UJI FITOKIMIA, TOKSISITAS DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN ALAMI DAUN TUMBUHAN KELAKAI (Stenochlaena palustris) DENGAN METODE DPPH

Transkripsi

1 UJI FITOKIMIA, TOKSISITAS DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN ALAMI DAUN TUMBUHAN KELAKAI (Stenochlaena palustris) DENGAN METODE DPPH ABSTRACT The phytochemical test, brine shrimp lethality test and activity antioxidant test and secondary metabolits of kelakai (Stenochlaena Palustris) leaves have been researched. The leaves samples are extract with solvent methanol by masseration method and that is concentrated by using rotary evaporator. The methanol crude extract obtained are fractioned with solvent n-hexane and. Solvent ethyl acetat.based on secondary metabolits phytochemical test of kelakai leaves showed that methanol raw extract contains steroid, alkaloid and flavonooid. n-hexane fraction extract contains steroid and alkaloid. Ethyl acetat fraction extract contains alkaloid, steroid, flavonoid and saponin.in brine shrimp lethality test, the increase larvae death and data was yielded recorded and processed using SAS Probit Analysis to determine the lethal concentration 50 % (LC 50 ) value. The results of this test obtained data and showed that the most active fraction is ethyl acetat fraction extract withvalue of LC 50 was equel to 88,8477 ppm.based on the antioxidant activity conducted by scavenging activity of DPPH used spectrophotometry. Based on the result be held researched was obtained that Inhibition Concentration 50% (IC 50 ) that methanol raw extract value of 185,92 ppm, n-hexane fraction value of 520,64 ppm and athyl acetat fraction 107,49 ppm and vitamin C is value of 3,064 ppm, can be axpressed that the result of this test showed that the most active fraction is ethyl acetat with value of IC 50 equel to 107,49 ppm. Keywords : Kelakai (Stenochlaena Palustris), phytochemical test, brine shrimp lethality test (BSLT) and antioxidant activity test by DPPH method. PENDAHULUAN Sejak dahulu masyarakat Indonesia mengenal dan memakai tumbuhan sebagai salah satu upaya dalam penanggulangan masalah kesehatan yang dihadapinya.namun hal ini dilakukan berdasarkan pengalaman yang turun temurun dan bukan melalui kajian yang sistematis dan terencana, sehingga komponen kimia yang aktif dari tumbuhan tersebut belum banyak di temukan.beberapa dari tumbuhan tersebut memiliki manfaat sebagai antioksidan (Harborne, 1987). Antioksidan adalah senyawa-senyawa yang mampu menghilangkan, membersihkan, menahan pembentukan ataupun memadukan efek spesies oksigen reaktif (Lautan, 1997).Radikal bebas adalah senyawa atau molekul yang mengandung satu atau lebih elektron tidak berpasangan pada orbital luar yang menyebabkan senyawa tersebut sangat reaktif (Winarsi, 2007). Dari hasil penelitian sebelumnya (Sutomo dkk., 2010) diketahui bahwa daun tumbuhan kelakai memiliki aktivitas sebagai antidiare dan memiliki beberapa kandungan metabolit sekunder seperti flavonoid, steroid, alkaloid, vitamin A dan vitamin C. Oleh karena itu berdasarkan uraian diatas, perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui aktivitas antioksidan dengan metode peredaman radikal (2,2-diphenyl-1-picrylhidrazyl) DPPH dari ekstrak metanol daun kelakai (Stenochlaena Palustris) dan dua fraksi yaitu fraksi n-heksana dan fraksi etil asetat. Dan untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder, toksisitas terhadap larva udang (brine shrimp lethality test) serta mengetahui potensi aktivitas antioksidan dari kedua fraksi