o C 1 menit, penempelan 50 o C 1 menit, polimerisasi 72 o C 1 menit (tiga tahap ini
|
|
- Johan Lie
- 7 tahun lalu
- Tontonan:
Transkripsi
1 13 BAB IV PERCOBAAN IV.1 Bahan Air miliq, deoksinukleotida trifosfat (dntp), MgCl 2, (Promega), enzim Pfu DNA polymerase, dapar Pfu (Stratagene), oligonukleotida SR1, SR2, SR3, SR4, SR5, AR6, AR7, AR8, AR9, AR10, primer PFOLIRAB, primer PREVIFNA2B (urutan nukleotida terlampir pada Tabel IV.1 bagian lampiran), enzim Taq DNA polymerase, dapar Taq (Fermentas), agarosa (Boehringer Mannheim), DNA 1 kilo basa, DNA 100 basa (MD Bio), dapar Tris Asetat EDTA, loading buffer, ethidium bromida (EtBr), enzim T4 ligase, dapar ligase (Promega), kit pemurnian DNA (GE health care), kalsium klorida (CaCl 2 ), ampisillin, isopropil β-d-1-tiogalaktopiranosid (IPTG), X-gal (Sigma), ekstrak ragi (Difco), tripton, agar bakto (Pronadisa), natrium klorida (NaCl), natrium hidroksida (NaOH), Sodium Deodesil Sulfat (SDS), etilen diamin tetra asetat (EDTA), kalium klorida (KCl), sukrosa (Merck), kit isolasi plasmid (Biobasic), enzim restriksi EcoRI, dapar H, enzim restriksi HindIII, dapar B (Roche), primer promotor T7, primer terminator T7, primer SP6, primer SDMFORIFNA2B, primer SDMREVIFNA2B (urutan nukleotida terlampir pada Tabel IV.1 bagian lampiran), enzim DpnI, buffer A (Roche), akrilamid, bisakrilamid, amoniumpersulfat (APS), dapar Tris EDTA, lisozim, separating gel buffer, stacking gel buffer, tetraetil metilen diamin (TEMED), dapar elektrophoresis, dapar sampel, coomasie blue R-250, metanol, dan asam asetat glasial (Merck). IV.2 Alat Gene amp PCR System (Perkin Elmer), alat elektroforesis DNA dan protein (BioRad), Ultraviolet (UV) Transiluminator (Vilber lourmat), autoklaf (Sanyo), inkubator goyang (GSL), kompor listrik (rommelbascher), laminar (Microflow), lemari pendingin -20 o C, lemari pendingin 4 o C (Denpoo), oven (LTE Ltd), mikropipet (Gilson), vortex, sentrifuga (Biofuge), cawan petri, labu erlenmeyer, tabung reaksi, tip, tabung PCR, dan tabung mikrosentrifuga.
2 14 IV.3 Plasmid dan Mikroba Uji Plasmid pgem-t (Promega), plasmid pet32b (Novagene) peta pada gambar 3.1 di bagian lampiran, plasmid pgem-t IFNα2b 3 mut (Yohanes, 2007), E. coli galur JM109, E. coli galur DH5α, E. coli galur TOP10, dan E. coli galur BL21. IV.4 Sintesis, Amplifikasi, dan Purifikasi Kerangka Baca Terbuka IFNα2b Sintetik Sintesis kerangka baca terbuka IFNα2b dilakukan menggunakan metode TBIO yang berbasis sintesis dua arah, sedangkan amplifikasi kerangka baca terbuka IFNα2b dilakukan dengan metode PCR. Sintesis dengan TBIO dimulai dengan mencampur semua komponen yang dibutuhkan dalam reaksi ke dalam tabung PCR, yaitu dntps, dapar Pfu, 10X, primer SR1-AR10 (200nM), SR2-AR9 (120nM), SR3-AR8 (80nM), SR4-AR7 (60nM), SR5-AR6 (40nM), dan air milliq sampai volume total 49 µl. Reaksi polimerisasi dilakukan dengan siklus sebagai berikut: denaturasi awal pada suhu 95 o C selama 2 menit dimana pada tahap ini dilakukan metode Hot Start melalui penambahkan 2,5 U (1 µl) Pfu DNA polymerase, denaturasi 95 o C 30 detik, penempelan 54 o C 45 detik, polimerisasi 72 o C 30 detik (tiga tahap ini dilakukan sebanyak 25 siklus), serta polimerisasi akhir 72 o C 5 menit. Produk selanjutnya dianalisis dengan metode elektoforesis pada medium agarosa 1,5%. Gel diwarnai dengan larutan EtBr dan diamati di bawah sinar UV. Hasil yang diharapkan adalah pita-pita pada daerah sekitar 500 pasang basa (pb). Produk TBIO PCR digunakan sebagai cetakan untuk amplifikasi kerangka baca terbuka IFNα2b. Reaksi PCR dilakukan menggunakan komponen berikut : 20 mm dntp, 10 mm dapar Taq, 0,3 U enzim Taq DNA Polymerase, primer PFOLIRAB (30 µm), primer PREVIFNA2B (30 µm), produk TBIO PCR 2,5 µl dan air miliq sampai volume total 25 µl. Air miliq digunakan sebagai kontrol negatif dan sebagai kontrol positif digunakan plasmid pgem-t IFNα2b 3 mut (Yohanes, 2007). Amplifikasi dilakukan dengan program sebagai berikut: denaturasi awal 94 o C 5 menit, denaturasi 94 o C 1 menit, penempelan 50 o C 1 menit, polimerisasi 72 o C 1 menit (tiga tahap ini dilakukan sebanyak 25 siklus), serta polimerisasi akhir 72 o C 10 menit. Produk PCR selanjutnya dianalisis dengan metode elektoforesis pada medium agarosa 1,5%. Hasil yang diharapkan adalah pita berukuran sekitar 522 pasang basa (pb).
