penyimpanan benih yang selanjutnya disebut gudang G 1), Leuwikopo. Pelaksanaan penelitian dimulai pada bulan Mei 1994 dan selesai Februari 1995.

Transkripsi

1 BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian ini dilakukan di lahan pertanian dan kolam ikan di Desa Gadog, Ciawi, Bogor, serta di Laboratorium Teknologi Benih Faperta-IPB (termasuk gudang penyimpanan benih yang selanjutnya disebut gudang G 1), Leuwikopo. Pelaksanaan penelitian dimulai pada bulan Mei 1994 dan selesai Februari Bahan dan Alat Benih yang digunakan dalam penelitian ini adalah benih kedelai (Glycine max 1. Merr) varietas Wilis. Bahan lain adalah kertas merang untuk pengujian, lem aquarium untuk menyegel tabung penelitian, dan cat kolam warna putih untuk mengecat tabung penelitian. Bahan kimia yang digunakan ialah etanol 95%, 2,3,5 trifenil tetrazolium klorida (TTZ), air destilata, gas CO 2 90% dan gas N2 90%. Alat yang digunakan berupa timbangan, oven, botol Coca Cola ml, alat pemberat, termometer, MPC IPB 77-1 M, MPC IPB 77-1, alat pengecambah benih IPB 72-1, wadah plastik, dan wadah bekas roll film warna hitam. Pelaksanaan Percobaan Percobaan dilaksanakan dengan melalui dua tahapan, yaitu (1) penyiapan benih, dan (2) penyimpanan benih. Penyiapan benih. Untuk penelitian ini diperlukan benih kedelai (Glycine max

2 17 cara menanam sendiri benih varietas kedelai yang sesuai yang diperoleh dari Balai Penelitian Tanarnan Pangan, Bogor, di atas laban seluas 800 m 2 Sesudab tanarnan berumur 90 hari, polong kedelai dipanen dan diolab (pemisaban polong dari benih, pemilahan, dan pengeringan benih kedelai sampai mencapai kadar air 7%). Maka benih-benih kedelai tersebut siap dipakai sebagai benih untuk percobaan. Penyimpanan benih. Benih kedelai sebanyak kurang lebih 800 gram dirnasukkan ke dalain botol Coca Cola yang terbuat dari kaca dan berukuran ml yang dicat putih (untuk lebih mencegab sinar matabari rnasuk ke dalam botol) sampai sebatas leher botol. Seluruhnya disiapkan 36 botol. Sebanyak 24 botol dibawa ke PT Aneka Gas, Jakarta, untuk diisi dengan gas CO 2 (12 botol), atau N2 (12 botol), keduanya dengan tingkat kemurnian 90%. Sebelum gas-gas tersebut diisikan ke dalam botol, udara yang ada di dalam botol terlebih dabulu dikeluarkan dengan bantuan pompa vakum. Gas CO 2 atau N2 dimasukkan ke dalam botol-botol yang sesuai dalam jumlab yang diusabakan seseragam mungkin dengan bantuan selang gas dan alat pengukur tekanan. Segera setelab gas dimasukkan, botol-botol disumbat dengan sumbat gabus yang sebelumnya telab dilumuri dengan lem Aqua Seal. Sumbat-sumbat tersebut selanjutnya didorong rnasuk sampai sebatas mulut botol, lalu tutup botol yang asli Guga diberi lem Aqua Seal) diletakkan di tempatnya dan disegel. Sebanyak 12 botol benih tidak diberi perlakuan (udara yang ada tidak dibuang dan juga tidak diberi penambaban gas), tetapi disegel dengan cara yang sama seperti semua botol yang lain dan digunakan sebagai pembanding.

3 18 Botol-botol tersebut di atas selanjutnya disirnpan di gudang G1 dan di dalam k;olam ikan (25m x 10m x 0.9m), masing-masing sebanyak enam botol yang berisi gas CO 2, enam botol berisi gas N 2, dan enam botol tanpa periakuan (berisi udara biasa). Dari jumiah tersebut, separuh disirnpan selama tiga bulan dan separuhnya lagi disirnpan selama enam bulan. Rancangan Percobaan Penelitian ini dirancang dengan rancangan Petak Terbagi Dua KaIi yang disusun secara faktorial dan terdiri atas tiga faktor. Faktor pertama yaitu lama penyirnpanan (dua tarat) sebagai petak utama, faktor kedua yaitu komposisi gas di dalam botol kemasan (tiga tarat) sebagai anak petak, dan faktor ketiga yaitu tempat penyirnpanan (dua tarat) sebagai anak anak petak. Rancangan yang digunakan adalah faktorial 2 x 3 x 2 dengan rancangan Petak Terbagi Dua Kali atas dasar Acak Lengkap. Perlakuan tiga fuktor tersebut adalah : Faktor 1 (petak utama). Lama Penyirnpanan (A) Al : 3 bulan A2: 6 bulan Faktor 2 (anak petak). Komposisi Gas di dalam Botol Kemasan (B) B 1 : komposisi gas yang terdapat di udara B2: CO 2 90% B3: N2 90%

