BAB I PENDAHULUAN. Latar Belakang

Transkripsi

1 BAB I PENDAHULUAN Latar Belakang Newcastle disease (ND) merupakan penyakit viral disebabkan oleh Newcastle disease virus (NDV) yang sangat penting dan telah menyebar di seluruh wilayah Indonesia. Morbiditas maupun mortalitas NDV pada unggas dapat mencapai 100% sehingga mampu menimbulkan kerugian yang sangat besar bagi industri perunggasan. Penyakit ND waktu penyebarannya sangat cepat pada ayam ras, ayam buras dan NDV telah menginfeksi lebih dari 200 spesies unggas. Virulensi NDV tergantung pada induk semang dan galur NDV (OIE, 2012). Di Indonesia, kerugian infeksi NDV pada unggas mencapai ±142 milyar rupiah/tahun, akibat tingkat kematian yang tinggi, menurunnya produksi daging dan telur, serta biaya pengendalian NDV (Darminto dan Ronohardjo, 1996). Pada unggas, Newcastle disease virus (NDV) seringkali ditemukan koinfeksi dengan avian influenza virus (AIV) (Wang et al., 2008) dan seringkali menunjukkan gejala klinis serupa pada unggas dengan morbiditas dan mortalitas tinggi (Murphy et al., 2008). Penyakit ND dapat ditularkan pada unggas liar dan unggas peliharaan (Alexander, 2000; Achenbach and Bowen, 2011; El Zowalaty et al., 2011; Perkins and Swayne, 2001; Swayne and Pantin-Jackwood, 2008; Cattoli et al., 2011). Gejala klinis dan lesi patologis anatomis serupa antara infeksi AIV dan NDV di lapangan perlu dilakukan diagnosis konfirmasi. Metode diagnosis, seperti isolasi virus dan

2 pemeriksaan serologis memakan waktu dan tenaga, sehingga dibutuhkan metode yang cepat dan sensitif untuk mendeteksi dan membedakan antara virus-virus tersebut. Prinsip imunohistokimia (IHK) adalah melihat ikatan yang terjadi antara antigen dan antibodi dan aplikasi uji IHK terbukti akurat untuk deteksi antigen pada jaringan ayam yang terinfeksi lymphoid leucosis, Newcastle disease, infectious bursal disease, infectious laryngotracheitis, fowl pox, infectious bronchitis (Owen et al., 1991) dan highly pathogenic avian influenza virus (Brown et al., 1992; Hooper et al., 1995). Uji imunohistokimia streptavidin biotin (IHK SB) dapat digunakan untuk menentukan diagnosis penyakit dengan validitas yang relatif tinggi, karena streptavidin mempunyai kemampuan mengikat biotin sangat kuat dan dapat menghindari reaksi positif palsu (Howarth et al., 2006). Uji IHK SB telah dilaporkan memiliki spesifitas tinggi dan hasil konsisten pada uji deteksi pada sel hematopoietik virus dengue (Bhoopat et al., 1996; Wuryaningsih, 2005), virus RNA transmissible gastroenteritis pada babi (Wasito, 1997) dan deteksi bakteri berselubung antibodi dalam sedimen air kemih (Priambodo, 2002). Antibodi yang terbentuk ini, menyelubungi bakteri berupa bakteri berselubung antibodi (BBA) dan dapat dideteksi dalam sedimen air kemih. Pada umumnya terdiri dari bakteri golongan enterik, berbentuk batang dan bersifat Gram negatif dengan isolat Escherichia coli, sedangkan asal sumber infeksinya, pada umumnya, berasal dari saluran pencernaan. Bakteri batang Gram negatif mempunyai beberapa jenis struktur antigen yang terdiri dari antigen K (kapsula) yang mengandung polisakarida, mempunyai hubungan dengan

3 daya invasi kuman penyebab infeksi saluran kemih bagian atas. Antigen H (flagella) yang mengandung protein flagelin, yang mempunyai kemampuan daya perlekatan pada saluran mukosa saluran kemih, sedangkan antigen O (somatik) mengandung lipopolisakarida yang umumnya mempunyai peran utama mampu memacu tanggap kebal humoral lokal di parenkim ginjal. Metode IHK SB telah diaplikasikan sebagai uji kualitatif yang efektif, akurat, mudah dilaksanakan, dan biaya terjangkau untuk mendeteksi keberadaan AIV pada saluran pernafasan unggas (Rimmelzwaan et al., 2001; Gu et al., 2007; Kalthoff et al., 2008; Chamnanpood et al., 2011) dan NDV (Oldoni et al., 2005; Wakamatsu et al., 2006). Pada penelitian ini, uji IHK SB diharapkan dapat diaplikasikan untuk mendeteksi NDV di lapangan pada unggas dengan gejala klinis torticolis dan curled toe paralysis. Permasalahan Deteksi dan identifikasi cepat virus, terutama Newcastle disease virus (NDV) sangat diperlukan untuk kontrol, termasuk pencegahan dan eradikasi secara efektif. Uji cepat serologis dengan antigen spesifik (NDV) untuk deteksi antibodi NDV dengan spesimen yang diambil dari ayam yang sakit, tidak memberikan informasi mengenai karakter virus. Metode RT-PCR memberikan keterbatasan, termasuk hasil negatif palsu yang dihasilkan oleh primer yang tidak sesuai yang disebabkan oleh variabilitas genetik NDV dan adanya vaksin dalam tubuh ayam dapat memberikan

