Lampiran 1 Prosedur Analisis Proksimat (Takeuchi, 1988) 1.1 Prosedur analisis kadar air Panaskan cawan pada suhu 105-110 O C selama 1 jam, dinginkan dalam desikator dan timbang (X 1 ) Timbang bahan 2-3 gram (A) lalu masukkan ke dalam cawan Cawan dan bahan dipanaskan selama 4 jam pada suhu 105-110 O C, dinginkan dan timbang (X 2 ) Kadar air = 1.2 Prosedur analisis kadar lemak (X 1 + A) A X 2 x 100% Panaskan labu pada suhu 104-110 O C selama 1 jam, dinginkan dalam desikator dan timbang (X 1 ) Timbang bahan 2-3 gram (A) lalu masukkan ke dalam cawan Masukkan ke dalam tabung Sochlet dan beri 100-150 ml N-Hexan hingga selongsong terendam. Sisa N-Hexan dimasukkan ke dalam labu Panaskan labu di atas hotplate hingga larutan perendam selongsong dalam Sochlet berwarna bening Labu dan lemak yang tersisa dipanaskan dalam oven selama 15 menit, diinginkan, lalu timbang (X 2 ) Kadar lemak = (X 1 + X 2 ) A x 100% 17
1,3 Prosedur analisis kadar protein 1. Tahap oksidasi Timbang bahan 0,5 gram (A) Timbang katalis 3 gram H 2 SO 4 pekat 10 ml Masukkan dalam Labu Kjedhal dan panaskan hingga berwarna hijau bening, dinginkan, dan encerkan hingga volume 100 ml 2. Tahap destruksi 10 ml H 2 SO 4 0,05 N 2-3 tetes indikator Phenolpthalein Masukkan 5 ml larutan hasil oksidasi ke dalam labu destilasi Masukkan ke dalam erlenmeyer 250 ml Destruksi selama 10 menit dari tetesan pertama 3, Tahap titrasi Titrasi hasil destruksi dengan NaOH BLANKO Tirasi hingga 1 tetes setelah larutan menjadi bening SAMPEL Catat ml titran (ν) Kadar protein = 0,0007*x 6,25**x (V b V s ) x 20 Keterangan : Vb = ml 0,05 N titran NaOH untuk blanko Vs = ml 0,05 N titran NaOH untuk sampel A = bobot sampel (gram) * = setiap ml 0,05 NaOH ekivalen dengan 0,0007 gram N ** = Faktor Nitrogen A x 100% 18
1.4 Prosedur analisis kadar serat kasar Timbang bahan 0,5 gram (A) lalu masukkan ke dalam erlenmeyer 250 ml Panaskan kertas saring dalam oven, dinginkan, dan timbang (X1) Tambahkan 50 ml H 2 SO 4 0,3 N lalu panaskan di atas hotplate Setelah 30 menit tambahkan 25 ml NaOH 1,5N lalu panaskan kembali selama 30 menit Pasang kertas saring pada labu Buchner yang telah terhubung dengan vacumm pump Lakukan penyaringan larutan bahan dengan pembilasan secara berurutan sebagai berikut : 1. 50 ml air panas 2. 50 ml H 2 SO 4 0,3 N 3. 50 ml air panas 4. 25 ml Aceton Panaskan cawan porselin pada suhu 105-110 o C selama 1 jam lalu dinginkan Masukkan kertas saring hasil penyaringan ke dalam cawan porselin Panaskan pada suhu 105-110 o C selama 1 jam, dinginkan, dan timbang (X 2 ) Panaskan dalam tanur pada suhu 600 o C hingga berwarna putih, netralkan panas dalam oven, dinginkan, dan timbang (X 3 ) Kadar serat kasar = (X 2 X 3 X 1 ) A x 100% 1.5 Prosedur analisis kadar abu Panaskan cawan pada suhu 105-110 O C selama 1 jam, dinginkan dalam desikator dan timbang (X 1 ) Timbang bahan 2-3 gram (A) lalu masukkan ke dalam cawan Cawan dan bahan dipanaskan di dalam tanur dengan suhu 600 O C, dinginkan dan timbang (X 2 ) 19
