2E1 1,2 1,1 1,1 0,057735 1,133333 2 0A1E 1,2 1,4 1,2 0,11547 1,266667 3 SA1A 0,9 0,9 0,8 0,057735 0,866667 4 SA2A1 0,8 0,8 0,8 1,36E-16 0,8 5 MB1C 0,8 0,8 0,9 0,057735 0,833333 6 OA2G 1,1 1,1 1,2 0,057735 1,133333 7 OA2E2 1,05 1,1 1,1 0,028868 1,083333 Kode isolat Zn (10 Ppm) Sd Rerata 1 0A2E1 1,1 1,05 1 0,05 1,05 2 0A1E 1,15 1,4 1,15 0,144337567 1,233333 3 SA1A 0,8 0,8 0,9 0,057735027 0,833333 4 SA2A1 1 1,05 0,9 0,076376262 0,983333 5 MB1C 0,7 0,8 0,8 0,057735027 0,766667 6 OA2G 1 1,05 1,1 0,05 1,05 7 OA2E2 1,05 1 1 0,028867513 1,016667 Logam Hg Kode isolat Hg ( 1 Ppm) Sd Rerata 1 0A2E1 0 0 0 0 0 0,13435 0,905 2 0A1E 1 0,81 0,1 3 SA1A 1 1 1 0 1 4 SA2A1 1,5 1,5 1,6 0,057735 1,533333 5 MB1C 0,8 0,9 0,9 0,057735 0,866667 6 OA2G 0 0 0 0 0 7 OA2E2 0,8 0,69 0,88 0,095394 0,79
Kode isolat Hg ( 5 Ppm) Sd Rerata 0,035355 0.725 1 0A2E1 0,7 0,75 0 0,070711 0,85 2 0A1E 0,9 0,1 0,8 3 SA1A 1,1 0,9 0,9 0,11547 0,966667 4 SA2A1 0,8 0,8 0,8 1,36E-16 0,8 5 MB1C 0,9 0,95 1 0,05 0,95 6 OA2G 0 0 0 0 0 0,077782 0,805 7 OA2E2 1,24 0,86 0,75 Kode isolat Hg ( 10 Ppm) Sd Rerata 1 0A2E1 0,8 0,8 0,8 1.35974E-16 0,8 2 0A1E 1,1 1,1 1,1 0 1,1 3 SA1A 1,2 1,1 1 0,1 1,1 4 SA2A1 0,9 0,85 0,9 0,028867513 0,883333 5 MB1C 0,7 0,7 0,7 1,35974E-16 0,7 6 OA2G 0,95 0 0 0 0 7 OA2E2 1,22 1,2 1,18 0,02 1,2 B. Tabel TPC dan pph masing-masing isolat pada tiap logam (Pb, Zn, dan Hg) dengan waktu inkubasi selama 7 hari. Tabel TPC dan ph isolat hari ke-0 ph 1 2 3 Kode isolat 1 2 3 10 5 10 6 10 7 10 5 10 6 10 7 10 5 10 6 10 7 1 0A2E1 7 7 7 1920 816 2176 2304 1320 1104 1984 768 968 2 0A1E 7 7 7 74 79 86 75 84 51 103 92 95 3 SA1A 7 7 7 2784 185 156 1376 296 148 679 241 130 4 SA2A1 7 7 7 664 268 156 576 112 30 456 73 32 5 MB1C 7 7 7 2624 437 139 2368 816 256 3520 447 172 6 OA2G 7 7 7 68 25 42 25 202 24 7 77 24 7 OA2E2 7 7 7 635 266 247 1008 461 200 0 694 228
Logam Pb Tabel TPC dan ph isolat bakteri pada logam Pb pada hari ke-3 ph 1 2 3 Kode 1 2 3 10 7 10 8 10 9 10 7 10 8 10 9 10 7 10 8 10 9 isolat 1 0A2E1 9 9.8 9.1 3872 584 72 12000 936 170 3552 1488 320 2 0A1E 8.8 9.3 9.2 6768 1472 1400 3568 1008 276 2208 6496 668 3 SA1A 8.9 8.8 9.6 1360 263 63 2144 1664 460 348 94 38 4 SA2A1 9.2 8.2 9.2 4160 1536 197 4560 880 387 4512 1360 372 5 MB1C 8.9 9.1 9.6 1520 276 148 7168 504 190 12288 328 142 6 OA2G 9.5 9.2 8.6 2208 600 170 4288 202 198 1664 424 268 7 OA2E2 9 8.4 9.1 2368 352 134 9520 1920 364 832 292 43 Tabel TPC dan ph isolat bakteri pada logam Pb pada hari ke-7 ph 1 2 3 Kode 1 2 3 10 7 10 8 10 9 10 7 10 8 10 9 10 7 10 8 10 9 isolat 1 0A2E1 9.1 8.9 9 1488 721 502 2608 1208 475 2608 510 335 2 0A1E 9.1 8.6 8.5 4432 2304 610 5312 1648 920 5312 3616 1586 3 SA1A 9 8.9 8.5 1480 287 111 1272 636 370 1272 968 336 4 SA2A1 9 9.2 9.2 3208 1600 968 77 444 340 77 447 325 5 MB1C 9.1 8.8 8.9 7296 1904 1360 5552 2240 652 5552 1648 527 6 OA2G 8.6 8.9 8.7 6240 3120 1488 8448 3584 1696 8448 3680 888 7 OA2E2 8.8 9.2 9.1 2416 2400 335 1728 1296 1104 