terhadap radikal bebas DPPH (Meyer dkk., 1982). METODE PENELITIAN Alat Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah rotary evaporator, beaker gelas, erlenmeyer, gelas ukur, corong, corong pisah, neraca analitik, tabung reaksi, pipet volume, pipet tetes, mikropipet ukuran µl, labu ukur, batang pengaduk, kertas saring Whatman no.1, aluminium foil, lampu TL, hot plate, shaker, freezer dan spektrofotometer UV-Vis. Bahan Bahan-bahan yang digunakan adalah daun Tumbuhan Kelakai (Stenochlaena Palustris), metanol, etil asetat, kloroform, heksana, dietil eter, H 2 SO 4 2 M, asam asetat glasial, Bi(NO 3 ) 3.5H 2 O, HgCl 2, HNO 3 pekat, KI, FeCl 3, HCl, serbuk Mg, aquadest, air laut, DMSO, DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhidrazyl) dan Vitamin C. 141

2 Prosedur Penelitian Penelitian ini dilakukan dengan cara observasi lapangan dan dilanjutkan dengan analisis laboratorium dan eksperimen. Daun tumbuhan kelakai (Stenochlaena palustris) diambil didaerah Perjuangan Samarinda. Daun ini dibersihkan, dicuci kemudian dikeringanginkan, dipotong kecil-kecil, dihaluskan, ditimbang, dimaserasi dengan pelarut metanol lalu disaring dan dipekatkan dengan menggunakan rotary evaporator. Kemudian ekstrak kasar metanol daun tersebut akan difraksinasi dengan corong pisah menjadi fraksi n-heksana, etil asetat. Ekstrak kasar dan kedua fraksi ini kemudian akan dilakukan uji fitokimia dan uji mortalitas larva udang (brine shrimp lethality test). Selanjutnya ekstrak kasar dan kedua fraksi dilakukan uji aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode peredaman radikal bebas 2,2- diphenyl-1-picrylhidrazyl (DPPH) dari berbagai fraksi ekstrak daun kelakai(stenochlaena palustris) dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis. HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi sampel daun tumbuhan kelakai (Stenochlaena Palustris) Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun tumbuhan kelakai (Stenochlaena Palustris).Sampel yang digunakan tersebut dihaluskan terlebih dahulu. Berat kering serbuk daun yang dihasilkan dari daun tumbuhan kelakai (Stenochlaena Palustris) halus yang digunakan dalam penelitian ini adalah seberat 700, 14 gr. Sampel daun tumbuhan kelakai (Stenochlaena Palustris) tersebut kemudian dimaserasi dengan metanol, disaring dan pelarutnya diuapkan dengan rotary evaporator. Selanjutnya ekstrak kasar metanol difraksinasi berdasarkan pada perbedaan kepolaran pelarut-pelarut organik. Fraksinasi bertujuan untuk memisahkan senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak kasar metanol berdasarkan kepolaran pelarut-pelarut organik. Kemudian ekstrak kasar metanol yang telah bebas metanol dilarutkan kembali dengan metanol lalu difraksinasi dengan n-heksana dengan perbandingan 2:1 ( v / v ) terlebih dahulu yang bertujuan agar seluruh senyawa metabolit sekunder yang besifat nonpolar akan terlarut atau tertarik ke dalam pelarut n- heksana. Fraksinasi dengan n-heksana dilakukan berulang-ulang hingga larutan hasil fraksinasi menjadi bening dari warna larutan semula.fraksinasi dilakukan dengan menggunakan corong pisah sehingga diperoleh fraksi n-heksana dan ekstrak metanol.selanjutnya dilanjutkan fraksinasi ekstrak metanol dengan etil asetat.fraksinasi dengan etil asetat ini juga dilakukan berulang kali hingga larutan hasil fraksinasi menjadi bening.tujuan dilakukan fraksinasi berulang kali yaitu senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak metanol terpisah dan terlarut ke dalam masingmasing pelarutnya. Diperoleh fraksi