Kadar abu = (X 2 X 1 ) A x 100% Lampiran 2 Skema tata letak wadah perlakuan B3 D2 E3 B2 A3 C1 C3 A1 D3 E1 E2 C2 B1 A2 D1 Keterangan: A: pakan dosis 0% TKU, B: pakan dosis 15% TKU, C: pakan dosis 30% TKU, D: pakan dosis 45% TKU, E: pakan dosis 60% TKU, dan T: tandon. T Lampiran 3 Komposisi proksimat bahan pakan (% bahan kering) Bahan pakan Kadar protein (%) Kadar lemak (%) Kadar abu (%) Kadar serat kasar (%) BETN (%) Tepung ikan (TI) 50,83 4,32 24,70 3,47 16,68 TKU 31,47 2,96 34,67 15,26 15,64 PKM 23,66 0,72 12,33 13,94 49,35 SBM 44,00 2,20 8,00 3,40 42,40 Dedak 13,00 11,87 10,00 3,80 61,33 Keterangan : Kadar air : TI = 9,4 %; TKU = 10 %, PKM = 10,11 %, SBM= 8 %, dedak = 10 % Lampiran 4 Data parameter kualitas air Parameter Perlakuan A B C D E Suhu 25-29 25-29 25-29 25-29 25-29 DO (mg l ¹) 2,15-3,83 2,06-3,28 2,00-2,75 2,09-2,40 1,90-2,55 Ph 6,90-7,80 6,90-7,80 6,90-7,80 6,90-7,80 6,90-7,80 TAN 0,73-0,8 0,61-0,71 0,71-0,78 0,61-0,78 0,69-0,71 Alkalinitas 141,85 137,30-151,00 141,85-160,16 146,43-187,61 137,78-146,43 Kesadahan 89,4-92,97 89,40 89,4-100,13 92,97-100,13 92,97-96,55 Lampiran 5 Data bobot biomassa ikan patin pada awal dan akhir penelitan Hari Perlakuan/Kadar TKU dalam pakan (%) ke- 0 1 426,90 433,30 428,90 430,00 423,40 2 427,70 423,90 428,10 429,40 425,80 3 427,70 430,10 429,90 425,70 429,80 Rata-rata 427,40±0,46 429,10±4,78 428,97±0,90 428,37±2,33 426,30±3,23 42 1 897,60 884,44 967,90 869,97 877,20 2 996,10 851,80 999,80 847,92 923,00 3 977,50 836,00 966,70 839,89 736,00 Rata-rata 957,1±52,3 857,4±24,7 978,1±18,8 852,6±15,6 845,4±97,5 20
Lampiran 6 Nilai jumlah konsumsi pakan (JKP), konversi pakan (KP), specific growth rate (SGR), tingkat kelangsungan hidup (SR), nilai retensi protein (RP), dan retensi lemak (RL) a. Jumlah konsumsi pakan (JKP) 1 12,41 12,30 12,53 11,78 12,12 2 12,63 11,92 12,80 11,58 12,33 3 12,95 12,02 12,47 10,59 11,14 Rata-rata 12,66 ± 12,02 ± 12,60 ± 11,98 ± 11,86 ± 0,64 a 0,27 a 0,20 a 0,18 a 0,53 a b. Konversi pakan 1 1,58 1,48 1,40 1,61 1,60 2 1,33 1,67 1,34 1,59 1,49 3 1,41 1,78 1,39 1,82 2,18 Rata-rata 1,44±0,13 a 1,64±0,15 a 1,38±0,03 a 1,67±0,13 a 1,77±0,37 a c. Specific growth rate (SGR) 1 1,77 1,95 1,94 1,68 1,73 2 2,01 1,66 2,02 1,74 1,84 3 1,97 1,58 1,93 1,62 1,28 Rata-rata 1,92 ± 1,73 ± 1,96 ± 1,68 ± 1,62 ± 0,13 ab 0,19 ab 0,08 a 0,35 ab 0,39 ab d. Tingkat Kelangsungan Hidup 1 100,00 90,00 100,00 100,00 100,00 2 100,00 100,00 100,00 95,00 100,00 3 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 Rata-rata 100,00±0,00 96,67±5,77 100,00±0,00 98,33±2,89 100,00±0,00 21