3 15 Purifikasi kerangka baca terbuka IFNα2b dilakukan menggunakan kolom GFX. Pita berukuran kira-kira 522 pb dipotong kemudian dimasukkan ke dalam tabung mikrosentrifuga. Bobot gel ditimbang dan ditambahkan 10 µl dapar pengikat per 10 mg bobot gel. Selanjutnya gel dalam dapar diinkubasikan pada suhu 60 o C selama 15 menit. Larutan dalam tabung dipindahkan ke dalam kolom GFX yang telah dihubungkan dengan tabung pengumpul dan disentrifuga pada kecepatan rotasi per menit (rpm) selama 1 menit. Kolom kemudian dicuci dengan 500 µl buffer pencuci dan kembali disentrifugasi dengan waktu dan kecepatan sama. Larutan dalam tabung pengumpul dibuang. Elusi dilakukan dengan penambahan 50 µl buffer pengelusi ke dalam kolom yang telah dihubungkan dengan tabung mikrosentrifuga. Selanjutnya kolom diinkubasi 1 menit pada suhu ruang dan disentrifugasi dengan kecepatan sama. Eluat diperoleh pada tabung mikrosentrifuga. Hasil purifikasi dianalisis kembali dengan metode elektroforesis pada medium agarosa 1% untuk memperkirakan konsentrasi kerangka baca terbuka IFNα2b. IV.5 Kloning Kerangka Baca Terbuka IFNα2b Reaksi ligasi kerangka baca terbuka IFNα2b dengan vektor pgem-t terdiri atas 5 µl dapar ligasi 2 X, 1 µl vektor pgem-t (50 ng), hasil purifikasi kerangka baca terbuka IFNα2b (konsentrasi tergantung ketebalan pita dan banyaknya sisipan yang dibutuhkan), enzim T4 DNA ligase 1 µl (10 U), dan air milliq dicampurkan ke dalam tabung mikrosentrifuga sehingga volume total mencapai 10 µl. Campuran diinkubasi pada suhu 4 o C semalam. Variasi ligasi dilakukan dengan perbandingan vektor : sisipan 1 : 3, 1 : 6, dan 1 : 8. Koloni tunggal sel E. coli JM109 pada medium minimum diambil dengan kawat ose dan dikultivasi pada medium LB cair 10 ml selama 18 jam dengan kecepatan pengocokan 200 rpm dan suhu 37 o C. Kultur dipindahkan ke dalam medium LB cair baru dengan perbandingan 2 : 100 dan diinkubasi kembali selama 1,5 jam. Kultur sebanyak 6 ml untuk satu reaksi transformasi disentrifuga pada kecepatan 4000 rpm selama 10 menit untuk mendapatkan sel sebagai pelet. Masing-masing pelet diresuspensi dalam larutan 100 mm CaCl 2 dingin sebanyak 600 µl dan diinkubasi di es. Suspensi disentrifuga pada kecepatan dan waktu yang sama, kemudian supernatan dibuang. Pelet diresuspensi
4 16 kembali dengan 200 µl CaCl 2 dingin dan diinkubasi pada suhu 4 o C semalam. Pada masing-masing 200 µl suspensi sel dimasukkan hasil ligasi sampel (konsentrasi DNA total tidak lebih dari 50 ng). Sebagai kontrol positif digunakan plasmid rekombinan pgem-t IFNα2b 3 mut (Yohanes, 2007) dan sebagai kontrol negatif digunakan suspensi sel tanpa penambahan reaksi ligasi. Tabung diinkubasi di es selama 30 menit dan diinkubasi pada suhu 42 o C selama 90 detik, kemudian tabung dipindahkan cepat ke dalam es selama 1-2 menit. Suspensi kemudian ditambah 800 µl medium LB cair dan diinkubasi 1,5 jam. Suspensi disentrifuga pada kecepatan 4000 rpm selama 10 menit dan sebanyak 800 µl dibuang. Pelet kemudian diresuspensi dan diinokulasikan ke dalam medium LB padat yang mengandung antibiotik ampisillin (100 µg/µl), IPTG, dan X-gal. Selanjutnya medium diinkubasi pada suhu 37 o C semalam. Kerangka baca terbuka IFNα2b dan vektor pet32b disiapkan dengan mengkultivasi E.coli JM109 yang membawa plasmid pet32b dan E. coli JM109 yang membawa plasmid pgem-t IFNα2b dalam medium LB cair yang mengandung ampisillin pada 37 o C dan 200 rpm semalam. Plasmid diisolasi dari kultur dengan bantuan kit isolasi plasmid. Hasil isolasi dianalisis dengan metode elektroforesis gel agarosa. Plasmid pet32b dan pgem-t IFNα2b selanjutnya dipotong dengan enzim HindIII dan EcoRI. Hasil pemotongan dianalisis dengan metode elektroforesis. Hasil pemotongan kedua plasmid tersebut kemudian dimurnikan dengan kit purifikasi DNA (GE healthcare). Ligasi dan transformasi dilakukan dengan prosedur yang sama seperti pada ligasi kerangka baca terbuka IFNα2b dengan vektor pgem-t dan transformasi ke dalam E. coli DH5α. IV.6 Seleksi dan Karakterisasi Transforman Hasil transformasi yang sudah diinkubasi semalam diamati. Koloni putih adalah koloni yang secara teoritis mengandung plasmid dengan sisipan yaitu pgem-t IFNα2b, sedangkan koloni biru adalah koloni dengan plasmid tanpa sisipan. Koloni yang tumbuh di subkultur ke dalam medium LB padat yang mengandung medium ampisillin, IPTG dan X-gal. Pelat diinkubasi pada suhu 37 o C semalam.
5 17 Karakterisasi pertama pada transforman dilakukan dengan metode lisis cepat. Masingmasing koloni disuspensikan ke dalam 50 µl larutan EDTA 0,5 mm. Suspensi kemudian ditambahkan 50 µl larutan lisis cepat, divorteks 30 detik, dan diinkubasi 70 o C selama 10 menit. Sebanyak 1,5 µl larutan KCl 4 M dan 0,5 µl larutan bromfenol biru ditambahkan ke dalam masing-masing suspensi. Suspensi divorteks selama 30 detik, diinkubasi di es selama 5 menit, dan disentrifugasi dengan kecepatan rpm 3 menit pada 4 o C. Selanjutnya supernatan dianalisis dengan metode elektroforesis untuk melihat laju migrasi plasmid. Hasil analisis kecepatan migrasi dengan metode lisis cepat dikonfirmasi dengan melakukan isolasi plasmid. Transforman yang mengandung plasmid rekombinan dengan ukuran sejajar kontrol pada lisis cepat dikultivasi dalam medium LB yang mengandung ampisillin selama 18 jam pada suhu 37 o C dan kecepatan pengocokan 300 rpm. Plasmid rekombinan diisolasi menggunakan kit isolasi plasmid. Hasil isolasi dianalisis dengan metode elektroforesis dan laju migrasi dibandingkan dengan laju migrasi kontrol. Sebagai kontrol digunakan plasmid pgem-t IFNα2b 3 mut (Yohanes, 2007). Analisis pemotongan dilakukan pada transforman yang memiliki kecepatan