etil asetat, setelah itu kedua fraksi tersebut diuapkan pelarutnya dengan rotary evaporator dan setelah itu sampel dimasukkan ke dalam sloci yang sudah diketahui berat kosongnya lalu ditutup dengan alumunium foil dengan memberi lubang-lubang kecil setelah itu dimasukkan ke dalam desikator dan ditunggu hingga sampel tersebut kering. Setelah kering ditimbang ekstrak yang didapat.dari hasil fraksinasi diperoleh dua ekstrak yaitu ekstrak fraksi n-heksana dan ekstrak fraksi etil asetat. Uji Fitokimia Untuk mengetahui kandungan senyawa metabolit sekunder pada sampel daun kelakai (Stenochlaena Palustris) maka perlu dilakukan uji fitokimia dari ekstrak kasar metanol dan dari kedua fraksi tersebut.uji fitokimia yang dilakukan antara lain uji alkaloid, flavonoid, fenolik, saponin dan steroid/triterpenoid.uji alkaloid dilakukan dengan pereaksi dragendroff dan dinyatakan positif jika reaksi yang terjadi menghasilkan endapan jingga sampai endapan merah.endapan jingga terbentuk karena terjadinya reaksi antara elektron bebas nitrogen pada senyawa alkaloid dengan asam pada reagen dragendroff.uji alkaloid menunjukkan hasil positif untuk ekstrak kasar metanol dan kedua fraksi dengan tebentuknya endapan merah bata. Pada uji flavonoid ekstrak ditambah dengan air panas, dididihkan dan disaring lalu ditambahkan serbuk Mg dan HCl pekat lalu dikocok dan dinyatakan positif jika terbentuk warna merah, kuning atau jingga. Uji flavonoid menunjukkan hasil positif pada ekstrak kasar metanol dan fraksi etil asetat sedangkan fraksi n-heksana menunjukkan hasil yang negatif karena tidak ada perubahan warna yang terjadi dengan blanko. Uji steroid dan triterpenoid merupakan kelanjutan dari uji saponin dimana digunakan fraksi yang larut dalam dietil eter, kemudian ditambahkan pereaksi Lieberman-Burchard (asam asetat anhidrida-h 2 SO 4 pekat) menunjukkan hasil yang positif untuk ekstrak kasar metanol dan kedua fraksi yaitu n-heksana dan etil asetat dengan menunjukkan warna hijau.uji saponin dilakukan dengan melarutkan ekstrak dengan dietil eter, lalu dipisahkan antara fraksi yang larut dan yang tidak larut dengan dietil eter. Fraksi yang tidak larut untuk uji saponin dengan metode pengocokan hingga timbul busa setinggi 1-3 cm selama kurang lebih 15 menit, menunjukkan hasil positif pada fraksi etil asetat sedangkan pada fraksi n-heksana dan ekstrak kasar metanol menunjukkan hasil yang negatif. Dari hasil uji fitokimia yang telah dilakukan, diketahui bahwa pada ekstrak kasar metanol dan kedua fraksi yaitu fraksi n-heksan dan fraksi etil asetat mengandung senyawa metabolit sekunder diantaranya adalah alkaloid, flavonoid, steroid dan saponin sedangkan fraksi n-heksana hanya mengandung steroid dan alkaloid. 142

3 Uji Bioaktivitas BSLT Untuk mengamati ekstrak daun kelakai (Stenochlaena Palustris) perlu dilakukan uji mortalitas larva udang (brine shrimp lethality test). Brine Shrimp Lethality Test adalah suatu metode pegujian dengan menggunakan hewan uji yaitu larva udang Artemia salina (L.) yang dapat digunakan sebagai menentukan toksisitas suatu senyawa dengan cara menentukan LC 50 yang dinyatakan dari komponen aktif suatu simplisia maupun bentuk sediaan ekstrak dari suatu tanaman. Menurut (Mc Laughlin 1998) dalam pengamatan potensi bioaktivitas ini dilakukan berdasarkan nilai Lethal Concentration 50% (LC 50 ) yaitu suatu nilai yang menunjukkan konsentrasi zat toksik yang dapat mengakibatkan kematian organisme sampai 50%. Berdasarkan studi yang dilakukan Meyer (1982) senyawa kimia dikatakan berpotensi