PEMERIKSAAN LABORATORIUM GLUKOSA URINE DAN PROTEIN URINE

Transkripsi

1 PEMERIKSAAN LABORATORIUM GLUKOSA URINE DAN PROTEIN URINE Filed under: 1 9:07 am PEMERIKSAAN LABORATORIUM GLUKOSA URINE DAN PROTEIN URINE JUMLAH URINE ( PRODUKSI URINE PER 24 JAM ) Bayi : ml Anak ( 1-14 th ) : ml Dewasa : ml anuria : 100 ml oliguria : ml poliuria : > 1600 ml Proteinuria Adanya protein dalam urine Orang sehat : ekskresi urine < 30 mg/24 jam Proteinuria : ekskresi ³ 300 mg/24 jam Mekanisme : prerenal proteinuria glomerular proteinuria tubular proteinuria Mikroalbuminuria Mikroalbuminuria : ekskresi /24 jam yang diperoleh 2 kali dari 3 kali pemeriksaan PROTEINURIA

2 Normal : protein diekskresi ke dalam urine < 150 mg/24 jam Urine normal terdiri dari : albumin 30%, globulin 30%, Tamm-Horsfall protein 40% Protein dengan BM > dalton sukar melewati dinding kapiler glomerulus Glomerular basement membrane bermuatan negatif, demikian juga albumin menghalangi keluar PRERENAL PROTEINURIA 2. GLOMERULAR PROTEINURIA 3. TUBULAR PROTEINURIA Protein dalam urine (komposisi) PRERENAL PROTEINURIA - tidak ada kelainan glomerulus ( ginjal ) - ekskresi protein dengan berat molekul rendah ( hemoglobin, protein Bence Jone ) GLOMERULAR PROTEINURUA - Ada kelainan glomerulus ginjal - Permeabilitas terhadap protein contoh : glomerulonephritis sindroma nefrotik Glomerular paling sering kadar bervariasi sampai > 100 g/hari disebabkan permiabilitas, bermacam- macam proses

3 Overflow : produksi protein yang berlebihan TUBULAR PROTEINURIA gangguan reabsorpsi protein di tubulus contoh : hemoglobinuria ortostatik proteinuria keracunan obat GLUKOSURIA adanya glukosa dalam urine Pada ginjal sehat : glukosuria terjadi jika kadar glukosa darah 180 mg/dl ( nilai ambang ginjal terhadap glukosa ) Renal glukosuria : glukosuria yang disebabkan kelainan sel tubulus ( reabsorpsi glukosa ) ( nilai ambang ginjal terhadap glukosa ) SAMPEL URINE 1. Urine sesaat : urine acak ( random ) 2. Urine pagi : urine pertama di pagi hari Paling baik untuk urinalisis : - volume dan osmolaritas seragam - lebih kental - ph rendah 1. Urine segar ( < 1 jam dari penampungan ) 2. Urine Post Prandial : 1 ½ 3 jam setelah makan 3. Urine 24 jam :

4 dibuang ditampung URINE disimpan ² > 1 jam : terjadi perubahan sel / susunan kimia. ² Tidak steril : timbul bakteri ureum CO2 + NH3 ph urine : basa CaSo4, MgSo4, Sedimen (torak) : rusak Ureum Glukosuria : kadar glukosa hasil negatif palsu! ² Bilirubin (terikat) hidrolisis oksidasi as. Glukorunat biliverdin + (hijau) biluribin (bebas) ² Urobilinogen Urobilin urine harus segar/baru lemari es (tempat tertutup) pengawet tidak dianjurkan Pemeriksaan kuantitatif urine 24 jam : pengawet tergantung bahan yang

5 diperiksa. BAHAN PENGAWET UNTUK URINE : 1. 10% Thymol - Asam amino 1% Urea Isopropanol Kreatinin Asam urat 2. NaHCO3 5 g - Urofirin Koproporfirin Porfobilinogen 3. 1% Asam Borat 5 ml - Hormon (steroid) Estrogen Pregnantriol 4. Asam Asetat glasial 20 ml - Katekolamine ( ph : 3 ) 5. 10% HCl 20 ml - Asam 5-Hidro Indolasetat 6. 4oC ( lemari pendingin ) - Enzim Kuman Pemeriksaan Urine: A. Pemeriksaan Fisis : 1. Jumlah 2. Bau 3. Buih 4. Warna 5. Kejernihan 6. Berat jenis.