1728 1488 752 Logam Zn Tabel TPC dan ph isolat bakteri pada logam Zn pada hari ke-3 ph 1 2 3 Kode 1 2 3 10 7 10 8 10 9 10 7 10 8 10 9 10 7 10 8 10 9 isolat 1 0A2E1 8.2 8.5 8.1 4096 304 158 4832 1584 152 9216 832 251 2 0A1E 8.1 8.2 8.0 2016 544 132 1664 856 53 1408 298 122 3 SA1A 8.8 8.1 8.9 6192 688 245 4928 560 135 1664 464 199 4 SA2A1 7.6 8.1 7.4 18144 616 139 576 116 117 5152 488 181 5 MB1C 7.6 8.0 7.9 1312 109 81 13056 552 112 4592 760 114 6 OA2G 7.8 7.9 7.8 336 202 61 2720 496 62 6480 1040 123 7 OA2E2 8.3 8.1 8.7 7760 1256 480 7232 880 240 11440 872 223
Tabel TPC dan ph isolat bakteri pada logam Zn pada hari ke-7 ph 1 2 3 Kode 1 2 3 10 11 10 12 10 13 10 11 10 12 10 13 10 11 10 12 10 13 isolat 1 0A2E1 8.8 8.8 8.0 792 388 554 640 224 184 888 492 154 2 0A1E 7.9 8.4 8.4 3328 624 376 1024 576 209 752 1744 290 3 SA1A 7.2 8.1 8.0 80 32 15 456 212 165 2212 1142 364 4 SA2A1 8.0 8.3 8.2 343 135 151 456 764 272 276 384 155 5 MB1C 7.7 7.4 7.9 308 112 76 219 156 192 612 168 131 6 OA2G 8 7.8 8.1 1032 552 268 1008 1096 226 1120 384 364 7 OA2E2 7.7 8.3 8.3 1408 248 97 1168 632 228 1168 332 218 Logam Hg Tabel TPC dan ph isolat bakteri pada logam Hg pada hari ke-3 ph 1 2 3 Kode 1 2 3 10 7 10 8 10 9 10 7 10 8 10 9 10 7 10 8 10 9 isolat 1 0A2E1 8.4 8.1 8.2 2 1 1 4 6 1 0 0 2 2 0A1E 8.2 8.5 8.3 4880 2056 0312 2240 1872 769 3168 1888 956 3 SA1A 8.5 8.7 8.1 2608 337 111 568 363 108 496 223 94 4 SA2A1 8.4 7.8 8.0 3792 1304 808 3588 2484 724 3312 2784 776 5 MB1C 8.5 8.5 8.7 4848 1392 540 3520 1072 179 2880 1872 560 6 OA2G 8.3 8.2 8.1 3232 3648 4432 3712 328 34 1884 2592 1056 7 OA2E2 8.6 8.4 8.7 3648 2640 500 3936 1680 544 2336 1712 53 Tabel TPC dan ph isolat bakteri pada logam Hg pada hari ke-7 ph 1 2 3 Kode 1 2 3 10 11 10 12 10 13 10 11 10 12 10 13 10 11 10 12 10 13 isolat 1 0A2E1 7.3 7.2 7.3 328 106 16 236 70 30 255 103 26 2 0A1E 7.4 7.2 7.2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 SA1A 7.4 7.4 7.4 440 214 181 29 36 9 601 35 71 4 SA2A1 7.3 7.3 7.3 358 241 128 358 267 238 448 228 134 5 MB1C 7.4 7.3 7.3 349 196 6 236 74 33 767 320 554 6 OA2G 7.4 7.5 7.5 341 254 55 431 109 28 1037 2240 572 7 OA2E2 7.7 8.3 8.3 1408 248 97 1168 632 228 1168 332 218
Lampiran 2 Dokumentasi penelitian A. Dokumentasi isolat bakteri B. Dokumentasi zona halo dari tiap isolat bakteri terhadap pemberian logam dengan konsentrasi 1 ppm, 5 ppm, 10 ppm. Logam Pb Kode isolat bakteri 1 Logam Pb dengan konsentrasi- 1 5 10 2 0A2E1 0A1E
3 4 SA1A 5 SA2A1 6 MB1C 7 OA2G OA2E2 Logam Zn Kode isolat bakteri 1 Logam Zn dengan konsentrasi- 1 5 10 0A2E1
2 3 0A1E 4 SA1A 5 SA2A1 6 MB1C 7 OA2G OA2E2
Logam Hg Kode isolat bakteri 1 Logam Zn dengan konsentrasi- 1 5 10 2 0A2E1 3 0A1E 4 SA1A 5 SA2A1 6 MB1C OA2G
7 OA2E2 C. Dokumentasi uji pertumbuhan isolat bakteri pada media Mueller Hinton Broth dengan pemberian logam Pb, Zn, dan Hg 10 ppm 1 Media Mueller Hinton Broth tanpa biakan Biakan isolat bakteri dalam media Mueller Hinton dengan pemberian berbagai logam berat dengan konsentrasi 10 ppm Pb 10 ppm Nama isolat bakteri 1 0A2E1 Foto media pada hari ke-3 Foto media pada hari ke-7 2 0A1E