aktif atau toksik bila mempunyai LC 50 kurang dari ppm. Apabila LC 50 < 30 ppm maka ekstrak sangat toksik dan berpotensi mengandung senyawa bioaktif antikanker. Meyer (1982) menyebutkan tingkat toksisistas suatu ekstrak adalah sebagai berikut: LC ppm = Sangat Toksik 31 ppm LC ppm = Toksik LC 50 > ppm = Tidak Toksik Berdasarkan hasil uji mortalitas larva udang dari ekstrak kasar metanol diperoleh nilai LC , 1790 ppm; pada ekstrak fraksin-heksana diperoleh nilai LC ,1526 ppm dan pada ekstrak fraksi etil asetat diperoleh nilai LC 50 88,8477 ppm. Nilai ini menunjukkan bahwa pada konsentrasi tersebut, ekstrak sampel mampu membunuh larva udang sampai 50% populasi.nilai LC 50 dari uji mortalitas larva udang diperoleh dengan menggunakan Analisis Probit SAS. Uji Antioksidan dengan Metode Peredaman Radikal DPPH Setelah didapatkan panjang gelombang optimum pada 517 nm kemudian dilakukan pengukuran absorbansi pada tabung A (sampel) yang berisi 1 ml ekstrak dalam metanol dan 1 ml DPPH. Pengukuran absorbansi dilakukan pada panjang gelombang 517nm. Kemudian dilakukan hal yang sama pada tabung B yang berisi 1 ml vitamin C dalam metanol dan 1 ml DPPH untuk mengukur absorbansi vitamin C (pembanding). Variasi konsentrasi sampel ekstrak kasar 100, 150, 200, 250, 300 dan fraksi n-heksana adalah 100, 200, 400, 600 dan 800 ppm sedangkan untuk fraksi etil asetat 10, 50, 100, 150, 200 ppm sedangkan pada vitamin C 1, 1,5, 2, 2,5, 3 dan 3,5 ppm. Dilakukan pengulangan tiga kali untuk masing-masing pengukuran lalu diperoleh persentase peredaman radikal DPPH dan digunakan rumus berikut untuk mengukur persen peredaman radikal DPPH (%AA) adalah: %AA = 100 {[A B A A ] / A Negatif control } Berdasarkan hasil analisa data dengan menggunakan regresi linear sederhana sehingga diperoleh grafik linear dan persamaan regresi linear antara konsentrasi ekstrak kasar metanol, fraksi n-heksana dan fraksi etil asetatdari daun kelakai (Stenochlaena Palustris) dengan persen peredaman radikal DPPH (%AA) adalah sebagai berikut: Gambar 4.1 Grafik regresi linear antara konsentrasi dengan % AA dari ekstrak (Stenochlaena Palustris) Diperoleh persamaan garis linear : y = 0,206x + 11,70 Dimana : x = Konsentrasi ekstrak kasar metanol daun kelakai (Stenochlaena Palustris) y = Persen peredaman radikal DPPH (% AA) kasar metanol daun Kelakai 143

4 Gambar 4.2 Grafik regresi linear antara konsentrasi dengan % AA dari fraksi n-heksana daun Kelakai (Stenochlaena Palustris) Diperoleh persamaan garis linear : y = 0,090x + 3,142 Dimana : x = Konsentrasi fraksi n-heksana daun kelakai (Stenochlaena Palustris) y = Persen peredaman radikal DPPH (% AA) Gambar 4.3 Grafik regresi linear antara konsentrasi dengan % AA A dari fraksi Etil asetat daun Kelakai (Stenochlaena Palustris) Diperoleh persamaan aan garis linear : y = 0,403x + 6,678 Dimana : x = Konsentrasi fraksi Etil asetat daun kelakai (Stenochlaena Palustris) y = Persen peredaman radikal DPPH (% AA) Untuk melihat besarnya nilai IC 50 pada ekstrak kasar metanol, fraksin-heksana dan vitamin C sebagai pembanding dapat dilihat pada gambar grafik 4.4 berikut ini : Ekstrak kasar metanol fraksi n-heksana Vitamin C Gambar 4.4 Grafik Nilai IC 50 pada ekstrak kasar metanol, fraksi n-heksana dan vitamin C 144