e. Retensi protein f. Retensi Lemak 1 43,81 51,99 55,40 51,37 49,79 2 53,98 49,26 55,79 55,04 52,73 3 48,43 47,81 56,03 46,01 39,87 Ratarata 48,74 ± 5,10 a 49,69 ± 2,12 a 55,74 ± 0,32 a 50,81 ± 4,54 a 47,47 ± 6,74 a 1 57,00 61,94 71,67 65,96 66,15 2 63,09 61,71 68,13 65,94 66,98 3 60,60 57,51 71,83 60,46 56,44 Ratarata 60,23 ± 3,06 b 60,38 ± 2,49 b 70,54 ± 2,09 a 64,12 ± 3,17 ab 63,19 ± 5,86 b Lampiran 7 Analisis statistika Dependent Variable: Jumlah Konsumsi Pakan (JKP) Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F Model 4 1,63192107 0,40798027 2,43 0,1157 Error 10 1,67552534 0,16755253 Corrected Total 14 3,30744640 Dependent Variable: Konversi pakan (KP) Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F Model 4 0,31235819 0,07808955 2,01 0,1692 Error 10 0,38876981 0,03887698 Corrected Total 14 0,70112799 Dependent Variable: Spesific growth rate (SGR) Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F Model 4 0,27104476 0,06776119 2,27 0,1336 Error 10 0,29845497 0,02984550 Corrected Total 14 0,56949972 22
Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N Perlakuan A 1,9623 3 C B A 1,9168 3 A B A 1,7312 3 B B A 1,6793 3 D B 1,6190 3 E Dependent Variable: Tingkat kelangsungan hidup (SR) Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F Model 4 26,6666667 6,6666667 0,80 0,5520 Error 10 83,3333333 8,3333333 Corrected Total 14 110,0000000 Dependent Variable: Retensi Protein Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F Model 4 125,1278933 31,2819733 1,55 0,2615 Error 10 201,9994000 20,1999400 Corrected Total 14 327,1272933 Dependent Variable: Retensi Lemak Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F Model 4 210,8598267 52,7149567 4,10 0,0321 Error 10 128,7195333 12,8719533 Corrected Total 14 339,5793600 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N Perlakuan A 70,543 3 C B A 64,120 3 D B 63,190 3 E B 60,387 3 B B 60,230 3 A 23
Lampiran 8 Data Perhitungan Retensi Protein A B C D E 1 426,9 426,90 433,30 428,90 430,00 2 427,7 427,70 423,90 428,10 429,40 3 427,7 427,70 430,10 429,90 425,70 1 897,60 897,60 884,44 967,90 869,97 2 996,10 996,10 851,80 999,80 847,92 3 977,50 977,50 836,00 966,70 839,89 1 13,81 13,81 13,81 13,81 13,81 2 13,81 13,81 13,81 13,81 13,81 3 13,81 13,81 13,81 13,81 13,81 1 17,28 17,28 18,97 18,30 18,43 2 18,04 18,04 18,50 18,04 19,53 3 17,40 17,40 18,70 18,41 18,50 1 58,95 58,95 59,84 59,23 59,38 2 59,07 59,07 58,54 59,12 59,30 3 59,07 59,07 59,40 59,37 58,79 1 155,11 155,11 167,78 177,08 160,30 2 179,71 179,71 157,58 180,35 165,62 3 170,04 170,04 156,33 177,95 155,39 1 96,16 96,16 107,94 117,85 100,92 2 120,64 120,64 99,04 121,23 106,32 3 110,98 110,98 96,94 118,58 96,60 1 744,34 744,34 738,29 751,97 706,62 2 757,81 757,81 714,95 768,08 694,89 3 777,00 777,00 721,00 