3 SA1A 4 SA2A1 5 MB1C 6 OA2G 7 OA2E2
Zn 10 ppm Nama isolat bakteri 1 0A2E1 Foto media pada hari ke-3 Foto media pada hari ke-7 2 0A1E 3 SA1A 4 SA2A1 5 MB1C
6 OA2G 7 OA2E2 Hg 10 ppm Nama isolat bakteri 1 0A2E1 Foto media pada hari ke-3 Foto media pada hari ke-7 2 0A1E
3 SA1A 4 SA2A1 5 MB1C 6 OA2G 7 OA2E2
D. Hasil uji oksidase Kode isolat bakteri 0A1E MB1C OA2G Keterangan: uji positif dengan adanya perubahan warna (ungu) pada kertas uji E. Dokumentasi identifikasi isolat terpilih menggunakan Kit Kode isolat bakteri 1 0A1E Jam ke-0 Jam ke-24 sebelum penambahan reagen Jam ke-24 setelah penambahan reagen 2 MB1C 3 OA2G
F. Hasil uji H 2 O 2 Kode isolat bakteri 0A1E MB1C OA2G Keterangan: terdapat gelembung gas yang menandakan uji positif G. Hasil uji amilolitik Kode isolat bakteri 0A1E MB1C OA2G Keterangan: uji positif menunjukan adanya zona halo pada media
H. Hasil uji proteolitik Kode isolat bakteri 0A1E MB1C OA2G Keterangan: uji positif menunjukan adanya zona halo pada media I. Dokumentasi alat dan bahan Foto Nama 1 Autoclave 2 Spectrofotometer
3 Timbangan digital 4 Oven 5 Inkubator 6 Colony counter 7 Kompor listrik
8 Alat laboratorium lainnya 9 Logam uji 10 Pewarnaan gram
Lampiran 3 Data hasil biodegradasi dan identifikasi isolat bakteri terpilih A. Hasil uji biodegradasi logam Pb, Zn, dan Hg oleh isolat bakteri terpilih dengan menggunakan AAS
B. Hasil uji kit dan uji fisiologis isolat bakteri terpilih 1. 0A1E. Substrat Warna Hasil Keterangan 1 Lysine kuning - hijau (-) 2 Ornithine kuning - hijau (-) 3 H2S warna jerami (-) 4 Glucose Kuning (-) 5 Mannitol biru - hijau (-) 6 Xylose kuning tua (+) 7 ONPG berwarna (-) 8 Indole berwarna (-) agak kuning 9 Urease warna jerami (-) 10 VP Merah bata (+/-) 11 Citrate Hijau (-) 12 TDA Kuning (-) 13 Gelatin berwarna (-) 14 Malonate Kuning (-) 15 Inositol biru hijau (-) 16 Sorbitol biru hijau (-) 17 Rhamnose biru hijau (-) 18 Sucrose biru hijau (-) 19 Lactose biru hijau (-) 20 Arabinose Kuning (+) 21 Adonitol biru hijau (-) 22 Raffinose biru hijau (-) 23 Salicin biru hijau (-) 24 Arginine Kuning (+) 25 Nitrat merah ceri (+) 26 Nitrat (+Zn) dilakukan 27 H2O2 ada (+) gelembung berwarna udara 28 Motility (+) 29 Amilum (+) 30 Proteolitik (-)
2. MB1C. Substrat Warna Hasil Keterangan 1 Lysine kuning (-) 2 Ornithine kuning (-) 3 H2S warna jerami (-) 4 Glucose Hijau (+) 5 Mannitol biru - hijau (-) 6 Xylose kuning tua (+) 7 ONPG berwarna (-) 8 Indole berwarna (-) agak kuning 9 Urease Merah muda (-) 10 VP Merah Cerry (+/-) 11 Citrate kuning (-) 12 TDA Kuning (-) 13 Gelatin berwarna (-) 14 Malonate Kuning (-) 15 Inositol biru - hijau (-) 16 Sorbitol biru - hijau (-) 17 Rhamnose hijau (-) 18 Sucrose biru - hijau (-) 19 Lactose biru - hijau (-) 20 Arabinose Kuning (+) 21 Adonitol biru - hijau (-) 22 Raffinose biru - hijau (-) 23 Salicin biru - hijau (-) 24 Arginine kuning (-) 25 Nitrat merah ceri (+) 26 Nitrat (+Zn) 27 H2O2 berwarna (+) 28 Motility (+) 29 Amilum (+) 30 Proteolitik (+) dilakukan ada gelembung udara
