EFEKTIVITAS BACILLUS SPP. DALAM PENURUNAN OFF-FLAVOURS PADA BUDIDAYA IKAN PATIN (PANGASIUS SP.)

Transkripsi

1 EFEKTIVITAS BACILLUS SPP. DALAM PENURUNAN OFF-FLAVOURS PADA BUDIDAYA IKAN PATIN (PANGASIUS SP.) Moh. Zhrfn Abd. Djmil, *, Heny Budi Utri, b, Djumbuh Rukmono b Politeknik Ahli Ush Periknn, Psr Minggu, Jkrt Seltn, Indonesi b Politeknik Ahli Ush Periknn, Psr Minggu, Jkrt Seltn, Indonesi *Koresponden penulis (Almt emil) : mohzhrfn@yhoo.com Abstrk Penggunn probiotik meru slh stu lterntif yng dpt digunkn oleh pembudidy ikn ptin untuk meminimlisir permslhn yng dilmi pd setip proses budidy. Permslhn tersebut ert kitnny dengn mutu dn kulits dging ikn, sehingg pr pelku ush budidy membutuhkn solusi terbik untuk tetp menjg mutu dn kulits hsil produksi gr tetp dpt memenuhi kebutuhn tupun permintn psr. Penelitin ini fokus pd upy menurunkn bu tnh tu off-flvours mellui penggunn probiotik Min Pro (Bcillus spp.) yng didominsi oleh B. Licheniformis dn B. Subtilis. Pengpliksin probiotik mellui ikn dengn dosis 10 ml/kg dn 20 ml/kg. Hsil penelitin yng diperoleh kedu perlkun lebih bik jik dibndingkn kontrol ditinju dri beberp prmeter meliputi: Proksimt terutm pd kenikn protein diperlkun 10 ml/kg (17,1%); 20 ml/kg (16,7%); jik dibndingkn kontrol yng lebih rendh (14%). Komposisi bkteri orgn lmbung dn usus pd perlkun 10 ml/kg dn 20 ml/kg lebih bnyk jik dibndingkn dengn kontrol. Hsil histoptologi orgn perlkun 10 ml/kg dn 20 ml/kg lebih bik. Kren bnyk terbentuk villi yng mempermudh penyerpn nutrisi. Orgnoleptik dri dging ikn ptin (punngung, ekor dn perut yng didug muddy) pd perlkun 20 ml/kg lebih renh. 10 ml/kg dn 20 ml/kg memiliki nili lebih rendh (0,2 tu msih dlm ktegori sedikit muddy/kurng muddy. jik dibndingkn dengn kontrol (0,3 tu dlm ktegori muddy sedng). Kt kunci: Bcillus spp., Off-flvours, Ptin Abstrct The use of probiotics is n lterntive tht cn be used by iridescent shrk cultivtors to minimize the problems experienced in ech cultivtion process. These problems re closely relted to the qulity nd qulity of fish met, so tht cultivtors need the best solution to mintin the qulity nd production qulity so tht they cn meet mrket needs or demnds. This study focused on the efforts to decrese odor or off-flvors through the use of Min Pro (Bcillus spp.) probiotic which is dominted by B. licheniformis nd B. subtilis. The ppliction of probiotics through fish feed t dose of 10 ml/kg of feed nd 20 ml/kg of feed. The results of the study obtined tht both tretments were better thn the control in terms of severl prmeters including: Proximte especilly in the increse of protein treted with 10 ml/kg of feed (17.1%); 20 ml/kg of feed (16.7%); when compred to lower control (14%). The bcteril composition of the stomch nd intestines in the tretment of 10 ml/kg nd 20 ml/kg of feed ws higher thn the control. The histopthologicl results of the 10 ml/kg nd 20 ml/kg treted orgns were better. Becuse mny villi were formed which fcilitted the bsorption of feed nutrients. Orgnoleptic of iridescent shrk met (bck, til nd belly llegedly muddy) in the tretment of 20 ml/kg of the feed ws lower. 10 ml/kg nd 20 ml/kg of feed hd lower vlues (0.2 or still in the slightly muddy/less muddy ctegory when compred to the control (0.3 or in the medium muddy ctegory). Keywords: Bcillus spp., Off-flvors, Iridescent Shrk PENDAHULUAN Bu tnh yng dikenl dengn istilh offflvours meru slh stu mslh yng sngt serius terhdp ikn-ikn ir twr yng dibudidykn secr komersil [45]. Offflvours pd perirrn dikitkn dengn keberdn Geosmin (GSM) dn Du Methylisoborneol (2-MIB) yng dikibtkn oleh kumulsi bhn orgnik yng berlimph Article history: Diterim / Received 24 April 2021 Disetujui / Accepted 30 July 2021 Diterbitkn / Published

2 Djml,et l.) / Journl of Fisheries nd Mrine Reserch Vol 5 No.2 (2021) [55] ; [41] yng menyebbkn terjdiny over populsi plnkton tu Blooming lge [58]. Blooming lge sering terjdi di musim kemru kren fktor lingkungn perirn yng menglmi peningktn suhu, nutrien kren sis pemberin, pemupukn, fses dn bhn orgnik lin dlm irkibt kurngny pergntin ir [21]. GSM dn 2-MIB dlm ir dpt diproduksi sekitr 0,03 mg/10 4 sel oleh beberp plnkton dri golongn Cynobcteri [15] dn kn meningkt seiring dengn bertmbhny jumlh plnkton penghsil senyw kimi tersebut. Kndungn GSM dn 2-MIB pd ikn ir twr lebih besr tersimpn pd jringn lemk yng dpt dirskn mellui dging ikn [7], disebbkn lebih mudh lrut dlm lemk dibndingkn ir. Upy penceghn yng lebih mn dn tidk menyebbkn stress pd ikn dlh pengpliksin probiotik selm pemelihrn. Cr ini membntu memperbiki kulits ir tupun menurunkn rs tidk enk/pk pd dging ikn [41]; [54]. Penggunn probiotik dpt dilkukn lngsung ke ir tupun mellui. Penggunn pd medi kulturdpt mempengruhi kndungn nutrien Crbon, Nitrogen, Phospt, Klium, yng digunkn mikroorgnisme untuk pertumbuhnny. Penggunn probiotik mellui menurut Septirini [49]; [42] dpt dikelompokkn menjdi tig, yitu dpt menekn populsi mikrob ptogen dengn memproduksi senyw-senyw ntimikrob mellui kompetisi nutrisi, merubh metbolisme mikrobil dengn meningktkn tu menurunkn ktifits enzim penguri (selulse, protese, milse dn lin sebginy) dn menstimulsi imunits. Menurut Novin [37] pencmpurn probiotik kedlm kn lebih segr dibndingkn tnp pencmpurn, krendny bu trktn dn cit rs pd yng terfermentsikn oleh probiotik sehingg merngsng ikn. Beberp probiotik yng telh diproduksi secr komersil sebgi lterntif untuk memperbiki kulits ir dn meningktkn pertumbuhn ikn telh bnyk digunkn pd proses budidy [2]; [25] dri golongn Bcillus spp.seperti B. Licheniformis yng dpt menstbilkn dn merngsng pertumbuhn sert B. Subtilis, B. polymyx, B. Megterium dn B. Lterosporus yng dpt menghmbt pertumbuhn bkteri merugikn/ptogen dn merombk orgnik menjdi norgnik. Bcillus spp. memiliki kemmpun yng sngt bik, kren didug mmpu berkompetensi secr efisisen dengn bkteri merugikn dlm bioremedisi lingkungn [39]. Bkteri jenis B. Licheniformis dpt menghsilkn enzim yng dpt mengubh senyw kompleks dri protein menjdi sm mino yng lebih sederhn dn membut dy cern protein pd ikn lebih bik [33]; [6], sert meningktkn kesehtn slurn pencernn pd ikn dn menstimulsi sistem imun. B.Subtilisdpt menghsilkn spor sehingg dpt resisten pd pns dn bersift nerob. Sebgin besr digolongkn dlm kels bkteri yng mmpu mendegrdsi senyw orgnik, berpern dlm nitrifiksi dn dentrifiksi, sert dpt mengikt nitrogen [20]; [10]. Bkteri ini jug mmpu memproduksi senyw bkteriosin dn memiliki efek ntgonis terhdp bkteri grm negtif dn positif [5]. Penelitin Bcillus spp. terhdp penurunn off-flvours pd budidy ikn seperti ikn lele, nil dn slmon telh dilkukn. Tetpi belum memberikn hsil yng mksiml tu solusi terbik untuk menurunkn off-flvours. Dlm penelitin ini dilkukn percobn pd pengpliksin probiotik Bcillus spp. mellui dengn dosis probiotik 10 ml/kg dn 20 ml/kg. Hsil yng dihrpkn yitu secr tidk lngsung dpt mengurngi senyw GSM dn 2-MIB dlm tubuh/slurn pencernn ikn dn dpt berkompetisi dengn produsen GSM dn 2-MIB dlm perirn.. METODE PENELITIAN Wktu dn Tempt Penelitin Penelitin dilkukn selm 60 hri di CV. Tirto Bumi Agung (TBA), Des krngdgngn, Kecmtn Bndrkedung mulyo, Kbupten Jombng, Provinsi Jw Timur, milik Ilhm Subekti yng bekerjsm 482