4 19 Faktor 3 (anak anak petak). Tempat Penyimpanan (C) C1 : gudang C2 : dalam kolam berair Tiap kombinasi perlakuan mempunyai 3 ulangan, sebingga ada 12 kombinasi dengan 36 satuan percobaan. Model linear aditif dari rancangan tersebut adalab : Yijkl = I' + Aj +]11 + B j + ABij + bijl + Ck + AC;k + BC jk + ABCijk + Bijkl Keterangan : Yijkl = nilai peubab yang diamati J.l Ai B j C k ABij = nilai rataan umum = pengaruh lama penyimpanan pada tarafke-i = pengaruh komposisi gas di dala botol kemasan pada tarafke-j = pengaruh tempat penyimpanan pada tarafke-k = pengaruh interaksi tingkat lama penyimpanan pada tarafke-i dan komposisi gas di dalam botol kemasan pada tarafke-j BC jk = pengaruh interaksi komposisi gas di dalam botol kemasan pada taraf ke-j dan pengaruh tempat penyimpanan pada tarafke-k ABCijk = pengaruh interaksi tingkat lama penyimpanan pada tarafke-i, komposisi gas di dalam botol kemasan pada tarafke-j, dan pengaruh tempat penyimpanan pada tarafke-k

5 20 Y;I = galat petak utama O;jl = galat anak petak 8;jkl = galat anitk anak petak. Analisis Benih Pada akhir masa penyimpanan, botol-botol percobaan dibuka dan benihnya dianalisis untuk mengetahui :.(1) nilai viabilitas potensial (Vp) benih, (2) nilai vigor daya simpan benih setelah mengalami deraan alkohol (VDS'lk), (3) nilai vigor daya simpan (V DS) benih hasil anaiisis Sistem Multiplikasi Devigorasi (SMD). Viabilitas Potensial (Vp). Nilai V p didapat dengan dua cara, yaitu (1) dengan menghitung daya berkecambah (DB), dan (2) dengan menghitung jumlah benih yang normal setelah direndam dengan larutan Tetrazolium (uji TZ). (1). Sebanyak 25 butir benih kedelai dengan tiga ulangan dari masing-masing botol percobaan ditanam pada substrat kertas merang lembab dan diuji daya berkecambahnya dengan metode Uji Kertas Digulung didirikan di dalam plastik (UKDdp), kemudian dikecambahkan dengan alat pengecambah benih IPB Pengamatan dilakukan setelah tiga dan lima hari. Nilai daya berkecambah dihitung dengan cara berikut ; jumlah kecambah normal DB = x 100% jumlah total benih (2). Sebanyak 12 butir benih kedelai dengan tiga ulangan dilembabkan selama 11 jam sehingga terjadi imbibisi. Kemudian benih-benih tersebut direndam selarna dua

6 21 Ja.m di dalarn Iaruta..f1 Tetrazoliu.rn (TZ) 0.25% pada suhu kamar. Pada a.lc..hjy perendaman, perubahan warna benih diamati. Kemungkman yang bisa terjadi ialah :.(1) benih berwarna merahjambu cerah (MC) merata yang menunjukkan benih tersebut normal dan kuat, (2) benih berwarna merah jambu pucat (MP) merata yang menunjukkan benih tersebut normal tetapi kurang kuat, dan (3) benih berwarna putih atau pucat atau merah ungu tua sampai kehitaman (A) pada sebagian atau seluruh kotiledon yang menunjukkan benih tersebut abnormal atau mati. Penghitungan jumlah kecambah normal hasil uji TZ ini dilakukan dengan cara berikut : MC+MP Benih normal = x 100% MC+MP+A Vigor Daya Simpan benih sesudah mengalami deraan alkohol (VDS a1k ). Sebanyak 75 butir benih kedelai dari rnasing-masing botol percobaan dilembabkan di dalam kertas merang lembab selama enam jam sebelum didera dengan etanol 95% dengan menggunakan alat IPB 77-1 dengan waktu penderaan (15+ 15)+(15+ 15) menit. Kemudian benih diuji daya berkecambahnya dengan metode UKD dp sebanyak tiga ulangan. Analisis Sistem Multiplikasi Devigorasi (SMD) benih. Sebanyak 468 butir benih kedelai dari masing-masing botol percobaan dilembabkan dahulu selama 11 jam (untuk terjadinya imbibisi) sebelum didera dengan MPC IPB 77-1 M. Benih-benih tersebut terbagi di dalam 13 tabung masing-masing berisi 12 butir, yang satu tabung berfungsi sebagai kontrol (tidak didera), sedangkan 12 lainnya didera. Proses penderaan tersebut meliputi pemanasan (35 C) pada 13 tingkat deraan dengan interval