5 Sedangkan untuk melihat besarnya nilai IC 50 pada fraksi etil asetat dan vitamin C sebagai pembanding dapat dilihat pada gambar grafik 4.5 berikut ini : 107,49 3,064 Fraksi Etil asetat Gambar 4.5 GrafikNilai IC 50 pada fraksi Etil asetat dan vitamin C Vitamin C Parameter yang digunakan untuk uji penangkapan radikal DPPH adalah nilai IC 50 (Inhibition Concentration 50).Nilai IC 50 didefinisikan sebagai besarnya konsentrasi ekstrak yang dapat menghambat aktivitas radikal bebas DPPH sebesar 50%.Dimana nilai IC 50 diperoleh dari suatu persamaan regresi linear yang menyatakan hubungan antara konsentrasi ekstrak uji dengan persen penangkapan radikal.nilai IC 50 yang semakin kecil menunjukkan aktivitas antioksidan pada bahan yang diuji semakin besar (Molyneux, 2004). Pada grafik dapat dilihat bahwa nilai IC 50 dari ekstrak kasar metanol dan kedua fraksi yaitu fraksi n-heksana dan fraksi etil asetat semuanya lebih besar dari vitamin C. hal ini dikarenakan ekstrak daun kelakai bukan merupakan senyawa murni tetapi masih mengandung senyawa-senyawa lain yang kemungkinan tidak mempunyai aktivitas antioksidan.bila semakin kecil nilai IC 50 berarti semakin tinggi aktivitas antioksidan. Secara spesifik bila suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC 50 kurang dari 50 ppm, kuat apabila nilai IC 50 antara ppm, sedang apabila nilai IC 50 antara ppm dan lemah apabila nilai IC 50 diantara ppm (Blois, 1985 dalam Molyneux, 2004). Berdasarkan klasifikasi diatas sehingga dapat disimpulkan bahwa pada fraksi etil asetat diperoleh nilai IC 50 sebesar 107,49 ppm dan memiliki potensi antioksidan sedang dimana nilai IC 50 berada dalam rentang ppm. Pada ekstrak kasar metanol memiliki potensi sebagai antioksidan lemah, karena nilai IC 50 yang diperoleh berada dalam rentang ppm yaitu diperoleh nilai IC ,92 ppm. Sedangkan pada fraksi n-heksana nilai IC 50 yang diperoleh sebesar 520,64 ppm sehingga aktivitas antioksidan yang dimiliki pada fraksi n-heksana dapat dikategorikan sangat lemah, dikarenakan nilai IC 50 yang dimiliki melebihi dari 200 ppm. Bila dihubungkan dengan hasil uji fitokimia, ekstrak kasar metanol dan fraksi etil asetat mengandung senyawa metabolit sekunder seperti alkaloid, steroid, saponin dan flavonoid.pada fraksi n-heksana mengandung senyawa metabolit sekunder yaitu alkaloid dan steroid.timbul dugaan bahwa aktivitas antioksidan yang ada disebabkan adanya senyawa alkaloid, steroid dan flavonoid serta saponin. Berdasarkan dari hasil penelitian dapat diketahui bahwa fraksi etil asetat memiliki aktivitas antioksidan paling kuat jika dibandingkan dengan ekstr rak kasar metanol.urutan kedua dan ketiga yaitu ekstrak kasar metanol dan fraksi n- heksana.hal ini dikarenakan terdapat kandungan senyawa flavonoid, steroid dan juga alkaloid dan saponin yang dimiliki fraksi etil asetat yang sudah diketahui memiliki aktivitas tas sebagai antioksidan. Sedangkan untuk ekstrak kasar metanol yang mengandung juga senyawa flavonoid, steroid dan alkaloid yang juga memiliki aktivitas antioksidan yang lemah dan fraksi n-heksana hanya mengandung senyawa steroid dan juga alkaloid yang juga hanya memiliki aktivitas antioksidan yang lemah bila dibandingkan dengan ekstrak kasar metanol dan fraksi etil asetat dan juga aktivitas antioksidan metabolit sekundernya yang sinergis sedangkan pada ekstrak kasar metanol, fraksi n-heksana memiliki metabolit sekunder dengan aktivitas antioksidan yang tidak sinergis sehingga kandungan senyawa metabolit sekunder baik yang polar dan nonpolar yang terdapat dalam ekstrak kasar metanol dan fraksi n-heksana menyebabkan aktivitas antioksidannya menurun. Pada fraksi n-heksana tidak terdapat senyawa flavonoid, hal ini dikarenakan sifat dari flavonoid sebagian besar bersifat polar sedangkan senyawa steroid yang terkandung didalam fraksi n-heksana yang