3 Djml,et l.) / Journl of Fisheries nd Mrine Reserch Vol 5 No.2 (2021) dengn PT. Centrl Protein Prim. Lhn budidy ± 4 hektr terdiri dri 197 petk/kolm ikn, terbgi ntr kolm ikn ptin dn lele. Pengujin smpel ikn dilkukn di lbortorium Animl Helth Service PT. Centrl Protein Prim (CP. Prim Sidordjo). Alt dn Bhn Penelitin Alt yng digunkn meliputi 9 kolm ikn dengn lusn 400 m 2, pengujin proksimt dn hemtologi dilkukn di Universits Airlngg, pengujin ptologi dn histoptologi (Skur Tissue-Tek VIP TM 5 Jr. Jpn ), pengujin bkteri orgn dn bkteri ir dilkukn dilbortorium Animl Helth Service PT. Centrl Protein Prim, Sidorjo. Bhn yng digunkn yitu ikn ptin dri CV. TBA, ikn dri CP. Prim dn probiotik Min Pro jenis Bcillus spp. dri PT. Mrindo Lb. Prtm, Ciknde, Serng. Rncngn dn Thpn Penelitin Metode penelitin menggunkn Rncngn Ack Lengkp (RAL) dengn 2 perlkun (dosis probiotik 10 ml/kg ikn, 20 ml/kg ikn, kontrol) dn msing-msing terdiri 3 ulngn. Jumlh kolm yng digunkn terdiri 9 kolm. Lus kolm yng digunkn 400 m2, kedlmn ir ± 2 meter, pdt tebr 20 ekor/m2 dn ukurn ikn 400 g/ekor. Probiotik dipliksikn 2 kli/minggu, probiotik diencerkn terlebih dhulu dengn 200 ml ir twr per kg, pencmpurn probiotik dengn menyemprotkn probiotik secr mert pd, selnjutny dilkukn pengdukn gr komponen probiotik terserp kedlm pori-pori dn didimkn selm 60 menit di tempt yng teduh dengn tujun gr dpt terfermentsikn, selnjutny dilkukn pemberin. Pengumpuln dn Pengolhn Dt Pengmbiln smpel ikn secr ck mellui smpling dengn intervl wktu 21 hri. Pengmbiln smpel ikn selnjutny dilkukn pengujin meliputi:. Pengujin Proksimt; b. Pengujjin Hemtologi; c. Pengujin Bkteri Air; d. Penguin Bkteri Orgn; e. Pengujin Ptologi; f. Pengujin Histoptologi; dn g. Pengujin Orgnoleptik (Muddy tste) Pengujin Proksimt Pengujin proksimt dging ikn yng diuji dlh protein, lemk, kdr bu dn kdr ir berdsrkn SNI [61] dn metode yng dikembngkn Sudrmdji [51]. Pengujin Hemtologi Pengujin drh ikn ptin menggunkn lt hemtologi Anlyzer yng dikembngkn Bstin et l., (2001) meliputi: nili Hemtokrit, Totl Eritrosit/RBC, Trombosit, Hemoglobin (Hb), Totl Leukosit/WBC, Grnulosit, Limfosit dn Monosit di Lbortorium Ptologi Klinik Universits Airlngg. Pengujin Bkteri Air Pengujin Bkteri Air meliputi Totl Bcteri Count (TBC) dn Totl Aeromons Count (TAC) mellui beberp thp sesui dengn Stndr Opersionl Prosedur (SOP) di lbortorium Animl Helth Service PT. Centrl Protein Prim seperti terdpt pd Lmpirn 1. Pengujin Bkteri Orgn Pengmbiln smpel orgn mellui pembedhn ikn dengn mengelurkn slurn pencernn (lmbung dn usus) dri ikn ptin dews, selnjutny lmbung dn usus digerus, smpel ditimbng 1 g, ditmbhkn 9 ml cirn fisiologis (NCl 0,85%) steril [28] llu dihomogenkn dengn vortex. Proses inokulum dimbil 1 ml dn diencerkn dlm tbung pengencern seril berisi 9 ml lrutn fisiologis, sebnyk 8 tbung pengencer. Setelh dihomogenkn, setip tbung pengencer dimbil lrutn sebnyk 0,1 ml dn disebrkn dlm cwn 483

4 Djml,et l.) / Journl of Fisheries nd Mrine Reserch Vol 5 No.2 (2021) petri berisi TSA. Diinkubsi pd suhu 30 Cselm 24 jm smpi koloni bkteri tumbuh [28]. Pengujin bkteri orgn dilkukn di Lbortorium Animl Helth Service PT. Centrl Protein Prim. mk diteruskn dengn uji lnjut (duncn) untuk mengethui dny perbedn perlkun probiotik yng dipliksikn terhdp penurunn off-flvours pd budidy ikn ptin. Pengujin Ptologi Pengujin Ptologi dilkukn pd orgn ikn yitu (lmbung dn usus ikn) orgn ikn difillet kemudin dilkukn pengmtn dn menghitung (%) komposisi pd orgn ikn yng dinytkn muddy tste dn tidk muddy tste. Kriteri pengujin ptologi terdpt pd Lmpirn 2. HASIL DAN PEMBAHASAN Pengujin Proksimt Hsil rt-rt pengujin proksimt dging ikn ptin selm penelitin setelh perlkun ditmpilkn pd Gmbr 1. dn Tbel 1. Pengujin Histoptologi Pengujin Histoptologi menggunkn lt (Skur Tissue-Tek VIP TM 5 Jr. Jpn ), dilkukn mellui beberp thp sesui dengn Stndr Opersionl Prosedur (SOP) Lbortorium Animl Helth Service PT. Centrl Protein Prim, meliputi: pengmbiln smpel orgn ikn, fikssi, preprsi, prosesing, embedding, pemotongn irisn tipis, pewrnn, pemeriksn dn nlis mikroskopis. Pengujin Orgnoleptik (Muddy tste) Pengujin orgnoleptik dilkukn untuk mengethui bu/rs dging ikn ptin menggunkn pnelis sesui SNI pd tingkt kepercyn 95%. Orgnoleptik (rs) ditentukn oleh 3 bgin ikn (punggung, perut dn ekor) yng sering ditemukn dny indiksi bu tnh pd dging ikn ptin. Pengujin dilkukn oleh 6 orng pnelis menggunkn skoring terdpt pd Lmpirn 3. Anlisis Dt Hsil pengujin pd setip prmeter, selnjutny diuji sttistik (normlits dn homogenits dt) sebgi syrt uji Anov dn pbil hsil yng diperoleh signifikn 484