migrasi sejajar dengan kontrol. Plasmid rekombinan dimasukkan ke dalam tabung mikrosentrifuga bersama dengan enzim EcoRI atau HindIII, dapar, dan air miliq (banyaknya volume untuk masing-masing komponen tergantung pada jumlah plasmid yang dipotong). Larutan kemudian diinkubasi selama jam pada suhu 37 o C. Hasil pemotongan kemudian dielektroforesis pada gel agarosa 1%. Karakterisasi selanjutnya adalah analisis urutan nukleotida. Pembacaan dilakukan dua arah yaitu arah 5-3 dengan primer promotor T7, dan arah 3-5 dengan primer SP6. Seleksi transforman yang membawa plasmid rekombinan pet32b-ifnα2b dilakukan pada medium LB padat yang mengandung ampisillin. Transforman yang tumbuh selanjutnya dikarakterisasi seperti karakterisasi transforman yang membawa plasmid rekombinan pgem-t IFNα2b. Plasmid rekombinan pet32b IFNα2b yang memiliki mutasi delesi nukleotida deoksiguanosin monofosfat pada kodon kedua (selanjutnya
6 18 disebut pet32b IFNα2b G del) digunakan sebagai cetakan pada proses mutagenesis terarah dengan metode PCR. IV.7 Mutagenesis Terarah Terhadap Plasmid Rekombinan pet32b IFNα2b, Transformasi, dan Karakterisasi Primer dirancang untuk mengamplifikasi plasmid rekombinan pet32b IFNα2b G del dan memperbaiki urutan basa kerangka baca terbuka IFNα2b. Reaksi PCR dilakukan menggunakan komponen berikut: dntp, dapar Pfu, enzim Pfu DNA polymerase 2,5 U, primer SDMPFORIFNA2B (150 ng), primer SDMPREVIFNA2B (30 µm), plasmid rekombinan (50 ng), dan air miliq sampai volume total 50 µl. Program PCR yang digunakan adalah denaturasi awal 95 o C 30 detik, denaturasi 95 o C 30 detik, penempelan 55 o C 1 menit, polimerisasi 68 o C 6,5 menit (tiga tahap ini dilakukan sebanyak 12 siklus). Produk PCR kemudian ditambahkan enzim DpnI untuk menghilangkan cetakan dan diinkubasi pada 37 o C selama 1 jam. Transformasi produk mutagenesis ke dalam E. coli TOP10 dilakukan dengan menambahkan produk ke dalam masing-masing 600 µl sel kompeten E. coli TOP10 dengan konsentrasi tidak lebih dari 50 ng. Transforman yang tumbuh pada medium LB ampisillin dikarakterisasi dengan analisis lisis cepat, analisis kecepatan migrasi, analisis pemotongan, dan analisis urutan nukleotida. Plasmid rekombinan yang memiliki urutan nukleotida kerangka baca terbuka IFNα2b benar (selanjutnya disebut pet32b IFNα2b) ditransformasi ke dalam E. coli BL21 untuk menghasilkan protein rekombinan IFNα2b. Transformasi plasmid rekombinan pet32b IFNα2b ke dalam E. coli BL21 dilakukan seperti transformasi ke dalam E. coli TOP10. Koloni tunggal transforman diambil dengan bantuan kawat ose dan dikultivasi dalam medium LB cair 10 ml yang mengandung antibiotik ampisillin pada suhu 37 o C dan 200 rpm selama 18 jam. Sebanyak 2% kultur ditambahkan ke dalam labu yang berisi medium LB 100 ml. Kultur diinkubasi lagi selama 3 jam pada suhu 37 o C dan 200 rpm. Selanjutnya ditambahkan IPTG ke dalam setiap labu (kecuali untuk kontrol negatif) sehingga konsentrasi akhirnya 0,3 mm. Kultur
7 19 diinkubasikan lagi selama 3 jam pada kondisi yang sama. Masing-masing kultur kemudian disentrifuga dan sel sebagai pelet disimpan. IV.8 Isolasi, Purifikasi, Karakterisasi, dan Protein Rekombinan IFNα2b Pelet sel diresuspensi dalam dapar pengikat tanpa imidazol (5ml per 1 g pellet). Suspensi kemudian ditambahkan larutan PMSF (konsentrasi akhir dalam suspensi 1 mm) dan disonikasi selama 30 detik sebanyak 10 kali pada frekuensi 2,5 Hertz. Hasil sonikasi disentrifuga pada 4300 rpm selama 15 menit. Ekstrak protein diperoleh sebagai supernatan dan kemudian dikarakterisasi. Pelet sel dapat dilisis langsung menggunakan loading buffer, diinkubasi 3 menit pada 100 o C dan disentrifuga rpm 1 menit. Kemudian protein dalam supenatan dikarakterisasi. Karakterisasi protein rekombinan IFNα2b dilakukan dengan metode SDS PAGE. Gel poliakrilamid yang terdiri atas separating dan stacking gel disiapkan. Larutan untuk separating gel 15% dibuat sebanyak 6 ml yang terdiri atas 3 ml larutan A (akrilamid 30%, bisakrilamid 0,8%), 1,5 ml larutan B (dapar separating gel 4X: 1,5 M Tris HCl ph 8,8 dan 0,4% SDS), aquadest 1,5 ml, APS 30 µl, dan TEMED 5 µl. Larutan dalam cetakan dibiarkan selama 30 menit agar berpolimerisasi sehingga terbentuk gel. Selanjutnya dibuat larutan untuk 4 ml stacking gel 5% yang terdiri atas: solution A 0,67 ml, solution C (1 ml dapar stacking gel 4X: Tris HCl ph 6,8 0,5 M dan SDS 0,4%), aquadest 2,3 ml, APS 30 µl, dan TEMED 5 µl. Larutan kemudian dimasukkan ke dalam cetakan pada posisi di atas separating gel. Kemudian sisir dimasukkan pada cetakan dan gel akan terbentuk selama 30 menit. Masing-masing lisat, kontrol negatif serta positif dimasukkan ke dalam tabung mikrosentrifuga sebanyak 30 µl dan ditambahkan dapar sample 6 µl. Tabung yang berisi marker protein 10 µl disiapkan. Lisat, marka, dan kontrol dididihkan 15 menit kemudian masing-masing dimasukkan ke dalam sumur dan dielektroforesis dalam dapar elektroforesis pada tegangan 125 volt 90 menit. Gel diwarnai dengan commasie blue selama setengah jam. Setelah pewarnaan, gel diperlakukan dengan destaining solution.
8 20 Purifikasi protein rekombinan IFNα2b dilakukan dengan menggunakan kolom nikel. Sebanyak 1 ml resin nikel dimasukkan ke dalam kolom dan dibiarkan sampai diperoleh matriks padat. Resin dicuci berturut-turut dengan air deion 1,5 ml, dapar charge 1,5 ml, dan dapar pengikat 1,5 ml. Ekstrak protein sebanyak 5 ml kemudian dimasukkan ke dalam kolom. Kolom dibilas dengan dapar pengikat 5 ml dan dapar pencuci 3 ml. Elusi dilakukan dengan dapar pengelusi sebanyak 3 ml dan eluat ditampung. Protein yang terkandung dalam eluat dikarakterisasi dengan metode SDS PAGE.