4 hasil positif palsu, memakan waktu relatif lama dan banyak tenaga. Selain itu, uji PCR mendeteksi materi genetik (RNA atau DNA) sehingga jika hasil uji PCR positif ada kemungkinan palsu. Pada penelitian ini akan digunakan uji imunopatologis IHK SB untuk peneguhan diagnosis NDV pada ayam yang menunjukkan gejala klinis tortikolis dan curled toe paralysis, dan lesi patologis anatomis berupa foki nekrotik hemoragis dan petekie hemoragis pada saluran pencernaan pada kasus-kasus di lapangan. Uji IHK SB merupakan cara cepat megidentifikasi berbagai patogen, termasuk virus. Keuntungan IHK SB adalah diagnosis dapat dilakukan pada sampel darah atau sampel jaringan yang telah lama disimpan (Wakamatsu et al., 2007). Uji imunohistokimia diketahui lebih sensitif untuk deteksi dini (dalam waktu dua hari setelah infeksi) antigen NDV pada jaringan unggas (Wakamatsu et al., 2007). Metode IHK SB, sangat diunggulkan karena streptavidin mempunyai kemampuan mengikat biotin sangat kuat sehingga dapat terhindari adanya hasil reaksi positif palsu. Keaslian Penelitian Metode IHK SB pernah dilakukan untuk deteksi dalam penentuan patogenesis NDV galur murni dan chimera. Chimera adalah individu yang memiliki lebih dari satu set populasi DNA yang berbeda satu sama lainnya dan berasal dari zygote yang berbeda (Wakamatsu et al., 2006) dan karakterisasi gejala klinis dan patologis unggas yang terinfeksi tiga galur NDV, yaitu velogenik, mesogenik dan lentogenik (Susta et al., 2011). Di Indonesia, aplikasi metode imunohistokimia avidin biotin complex (IHK ABC) pernah dilakukan untuk deteksi NDV isolat Bali-1/07 (Adi et al., 2011).

5 Meskipun demikian, aplikasi imunohistokimia streptavidin biotin (IHK SB) untuk mendeteksi NDV pada kasus-kasus lapangan ayam petelur yang menunjukkan gejala klinis tortikolis dan curled toe paralysis, serta lesi patologis anatomis berupa foki nekrotik hemoragis, petekie hemoragis pada saluran pencernaan belum pernah dilakukan. Tujuan Penelitian Penelitian ini ditujukan untuk: 1. Deteksi cepat NDV penyebab penyakit pada ayam petelur komersial dengan gejala klinis tortikolis dan curled toe paralysis, serta lesi patologis anatomis foki hemoragis nekrotik dan hemoragis petekie pada saluran pencernaan dengan aplikasi uji imunohistokimia streptavidin biotin (IHK SB) yang cepat, tepat, akurat, efisien dan efektif. Dengan demikian, diharapkan dapat diketahui dan ditentukan adanya infeksi NDV pada kasus tersebut di lapangan dan 2. Mengingat, bahwa pada unggas, gejala klinis tortikolis dan curled toe paralysis serupa dengan gejala klinis yang disebabkan oleh AIV, diharapkan uji IHK SB nantinya dapat diaplikasikan dalam pembeda antara infeksi NDV dan AIV. Manfaat Penelitian Deteksi dan identifikasi cepat virus penting untuk kontrol, termasuk pencegahan dan eradikasi NDV secara efektif. Imunohistokimia terbukti merupakan pendekatan imunologis patologis yang sudah digunakan untuk deteksi dan penentuan

6 patogenesis NDV pada jaringan berbagai spesies unggas (Adi et al., 2011). Aplikasi uji IHK SB yang cepat, tepat, akurat, efisien dan efektif dapat diaplikasikan dalam peneguhan diagnosis infeksi NDV pada unggas dengan gejala klinis dan lesi patologis menyerupai AIV. Hasil penelitian ini, diharapkan dapat membantu pencegahan dan pengendalian NDV secara tepat terkait eradikasinya via biosurveilans dan biosekuriti.