5 % Kontrol 10 ml/kg 20 ml/kg Protein (%) Lemk (%) Kdr Abu (%) Kdr Air (%) Proksimt Dging Ikn Ptin Gmbr 1. Hsil rt-rt pengujin proksimt pd dging ikn setelh perlkun selm penelitin. Tbel 1. Hsil rt-rt pengujin proksimt dging ikn ptin sebelum dn sesudh perlkun. Proksi mt Hsil Rt-rt Sebelum Perlkun Rt-rt Sesudh Perlkun Diff. (%)*) Kontrol 10 ml/kg 20 ml/kg 10 ml/kg 20 ml/kg Protein (%) % 13% Lemk (%) % 22% Kdr Abu % 10% (%) Kdr Air (%) % 10% *) Cttn: Diff (different) yitu perbedn ntr nili sesudh dn sebelum perlkun Hsil pengujin proksimt selm penelitin pd pengpliksin probiotik mellui diperoleh nili rt-rt pd komposisi kdr bu (kontrol 1,0%; 10 ml/kg 1,1%; dn 20 ml/kg 1,1%) dn kdr ir pd dging ikn (kontrol 19,9%; 10 ml/kg 21,9%; dn 20 ml/kg 21,8%). Kndungn kdr ir yng diperoleh msih tergolong rendh sehingg tekstur dging yng dihsilkn jug lebih kenyl. Kndungn kdr ir ikn ptin berkisr ntr 75,53 79,42% dn kdr ir yng tinggi sngt mempengruhi tekstur dging ikn menjdi lembek [52]. Probiotik dpt mempengruhi nutrisi dging ikn ptin seperti kdr protein, pd perlkun 10 ml/kg (17,1%), 20 ml/kg (16,7%) yng lebih tinggi jik dibndingkn dengn kontrol (14,8%), demikin pul dengn kdr lemk menghsilkn nili rt-rt yng lebih tinggi pd perlkun 10 ml/kg dn 20 ml/kg sebesr 2,8%, sedngkn pd kontrol reltif lebih rendh sebesr 2,3%. Penjelsn tentng kdr protein dn lemk pd ikn ir twr yitu ikn ir twr mengndung sekitr 19% protein tu lebih sesui komposisi protein tu lemk pd. Kndungn protein ini bervrisi hingg 20%, tergntung pd spesies dn musim dlm budidy. Ikn jug mengndung kndungn lemk yng juh lebih rendh jik dibndingkn dengn dging merh [35]. Kulits nutrisi dging ikn secr orgnoleptik dpt dipengruhi oleh degrdsi lingkungn dn yng diberikn selm budidy, terutm dlm sistem budidy semi intensif dn intensif [16]; [17]. Penyebb tingginy kndungn protein pd perlkun 10 ml/kg (17,1%) dn 20 ml/kg (16,7%) jik dibndingkn dengn kontrol yng reltif lebih rendh 14,8% kren beberp pern dri Bcillus spp. yng dpt menghsilkn enzim untuk membntu proses pencernn protein menjdi sm mino sehingg mempermudh ikn untuk penyerpn nutrisiny. Bcillus spp. jug mempunyi sift fisiologis yitu memiliki kemmpun mendegrdsi orgnik seperti protein, pti, selulos, hidrokrbon dn gr, menghsilkn ntibiotik, sert berpern dlm nitrifiksi dn dentrifiksi [36]; [8]; [32]. Beberp penelitin ditemukn bhw penmbhn B. Subtilis mmpu mencern dengn bik [13], sedngkn B. Licheniformis meru spesies bkteri yng mmpu menghsilkn protese dlm jumlh yng reltive tinggi. Menurut Phumee [43] peningktn protein berpengruh pd kndungn protein dging ikn ptin yng berdmpk terhdp peningktn retensi protein. Perlkun 10 ml/kg dn 20 ml/kg menunjukn kndungn protein dging ikn ptin lebih tinggi, hl tersebut didukung oleh protein yng termnftkn dengn bik untuk sintes protein tubuh dengn bntun Bcillus spp. Sintes protein pd tubuh ikn dipengruhi oleh lemk. Kren pbil metbolisme sm mino yng tidk termnftkn dengn bik untuk sintesis protein mk kn meningktkn penimbunn 485

6 Djml,et l.) / Journl of Fisheries nd Mrine Reserch Vol 5 No.2 (2021) lemk dlm tubuh ikn dn kn menyebbkn simpnn protein dlm tubuh ikn lebih rendh yng selnjutny dpt menurunkn lju pertumbuhn dn penmbhn bobot tubuh ikn [62]; [31]. Pd komposisi lemk dri perlkun 10 ml/kg dn 20 ml/kg lebih tinggi jik dibndingkn dengn kontrol, nmun msih termsuk dlm kondisi lemk rendh. Menurut Thmmpt [52] bhw kndungn lemk dging ikn ptin secr umum terdiri ts lemk rendh (2 4%), lemk sedng (4 8%) dn lemk tinggi (>8%). Meknisme secr umum hidrolisis enzimtik substrt peptid menurut Morn [34] terdpt pd Gmbr 2.2. Bcillus spp. penghsil enzim protese yng mengktlisis pemechn iktn peptid, polipeptid dn protein dengn reksi hidrolisis menjdi molekul-molekul yng lebih sederhn seperti peptid rnti pendek dn sm mino [33]; [40]. Reksi hidrolisis yng serup ditunjukkn pd Gmbr 2. Gmbr 2 Meknisme umum hidrolisis enzimtik substrt peptid yng dpt membntu proses kecernn ikn [34]. Hidrolisis iktn peptid dlh reksi penmbhn/penghilngn, yitu protese bertindk sebgi nukleofilik tu bereksi dengn membentuk stu molekul ir [40]. Pd protese tertentu, disi enzim-sil dpt dibentuk, seperti pd Gmbr 2.2. intermedit tetrhedrl kedu khirny dibentuk dn menghsilkn produk krboksilt, proton dn enzim bebs yng diregenersi [34]. Asumsi secr umum proses kerj enzim yng dihsilkn dri Bcillus spp.mellui pencmpurn pd ikn ptin ditmpilkn pd Gmbr 3. Gmbr 3. Secr umum proses kerj enzim yng dihsilkn dri Bcillus spp. mellui pencmpurn pd ikn ptin. Pengujin Hemtologi Pengujin Hemtologi sebelum dn sesudh perlkun diperoleh hsil rt-rt yng ditmpilkn pd Tbel 2.. Tbel 2 Hsil Rt-rt Pengujin Hemtologi Hsil Hemtologi Rt-rt Hsil Rt-rt Sesudh Perlkun Ikn Ptin Sebelum Perlkun Kontrol 10 ml/kg 20 ml/kg Hemtokrit (21-33%) T.Eritrosit/RBC 29 29±0.57 b 32±1.52 b 28±0.33 (1,0-2,5 x ± ± ± /mm 3 ) Hb (5,8-8,9 g/dl) Trombosit ± ± ±0.14 ( x ± ± ± /mm 3 ) T. Leukosit/WBC (20,0-150,0 x 10 3 /mm 3 ) ±1.63 b 41.4±1.28 b 35.8±1.17 Grnulosit (3-8%) Limfosit (57-87%) ± ±0.88 6± ±0.57 7± ±0.88 Monosit (2-5%) 5 5±0.33 5±0.33 4±1.22 Hsil rt-rt pengujin hemtologi diperoleh nili drh hemktokrit, Totl Eritrosit/RBC, Hb, Trombosit, Totl Leukosit/WBC, Grnulosit, Limfosit dn Monosit yng terliht norml untuk stndr hemtologi ikn ir twr. Menurut Bstiwn [4] pbil ikn terserng penykit dn nfsu mkn ikn menurun dpt mempengruhi hemtokrit dn eritrosit rendh. Rt-rt nili hemtokrit dn eritrosit ikn ptin perlkun 10 ml/kg, 20 ml/kg dn kontrol 486