BAB 3 PERCOBAAN. Alat elektroforesis agarosa (Biorad), autoklaf, cawan Petri, GeneAid High Speed Plasmid
BAB 3 PERCOBAAN 3.1 Alat Alat elektroforesis agarosa (Biorad), autoklaf, cawan Petri, GeneAid High Speed Plasmid Mini kit, inkubator goyang (GSL), jarum Ose bundar, kit GFX (GE Healthcare), kompor listrik
Lebih terperinciBAB 3 PERCOBAAN 3.1 Bahan 3.2 Alat
BAB 3 PERCOBAAN 3.1 Bahan Bahan yang digunakan memiliki kualitas pro analisis atau pro biologi molekular, yaitu : primer M. tuberculosis forward: 5 GGATCCGATGAGCAAGCTGATCGAA3 (Proligo) dan primer M. tuberculosis
Lebih terperinciBAB 4 HASIL PERCOBAAN DAN BAHASAN. Oligonukleotida sintetis daerah pengkode IFNα2b sintetis dirancang menggunakan
BAB 4 HASIL PERCOBAAN DAN BAHASAN Oligonukleotida sintetis daerah pengkode IFNα2b sintetis dirancang menggunakan program komputer berdasarkan metode sintesis dua arah TBIO, dimana proses sintesis daerah
Lebih terperinciBAB 3 PERCOBAAN Mikroba C. violaceum, Bacillus cereus dan E. coli JM 109
9 BAB 3 PERCOBAAN 3.1 Alat, Bahan dan Miroba 3.1.1 Alat Bunsen, inkubator 37 o C, sentrifuga (Mikro 200R Hettich), Eppendorf 100 ul, 500 ul, 1,5 ml, tabung mikrosentrifuga (Eppendorf), neraca timbang (Mettler
Lebih terperinciBAB V HASIL DAN PEMBAHASAN
21 BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN Pada penelitian sebelumnya diperoleh kerangka baca terbuka gen IFNα2b yang mengandung tiga mutasi dengan lokasi mutasi yang letaknya berjauhan, sehingga mutagenesis terarah
Lebih terperinciPembuatan Media Kultur Bakteri Pemanenan sel bakteri. Isolasi DNA kromosom bakteri. Kloning DNA
LAMPIRAN 15 15 Lampiran 1 Tahapan penelitian Pembuatan Media Kultur Bakteri Pemanenan sel bakteri Isolasi DNA kromosom bakteri Pemotongan DNA dengan enzim restriksi Kloning DNA Isolasi DNA plasmid hasil
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN. Jenis penelitian yang dilakukan termasuk dalam penelitian dasar yang. dilakukan dengan metode deskriptif (Nazir, 1998).
BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian Jenis penelitian yang dilakukan termasuk dalam penelitian dasar yang dilakukan dengan metode deskriptif (Nazir, 1998). B. Populasi dan Sampel 1. Populasi yang
Lebih terperinciBAB 4 HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN
BAB 4 HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN Sebelum melakukan PCR, terlebih dahulu dilakukan perancangan primer menggunakan program DNA Star. Pemilihan primer dilakukan dengan mempertimbangkan parameter spesifisitas,
Lebih terperinciBAB III. METODOLOGI PENELITIAN. Pengambilan sampel. Penyiapan templat mtdna dengan metode lisis sel
16 BAB III. METODOLOGI PENELITIAN Bab ini menggambarkan tahapan penelitian yang terdiri dari pengambilan sampel, penyiapan templat mtdna dengan metode lisis sel, amplifikasi D-loop mtdna dengan teknik
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN. Dalam penelitian ini dilakukan lima tahap utama yang meliputi tahap
BAB III METODE PENELITIAN Dalam penelitian ini dilakukan lima tahap utama yang meliputi tahap penyiapan templat mtdna, amplifikasi fragmen mtdna pada daerah D-loop mtdna manusia dengan teknik PCR, deteksi
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN
BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian dasar dengan metode deskriptif (Nazir, 1983). B. Populasi dan Sampel Populasi dalam penelitian ini adalah
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN Bagan Alir Penelitian ini secara umum dapat digambarkan pada skema berikut:
BAB III METODE PENELITIAN Tahapan-tahapan yang dilakukan dalam penelitian ini adalah: pengumpulan sampel, lisis terhadap sampel mtdna yang telah diperoleh, amplifikasi daerah HVI mtdna sampel dengan menggunakan
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN
BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian deskriptif. Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian dasar dengan metode B. Objek Penelitian Objek penelitian ini adalah sampel DNA koleksi hasil
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan 7 sampel dari 7
BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Rancangan Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan 7 sampel dari 7 individu udang Jari yang diambil dari Segara Anakan Kabupaten Cilacap Jawa Tengah.
Lebih terperinciBAB 4 HASIL PERCOBAAN DAN BAHASAN
14 BAB 4 HASIL PERCOBAAN DAN BAHASAN Konfirmasi bakteri C. violaceum dan B. cereus dilakukan dengan pewarnaan Gram, identifikasi morfologi sel bakteri, sekuensing PCR 16s rdna dan uji kualitatif aktivitas
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN. amplifikasi daerah HVI mtdna sampel dengan menggunakan teknik PCR;
BAB III METODE PENELITIAN Secara garis besar, langkah-langkah yang dilakukan dalam penelitian ini adalah: pengumpulan sampel; lisis terhadap sampel mtdna yang telah diperoleh; amplifikasi daerah HVI mtdna
Lebih terperinciKEMENTERIAN PENDIDIKAN DAN KEBUDAYAAN DIREKTORAT JENDERAL PENDIDIKAN MENENGAH DIREKTORAT PEMBINAAN SEKOLAH MENENGAH ATAS
KEMENTERIAN PENDIDIKAN DAN KEBUDAYAAN DIREKTORAT JENDERAL PENDIDIKAN MENENGAH DIREKTORAT PEMBINAAN SEKOLAH MENENGAH ATAS Test Seleksi Calon Peserta International Biology Olympiad (IBO) 2014 2 8 September
Lebih terperinciBAHAN DAN METODE. Produksi Protein Rekombinan Hormon Pertumbuhan (rgh)
11 BAHAN DAN METODE Penelitian ini terdiri atas 2 tahapan utama, yaitu produksi protein rekombinan hormon pertumbuhan (rgh) dari ikan kerapu kertang, ikan gurame, dan ikan mas, dan uji bioaktivitas protein
Lebih terperinciBAB in. METODE PENELITIAN
BAB in. METODE PENELITIAN Waktu Dan Tempat Penelitian Penelitian ini telah dilakukan dari April sampai November 2009 di laboratorium Biologi Molekular dan Rekayasa Genetika, Balai Penelitian Bioteknologi
Lebih terperinciBAB III METODOLOGI PENELITIAN. Penelitian akan diawali dengan preparasi alat dan bahan untuk sampling
16 BAB III METODOLOGI PENELITIAN Penelitian akan diawali dengan preparasi alat dan bahan untuk sampling sel folikel akar rambut. Sampel kemudian dilisis, diamplifikasi dan disekuensing dengan metode dideoksi
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN. Jenis penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah deskriptif.
BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian Jenis penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah deskriptif. Penelitian deskriptif adalah metode penelitian yang bertujuan untuk membuat gambaran
Lebih terperinciPETUNJUK PRAKTIKUM BIOLOGI SEL DAN MOLEKULER Oleh: Ixora Sartika M ISOLASI DNA PLASMID
PETUNJUK PRAKTIKUM BIOLOGI SEL DAN MOLEKULER Oleh: Ixora Sartika M ixomerc@uny.ac.id ISOLASI DNA PLASMID Plasmid adalah DNA ekstrakromosom yang berbentuk sirkuler dan berukuran kecil (1 200 kb). Sebagian
Lebih terperinciBab III Metodologi Penelitian
21 Bab III Metodologi Penelitian III.1 Alat Peralatan gelas yang digunakan terdiri dari labu erlenmeyer, gelas kimia, gelas ukur, cawan petri, tabung reaksi, batang pengaduk, dan spreader (batang L). Peralatan
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN
BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis penelitian Jenis penelitian yang dilakukan adalah penelitian dasar dengan metode deskriptif (Nazir, 1988). B. Populasi dan sampel Populasi pada penelitian ini adalah
Lebih terperinciBAB III BAHAN DAN CARA KERJA. Penelitian dilakukan di Laboratorium Biologi Molekuler, Pusat
BAB III BAHAN DAN CARA KERJA A. LOKASI DAN WAKTU PENELITIAN Penelitian dilakukan di Laboratorium Biologi Molekuler, Pusat Penelitian Bioteknologi, LIPI, Cibinong selama 9 bulan (Maret 2008-- November 2008).
Lebih terperinciBAB III METODOLOGI PENELITIAN. Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian dasar dengan metode
24 BAB III METODOLOGI PENELITIAN A. Jenis Penelitian Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian dasar dengan metode penelitian deskriptif. B. Objek Penelitian Empat spesies burung anggota Famili
Lebih terperinciMETODE PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian Bahan Metode penelitian Isolasi RNA total
METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian ini dilakukan mulai bulan Februari 2005 hingga bulan Maret 2008 di Laboratorium Biologi Molekuler dan Seluler Tanaman dan Laboratorium BIORIN (Biotechnology
Lebih terperinciGambar 1. Struktur organisasi promoter pada organisme prokariot [Sumber: University of Miami 2008: 1.]
Gambar 1. Struktur organisasi promoter pada organisme prokariot [Sumber: University of Miami 2008: 1.] Gambar 2. Struktur organisasi promoter pada organisme eukariot [Sumber: Gilbert 1997: 1.] Gambar 3.
Lebih terperinciBAB III BAHAN DAN CARA KERJA. Penelitian dilakukan di Laboratorium Institute of Human Virology and
23 BAB III BAHAN DAN CARA KERJA A. LOKASI DAN WAKTU PENELITIAN Penelitian dilakukan di Laboratorium Institute of Human Virology and Cancer Biology of the University of Indonesia (IHVCB-UI), Jl. Salemba
Lebih terperinciBAB III METODOLOGI PENELITIAN. Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian dasar dengan metode
22 BAB III METODOLOGI PENELITIAN A. Jenis Penelitian Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian dasar dengan metode penelitian deskriptif. B. Lokasi dan Waktu Penelitian 1. Lokasi Penelitian Penelitian
Lebih terperinci3 Metodologi Penelitian
3 Metodologi Penelitian 3.1 Alat Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Penelitian Biokimia, Program Studi Kimia, Institut Teknologi Bandung. Peralatan yang digunakan pada penelitian ini diantaranya
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN. Secara garis besar langkah-langkah yang dilakukan dalam penelitian ini
BAB III METODE PENELITIAN Secara garis besar langkah-langkah yang dilakukan dalam penelitian ini adalah: pengumpulan sampel; lisis terhadap sampel mtdna yang telah diperoleh; amplifikasi daerah D-loop
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Mei sampai September 2014 di Green
BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Mei sampai September 2014 di Green House dan Laboratorium Genetika dan Molekuler jurusan Biologi Fakultas Sains dan
Lebih terperinciBAHAN DAN METODE. Tempat dan Waktu Penelitian
BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian dilakukan di Laboratorium Kerjasama Bioteknologi Indonesia- Belanda (BIORIN) dan Laboratorium Biologi Molekuler dan Seluler Tanaman (BMST), Pusat
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN
BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian Jenis penelitian ini adalah penelitian deskriptif yang mengangkat fenomena alam sebagai salah satu masalah dalam penelitian. Penelitian ini dapat menerangkan
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN
25 BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian telah berlangsung sejak bulan Januari 2012 - Juli 2012 di Laboratorium Mikrobiologi, Lab. Optik, Lab. Genetika dan Lab. Biologi Molekuler Jurusan
Lebih terperinciLAMPIRAN. Lampiran 1. Pembuatan Larutan Stok dan Buffer
LAMPIRAN Lampiran 1. Pembuatan Larutan Stok dan Buffer A. LARUTAN STOK CTAB 5 % (100 ml) - Ditimbang NaCl sebanyak 2.0 gram - Ditimbang CTAB sebanyak 5.0 gram. - Dimasukkan bahan kimia ke dalam erlenmeyer
Lebih terperinciAsam Asetat Glacial = 5,7 ml EDTA 0,5 M ph 8.0 = 10 ml Aquades ditambahkan hingga volume larutan 100 ml
36 Lampiran 1. Pembuatan Larutan Stok dan Buffer A. Pembuatan Larutan Stok Tris HCL 1 M ph 8.0 (100 ml) : Timbang Tris sebanyak 12,114 g. Masukkan Tris ke dalam Erlenmeyer dan ditambahkan 80 ml aquades.