6 B. Pemeriksaan Kimia : 1. ph 2. Protein 3. Glukosa 4. Badan keton 5. Bilirubin 6. Urobilinogen / Urobilin C. Pemeriksaan Mikroskopis : 1. Sel darah, sel epitel. 2. Torak 3. Kristal II. Protein Urine Albumin, Globulin Sifat pemeriksaan : s Kualitatif - reaksi Heller - reaksi Roberts s Semi kuantitatif tes rebus tes sulfosalisilat carik celup visual s Kuantitatif Esbach carik celup : fotometer refleksi Tes penyaring Tes carik celup Ada kemungkinan positif palsu dan negatif palsu

7 Hasil positif ulang tes 2-3 X Penyebab transient proteinuria : gagal jantung kongestif olah raga panas badan PERCOBAAN REBUS Prinsip : Protein dalam suasana asam lemah dipanaskan denaturasi endapan ( + ) * Syarat sampel putar / saring RPM ( 5 menit ) Hasil : ( ) : tetap jernih (+) : kekeruhan minimal ( 0,01 0,05 g/dl ). huruf cetak terbaca (+ +) : Kekeruhan nyata ada butir-butir halus (0,05 0,2 g/dl Garis tebal terbaca (+ + +) : gumpalan-gumpalan yang nyata

8 ( 0,2 0,5 g/dl ) ( ) : gumpalan-gumpalan besar atau telah membeku ( > 0,5 g/dl ) Protein Bence Jones : o BM kecil ( < albumin ) o Monoklonal Ig light chain o Mengendap pada suhu 40o 60oC. ( Pemeriksaan kualitatif ) * Cara : ± 4 10 ml urine saring/sentrifus di tambah bufer ph ± 4,9 5,1 Water bath endapan w.b mendidih (3 ) 15 (± 40-60oC) hilang/endapan berkurang Bence Jones protein (+) Catatan : - Bila endapan >> (albumin/globulin) saring filtrat didinginkan to 40-60oC keruh mendidih larut Bence Jones protein (+) Pemeriksaan Kuantitatif : Alat : Albuminometer dari Esbach Prinsip : + As. Pikrat Protein

9 Syarat : urine jernih (24 jam) bereaksi asam tidak boleh pekat * Catatan : Protein rebus : ++ pemeriksaan Esbach TEHNIK : s s s Tampung urine 24 jam ukur volume Aduk sampai rata Ambil urine secukupnya + asam cuka sampai ph ± 6 saring (Periksa dengan kertas ph ) * Total protein dalam 24 jam = Vol. Urine 24 jam ( L ) X hasil (gram / L) =.. gram / 24 jam. III. Tes Glukosa Urine Reaksi Reduksi Fehling Benedict Semi-kuantitatif Clinitest Reaksi Enzimatik Carik celup Semi-kuantitatif Kuantitatif

10 III. glukosa 1. Reduksi 2. Ensimatik 1. Reduksi cara fehling Prinsip : Dalam suasana Lindi (basa) glukosa mereduksi Cupri (CuO) Cupro (Cu2O) yang mengendap dan berwarna merah bata. Reagen : Fehling A Fehling B R/ Cupri Sulfat 69,3 R/ K-Natartrat 346 Aquadest ad 1000ml Na-Hidroksida 100 Aquadest ad 1000 ml Hasil : Negatif Positif (+) : tetap biru atau hijau jernih : keruh warna hijau agak kuning Positif ( + + ) : kuning kehijauan dengan endapan kuning Positif ( ): kuning kemerahan, endapan kuning merah Positif ( ): merah jingga sampai merah bata Cara Benedict : Prinsip Perbedaan Reagen : Fehling : pereaksi basa-nya : Cu SO4 5H2O 17,3 g Na-Citrat 173 g Na Carbonat 100 g Aquadest ad 100 ml CARA KERJA PEMERIKSAAN BENEDICT