7 TBC (x 103 CFU/ml) berd pd kisrn norml untuk stndr ikn ptin. Hl tersebut menunjukn pemberin probiotik mellui tidk mempengruhi nili gmbrn drh pd ikn ptin. Hsil kdr Hb ikn ptin untuk perlkun 10 ml/kg, 20 ml/kg dn kontrol tergolong norml. Hb berfungsi mengikt oksigen yng digunkn untuk proses ktbolisme sehingg dihsilkn energi [29]; [4]. Kemmpun mengikt oksigen dlm drh tergntung pd jumlh Hb yng terdpt dlm sel drh merh. Rendhny kdr Hb mempengruhi metbolisme menurun dn Kontrol 10 ml/kg 20 ml/kg Pengecekn Minggu Ke- Gmbr 4.Hsil rt-rt TBC ir selm penelitin Tbel 3. Hsil rt-rt TBC ir sebelum dn sesudh perlkun pemberin probiotik Bcillus spp. energi yng dihsilkn menjdi rendh menyebbkn ikn menjdi lemh, nfsu mkn menurun, dim di dsr dn Hsil Rt-rt TBC ir Sebelum Hsil Rt-rt TBC ir Sesudh Perlkun (x 10 3 CFU/ml) Perlkun Pengecekn menggntung dibwh permukn ir [4]. Perlkun (x 10 3 Minggu ke- Kontrol 10 ml/kg 20 ml/kg Hsil pengecekn trombosit perlkun 10 ml/kg, 20 ml/kg dn kontrol menunjukn kisrn nili norml untuk jenis ikn ir twr. Jumlh leukosit ikn ptin perlkun perlkun10 ml/kg, 20 ml/kg dn kontrol diperoleh kisrn nili norml (Tbel 2.). Meningktny produksi jumlh sel drh putih ikn menunjukkn dny respon perlwnn tubuh terhdp zt sing penyebb penykit. Leukosit ikn ptin terdiri dri monosit, limfosit, dn neutrofil (grnulosit). Menurut Bstiwn [4] monosit berfungsi sebgi fgosit terhdp bend-bend sing yng berpern sebgi gen penykit. Limfosit berfungsi sebgi penghsil ntibodi untuk kekebln tubuh dri gnggun penykit. Neutrofil berpern dlm respon kekebln terhdp serngn orgnisme ptogen dn mempunyi sift fgositik dn neutrofil dlm drh meningkt pbil terjdi infeksi yng berpern sebgi perthnn pertm tubuh ikn [9]. Nili rt-rt leukosit pd perlkun 20 ml/kg reltif lebih rendh didug dny penurunn terhdp infeksi yng terjdi pd ikn ptin. CFU/ml) pd Gmbr 4. dn Tbel 3. Totl Bkteri Air Hsil rt-rt pengecekn Totl Bkteri Air (Totl Bcteri Count tu TBC) dlm 10 3 CFU/ml selm penelitin ditmpilkn 487

8 Rt-rt Djml,et 5.10±0.19 l. / Journl 4.94±0.21 of Fisheries nd Mrine Reserch Vol 5 No.2 (2021) ±0.22 Hsil pengecekn rt-rt TBC ir dri penelitin ini diperoleh pd kontrol sedikit lebih tinggi (5,10 x 10 3 CFU/ml), dibndingkn perlkun10 ml/kg (5,03 x 10 3 CFU/ml) dn 20 ml/kg (4,94 x 10 3 CFU/ml). Nili rt-rt bkteri ir bik kontrol mupun perlkun msih dlm kisrn yng bik untuk budidy ikn ptin yitu 1,0 x 10 2 smpi 8,7x10 5 CFU/ml (Jun et l., 2000). Sedngkn hsil penelitin Hrbi dn Udin (2010) untuk totl bkteri ir pd ikn ctfish sedikit lebih rendh yitu 7,9 ± 4.4 x 10 3 to 4,3 ± 5,7 x Pengujin Bkteri Orgn Hsil rt-rt pengujin bkteri orgn lmbung dn usus pd ikn ptin (x 10 8 CFU/ml). Pengujin bkteri tersebut meliputi Totl Bkteri tu Totl Bcteri Count (TBC) dn Totl Aeromons tu Totl Aeromons Count (TAC) ditmpilkn pd Gmbr 5 dn Tbel

9 TAC (x 106 CFU/ml) TBC (x 108 CFU/ml) Lmbung Usus Berdsrkn hsil uji Anov diperoleh nili signifikn pd bkteri lmbung dn bkteri usus tidk berbed nyt, tetpi hsil yng diperoleh secr deskriptif menunjukn dny perbedn pd setip perlkun terhdp penurunn off-flvours Kontrol Kontrol Lmbung 10 ml/kg Perlkun Usus 10 ml/kg Perlkun 20 ml/kg 20 ml/kg Gmbr 5. Hsil rt-rt pengujin TBC dn TAC pd orgn ikn ptin selm penelitin sebelum dn sesudh perlkun. Tbel 4. Hsil Rt-rt Pengujin Bkteri Orgn (x 10 8 CFU/ml) Totl Bcteri Count (TBC) Probiotik dlm budidy ikn dpt dipliksikn mellui tupun pd medi budidy. Menurut Kesrcodi-Wtson t l., (2012) probiotik Bcillus spp.mellui dpt memberikn pengruh positif bgi kelngsungn hidup ikn ptin, mempermudh proses penyerpn nutrisi dn mmpu memperbiki lingkungn pd slurn pencernn. Berdsrkn pendpt Kesrcodi- Wtson [26] spesies Bcillus spp. meru mikroflor usus sehingg lebih mudh menyesuikn diri pd lingkungn usus sebgi mikroorgniseme untuk menunjng pertumbuhn ikn, dpt menghsilkn imunostimuln dn ntibiotik seperti jenis B. Subtilis dn B. Licheniformis [22]; [3]. Rt-rt Bkteri Orgn Sebelum Perlkun Rt-rt Bkteri Orgn Setelh Perlkun Ditmbhkn oleh Irinto [23] probiotik dpt mengtur lingkungn mikrobi usus, Lmbung (X 10 8 CFU/ml) Usus (X 10 8 CFU/ml) Totl Aeromons Count (TAC) Perlkun Kontrol 10 ml/kg 20 ml/kg Lmbung (X 10 8 CFU/ml) Usus (X 10 8 CFU/ml) menghlngi mikroorgnisme ptogen dlm usus dengn meleps enzim yng membntu 10.16± ±0.32 proses pencernn mknn, hl ini 10.36± ± ± ±0.21 menyebbkn jumlh bkteri pd orgn usus lebih pdt seperti pd perlkun 10 ml/kg dn 20 ml/kg. Fungsi bkteri Lmbung Usus (X 10 8 (X 10 8 CFU/ml) CFU/ml) Kontrol diykini mmpu meningktkn dy cern pd ikn dengn bntun Bcillus spp. yng dpt mengsekresikn enzim protese, lipse ml/kg 20 ml/kg Hsil rt-rt pengecekn TBC orgn ikn ptin pd orgn lmbung perlkun 10 ml/kg memiliki jumlh koloni TBC lebih tinggi (10,36 x 10 8 ), perlkun 20 ml/kg (10,22 x 10 8 ) dn kontrol lebih rendh (10,16 x 10 8 ). Seblikny pd orgn usus jumlh TBC terbnyk didominsi oleh perlkun 20 ml/kg (10,61 x 10 8 ), perlkun 10 ml/kg (10,38 x 10 8 ) dn dn milse [25] untuk mempermudh penyerpn nutrisi pd. Proses penyerpn yng bik jug ditunjukkn dengn kontrol lebih rendh (10,25 x 10 8 ). Secr umum rt rt jumlh norml TBC pd lmbung dn usus ikn ir twr berkisr ntr 2,2 x 10 9 CFU/ml dn 2,4 x 10 9 CFU/ml [26].