Lebih terperinciBAB III METODOLOGI PENELITIAN. Pada penelitian ini terdapat lima tahapan penelitian yang dilakukan yaitu
BAB III METODOLOGI PENELITIAN Pada penelitian ini terdapat lima tahapan penelitian yang dilakukan yaitu pengumpulan sampel berupa akar rambut, ekstraksi mtdna melalui proses lisis akar rambut, amplifikasi
Lebih terperinci3 Metode Penelitian. 3.1 Alat
3 Metode Penelitian 3.1 Alat Peralatan yang digunakan pada penelitian ini adalah peralatan gelas standar meliputi: labu erlenmeyer, cawan petri, gelas ukur, gelas kimia, botol reagen, tabung reaksi, batang
Lebih terperinciBAB 3 PERCOBAAN 3.1 Bahan Percobaan 3.2 Alat Percobaan
BAB 3 PERCOBAAN 3.1 Bahan Percobaan Agarosa (MD Bio), akrilamid (Promega), bisakrilamid (Promega), amonium oksalat (Bratachem), Bacto Triptone (Difco), fuchsin basa (Bratachem), Bovine Serum Albumin (BSA),
Lebih terperincibio.unsoed.ac.id METODE PENELITIAN A. Materi, Lokasi, dan Waktu Penelitian 1. Materi Penelitian
III. METODE PENELITIAN A. Materi, Lokasi, dan Waktu Penelitian 1. Materi Penelitian 1.1. Peralatan Penelitian Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah botol sampel, beaker glass, cool box, labu
Lebih terperinciBAB V KESIMPULAN DAN SARAN. Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dari empat primer yang
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. KESIMPULAN Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dari empat primer yang digunakan hanya primer GE 1.10 dengan suhu annealing sebesar 49,5 o C yang dapat dianalisis
Lebih terperinciLampiran 1 Pembuatan Medium Kultur DMEM Lampiran 2 Pembuatan Larutan PBS Lampiran 3 Prosedur Pewarnaan HE
LAMPIRAN Lampiran 1 Pembuatan Medium Kultur DMEM Medium kultur DMEM merupakan medium Dulbecco s Modified Eagle s Medium (DMEM; Sigma) yang telah dimodifikasi dengan penambahan asam amino non-esensial (AANE;
Lebih terperinci3. METODE PENELITIAN
19 3. METODE PENELITIAN 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret sampai Juni 2010 di Laboratorium Mikrobiologi, Biokimia dan Bioteknologi Hasil Perairan Departemen Teknologi Hasil
Lebih terperinciBAHAN DAN METODE. ditranskipsi dan produk translasi yang dikode oleh gen (Nasution 1999).
4 ditranskipsi dan produk translasi yang dikode oleh gen (Nasution 1999). Polymerase Chain Reaction (PCR) PCR merupakan suatu reaksi in vitro untuk menggandakan jumlah molekul DNA pada target tertentu
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN
BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis penelitian Jenis penelitian ini adalah penelitian deskriptif yang mengangkat fenomena alam sebagai salah satu masalah dalam penelitian, sehingga dapat menerangkan arti
Lebih terperinci4.1. Alat dan Bahan Penelitian a. Alat Penelitian. No. URAIAN ALAT. A. Pengambilan sampel
7 IV. METODE PENELITIAN Ikan Lais diperoleh dari hasil penangkapan ikan oleh nelayan dari sungaisungai di Propinsi Riau yaitu S. Kampar dan S. Indragiri. Identifikasi jenis sampel dilakukan dengan menggunakan
Lebih terperinciGambar 2 Vektor pengklonan pgem T Easy
BAHAN DAN METODE Waktu dan Tempat Penelitian ini dilaksanakan dari bulan September 2007 sampai dengan bulan April 2008. Penelitian dilakukan di Laboratorium Biologi Molekuler Seluler Tanaman, dan Laboratorium
Lebih terperinciIII. Bahan dan Metode
III. Bahan dan Metode A. Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian ini dilaksanakan selama 3 bulan dari bulan Mei-Juli 2011 yang dilakukan di LPPT UGM Yogyakarta. B. Bahan Penelitian Sampel yang digunakan
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN
BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Rancangan Penelitian Penelitian tentang Pengaruh Suhu Annealing pada Program PCR terhadap Keberhasilan Amplifikasi DNA Udang Jari (Metapenaeus elegans) Laguna Segara Anakan
Lebih terperinciBAHAN DAN METODE. Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian ini dilaksanakan dari bulan Juli 2007 sampai bulan Juni 2008 di
BAHAN DAN METODE : Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian ini dilaksanakan dari bulan Juli 2007 sampai bulan Juni 2008 di 1. Laboratorium Bioteknologi Hewan dan Biomedis PPSHB IPB 2. Laboratorium Mikrobiologi
Lebih terperinciMETODOLOGI. Waktu dan Tempat Penelitian. Bahan dan Alat. Cara Kerja
17 METODOLOGI Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian dilakukan dari bulan Agustus 2011 sampai Maret 2012 di Laboratorium Biokatalis dan Fermentasi pada Pusat Penelitian Bioteknologi Lembaga Ilmu Pengetahuan
Lebih terperinciLampiran 1. Pembuatan Larutan Buffer untuk Dialisa Larutan buffer yang digunakan pada proses dialisa adalah larutan buffer Asetat 10 mm ph 5,4 dan
39 Lampiran 1. Pembuatan Larutan Buffer untuk Dialisa Larutan buffer yang digunakan pada proses dialisa adalah larutan buffer Asetat 10 mm ph 5,4 dan buffer Asetat 20 mm ph 5,4. Larutan buffer asetat 10
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN
BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Rancangan Penelitian Penelitian tentang Karakterisasi genetik Udang Jari (Metapenaeus elegans De Man, 1907) hasil tangkapan dari Laguna Segara Anakan berdasarkan haplotipe
Lebih terperinciBAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN. A. ISOLASI DNA GENOM PADI (Oryza sativa L.) KULTIVAR ROJOLELE,
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. ISOLASI DNA GENOM PADI (Oryza sativa L.) KULTIVAR ROJOLELE, NIPPONBARE, DAN BATUTEGI Isolasi DNA genom padi dari organ daun padi (Oryza sativa L.) kultivar Rojolele, Nipponbare,
Lebih terperinci3 Percobaan. 3.1 Tempat dan Bahan Penelitian. 3.2 Peralatan
3 Percobaan 3.1 Tempat dan Bahan Penelitian Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Penelitian Biokimia milik Program Studi Kimia Institut Teknologi Bandung. Ragi Saccharomyces cerevisiae yang mengandung
Lebih terperinciII. MATERI DAN METODE. Tempat pengambilan sampel daun jati (Tectona grandis Linn. f.) dilakukan di
II. MATERI DAN METODE 2.1 Waktu dan Tempat Penelitian Tempat pengambilan sampel daun jati (Tectona grandis Linn. f.) dilakukan di enam desa yaitu tiga desa di Kecamatan Grokgak dan tiga desa di Kecamatan
Lebih terperinciFAKULTAS BIOLOGI LABORATORIUM GENETIKA & PEMULIAAN INSTRUKSI KERJA UJI
ISOLASI TOTAL DNA TUMBUHAN DENGAN KIT EKSTRAKSI DNA PHYTOPURE Halaman : 1 dari 5 1. RUANG LINGKUP Metode ini digunakan untuk mengisolasi DNA dari sampel jaringan tumbuhan, dapat dari daun, akar, batang,
Lebih terperinciBab III Metode Penelitian
Bab III Metode Penelitian Metode yang dilakukan dalam penelitian ini terdiri dari empat tahapan, dimulai dengan pengumpulan sampel, kemudian lysis sel untuk mendapatkan template DNA, amplifikasi DNA secara
Lebih terperinciFAKULTAS BIOLOGI LABORATORIUM GENETIKA & PEMULIAAN INSTRUKSI KERJA UJI
Halaman : 1 dari 5 ISOLASI TOTAL DNA HEWAN DENGAN KIT EKSTRAKSI DNA 1. RUANG LINGKUP Metode ini digunakan untuk mengisolasi DNA dari sampel jaringan hewan, dapat dari insang, otot, darah atau jaringan
Lebih terperinciKloning Domain KS dan Domain A ke dalam Sel E. coli DH5α. Analisis Bioinformatika. HASIL Penapisan Bakteri Penghasil Senyawa Antibakteri
3 selama 1 menit, dan elongasi pada suhu 72 0 C selama 1 menit. Tahap terakhir dilakukan pada suhu 72 0 C selama 10 menit. Produk PCR dielektroforesis pada gel agarosa 1 % (b/v) menggunakan tegangan 70
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN. Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian deskriptif.
