KEMAMPUAN DAYA HAMBAT EKSTRAK BUAH MENGKUDU (Morinda citrifolia) TERHADAP BAKTERI Shigella dysenteriae

Transkripsi

1 KEMAMPUAN DAYA HAMBAT EKSTRAK BUAH MENGKUDU (Morinda citrifolia) TERHADAP BAKTERI Shigella dysenteriae Dewi Novianti Dosen Jurusan Biologi FMIPA Universitas PGRI Palembang ABSTRACT Shigella dysenteriae an intestinal microflora in the human body that can cause diarrheal disease shigellosis or dysentery. The purpose of this study was to determine the ability of inhibitory noni fruit extract on the growth of bacteria Shigella dysenterie performed in vitro. The research was conducted in March The experimental research has been conducted on the manufacture of noni fruit extract, the extract concentration manufacture, and testing of the extract of the test bacteria. The results showed that the noni fruit extract has inhibitory effect on the growth of bacteria Shigella dysenteriae. At a concentration of 10% noni fruit extract was able to inhibit the growth of bacteria Shigella dysenteriae, and at a concentration of 80% obtained the highest inhibition zone. The higher concentration of noni fruit extract is given the greater the inhibition zone is formed. Keywords: inhibition, noni fruit extract, growth, Shigella dysenteriae ABSTRAK Shigella dysenteriae merupakan mikroflora pada usus tubuh manusia yang dapat menyebabkan penyakit shigelosis atau diare disentri.. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kemampuan daya hambat ekstrak buah mengkudu terhadap pertumbuhan bakteri Shigella dysenterie yang dilakukan secara in vitro. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan maret Penelitian eksperimental telah dilakukan meliputi pembuatan ekstrak buah mengkudu, pembuatan konsentrasi ekstrak, dan pengujian ekstrak terhadap bakteri uji. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak buah mengkudu memiliki kemampuan daya hambat terhadap pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae. Pada konsentrasi 10% ekstrak buah mengkudu sudah dapat menghambat pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae, dan pada konsentrasi 80% didapatkan zona hambat yang tertinggi. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak buah mengkudu yang diberikan maka semakin besar pula zona hambat yang terbentuk. Kata Kunci: daya hambat, ekstrak buah mengkudu, pertumbuhan, Shigella dysenteriae. ISSN X 1

2 PENDAHULUAN Bakteri Shigella dysenteriae secara alamiah hidupnya di usus tetapi jika jumlahnya lebih dari 10 3 sel/ml maka dapat menyebabkan penyakit shigelosis atau diare disentri. S. dysenteriae termasuk kelompok bakteri Gram negatif, tidak berkapsul dan tidak membentuk spora, anaerob fakultatif, memfermentasi glukosa dengan membentuk asam tetapi jarang memproduksi gas (Madigan dkk., 2008). Shigellosis timbul dengan gejala adanya nyeri abdomen, demam, BAB berdarah, dan feses berlendir. Gejala awal terdiri dari demam, nyeri abdomen, dan diare cair tanpa darah, kemudian feses berdarah setelah 3 5 hari kemudian. Lamanya gejala ratarata pada orang dewasa adalah 7 hari, pada kasus yang lebih parah menetap selama 3 4 minggu. Penderita mengalami dehidrasi dan jika tidak ditanggulangi maka dapat menyebabkan kematian. S.dysenteriae berpindah dari penderita melalui fekal-oral seperti melalui makanan, tangan, air yang terkontaminasi feses penderita, dan lalat. Invasi bakteri ini mengakibatkan terjadinya infiltrasi sel-sel polimorfonuklear dan menyebabkan matinya sel-sel epitel tersebut, sehingga terjadilah tukaktukak kecil di daerah invasi yang menyebabkan sel-sel darah merah dan plasma protein keluar dari sel dan masuk ke lumen usus serta akhirnya ke luar bersama tinja. S.dysenteriae juga menghasilkan toksin yang bersifat nefrotoksik, sitotoksik dan enterotoksik (Rarasandy, 2014). Penatalaksanaan Shigellosis dengan pemberian antibiotik dapat membantu memperpendek masa sakit dan sekresi patogen serta meringankan penyakit. Obat-obat antibakteri tersebut harus digunakan pada situasi tertentu dengan indikasi yang jelas. Sekarang ini sudah banyak laporan adanya resistensi S.dysenteriae terhadap berbagai macam antibiotik yang selama ini digunakan.resistensi S.dysenteriae terhadap antibiotik terjadi akibat pemakaian antibiotika yang tidak rasional. Akibat sering terjadinya resistensi terhadap suatu antibakteri maka pemilihan antibakteri yang tepat perlu dilakukan, dimana pemilihan antibakteri tergantung kepada gambaran resistensi bakteri setempat sesuai prevalensi infeksi yang terjadi pada daerah tersebut (Jawetz, 2005). Seiring dengan perkembangan zaman perhatian masyarakat telah kembali ke bahan alami yang dikenal dengan istilah Back to Nature ini dianggap sebagai hal yang sangat bermanfaat karena sejak dahulu masyarakat telah percaya bahwa bahan alami mampu mengobati segala jenis penyakit dan relatif aman bagi tubuh. Mengkudu (Morinda citrifolia) merupakan tanaman obat yang cukup dikenal oleh masyarakat di Indonesia. Pada masyarakat, buah mengkudu banyak digunakan sebagai obat tradisional untuk penyembuhan berbagai penyakit seperti diare disentri. Hasil penelitian Purwantiningsih dkk (2014) membuktikan bahwa buah mengkudu mengandung senyawa metabolit sekunder yang sangat ISSN X 2