10 hsil histologi di bgin usus dn lmbung terdpt bnyk villi (Gmbr2.8 dn 2.9) Secr umum keberdn bkteri pd slurn pencernn ikn menurut Kurnisih [28] mempunyi ktivits enzim molitik (mencern krbohidrt), proteolitik (mencern protein), dn lipolitik (mencern lemk), dimnftkn untuk meningktkn dy cern. Bcillus spp. jug berpern penting dlm proses dekomposisi bhn orgnik [1]; [57]. Menurut Fuller (1992) genus Bcillus spp. mmpu tumbuh pd suhu lebih dri 50 o C dn mmpu menghsilkn spor. Meliht sift yng dimiliki Bcillus spp. mk perkembngbikn mikrob dpt dilkukn di 490

11 lur mupun di dlm slurn pencernn ikn yng dipergunkn untuk menekn pertumbuhn bkteri ptogen. Pengujin Ptologi Keberdn probiotik pd slurn pencernn ikn kn memkn sis tu menggunkn bhn bungn dri sis metbolisme [41]. Beberp jenis bkteri memiliki pern penting meningktkn pemnftn, kesehtn ikn, dn perbikn mutu lingkungn dn mikroorgnisme [57]. Pemberin probiotik dpt meningktkn totl bkteri usus pd ikn. Hsil ini sesui dengn totl bkteri usus pd ikn yng lebih tinggi dibndingkn dengn lmbung (Sri, 2014). Menurut Kesrcodi-Wtson [27] spesies bkteri probiotik meru mikroflor norml usus sehingg bkteri tersebut lebih mudh menyesuikn diri dengn lingkungn usus slh stu jenis Bcillus yng pernh diuji cob untuk menunjng pertumbuhn ikn, sebgi imunostimuln dn ntibotik dintrny B. Subtilis dn B. Licheniformis [30]. Berbgi penelitin menunjukkn bhw Bcillus spp. yng memiliki spor dpt berkecmbh dn berthn hidup pd slurn pencernn ikn yng berbed, bkteri ini dinggp sebgi nerob fkulttif dn bgin dri mikrobiot inng yng ktif secr metbolik [56]; [30]. Berikut ini perbedn pd orgn yng diidentifiksi menglmi muddy tste dn tidk muddy tste pd ikn ptin ditmpilkn pd Tbel 5. Tbel 5. Komposisi orgn usus ikn ptin penyebb muddy tste dn tidk muddy tste Muddy Tste Tidk Muddy Tste Keterngn: setelh orgn dibedh dn pengmtn secr visul. 1. Tekstur usus lebih kers 2. Berbu tnh/lumpur 3. Terdpt lumpur yng pdt 4. Dlm orgn usus berwrn hitm disebbkn kren kumulsi bhn orgnik dn lumpur. 5. Orgn usus cenderung lebih besr/bengkk disebbkn kren pdt. Keterngn: setelh orgn dibedh dn pengmtn secr visul. 1. Tekstur usus lebih lembek/lembut 2. Berbu 3. Terdpt sepnjng orgn usus. 4. Dlm orgn usus berwrn coklt disebbkn kren kumulsi. 5. Orgn usus cenderung lebih kecil tupun lunk nmun terisi dengn yng pdt. 491

12 Sesudh Perlkun Probiotik Bcillus spp. + Pkn 5% 5% 5% Kotorn lumpur Plnkton mti 5% 3% 5% Kotorn lumpur Plnkton mti 3%2% Kotorn 5% lumpur Plnkton mti 85% Sis 87% Sis 90% Sis Sebelum Perlkun Kontrol. Pengujin 1 Lin Kontrol. Pengujin 2 Lin Kontrol. Pengujin 3 Lin 4% 3% 10% 83% Kotorn lumpur Plnkton mti Sis Lin 5% 5% 80% 10% Kotorn lumpur Plnkton mti Sis Lin 5% 6% 6% 83% Kotorn lumpur Plnkton mti Sis Lin 7% 3% 5% 85% Kotorn lumpur Plnkton mti Sis Lin 10 ml/kg. Pengujin 1 10 ml/kg. Pengujin 2 10 ml/kg. Pengujin 3 5% 5% 8% 82% 20 ml/kg Pengujin 1 Kotorn lumpur Plnkton mti Sis Lin 20 ml/kg Pengujin 2 6% 5% 4% Kotorn lumpur Plnkton mti Sis 85% 88% Lin 20 ml/kg Pengujin 3 2% 5% 5% Kotorn lumpur Plnkton mti Sis Lin Gmbr 6. Hsil rt-rt komposisi orgn usus yng diindiksikn muddy tste tu off-flvours pd ikn ptin

13 490

14 Pengujin Histoptologi Pengujin Histoptologi pd orgn ikn ptin (insng, lmbung dn usus) selm penelitin diperlihtkn pd Gmbr 7; 8 dn 9. Gmbr 7. Gmbrn insng ikn sebelum dn sesudh perlkun Bcillus spp. (1) Hsil pengecekn insng sebelum perlkun, menunjukn telngiktse (Scle br = 50 µm); (2) Insng pd control, menunjukn hemorgi (Scle br = 50 µm); (3) dn (4) Insng 10 ml dn 20 ml menunjukn fusi lmel sekunder dn kongesti (Scle br = 50 µm). Secr umum kondisi ikn sebelum dn setelh perlkun kondisi tidk berbed secr lingkungn perirn ikn msih dlm kondisi bik. Gmbr 8. Gmbrn lmbung ikn ptin sebelum dn sesudh perlkun probiotik Bcillus spp. (1) pengecekn Lmbung sebelum perlkun, menunjukn degenersi hidropik (Scle br = 50 µm); (2) Lmbung pd kontrol dn (3) Lmbung 10 ml,dn (4) Lmbung 20 ml setelh perlkun msing-msing menunjukn degenersi hidropik (pnh hitm).(scle br = 50 µm); Nmun pd perlkun 20 ml sudh terbentuk villi (pnh besr) (Perbesrn 100 kli) (Scle br = 50 µm). Sebelum ml Sesudh Gmbr 9 Gmbrn usus ikn ptin sebelum dn sesudh perlkun probiotik Bcillus spp. (1) Hsil pengecekn Usus sebelum perlkun, menunjukn desqumsi epitel (Scle br = 20 µm); (2) Usus pd control, (3) Usus 10 ml (4) dn usus 20 ml menunjukn desqumsi epitel, nmun pd kontrol lebih prh, yng terbik kondisiny dlh pd 20 ml (Scle br = 50 µm(scle br = 20 µm). Beberp kelinn pd orgn ikn yng ditemukn selm penelitin seperti telngiktse meru dny pelebrn pd lmel sekunder sehingg membentuk seperti rket. Selin itu lmel insng membesr dn berisikn sel drh, terjdi penimbunn sel drh merh pd lmel sekunder [46]; [47]. Hemorgi dny pembuluh drh pech dn drh berd pd tempt yng tidk semestiny, menunjukn bukti pendrhn pd sel kren infeksi tu sebb linny [35]; [44]). Fusi lmel sekundertu menytuny lmel sekunder insng bis dikrenkn dny infeksi yng disebbkn oleh bkteri seperti epystilis, trichodin, ichthyophthyrius, dctylogyrus dn gyrodctylus tu kren kondisi lingkungn yng buruk. Kongesti meru pendrhn pd orgn, kibt pelebrn pembuluh drh dn didlm pembuluh tersebut penuh berisi drh [50]. Degenersi hidropik terjdi kren dny sel yng ceder sehingg tmpk menjdi bengkk. Sel menjdi membesr kren kumulsi ir dlm sitoplsm dn sitoplsm tmpk puct [48]. Desqumsi epithel dlh dny sel yng terbuk/terluk tu rusk, sering terjdi pd orgn lmbung tu usus ikn (Ploeksic, 2010). Perubhn orgn dri perlkun 20 ml terliht lebih bik dibndingkn dengn 10 ml mupun kontrol.pd perlkun 20 ml ditemukn dny fillie yng berfungsi untuk penyerpn sri-sri mknn. Penggunn Bcillus spp dlm penelitin ini selin menghsilkn enzim jug mmpu memulihkn bkteri di usus dn menggntikn bkteri berbhy seperti Aeroms dengn bkteri norml flor lebih bik [44]; [59]. Bcillus spp. dlm budidy ikn dpt meningktkn ktivits lipse, protese dn milse pd ikn. Sehingg mmpu 491