24 BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Jenis Penelitian Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian deskriptif. 3.2 Objek Penelitian DNA ikan gurame (Osphronemus goramy Lac.) yang resisten dan sensitif
Lebih terperinciMATERI DAN METODE. Materi
MATERI DAN METODE Lokasi dan Waktu Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Genetika Molekuler Ternak, Bagian Pemuliaan dan Genetik Ternak, Departemen Ilmu Produksi dan Teknologi Peternakan, Fakultas Peternakan,
Lebih terperinciBAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN. A. SINTESIS DAN AMPLIFIKASI FRAGMEN GEN tat HIV-1 MELALUI
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. SINTESIS DAN AMPLIFIKASI FRAGMEN GEN tat HIV-1 MELALUI TEKNIK PCR OVERLAPPING 1. Sintesis dan amplifikasi fragmen ekson 1 dan 2 gen tat HIV-1 Visualisasi gel elektroforesis
Lebih terperinciLAMPIRAN. Lampiran 1. Deskripsi Pembuatan Larutan Stok dan Buffer
LAMPIRAN Lampiran 1. Deskripsi Pembuatan Larutan Stok dan Buffer 1. Pembuatan Larutan Stok a. CTAB 5 % Larutan dibuat dengan melarutkan : - NaCl : 2.0 gr - CTAB : 5.0 gr - Aquades : 100 ml b. Tris HCl
Lebih terperinciIII. BAHAN DAN METODE
III. BAHAN DAN METODE 3.1. Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi, Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian (BB. Biogen)
Lebih terperinciBAB 3 METODOLOGI PENELITIAN
20 BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN 3.1. Desain Penelitian Penelitian ini bersifat deskriptif cross sectional molekuler. Data yang diperoleh berasal dari pemeriksaan langsung yang dilakukan peneliti sebanyak
Lebih terperinciBAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Bahan Pertumbuhan dan Peremajaan Isolat Pengamatan Morfologi Isolat B. thuringiensis
13 BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi, Departemen Biologi, IPB, dari bulan Oktober 2011 Mei 2012. Bahan Isolasi untuk memperoleh isolat B. thuringiensis
Lebih terperinciBab III Bahan dan Metode III.1 Bahan III. 2 Alat
Bab III Bahan dan Metode III.1 Bahan Pada penelitian ini, sampel yang digunakan dalam penelitian, adalah cacing tanah spesies L. rubellus yang berasal dari peternakan cacing tanah lokal di Sekeloa, Bandung.
Lebih terperinciMetodologi Penelitian. Metode, bahan dan alat yang digunakan dalam penelitian ini akan dipaparkan pada bab ini.
Bab III Metodologi Penelitian Metode, bahan dan alat yang digunakan dalam penelitian ini akan dipaparkan pada bab ini. III.1 Rancangan Penelitian Secara garis besar tahapan penelitian dijelaskan pada diagram
Lebih terperinciBAHAN DAN METODE. 1. Waktu dan Tempat penelitian
BAHAN DAN METODE 1. Waktu dan Tempat penelitian Penelitian dilakukan di Laboratorium Biologi Molekuler dan Rumah Kaca Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian
Lebih terperinciMATERI DAN METODE. Lokasi dan Waktu. Materi. Tabel 1. Jumah Sampel Darah Ternak Sapi Indonesia Ternak n Asal Sapi Bali 2 4
MATERI DAN METODE Lokasi dan Waktu Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Genetika Molekuler Ternak, Bagian Pemuliaan dan Genetika Ternak, Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor. penelitian ini
Lebih terperinciLampiran 1 Ekstraksi dan isolasi DNA dengan metode GeneAid
LAMPIRAN 9 Lampiran 1 Ekstraksi dan isolasi DNA dengan metode GeneAid Satu ruas tungkai udang mantis dalam etanol dipotong dan dimasukkan ke dalam tube 1,5 ml. Ruas tungkai yang telah dipotong (otot tungkai)
Lebih terperinciPengujian Inhibisi RNA Helikase Virus Hepatitis C (Utama et al. 2000) HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Ekspresi dan Purifikasi RNA
8 kromatografi kemudian diuji aktivitas inhibisinya dengan metode kolorimetri ATPase assay. Beberapa fraksi yang memiliki aktivitas inhibisi yang tinggi digunakan untuk tahapan selanjutnya (Lampiran 3).