11 1. Teteskan 8 tetes urine ke dalam tabung (0,5 ml) 2. Tambahkan reagen benedict 5 ml 3. Campur dengan baik dan letakkan dalam waterbath mendidih selama 5 menit 4. Angkat dari waterbath tsb. Dan masukkan dalam waterbath dengan suhu ruang (dingin) selama 10 menit 5. Baca segera Protein : Yg terukur pada dipstick adalah Albumin. Carik celup tidak sensitif untuk globulin & protein Bence Jones. Prinsip reaksi: Indikator warna: Tetra Bromfenol Biru yang dipertahankan oleh buffer pada ph = 3 ( warna kuning) + protein (albumin) (warna hijau biru) ( tergantung S protein ) Penyebab positif palsu proteinuria urine pekat (concentrated urine) urine alkali urine yang mengandung darah pemberian radiocontrast Negatif palsu tes carik celup urine Urine dilusi Proteinuria ringan (mikroalbuminuria) Protein bermuatan negatif (light chains) 7. Glukosa cara : Enzimatik 7.1. glukosa Oksidase - glukosa + O2 Asam glukonat + H2O2 GOD

12 Peroksidase - H2O2 + Kromogen a). O-toluidin O-totuidin + H2O (red = m.m) (oks = biru) hijau muda tartrazin (kuning) biru Peroksidase b). Kompleks kompleks + H2O Iodine Iodine ( Oks = coklat ) 7.2. Hexokinase ( lebih spesifik ) TES GLUKOSA URINE DAFTAR PUSTAKA dr. R. Wirawan, dr. S. Immanuel, dr. R. Dharma Bagian Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia/RSCM, Jakarta Cermin Dunia Kedokteran No

13 Pengambilan Sampel Dan Pemeriksaan Laboratorium Urine Posted on January 7, 2011 by Administrator Cara Pengambilan Sampel Bahan urin untuk pemeriksaaan harus segar dan sebaiknya diambil pagi hari. Bahan urin dapat diambil dengan cara punksi suprapubik (suprapubic puncture=spp), dari kateter dan urin porsi tengah (midstream urine). Bahan urin yang paling mudah diperoleh adalah urin porsi tengah yang ditampung dalam wadah bermulut lebar dan steril.1 Punksi Suprapubik Pengambilan urin dengan punksi suprapubik dilakukan pengambilan urin langsung dari kandung kemih melalui kulit dan dinding perut dengan semprit dan jarum steril. Yang penting pada punksi suprapubik ini adalah tindakan antisepsis yang baik pada daerah yang akan ditusuk, anestesi lokal pada daerah yang akan ditusuk dan keadaan asepsis harus selalu dijaga. Bila keadaan asepsis baik, maka bakteri apapun dan berapapun jumlah koloni yang tumbuh pada biakan, dapat dipastikan merupakan penyebab ISK.1 Kateter Bahan urin dapat diambil dari kateter dengan jarum dan semprit yang steril. Pada cara ini juga penting tindakan antisepsis pada daerah kateter yang akan ditusuk dan keadaan asepsis harus elalu dijaga. Tempat penusukan kateter sebaiknya sedekat mungkin dengan ujung kateter yang berada di dalam kandung kemih (ujung distal). Penilaian urin yang diperoleh dari kateter sama dengan hasil biakan urin yang diperoleh dari punksi suprapubik.1 Urin Porsi Tengah Urin porsi tengah sebagai sampel pemeriksaan urinalisis merupakan teknik pengambilan yang paling sering dilakukan dan tidak menimbulkan ketidaknyamanan pada penderita. Akan tetapi resiko kontaminasi akibat kesalahan pengambilan cukup besar. Tidak boleh menggunakan antiseptik untuk persiapan pasien karena dapat mengkontaminasi sampel dan menyebabkan kultur false-negative. Cara pengambilan dan penampungan urin porsi tengah pada wanita : 1. Siapkan beberapa potongan kasa steril untuk membersihkan daerah vagina dan muara uretra. Satu potong kasa steril dibasahi dengan air sabun, dua potong kasa steril dibasahi air atau salin hangat dan sepotong lagi dibiarkan dalam keadaan kering. Jangan memakai larutan antiseptik untuk membersihkan daerah tersebut. Siapkan pula wadah steril dan jangan buka tutupnya sebelum pembersihan daerah vagina selesai. 2. Dengan 2 jari pisahkan kedua labia dan bersihkan daerah vagina dengan potongan kasa steril yang mengandung sabun. Arah pembersihan dari depan ke belakang. Kemudian buang kasa yang telah dipakai ke tempat sampah. 3. Bilas daerah tersebut dari arah depan ke belakang dengan potongan kasa yang dibasahi dengan air atau salin hangat. Selama pembilasan tetap pisahkan kedua labia dengan 2 jari dan jangan

