UNIVERSITAS PANCASILA DESEMBER 2009

Transkripsi

1 PENAPISAN FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK n-heksana DAN METANOL DAUN KELADI TIKUS Oleh: Drs. Ahmad Musir, MS, Apt Dra. Yunahara Farida, M.Si, Apt Dra. Titiek Martati, M.Si, Apt Bernard Edward UNIVERSITAS PANCASILA DESEMBER 2009

2 PENAPISAN FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK n-heksana DAN METANOL DAUN KELADI TIKUS Ahmad Musir 1, Yunahara Farida 1, Titiek Martati 1, Bernard Edward 1 1 Fakultas Farmasi Universitas Pancasila, Jagakarsa Jakarta musirkosam@yahoo.com ABSTRAK Penggunaan obat tradisional oleh masyarakat terus meningkat, meskipun pengobatan modern saat ini sudah sangat maju. Banyak kalangan medis menganjurkan untuk menggunakan pengobatan dari ramuan tradisional. Oleh karena itu saat ini perkembangan penelitian tanaman obat sangat pesat. Salah satu tanaman menarik untuk diteliti adalah keladi tikus (Typhonium divaricatum L. Decne), merupakan tumbuhan liar yang banyak dikonsumsi oleh para penderita kanker. Salah satu penyebab kanker adalah radikal bebas, yaitu atom atau molekul yang mengandung elektron tidak berpasangan pada kulit terluarnya. Sifat antikanker dari keladi tikus diduga karena tanaman ini memiliki aktivitas antioksidan yang dapat menangkal radikal bebas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah ekstrak daun keladi mempunyai aktivitas antioksidan menggunakan metode peredaman radikal bebas DPPH. Penelitian yang dilakukan meliputi penapisan fitokimia, dan uji aktivitas antioksidan dari ekstrak daun keladi tikus (Typhonium divaricatum (L.) Decne) menggunakan pelarut dan metanol dan Vitamin C sebagai kontrol positif. Hasil penapisan fitokimia terhadap serbuk dan ekstrak daun menunjukkan adanya flavonoid, saponin dan steroid/triterpenoid. Hasil uji aktivitas antioksidan menggunakan metode peredaman bebas radikal bebas DPPH menunjukkan yang paling aktif adalah pada ekstrak metanol dengan IC 50 sebesar g/ml sedangkan IC 50 dari sebesar 128,79 g/ml. Apabila dibandingkan dengan Vit.C (IC 50 7,89 g/ml) maka aktivitas antioksidan dari vitamin C masih jauh lebih tinggi. Kata kunci: Keladi tikus, Typhonium divaricatum (L) Decne), DPPH

3 PENDAHULUAN Penggunaan obat tradisional oleh masyarakat terus meningkat, meskipun pengobatan modern saat ini sudah sangat maju. Banyak kalangan medis menganjurkan untuk menggunakan pengobatan dari ramuan tradisional. Oleh karena itu saat ini perkembangan penelitian tanaman obat sangat pesat. Salah satu tanaman menarik untuk diteliti adalah keladi tikus (Typhonium divaricatum L. Decne), merupakan tumbuhan liar yang banyak dikonsumsi oleh para penderita kanker. Salah satu penyebab kanker adalah radikal bebas, yaitu atom atau molekul yang mengandung elektron tidak berpasangan pada kulit terluarnya. Sifat antikanker dari keladi tikus diduga karena tanaman ini memiliki aktivitas antioksidan yang dapat menangkal radikal bebas. BAHAN DAN METODE BAHAN. Daun keladi tikus yang diperoleh dari Balittro Cimangu Bogor dan dideterminasi di Herbarium Bogoriense, Pusat Penelitian Biologi, LIPI, Bogor. Bahan kimia:, metanol, HCl p, amil alkohol, eter, asam asetat anhidrat, H 2 SO 4 p, DPPH (2,2- difenil-1-pikrilhidrazil), vit.c. Peralatan yang digunakan meliputi rotary evaporator (Heidolph), Orbital shaker, timbangan analitik, spektrofotometer UV-Vis, alat-alat gelas. METODE. Penyiapan ektrak. Sebanyak lebih kurang 1506,46 g daun keladi tikus yang sudah dibuat serbuk dimaserasi menggunakan metanol dalam bejana tertutup menggunakan orbital shaker sampai tersari sempurna, selanjutnya disaring. Filtrat diuapkan menggunakan rotary evaporator pada suhu 40 o C hingga diperoleh ekstrak metanol. Ekstrak selanjutnya dipartisi dengan dan selanjutnya sisa diuapkan hingga diperoleh ekstrak kental. Penapisan fitokimia dilakukan dengan cara mengidentifikasi senyawa kimia yang terdapat dalam serbuk dan ekstrak. Uji aktivitas antioksidan dengan peredaman radikal bebas DPPH. Larutan induk sampel 1000 ppm dibuat dengan menimbang 10 mg sampel yang dilarutkan dengan 10 ml metanol atau air. Kemudian untuk membuat larutan sampel dengan konsentrasi 5, 10, 25, 50 dan 100 bpj, sebanyak 25 µl, 50 µl, 125 µl, 250 µl dan 500 µl larutan induk