3. OA2G. Substrat Warna Hasil Keterangan 1 Lysine kuning - hijau (-) 2 Ornithine kuning - hijau (-) 3 H2S warna jerami (-) 4 Glucose Biru hijau (-) 5 Mannitol biru - hijau (-) 6 Xylose kuning tua (+) 7 ONPG berwarna (-) 8 Indole berwarna (-) 9 Urease warna jerami (-) 10 VP Merah cerry 11 Citrate Hijau (-) 12 TDA kuning (-) 13 Gelatin berwarna (-) 14 Malonate kuning (-) 15 Inositol biru - hijau (-) 16 Sorbitol biru - hijau (-) 17 Rhamnose biru - hijau (-) 18 Sucrose biru - hijau (-) 19 Lactose biru - hijau (-) 20 Arabinose kuning (+) 21 Adonitol biru - hijau (-) 22 Raffinose biru - hijau (-) 23 Salicin biru - hijau (-) 24 Arginine Kuninghijau (+) 25 Nitrat merah ceri (+) 26 Nitrat (+Zn) dilakukan 27 H2O2 ada (+) gelembung berwarna udara 28 Motility (+)
C. Tabel Persamaan Karakteristik Jenis Uji OA 2G 1 2 3 4 5 6 7 9 10 11 12 14 16 18 19 22 24 1 Pewarnaan gram + + + + + d + + + + + d d d - - d d 2 Bentuk sel bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt 3 Sel yang membentuk rantai - + + + + d d + d d d d d d - - d d 4 Motilitas + - + - + + + + + + + 5 Panjang sel > 3 µm - + + + + - - d - - - 6 Bentuk dan ukuran spora VX VX VX VX VX VX VX VX VX VX 7 Pembengkakan sel spora - - - - - V X + + + + + + + + + V T X V X d d d - - d d - - - - d + + + + d + V T X V X V X V X V T X Uji produksi asam dari fermentasi karbohidrat 10 Glucose - + 11 Cellubiose (Hydrolysis selulase) + + + + + + + + + + + + + + + + d - d d d - d + + + + d + + + + d d 12 Galactose (Gelatin) - - - d - - d + d + d d d + + + - - 13 Mannose (Manitol) - - - - d d + d + + d + d + + + + + 14 Raffinose - - - - - - - d + d + + + + + + d + 15 Salicin - - + d d - d + + + + d d + + + d d 16 Xylose + - - - - - - + d + d d - + + + d - 17 ONPG - - - d - d + + + + d d d + + + d - 18 Citrate - - d d + - - + + + d d - - - d - - 19 Urease - - d d - - + d - d - - d - - - - - 20 Indole - - - - - - - - - - - - + - - - - - 21 VP (Voges Proskauer) d + + + + - - - + d + d + d d + d d 22 Reduksi nitrate + + + + + + - d + + + d - d + + + d 23 Oksidase + d d d d - + - - - - - + - + - - - 24 25 Hidrolisis kasein (Protein) Hidrolisis tepung (Amilum) + + + + + + - + + + + + + - - + - d + + + + + + + + + + + + + + + + + + Koefisien sebanding (%) 65 66 52 66 31 39 41 57 58 49 61 41 59 62 50 61 70 Keterangan: (T) spora terminal, (V) spora sentral atau subteminal, (X) spora oval,(y) spora bulat. (1) B. anthracis; (2) B. cereus, B. anthracoide;(3) B. mycoides;(4) B. thuringiensis;(5) B. firmus;(6) B. lentus;(7) B. megaterium;(9) B.subtilis;(10) B. licheniformis;(11) B. amyloliquefaciens;(12) B. coagulans;(14) B. alvei;(16) B.circulans;(18) B. macerans;(19) B.polymyxa;(22) B. stearothermophilus;(24) B. stearothermophilus