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN
BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian murni yang dilakukan dengan metode deskriptif, yaitu suatu metode penelitian untuk membuat deskripsi, gambaran atau lukisan
Lebih terperinciHASIL DAN PEMBAHASAN bp bp bp
HASIL DAN PEBAHASAN Purifikasi dan Pengujian Produk PCR (Stilbena Sintase) Purifikasi ini menggunakan high pure plasmid isolation kit dari Invitrogen. Percobaan dilakukan sesuai dengan prosedur yang terdapat
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN. Penelitian ini merupakan penelitian yang dilakukan dengan metode
16 BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian yang dilakukan dengan metode deskriptif. Penelitian deskriptif adalah suatu metode penelitian untuk membuat deskripsi,
Lebih terperinciHASIL DAN PEMBAHASAN
19 HASIL DAN PEMBAHASAN Vektor Kloning Protein rgh Isolasi Plasmid cdna GH. Plasmid pgem-t Easy yang mengandung cdna; El-mGH, Og-mGH dan Cc-mGH berhasil diisolasi dari bakteri konstruksi E. coli DH5α dengan
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN
BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian Jenis penelitian yang dilakukan termasuk penelitian deskriptif. Penelitian deskriptif adalah metode penelitian yang bertujuan membuat gambaran secara sistematis,
Lebih terperinci3. METODOLOGI 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian 3.2. Alat dan Bahan 3.3 Metode Penelitian
17 3. METODOLOGI 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian Produksi dan Karakterisasi Enzim Transglutaminase dari Streptoverticillium ladakanum dengan Media yang Disubstitusi Limbah Cair Surimi dilaksanakan
Lebih terperinciBAB III BAHAN, ALAT DAN METODA
15 BAB III BAHAN, ALAT DAN METODA 3.1 BAHAN Lactobacillus acidophilus FNCC116 (kultur koleksi BPPT yang didapatkan dari Universitas Gajah Mada), Bacillus licheniformis F11.4 (kultur koleksi BPPT yang didapatkan
Lebih terperinciMATERI DAN METODE. Materi
MATERI DAN METODE Lokasi dan Waktu Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Genetika dan Molekuler Ternak, Departemen Ilmu Produksi dan Teknologi Peternakan, Fakultas Peternakan, Institut Pertanian
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN
39 BAB III METODE PENELITIAN A. Desain Penelitian Penelitian yang dilakukan merupakan penelitian deskriptif. Penelitian membuat deskripsi secara sistematis, faktual dan akurat mengenai fakta-fakta dan
Lebih terperinciBAB III METODOLOGI PENELITIAN. Penelitian yang dilakukan termasuk ke dalam penelitian dasar dimana adanya
BAB III METODOLOGI PENELITIAN A. Jenis Penelitian Penelitian yang dilakukan termasuk ke dalam penelitian dasar dimana adanya keingintahuan peneliti terhadap hasil suatu aktivitas. Metode penelitian ini
Lebih terperinci3 METODE PENELITIAN. 3.1 Bahan Bahan penelitian
3 METODE PENELITIAN 3.1 Bahan 3.1.1 Bahan penelitian Cacing tanah P. excavatus diperoleh dari peternakan cacing milik Ir. Bambang Sudiarto. Substrat koagulan darah diambil dari darah milik S. Krisnawati
Lebih terperinciVISUALISASI HASIL PCR DENGAN METODE PCR LANGSUNG DAN TIDAK LANGSUNG PADA SAMPEL BAKTERI Pseudomonas fluorescens dan Ralstonia solanacearum
VISUALISASI HASIL PCR DENGAN METODE PCR LANGSUNG DAN TIDAK LANGSUNG PADA SAMPEL BAKTERI Pseudomonas fluorescens dan Ralstonia solanacearum Pendahuluan Polymerase Chain Reaction (PCR) adalah suatu teknik
Lebih terperinciHASIL DAN PEMBAHASAN Isolasi DNA Genomik Sengon
HASIL DAN PEMBAHASAN Isolasi DNA Genomik Sengon DNA genomik sengon diisolasi dari daun muda pohon sengon. Hasil uji integritas DNA metode 1, metode 2 dan metode 3 pada gel agarose dapat dilihat pada Gambar
Lebih terperinciBab III Metodologi Penelitian
13 Bab III Metodologi Penelitian III.1 Alat Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah gelas ukur, gelas kimia, labu erlenmeyer, tabung reaksi bertutup, spatula, batang pengaduk, tabung mikro,
Lebih terperinciMETODOLOGI PENELITIAN. Tempat dan Waktu Penelitian. Bahan dan Alat Penelitian
14 METODOLOGI PENELITIAN Tempat dan Waktu Penelitian Tempat penelitian dilakukan di Laboratorium Unit Pelayanan Mikrobiologi Terpadu, Bagian Mikrobiologi Kesehatan, Departemen Ilmu Penyakit Hewan dan Kesehatan
Lebih terperinciBAB III METODE A. Jenis Penelitian B. Populasi dan Sampel C. Waktu dan Lokasi Penelitian D. Alat dan Bahan Rizki Indah Permata Sari,2014
34 BAB III METODE A. Jenis Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian murni atau pure research yang dilakukan dengan metode deskriptif, yaitu suatu metode penelitian untuk membuat deskripsi, gambaran
Lebih terperinciYOHANES NOVI KURNIAWAN KONSTRUKSI DAERAH PENGKODE INTERFERON ALFA-2B (IFNα2B) DAN KLONINGNYA PADA Escherichia coli JM109
YOHANES NOVI KURNIAWAN 10702026 KONSTRUKSI DAERAH PENGKODE INTERFERON ALFA-2B (IFNα2B) DAN KLONINGNYA PADA Escherichia coli JM109 Program Studi Sains dan Teknologi Farmasi INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG 2007
Lebih terperinciBAB III METODE PENELITIAN
BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Januari 2012 sampai bulan Juli 2012, yang bertempat di Laboratorium Genetika dan Biologi Molekuler Jurusan Biologi
Lebih terperinci3 Metode Penelitian Alat
3 Metode Penelitian 3.1. Alat Penelitian dilakukan di Laboratorium KBK Protein dan Enzim dan Laboratorium Biokimia, Program Studi Kimia ITB. Peralatan gelas yang digunakan terdiri atas labu erlenmeyer,
Lebih terperinciBAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Penelitian Bahan dan Alat
12 BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Penelitian Survei penyakit klorosis dan koleksi sampel tanaman tomat sakit dilakukan di sentra produksi tomat di daerah Cianjur, Cipanas, Lembang, dan Garut. Deteksi
Lebih terperinciGambar Penerapan metode..., Anglia Puspaningrum, FMIPA UI, 2008
Gambar 52 Gambar 1. Hasil elektroforesis Escherichia coli ATCC 25922 yang diisolasi menggunakan CTAB dan diamplifikasi dengan PCR [lajur 1 dan lajur 2]. 650 pb 500 pb Gambar 2. Hasil elektroforesis sampel
Lebih terperinci3 METODOLOGI 3.1 Waktu dan Tempat 3.2 Bahan dan Alat
3 METODOLOGI 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian Autentikasi Bahan Baku Ikan Tuna (Thunnus sp.) dalam Rangka Peningkatan Keamanan Pangan dengan Metode Berbasis DNA dilaksanakan pada bulan Januari sampai dengan
Lebih terperinciANALISA HASIL TRANSFORMASI DENGAN MENGGUNAKAN PCR KOLONI DAN RESTRIKSI
1 ANALISA HASIL TRANSFORMASI DENGAN MENGGUNAKAN PCR KOLONI DAN RESTRIKSI PENDAHULUAN Polimerase Chain Reaction (PCR) PCR adalah suatu reaksi invitro untuk menggandakan jumlah molekul DNA pada target tertentu
Lebih terperinciIII. BAHAN DAN METODE
15 III. BAHAN DAN METODE 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian ini dilaksanakan pada bulan November 2009 hingga Februari 2010. Tempat penelitian adalah di Laboratorium Reproduksi dan Genetika Organisme
Lebih terperinciKLONING DAN OVEREKSPRESI GEN celd DARI Clostridium thermocellum ATCC DALAM pet-blue VECTOR 1
PROPOSAL METODOLOGI PENELITIAN (BM-3001) KLONING DAN OVEREKSPRESI GEN celd DARI Clostridium thermocellum ATCC 27405 DALAM pet-blue VECTOR 1 Penyusun: Chandra 10406014 Dosen Narasumber: Dra. Maelita Ramdani
Lebih terperinci