14 biarkan labia menyentuh muara uretra. Lakukan pembilasan sekali lagi, kemudian keringkan daerah tersebut dengan potongan kasa steril yang kering. Buang kasa yang telah dipakai ke tempat sampah. 4. Dengan tetap memisahkan kedua labia, mulailah berkemih. Buang beberapa mililiter urin yang mula-mula keluar. Kemudian tampung aliran urin selanjutnya ke dalam wadah steril sampai kurang lebih sepertiga atau setengah wadah terisi. 5. Setelah selesai, tutup kembali wadah urin dengan rapat dan bersihkan dinding luar wadah dari urin yang tertumpah. Tuliskan identitas penderita pada wadah tersebut dan kirim segera ke laboratorium.1 Cara pengambilan dan penampungan urin porsi tengah pada pria : 1. Siapkan beberapa potongan kasa steril untuk membersihkan daerah penis dan muara uretra. Satu potong kasa steril dibasahi dengan air sabun, dua potong kasa steril dibasahi dengan air sabun, dua potong kasa steril dibasahi dengan air atau salin hangat dan sepotong lagi dibiarkan dalam keadaan kering. Jangan memakai larutan antiseptik untuk membersihkan daerah tersebut. Siapkan pula wadah steril dan jangan buka tutupnya sebelum pembersihan selesai. 2. Tarik prepusium ke belakang dengan satu tangan dan bersihkan daerah ujung penis dengan kasa yang dibasahi air sabun. Buang kasa yang telah dipakai ke tempat sampah. 3. Bilas ujung penis dengan kasa yang dibasahi air atau salin hangat. Ulangi sekali lagi, lalu keringkan daerah tersebut dengan potongan kasa steril yang kering. Buang kasa yang telah dipakai ke dalam tempat sampah. 4. Dengan tetap menahan prepusium ke belakang, mulailah berkemih. Buang beberapa mililiter urin yang keluar, kemudian tampung urin yang keluar berikutnya ke dalam wadah steril sampai terisi sepertiga sampai setengahnya. 5. Setelah selesai, tutup kembali wadah urin dengan rapat dan bersihkan dinding luar wadah dari urin yang tertumpah. Tuliskan identitas penderita pada wadah tersebut dan kirim segera ke laboratorium.1 Bahan urin harus segera dikirim ke laboratorium, karena penundaan akan menyebabkan bakteri yang terdapat dalam urin berkembang biak dan penghitungan koloni yang tumbuh pada biakan menunjukkan jumlah bakteri sebenarnya yang terdapat dalam urin pada saat pengambilan. Sampel harus diterima maksimun 1 jam setelah penampungan.2 Sampel harus sudah diperiksa dalam waktu 2 jam. Setiap sampel yang diterima lebih dari 2 jam setelah pengambilan tanpa bukti telah disimpan dalam kulkas, seharusnya tidak dikultur dan sebaiknya dimintakan sampel baru.3 Bila pengiriman terpaksa ditunda, bahan urin harus disimpan pada suhu 4oC selama tidak lebih dari 24 jam.1 Pemeriksaan Urin Empat Porsi (Meares Stamey) Pemeriksaan ini dilakukan untuk penderita prostatitis. Pemeriksaan ini terdiri dari urin empat porsi yaitu : 1. Porsi pertama (VB1) : 10 ml pertama urin, menunjukkan kondisi uretra, 2. Porsi kedua (VB2) : sama dengan urin porsi tengah, menunjukkan kondisi buli-buli, 3. Porsi ketiga (EPS) : sekret yang didapatkan setelah masase prostat, 4. Porsi keempat (VB4) : urin setelah masase prostat.4