15 Kisrn muddy meningktkn kinerj pertumbuhn, respons imun, kethnn terhdp penykit, dn kelngsungn hidup budidy [26]. Menurut Okpokwsili dn Alpiki [38] menmbhkn kelimphn bkteri yng tinggi belum tentu merugikn, jik bkteri tidk bersift ptogen. Kelimphn bkteri yng tinggi dpt mengindiksikn dur ulng bhn orgnik yng seht dn minerlissi ulng. Vrisi jumlh bkteri di kolm ikn hmpir sm dengn vrisi jumlh bkteri di orgn pencernn ikn. Pengujin Orgnoleptik Muddy tste Hsil pengujin orgnoleptik muddy selm penelitin diperoleh nili rt-rt dri setip perlkun yng dpt diliht pd Gmbr 10 dn Tbel 6. Orgnoleptik Pengujin orgnoleptik dilkukn untuk mengethui tingkt rs pd dging ikn ptin setelh penggunn probiotik Min Pro (Bcillus spp.) yng dipliksikn mellui pkh dpt menurunkn bu tnh pd dging ikn ptin. Hsil pengecekn orgnoleptik dri ketig perlkun (kontrol, 10 ml/kg dn 20 ml/kg ) diperoleh dny penurunn muddy pd dging ikn yng ditunjukn pd perlkun 10 ml/kg (kisrn muddy 0,24) dn 20 ml/kg (kisrn muddy 0,22) pd skl 2 tu muddy sedng. Jik dibndingkn dengn kontrol, kedu perlkun tersebut (10 ml/kg dn 20 ml/kg ) menunjukn dny penurunn bu lumpur/tnh pd dging ikn ptin. Perlkun 20 ml/kg lebih bik tetpi msih tipis (slight). Berdsrkn hsil uji sttistik (Anov) diperoleh nili pengecekn muddy ini tidk Kontrol 10 ml/kg 20 ml/kg Perlkun Gmbr 10. Hsil rt-rt pengujin Orgnoleptik tig kli (intervl wktu 21 hri) selm penelitin pd dging ikn ptin setelh pemberin probiotik Bcillus spp. pd. signifikn ntr kontrol, perlkun 10 ml/kg dn 20 ml/kg. Tetpi hsil yng diperoleh selm penelitin menunjukn dny penurunn bu lumpur/tnh yitu pd perlkun 20 ml/kg dn 10 ml/kg jik dibndingkn dengn kontrol. Hsil pengecekn dging ikn ptin dri pengujin muddy ditmpilkn pd Gmbr 11. dn Tbel 7. Tbel. 6. Skl rs bu lumpur/tnh(muddy tste) Punggung Ekor Perut pd ikn ptin 0.40 Skl Rs bu lumpur/ tnh Sesifiksi smpel ikn Sngt Muddy tu Muddy Tinggi Muddy Sedng Sedikit Muddy tu Kurng Muddy 492 Nili Kisrn muddy Hsil Penelitin 3 0,50 Perlkun Muddy 2 1 0,33 0,17 Norml 0 0,00 Kontrol 10 ml/kg 20 ml/kg 0,31±0.07 0,24±0.08 0,22± Kontrol 10 ml/kg 20 ml/kg Perlkun Gmbr 11. Hsil rt-rt pengecekn muddy tste dri tig re pd dging ikn ptin (Punggung, Ekor dn Perut). Tbel 7. Pengecekn muddy tste pd ikn ptin (Punggung, Perut dn Ekor). Titik Muddy Punggung Ikn Perlkun Kontrol 10 ml/kg 20 ml/kg 0.19± ± ±0.03

16 Perut Ikn 0.27± ± ±0.04 Ekor Ikn 0.24± ± ±

17 Identifiksi sumber utm mikrob penghsil GSM dn 2-MIB dpt difokuskn pd cynobcteri (gnggng biru-hiju). Selin produk metbolisme mikrob, offflvours dpt jug bersl dri sumber lin seperti bersl dri oksidsi lipid tu pembusukn bkteri yng terkit dengn penngnn dn penyimpnn psc pnen yng tidk tept [27]; [24]; [14] menyrnkn bhw efisiensi dlm penggunn ikn dn pengontroln kulits ir terutm pd komposisi plnkton sngt diperhtikn kren menjdi sumber GSM dn 2-MIB [9]. Metbolit sekunder penyebb off-flvours meru zt dn cynotoxin yng diproduksi oleh sel cynobcteri selm fse eksponensil pertumbuhn, dn kemudin dilihkn ke dlm sistem ir selm fse kemtin sehingg bhn ini cenderung dideteksi hny setelh fse kemtin mikroorgnisme [18]. Bgin dging ikn ptin yng diindiksikn off-flvours ditmpilkn pd Gmbr 12. (A) Bgin dging ikn ptin yng terindiksi muddy sebelum perlkun. Keterngn: Wrn perut (1) gk kekuningn dn sedikit berbu tnh; wrn ekor (2) gk kekuningn;dn punggung (3) gk kekuningn. Gmbr 12. Hsil pengecekn secr visul pd dging ikn ptin yng mengindiksikn terdpt dn tidk terdpt muddy/off-flvours selm penelitin. Pengecekn tersebut dilkukn sebelum dn sesudh perlkun probiotik Bcillus spp. pd. Kesimpuln Penelitin tentng pengunn probiotik Min Pro (Bcillus spp.) pd untuk menurunkn off-flvours diperoleh hsil yng menunjukn dny perubhn/penurunn bu tnh pd perlkun 10 ml/kg dn 20 ml/kg jik dibndingkn dengn kontrol. Hsil orgnoleptik dri dging ikn ptin pd perlkun 20 ml/kg lebih rendh dibndingkn kontrol wlupun tidk berbed dengn 10 ml/kg yitu 0,2 ktegori sedikit muddy dibndingkn kontrol 0,3 tu ktegori muddy sedng. Tetpi penurunn muddy tersebut dri msing-msing perlkun sngt tipis (slight). Probiotik Min Pro (Bcillus spp.) bik digunkn sebgi lterntif untuk menurunkn bu tnh/lumpur. Pengpliksin probiotik sebikny hrus kontinyu dn sehrusny membutuhkn wktu yng cukup pnjng, disrnkn bik digunkn pd umur budidy menjelng pnen tu st ikn berukurn konsumsi sehingg hsil yng diperoleh jug efektif. Tindkn tersebut untuk menjg kulits mutu dging ikn ptin tetp dpt diterim psr dengn hrg yng sesui tnp teridentifiksi bu tnh tu offflvours. DAFTAR PUSTAKA (B) Bgin dging ikn ptin yng tidk terindiksi muddy sesudh perlkun probiotik Bcillus spp. pd. Keterngn: Wrn perut (4) kemerhn/putih puct; wrn punggung (5) gk kemerhn/putih puct;dn wrn ekor (6) kemerhn/putih puct. [1] Abdi, A. F Pengruh pemberin suplemen yng mengndung Bcillus spp. dlm butn terhdp lju pertumbuhn benih ikn Nil. Fkults Periknn dn Ilmu Kelutn. Universits Pdjdjrn, Bndung, 41 hlm. [2] Adriynto, S., Listynto, N., dn Rhmwti, R Pengruh Pemberin Probiotik Dengn Dosis Yng Berbed Terhdp Sintsn Dn 494