nonpolar. Jika hasil uji aktivitas antioksidan dihubungkan dengan nilai LC 50 yang diperoleh, dapat diketahui bahwa fraksi etil asetat memiliki aktivitas antioksidan paling kuat dengan nilai 107,49 ppm dan nilai LC 50 yang diperoleh dari fraksi etil asetat adalah 88, 8477 ppm. Dari hasil yang diperoleh tersebut menunjukkan bahwa pada konsentrasi 107,49 ppm fraksi etil asetat mampu menangkap radikal DPPH sebesar 50%. Sedangkan dari LC 50 yang diperoleh menunjukkan bahwa pada konsentrasi 88, 8477 ppm fraksi etil asetat mampu membunuh larva udang sampai 50% populasi. Walaupun pada fraksi etil asetat mempunyai aktivitas antioksidan idan lebih besar dibandingkan dengan ekstrak kasar 145

6 metanol akan tetapi fraksi etil asetat tidak aman sebagai antioksidan karena nilai LC 50 dibawah dari 1000 ppm atau dikategorikan bersifat toksik. Sedangkan pada ekstrak kasar metanol nilai IC 50 yang diperoleh adalah 185, 92 ppm, sehingga aktivitas antioksidan yang dimiliki pada ekstrak kasar ini dikategorikan lemah, dikarenakan nilai IC 50 dibawah 200 ppm akan tetapi pada ektrak kasar metanol masih aman untuk digunakan sebagai antioksidan karena dilihat dari nilai LC 50 yang diperoleh adalah 1166, 1790 dapat dikategorikan tidak toksik dari fraksi n-heksana dan fraksi etil asetat. Pada fraksi n-heksana nilai IC 50 yang diperoleh sangat besar yaitu 520, 64 ppm, sehingga aktivitas antioksidan yang dimiliki pada fraksi n-heksana dikategorikan sangat lemah, dikarenakan nilai IC 50 yang dimiliki melebihi dari 200 ppm dan nilai LC 50 yang diperoleh sebesar 428, 1526 ppm. Sehingga dapat dikatakan bahwa pada fraksi n-heksana tidak dapat digunakan sebagai antioksidan karena dilihat dari nilai IC 50 yang diperoleh sangat tinggi dan tidak aman digunakan sebagai antioksidan dandapat dikategorikan masih bersifat toksik, karena nilai LC 50 masih dibawah 1000 ppm. KESIMPULAN Berdasarkan dari hasil uji fitokimia didapatkan inforamasi kandungan metabolit sekunder pada sampel daun tumbuhan kelakai (Stenochlaena Palustris) yaitu senyawa steroid, alkaloid, flavonoid dan saponin.berdasarkan hasil uji LC 50 mortalitas larva udang (BSLT) didapatkan nilai LC 50 masing-masing ekstrak, untuk ekstrak kasar metanol nilai LC 50 yang diperoleh 1166,1790 ppm, frkasi n-heksana yang diperoleh 428,1526 ppm dan pada fraksi etil asetat yang diperoleh 88,8477 ppm dan pada ekstrak fraksi etil asetat yang memiliki bioaktivitas yang paling tinggi.berdasarkan uji aktivitas antioksidan didapatkan nilai IC 50 masing-masing ekstrak, untuk ekstrak kasar metanol nilai IC 50 yang diperoleh 185, 92 ppm, fraksi n-heksana yang diperoleh 520,64 ppm dan fraksi etil asetat yang diperoleh 107,49 ppm. DAFTAR PUSTAKA Blois, M Antioxidant Determinations By The Use Of a Stable Free Radical. Nature vol Harborne, J. B Metode Fitokimia. Bandung: Penerbit ITB. Lautan, J Radikal Bebas Pada Eritrosit dan Leukosit,Cermin dunia Kedokteran,(116), hal : Mclaughlin The Use of Biological Assays to Evaluate Botanicals. Drug Information Journal. Vol 32: Meyer, Laughlin and Ferngni Brine Shrimp. Convenient general bioassay for active constituens: Planta Medica. (45): Molyneux, P The Use of Stable Free Radikal Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity. Journal of Science Technology 26 (2): Sutomo, R.Y dan Arnida Skrining Farmakologi Ekstrak Metanol Herba Kelakai (Stenochlaena Palustris) Terhadap Aktivitasnya Sebagai Antidiare. Jurnal Farmasi Universitas Lambung Mangkurat Winarsi H Antioksidan Alami dan Radikal Bebas.Yogyakarta: Kanisius. 146