15 Pemeriksaan laboratorium Pemeriksaan urinalisis dilakukan untuk menentukan dua parameter penting ISK yaitu leukosit dan bakteri. Pemeriksaan rutin lainnya seperti deskripsi warna, berat jenis dan ph, konsentrasi glukosa, protein, keton, darah dan bilirubin tetap dilakukan.5 Pemeriksaan Dipstik Pemeriksaan dengan dipstik merupakan salah satu alternatif pemeriksaan leukosit dan bakteri di urin dengan cepat. Untuk mengetahui leukosituri, dipstik akan bereaksi dengan leucocyte esterase (suatu enzim yang terdapat dalam granul primer netrofil). Sedangkan untuk mengetahui bakteri, dipstik akan bereaksi dengan nitrit (yang merupakan hasil perubahan nitrat oleh enzym nitrate reductase pada bakteri). Penentuan nitrit sering memberikan hasil false-negative karena tidak semua bakteri patogen memiliki kemampuan mengubah nitrat atau kadar nitrat dalam urin menurun akibat obat diuretik. Kedua pemeriksaan ini memiliki angka sensitifitas 60-80% dan spesifisitas %. Sedangkan nilai positive predictive value kurang dari 80 % dan negative predictive value mencapai 95%. Akan tetapi pemeriksaan ini tidak lebih baik dibandingkan dengan pemeriksaan mikroskopik urin dan kultur urin. Pemeriksaan dipstik digunakan pada kasus skrining follow up. Apabila kedua hasil menunjukkan hasil negatif, maka urin tidak perlu dilakukan kultur.5,6 Pemeriksaan Mikroskopik Urin Pemeriksaan mikroskopik dilakukan untuk menentukan jumlah leukosit dan bakteri dalam urin. Jumlah leukosit yang dianggap bermakna adalah > 10 / lapang pandang besar (LPB). Apabila didapat leukosituri yang bermakna, perlu dilanjutkan dengan pemeriksaan kultur. Pemeriksaan langsung kuman patogen dalam urin sangat tergantung kepada pemeriksa. Apabila ditemukan satu atau lebih kuman pada pemeriksan langsung, perlu dilakukan pemeriksaan kultur.5,7 Pemeriksaan Kultur Urin Deteksi jumlah bermakna kuman patogen (significant bacteriuria) dari kultur urin masih merupakan baku emas untuk diagnosis ISK. Bila jumlah koloni yang tumbuh > 105 koloni/ml urin, maka dapat dipastikan bahwa bakteri yang tumbuh merupakan penyebab ISK. Sedangkan bila hanya tumbuh koloni dengan jumlah < 103 koloni / ml urin, maka bakteri yang tumbuh kemungkinan besar hanya merupakan kontaminasi flora normal dari muara uretra. Jika diperoleh jumlah koloni antara koloni / ml urin, kemungkinan kontaminasi belum dapat disingkirkan dan sebaiknya dilakukan biakan ulang dengan bahan urin yang baru. Faktor yang dapat mempengaruhi jumlah kuman adalah kondisi hidrasi pasien, frekuensi berkemih dan pemberian antibiotika sebelumnya.1,5 Perlu diperhatikan pula banyaknya jenis bakteri yang tumbuh. Bila > 3 jenis bakteri yang terisolasi, maka kemungkinan besar bahan urin yang diperiksa telah terkontaminasi.1 Rujukan 1. Kumalawati J. Diagnosis bakteriologik infeksi saluran kemih dengan biakan urin. Lokakarya pemeriksan laboratorium klinik pada penyakit infeksi. Bagian Patologi Klinik FKUI-RSCM Kumalawati J. Prosedur pengambilan urin untuk pemeriksaan mikrobiologik. Bagian Patologi Klinik FKUI-RSCM Sonnenwirth AC, Jarrett L. Gradwohl s clinical laboratory methods and diagnosis. 8th edition. St Louis, TheCV Mosby Company; 1980.

16 4. Meares EM. Prostatitis. Med Clin of North Am 1991 (75) : Pappas PG. Laboratory in the diagnosis and management of urinary tract infections. Med Clin of North Am 1991 (75) : Semeniuk H, Church D. Evaluation of the lecocyte esterase and nitrite urine dipstick screening tests for detection of bacteriuria in womwn with suspected uncomplicated urinary tract infections. Journal of clinical microbiology 1999 : Schaeffer J.A. Infections of the urinary tract. Dalam : Walsh PC. Campbell`s Urology Vol 1. 8th edition. WB Saunders Company. 2002;