7 22 dua menit. Untuk setiap tingkat penderaan dihembuskan etanol dengan menggunakan aerator pada menit pertama, dan dihembuskan etanol yang disertai tiupan angin dengan blower pada menit kedua. Maka penderaan yang diberikan secara keseluruhan dapat dikemukakan sebagai berikut : 0(1+1), 1(1+1), 2(1+1), 3(1+1), 4(1+1), 5(1+1), 6(1+ 1),7(1+1), 8(1+ 1), 9(1 +1), 10(1+1), 11(1+ 1), dan 12(1 + 1) menit, angka di depan kurung menyatakan jumlah deraan, sedangkan angka di dalam kurung menyatakan kedua macam deraan yang diberikan masing-masing selarna satu menit. Percobaan ini dilakukan dengan tiga ulangan. Analisis ini harus dilakukan tanpa penundaan; jika tidak selesai, benih harns disimpan dalam lemari es dengan asumsi tidak mengalami kemunduran atau kalaupun mengalarni kemunduran sedikit sekali. Benih yang sudah selesai didera direndam selarna dua jam di dalam larutan tetrazolium (TZ) 0.25% pada suhu kamar. Pada akhir perendaman, perubahan warna benih diamati. Kemungkinan yang bisa terjadi ialah : (1) benih berwarna merah jambu cerah (MC) merata yang menunjukkan benih tersebut normal dan kuat, (2) benih berwarna merah jambu pucat (MP) merata yang menunjukkan benih tersebut normal tetapi kurang kuat, dan (3) benih berwarna putih atau pucat atau merah ungu tua sampai kehitaman (A) pada sebagian atau seluruh kotiledon yang menunjukkan benih tersebut abnormal atau mati. Pengamatan benih harns dilakukan secepat mungkin. Jika terpaksa ditunda, maka benih-benih tersebut hams disimpan di dalam lemari es. Dari data pengarnatan tersebut di atas dapat dihitung Nilai Delta hasil uji TZ (D TZ ) yang menyatakan selisih antara viabilitas potensial (yang dapat ditentukan dari

8 23 data 0 deraan dengan tolok ukur hasil UJI TZ) dengan vigor benili dengan menggunakan TUmus : DTZ = MP/total benili x 100% x AlMC Kemudian berdasarkan nilai DTZ dari setiap taraf penderaan tersebut dapat ditentukan persamaan regresi polinomial tingkat tinggi untuk masing-masing satuan pereobaan (perlakuan penyimpanan) dan digambar grafik nilai deltanya. Setiap grafik memuat tiga garis persamaan dari tiga ulangan pereo baan, sehingga didapat 12 grafik Nilai Delta. Dari grafik tersebut dapat ditentukan nilai ZPo yaitu panjangnya kurun deraan pada saat garis nilai D TZ pertama kali keluar dari Zone Penilaian (ZP). Dari persamaan regresi ini dapat ditentukan pula nilai D TZ pada saat 0 menit (x = 0) untuk kemudian dieari nilai intersepnya dengan mengasumsikan nilai D TZ yang kurang dari satu adalah sarna dengan satu. Berdasarkan nilai-nilai di atas maka dapat ditentukan nilai Vigor Konservasi (V KS) dengan menggunakan rumus : V KS = DTz'1 X ZPo Keeepatan Tumbuh (KcT) benili dihitung untuk menduga Vigor awal sebelum simpan (Va'). Penghitungan dilakukan sebelum penyimpanan. Benili dari setiap satuan pereobaan diarnbil sebanyak 75 butir, kemudian dikeearnbahkan pada medium kertas merang dengan metode UKD dp, pengarnatan dilakukan setiap hari selarna lima hari terhadap jumlah keearnbah normal dengan tolok ukur % per etmal.

9 24 Berdasarkan nilai V KS dan KcT yang didapat maka dapat ditentukan pula nilai Vigor Daya Simpan (Vos) dengan menggunakan rumus : VOS =VKS x Va'