4 dimasukkan ke dalam lima labu tentukur 5 ml. Ke dalam masing-masing tabung ditambahkan 1,0 ml larutan DPPH 1 mm dan diencerkan dengan metanol sampai 5,0 ml. Setelah homogen, tabung yang berisi larutan tersebut diinkubasi dalam penangas air 37 C selama 30 menit. Serapan diukur dengan spektrofotometer Hitachi U-2000 pada panjang gelombang maksimun yaitu λ 515 nm. Tabel 1. Uji kandungan kimia serbuk dan ekstrak daun keladi tikus (Typhonium divaricatum (L) Decne) No. terbentuk Nama Senyawa Hasil serbuk dan ekstrak Metanol Keterangan 1 Flavonoid + - (+) berwarna merah, kuning atau jingga 2 Saponin + - (+) terbentuk busa stabil 2 SSteroid/triterpenoid + + Steroid (+) biru atau hijau, triterpenoid (+)merah / violet HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi Daun Keladi Tikus. Ekstraksi daun keladi tikus dengan pelarut metanol dan menghasilkan ekstrak dengan rendemen 19,29% (metanol hasil maserasi); 8,74% (nheksana hasil partisi) dan 9,46% (metanol sisa partisi) terhadap bobot kering. Kandungan Senyawa Kimia Ekstrak Daun Keladi Tikus. Hasil penelitian terhadap kandungan kimia ekstrak daun keladi tikus menunjukkan bahwa baik serbuk maupun ekstrak metanol mengandung golongan senyawa flavonoid, saponin dan steroid/triterpenoid dan ekstrak n- heksana mengandung golongan senyawa steroid/triterpenoid. Hasil uji kandungan kimia dapat dilihat pada Tabel 1. Uji Antioksidan dengan Metode DPPH. Uji aktivitas antioksidan dari masing-masing ekstrak dengan metode peredaman radikal bebas DPPH memberikan hasil seperti terlihat pada Tabel 2 dan Gambar 1, Gambar 2. Dalam uji digunakan vitamin C sebagai kontrol positif. Tabel 2. Uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH ekstrak daun keladi tikus metanol Konsentrasi % inhibisi 5 26,35 IC 50 ( g/ml) % inhibisi 16, ,86 17,80 56, ,88 25, ,21 33, ,45 40,57 IC 50 ( g/ml) 128,79

5 Hambatan (%) Hambatan (%) y = x R 2 = Konsentrasi (ug/ml) Ekstrak Linear (Ekstrak ) Gambar 1. Grafik hubungan antara konsentrasi ( g/ml) dan hambatan (%) dari ekstrak Ucapan Terima kasih Terima kasih kepada DP2M, Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi, Depdiknas, yang telah mendanai penelitian ini. DAFTAR PUSTAKA 1. Hutapea RJ, dkk. Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Jilid V. Jakarta: Departemen Kesehatan. Badan penelitian dan pengembangan kesehatan; 1999 hal y = x R 2 = Konsentrasi (ug/ml) Ekstrak metanol 2 Linear (Ekstrak metanol 2) Gambar 2. Grafik hubungan antara konsentrasi ( g/ml) dan hambatan (%) dari ekstrak metanol Dari KESIMPULAN hasil penelitian diketahui bahwa ekstrak metanol mengandung golongan senyawa kimia flavonoid, saponin dan steroid/triterpenoid, ekstrak mengandung senyawa steroid/triterpenoid. Pada uji peredaman radikal bebas DPPH 2. Loliger J. Natural antioxidant. Dalam: Allen JC, Hamilton RJ, editor. Rancidity in foods. London: Apllied science published:1990. hal Molyneux Philip. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazil (DPPH) for estimating antioksidant activity. Journal of science and technology. Songklanakrin; Vol. 26. no.2. hal Xing Zao, Song KB, Kim MR. Antioxidant Activity of Salad vegetables grown in Korea. Journal of food Science and Nutrition. Korea : Vol.9. hal Farnsworth NR, Biological and phytochemical screening of Plants, J.Pharm Sci; (3); hal Harborne JB. Metode Fitokimia. Penuntun cara modern menganalisis tumbuhan. Terbitan kedua. Terjemahan Padmawinata K, Soediro I. Bandung: ITB; hal didapatkan bahwa ekstrak metanol lebih aktif dibanding ekstrak.