18 Pertumbuhn Benih Ptin Jmbl. Pust Penykit Tnmn. Bli Penelitin dn Riset Periknn Budidy. Jkrt. Tnmn Seleri. [3] [3] Azevedo EC, Rios EM, Fukushim K, [12] Fuller, R History nd development dn GM Cmpos-Tkki. of probiotics. In Fuller, R. (Ed.) Bcitrcin production by the new Probiotics: The scientific Bsis. strin of Bcillus subtilis. Biochem Chpmn nd Hll, New York, p Biotech Appl 42: / [13] El Dkr, A.Y., S.M. Shlby dn I.P. BF Soud Assessing the Use of [4] Bstiwn, D. A. Whid., M. Alifudin, Dietry Probiotic/Prebiotics s n dn I. Agustiwn Gmbrn Enhncer of Spinefoot Rbbitfish Drh Lele dumbo (Clris spp.) yng Diinfeksi Cendwn Aphnomyces sp Signus rivultus Survivl nd Growth. Aquculture Nutrition. 13: pd ph yng Berbed. Jurnl [14] Gerber, N. N A voltile penelitin Indonesi 7 (3): metbolite of ctinomycetes: 2 [5] Budinto, dn Heny S Aktivits Antgonis Bcillus Subtilis Terhdp Streptococcus Inie Dn Pseudomons Fluorescens. Jurnl Veteriner. Vol. 18 No. 3: methylisoborneol. Journl of Antibiotics, 22, [15] Giglio, S., Jing, J., Sint, CP, Cne, DE, dn Monis, PT Isoltion nd chrcteriztion of genes ssocited [6] Clik, P., Bilir, E., Çlik, G., dn with geosmin production in Ozdmr, T. H Influence of ph cynobcteri. Environmentl Science conditions on metbolic regultions in nd Technology, 42, serine lkline protese production by Bcillus licheniformis. Enzyme nd Microbil Technology, 31 (5), [16] Grm, L. dn Huss, H.H., Microbiologicl spoilge of fish nd fish products. Interntionl Journl of Food Microbiology, vol. 33, no. 1, pp [7] Chiou CT Prtition Coefficients of Orgnic Compounds in Lipid-Wter System nd Correltions with Fish 137. [17] Grigorkis, K., Tylor, K.D.A. dn Alexis, M.N., Orgnoleptic nd Bioconcentrtion Fctors. voltile rom compounds comprison Environmentl Science nd Technology 19, [8] Clous, D. dn R.C.W. Berkeley Genus Bcillus, In: Bergeys Mnul of Systemtic Bcteriology, vol 2: [9] Dellmn, H. D dn E. M. Brown Buku Teks Veteriner I. Terjemhn : R. Hrtnto, Universits Indonesi Press. Jkrt. [10] Dickscht, JS, Bode, HB, Mhmud, T., Müller, R., dn Schulz, S A novel type of geosmin biosynthesis in mycobcteri. Journl Orgnic Chemistry, 70, [11] Djenuddin, N. dn Amrn M Krkteristik Bkteri Antgonis Bcillus Subtilis Dn Potensiny Sebgi Agens Pengendli Hyti of wild nd cultured gilthed se brem (Sprus urt): sensory differences nd possible chemicl bsis. Aquculture, vol. 225, no. 1-4, pp [18] Guttmn, L., dn vn Rijn, J Identify the conditions underlying the production of geosmin nd 2- methylisoborneol in the recircultion system. Aquculture, 279, [19] Guttmn, L., dn vn Rijn, J Methylisoborneol nd geosmin extrction by orgnic sludge from recircultion quculture systems. Wter Reserch, 43, [20] Htmnti, A Pengenln Bcillus spp. Osen, Volume XXV, Nomor 1,

19 496 [21] Hutchings E Muddy Tsting Fish Cuse nd Recommendtions. [22] Imm FG Sintesis enzim ekstrseluler dlm genus Bcillus. 41: [23] Irinto, A Probiotik Akukultur. Gdjh Md University Press. Yogykrt [24] Izguirre, G., Hwng, CJ, Krsner, SW, dn McGuire, MJ Geosmin nd 2- methylisoborneol from cynobcteri in 3 wter supply systems. Applied Environmentl Microbiology, 43, [25] Jusdi, E. D., Gndr dn Mokogint I Pengruh Penmbhn Probiotik Bcillus spp. Pd Pkn Komersil Terhdp Konversi Pkn Dn Pertumbuhn Ikn Ptin Pngsius Hypophthlmus. Jurnl Akukultur [26] Kml, M. Bsri., 2016, Pengruh Receivble Turn Over Dn Debt To Asset Rtio (DAR) Terhdp Return On Asset (ROA) Pd Perushn Pertnin Yng Terdftr Di Burs NR,Morgn MJ Evlusi perkecmbhn, distribusi, dn persistensi spor Bcillus subtilis mellui slurn pencernn. Poult Sci. 93: /ps [31] Liu XY, Wng Y, dn JI WX Growth, feed utiliztion nd body consumption of Asin ctfsh Pngsius hypopthlmus feed t different dietry protein nd lipid levels. Aquculture Nutrition 11: [32] Mdigns, M. T., J. M. Mrtinko, dn J. Prker Biology of Microorgnism, 8th editions. Bltimore: 110 pp. [33] Mo, W., Pn, R., dn Freedmn, D High production of lkline protese by Bcillus licheniformis in fed-btch fermenttion using synthetic medium. Journl of Industril Microbiology, 11 (1), [34] Morn LA, Scrimgeour KG, Horton HR, Och RS & Rwn JD Biochemistry. Second edit. Prentice. Inc. Efek Indonesi (BEI), Jurnl Ilmih Upper Sddle River. Mnjemen dn Bisnis, Vol. 17 No. 02, [35] Munro, A.L.S The Aqutic Environtment. In Fish Pthology. [27] Kesrcodi-Wtson, A., Kspr, H., M. Ltegn, J., dn Gibson, L Roberts, R.J. (ed). Billiere Tindll, London. Probiotics in quculture: Needs, [35] Ndome, C., Orikpono, O. dn Agnes, principles nd mechnisms of ction nd screening process. Akukultur, 274,1 O Proximte composition nd nutritionl vlue of some commonly [27] 14 Killin, HS Off-Flvor (Ctfish). consumed fishes in Clbr. Journl of Tropicl Freshwter Biology, vol. 19, University of Arknss Division of pp [28] Agriculture. Kurnisih, T., Widnrni., Mulysri., [36] Norris, J. R., R. C. W. Berkeley, N. A. Logn, dn A. G. O'donnell The Melti I., Imrn A. Z., Mrin L. A. Generl Bcillus nd Isolsi, Seleksi, Dn Identifiksi Sporlctobcillus. In: The Prokryotes, Bkteri Dri Slurn Pencernn Ikn Vol 2: Lele Sebgi Kndidt Probiotik. Bli [37] Novin, P., Subndiyono dn Penelitin Dn Pengembngn Pinndoyo Pengruh Pemberin Budidy Air Twr Jkrt. Probiotik Dlm Pkn Butn [29] Lgler KF, Brdch JE, RR Miller, Terhdp Tingkt Konsumsi Pkn Dn Pssino DRM Ichthyology. John Pertumbuhn Benih Ikn Nil Willey nd Sons. Inc. new York- (Oreochromis niloticus). Jurnl London. 506 hl. Mnjemen dn Teknologi Akukultur. [30] Ltorre JD, Hernndez-Velsco X, Vol. 3. No. 4. Hl Kllpur G, Menconi A, Pumford