748,13 755,30 1 29,49 29,49 28,12 28,29 27,80 2 29,49 29,49 28,12 28,29 27,80 3 29,49 29,49 28,12 28,29 27,80 1 219,51 219,51 207,61 212,73 196,44 2 223,48 223,48 201,04 217,29 193,18 3 229,14 229,14 202,75 211,65 209,97 1 43,81 43,81 51,99 55,40 51,37 2 53,98 53,98 49,26 55,79 55,04 3 48,43 48,43 47,81 56,03 46,01 Rata-rata 48,74 49,69 55,74 50,81 47,47 SD 5,10 2,12 0,32 4,54 6,74 Bobot awal (gram) Bobot akhir (gram) Protein tubuh awal (%) Protein tubuh akhir (%) Protein tubuh total awal Protein tubuh total akhir Jumlah protein yang disimpan Junlah konsumsi pakan Kadar protein pakan Jumlah konsumsi protein Retensi protein 24
Lampiran 9 Data Perhitungan Retensi Lemak A B C D E Bobot awal 1 426,90 433,30 428,90 430,00 423,40 2 427,70 423,90 428,10 429,40 425,80 3 427,70 430,10 429,90 425,70 429,80 Bobot akhir 1 897,60 884,44 967,90 869,97 877,20 2 996,10 851,80 999,80 847,92 923,00 3 977,50 836,00 966,70 839,89 736,00 Lemak tubuh 1 1,66 1,66 1,66 1,66 1,66 awal 2 1,66 1,66 1,66 1,66 1,66 3 1,66 1,66 1,66 1,66 1,66 Lemak tubuh 1 4,52 4,95 5,29 4,98 5,08 akhir 2 4,50 4,97 4,99 5,04 4,95 3 4,53 4,82 5,29 5,07 4,97 Lemak tubuh total 1 7,09 7,19 7,12 7,14 7,03 awal 2 7,10 7,04 7,11 7,13 7,07 3 7,10 7,14 7,14 7,07 7,13 Lemak tubuh total 1 40,60 43,78 51,20 43,35 44,54 akhir 2 44,87 42,33 49,91 42,73 45,72 3 44,30 40,31 51,10 42,55 3655 Jumlah lemak 1 33,52 36,58 44,08 36,22 37,51 yang disimpan 2 37,77 35,29 42,80 35,60 38,66 3 37,20 33,17 43,96 35,48 29,41 Jumlah konsumsi 1 744,34 738,29 751,97 706,62 727,01 pakan 2 757,81 714,95 768,08 694,89 739,87 3 777,00 721,00 748,13 755,30 668,16 Kadar lemak 1 7,90 8,00 8,18 7,77 7,80 pakan 2 7,90 8,00 8,18 7,77 7,80 3 7,90 8,00 8,18 7,77 7,80 Jumlah konsumsi 1 58,80 59,06 61,51 54,90 56,71 lemak 2 59,87 57,20 62,83 53,99 57,71 3 61,38 57,68 61,20 58,69 52,12 Retensi lemak 1 57,00 61,94 71,67 65,96 66,15 2 63,09 61,71 68,13 65,94 66,98 3 60,60 57,51 71,83 60,46 56,44 Rata-rata 60,23 60,38 70,54 64,12 63,19 SD 3,06 2,49 2,09 3,17 5,86 25
Lampiran 10 Profil asam amino tepung kepala udang (TKU), tepung ikan (TI), dan ikan patin Asam Amino Presentase (%) Profil asam amino TKU* Presentase (%) Profil asam amino TI* Profil asam amino ikan patin** Histidine 1,30 1,80 2,75 Threonine 8,20 3,10 3,64 Arginine 3,90 4,60 7,91 Methionine 1,40 1,60 2,61 Valine 2,60 3,20 4,27 Phenil alanine 2,50 3,20 3,48 I-Leucine 2,30 3,00 4,19 Leucine 4,10 5,50 6,17 Lysine 4,20 6,30 6,23 Triptopan 0,60 2,30 0,92 Keterangan : * Hetramf, J.W. and Piedad Pscual. 2000. Handbook on Ingredients for Aquaculture Feeds. Kluwer Academic Publisher, Netherlands. ** Hasibuan, 2007, Penggunaan Meat and Bone Meal (MBM) sebagai bahan substitusi tepung ikan dalam pakan ikan patin Pangasius sp. [Skripsi]. Institut Pertanian Bogor, Bogor. 26