20 497 [38] Okpokwsili, GC, dn AM Alpiki Bcteril fluids ssocited with Nigerin freshwter fish frming. J. Aqucult. Trop. 5: [39] Prmeswri, W., Dwi S. A. dn Muslim Populsi Bkteri, Histologi, Kelngsungn Hidup Dn Pertumbuhn Benih Ikn Gbus depurtion rte nd concentrtion of the geosmin sensory threshold responsible for the soil-musty stin on the rinbow trout, Onchorhynchus mykiss.akukultur, 245, [46] Robert, R.T Fish Pthology. Edisi III. W.B. Sunders. London Edinburg. Phildelphi, St. Louis, (Chnn strit) Yng Dipelihr Sydney, Toronto. 472 hlm. Dlm Medi Dengn Penmbhn [47] Roberts RJ, Ellis AE The Probiotik. Jurnl Akukultur Rw Pthophysiology nd Systemtic Indonesi. 1 (1): Pthology of [40] Prinduri, A., Usmn S. dn Desrit. Teleost. Di Dlm Roberts R.J. Fish Effect Of Probiotic In Addition On Pthology. Ed ke-4. Chichester (UK): Growth And Feed Conversion Rtio Of Wiley-Blckwell. hlm 22. Ctfish (P. hypopthlmus). [48] Sfrtilof Histoptologi Hti [41] Pelczr, M. J., Chn, E. C. S., dn Ginjl Ikn ptin (Pngsionodon Dsr-Dsr Mikrobiologi. Jkrt: hypopthlmus) yng diinjeksi Bkteri Universits Indonesi Press Aeromons hydrophil. Jurnl [41] Pilmort, P., Niwooti W., Chngun C., Akukultur Sungi dn Dnu, 2 (2): 83- Tomoki I., dn Louis L Off- 88. Flvor Chrcteriztion in High- [49] Septirini, Hrpeni E. dn Wrdiynto. Nutrient-Lod Tilpi Ponds in Pengruh Wktu Pemberin Northern Thilnd. Turkish Journl of Probiotik Yng Berbed Terhdp Fisheries nd Aqutic Sciences 15: 273- Respon Imun Non-Spesifik Ikn Ms 281. (Cyprinus Crpio L.) Yng Diuji [42] Pitriningsih, C., Suminto., dn Srjito. Tntng Dengn Bkteri Aeromons Pengruh Bkteri Kndidt Slmonicid. e-jurnl Rekys dn Probiotik Terhdp Perubhn Teknologi Budidy Perirn Volume I Kndungn Nutrien C, N, P dn K No 1 Oktober 2012 ISSN: Medi Kultur Lele Dumbo (Clris [50] Strzyzewsk, E., J. Szrek., dn I. griepinus). Journl of Aquculture Bbinsk Morphologicl Mngement nd Technology. 3 (4), Evlution of The Gills s Tool in The Dignostics of Pthologicl Conditions [43] Phumee P, Hshim R, Aliyu-Piko M, in Fish nd Pollution in The Aqutic dn ShuChien AC Effects of dietry protein nd lipid content on growth performnce nd biologicl [51] Environment: review. Veterinrni Medicin, 61 (3): Sudrmdji, S. B. Hryono, dn Suhrdi. indices of iridescent shrk Pngsius Anlis Bhn Mknn dn hypophthlmus, Suvge 1878 fry. Pertnin. Yogykrt. Aquculture Reserch 40: [52] [44] Rmos, MA, Weber, B., Gonçlves, JF, Sntos, GA, Rem, P., dn Ozório, ROA Suplementsi probiotik diet Suryningrum DT, Muljnh I, dn Thpri E, Profil sensori dn nili gizi beberp jenis ikn ptin dn hibrid nsutus. Jurnl Pscpnen dn memodulsi mikrobiot usus dn Bioteknologi Kelutn dn Periknn meningktkn pertumbuhn ikn 5: pelngi remj (Oncorhynchus mykiss). [53] Thmmpt P, Rviyn P, dn Biokimi dn Fisiologi Komprtif, Bgin A, 166, Sirimorpon S Proximte nd ftty cids composition of muscles nd [45] Robertson, RF, Juncey, K., Beveridge, viscer of Asin ctfsh Pngsius MCM, dn Lwton, LA The

21 bocourti. Food Chemistry 122: [54] Tucker, S. C. dn Mrtine V. D. P Mnging Off-Flvor Problems in Pond- Rised Ctfish. Southern Regionl Aquculture Center. No [55] Tucker, CS The problem of offflvor in quculture. Reviews in Fisheries Science, 8, [56] Vreelnd RH, Rosenzweig WD, Powers DW Isoltion of 250 Million Yer-Old Hlotolernt Bcteri from Primry Slt Crystls.407: / [57] Wtson, K, A., Kspr, H., Ltegn, M.J., Gibson, L Probiotics in quculture: The need, principles nd mechnisms of ction nd screening processes. Aquculture, Vol No.1, pp [58] Zkiyyh. I., Wsiq H. J. dn Muhmmd F Struktur Komunits Plnkton Perirn Pyu di Kecmtn Wedung Kbupten Demk. Vol. 18, No. 1, Hl ISSN: [59] Zho, Y., Zhng, W., Xu, W., Mi, K., Zhng, Y., dn Liufu, Z Potentil influence of Bcillus subtilis T13 probiotics on growth, immunity nd resistnce to disese Vibrio splendidus infection in juvenile se cucumbers Apostichopus jponicus. Imunologi Ikn dn Kerng, 32, [60] [BSN] Bdn Stndrissi Nsionl. SNI Uji Proksimt. Jkrt. [61] [SNI]Stndrdissi Nsionl Indonesi SNI Petunjuk Pengujin Orgnoleptik Dn Atu Sensori. Bdn Stndrdissi Nsionl.ICS [62] [NRC] Ntionl Reserch Council Nutrient Requirements of Fish Ntionl Acdemy Press, Wshington, DC:NRC Lmpirn 1. Prosedur pengujin bkteri ir 1. Pennmn dn Penghitungn Bkteri TBC (Totl Bcteri Count) ) Ambil smple ir menggunkn micropipet sebnyk 1 ml, msukn kedlm microtube kemudin di vortex/homogenkn. b) Ambil 0,1 ml smple ir Cttn: - Tnp pengencern tu dengn pengencern mksiml 10-3 (10-1, 10-2, 10-3) untuk TBC. - Pengencern menggunkn lrutn NCl fisiologis sebnyk 0,9 ml yng sudh dimsukkn kedlm microtube. - Pembutn lrutn pengencern yitu NCl fisiologis sebnyk 8,5 grm dengn 1 liter qudes steril yng dipnskn dengn hot plte dn di stir/duk, tunggu hingg mendidih, kemudin di utoclve. c) Inoculsi 0,1 ml dri msing-msing pengencern kedlm medi TSA. d) Spered tu rtkn menggunkn spreder glss. e) Inkubsi selm jm, dengn suhu 30 C. f) Hitung TVC (koloni kuning, hiju) dri msing-msing pengencern. 498

22 g) Jumlh bkteri (cfu/ml) = Jumlh koloni x Penyetrn ke 1 ml x fktor pengencern. 2. Pennmn dn Penghitungn Bkteri TAC (Totl Aeromons Count) ) Ambil smple ir menggunkn micropipet sebnyk 1 ml, msukn kedlm microtube kemudin di vortex/homogenkn. b) Ambil 0,1 ml smple ir. c) Msukkn kedlm microtube yng berisi NCl fisiologis 0,9 ml (pengencern 101 ), llu vortekx. d) Ambil smple 0,1 ml dri pengencern 1, msukkn kedlm microtube yng berisi NCl fisiologis 0,9 ml (pengencern 102 ), llu vortekx. e) Ambil 0,1 ml dri pengencern 102, llu tung pd cwn petridish. f) Rtkn dengn menggunkn spreder glss. g) Simpn dlm inkubtor pd suhu 30 o C selm 24 jm dlm posisi terblik (tutup cwn petridish berd di bwh). h) Jumlh bkteri (cfu/ml) = Jumlh koloni x Penyetrn ke 1 ml x fktor pengencern. c) Sis = (%) d) Lin-lin = (%) Lmpirn 3. Prosedur pengujin orgnoleptik muddy Orgnoleptik (rs) ditentukn oleh 3 bgin ikn (punggung, perut dn ekor) yng sering ditemukn dny indiksi muddy pd dging ikn ptin. Pengujin dilkukn oleh 6 orng pnelis menggunkn skoring sebgi berikut: Skl Rs bu lumpur/tnh Sesifiksi smpel ikn Nili Kisrn muddy Sngt Muddy tu Muddy 3 0,50 Tinggi Muddy Sedng 2 0,33 Sedikit Muddy tu Kurng 1 0,17 Muddy Norml 0 0,00 Lmpirn 2. Prosedur pengmtn ptologi ikn ptin Pengecekn meliputi orgn lmbung dn usus pd ikn ptin secr visul, selnjutny dipersentsekn sebgi berikut: ) Kotorn lumpur = (%) b) Plnkton mti = (%) t