3 bermanfaat bagi kesehatan. Buah mengkudu yang matang mempunyai kandungan senyawa flavonoid dan fenol lebih banyak dibandingkan dengan buah mengkudu yang mentah dan mengkal. Beberapa jenis senyawa fitokimia lainnya dalam buah mengkudu adalah terpen, acubin, lasperuloside, alizarin, zat-zat antrakuinon, asam askorbat, asam kaproat, asam kaprilat, zat-zat skopoletin, dan alkaloid. Senyawasenyawa tersebut bersifat antibakteri terhadap beberapa bakteri seperti Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Maserasi merupakan salah satu cara untuk mengekstraksi senyawa polar maupun non polar pada suatu zat/bahan (Usha dkk., 2010). Menurut Pelczar dan Chan (2005), untuk menentukan efektivitas suatu bahan atau zat tersebut bersifat antimikroba atau tidak yaitu dengan melihat zona hambat yang dibentuk oleh zat tersebut. Jika terbentuk zona hambat berarti zat tersebut bersifat antimikroba. Zona hambat merupakan daerah bening yang tidak ditumbuhi oleh mikroba. Berdasarkan uraian di atas maka perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengekstrak senyawa antibakteri dari buah mengkudu dan mengetahui seberapa besar kemampuan daya hambat ekstrak buah mengkudu terhadap bakteri Shigella dysenteriae penyebab disentri yang dilakukan dalam skala in vitro. BAHAN DAN METODE Alat yang digunakan dalam penelitian ini diantaranya adalah: autoklaf, beker glass, kertas cakram (diameter 6 mm), oven, water bath, hot plate, blender, dan jangka sorong. Sedangkan bahan yang digunakan diantaranya adalah: isolat murni bakteri Shigella dysenteriae, aquabidest, buah mengkudu matang, metanol, bubuk media MHA. Penelitian ini telah dilaksanakan pada bulan Maret Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental yang dilakukan di laboratorium dengan kondisi terkontrol, homogen dan steril. Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) menggunakan 9 perlakuan dan 3 kali ulangan. Variabel bebas yaitu konsentrasi ekstrak buah mengkudu matang, sebagai kontrol digunakan aquabidest steril sedangkan variabel terikatnya adalah luas zona hambat yang terbentuk. Pelaksanaan penelitian terdiri dari: Pembuatan ekstrak buah mengkudu, pembuatan konsentrasi ekstrak, dan pengujian ekstrak terhadap bakteri uji. Ekstraksi buah mengkudu dengan cara buah mengkudu matang dipotong tipis lalu dioven dengan suhu 50 C selama 48 jam. Setelah kering, dihaluskan dengan blender, serbuk mengkudu dimaserasi dengan pelarut metanol 95% dengan perbandingan 1:7 ISSN X 3

4 (setiap 1 gram serbuk mengkudu, direndam dalam 7 ml etanol) selama 5 hari sambil diadukaduk. Hasil yang didapatkan disaring dengan kain kasa sehingga diperoleh hasil maserasi, lalu diuapkan di atas waterbath selama 3 hari atau sampai terbentuk gel dan etanol benarbenar menguap (DepKes RI, 2005). Pembuatan konsentrasi ekstrak buah mengkudu. Ekstrak buah mengkudu dibuat dengan beberapa konsentrasi yaitu konsentrasi 0%, 10%, 20%, 30%,40%, 50%, 60%, 70% dan 80% menggunakan pelarut aquabidest steril. Pengujian ekstrak buah mengkudu terhadap bakteri Shigella dysenteriae menggunakan media Mueller Hinton Agar (MHA). Kekeruhan suspensi bakteri diukur dengan standar Mac Farland I. Suspensi bakteri dimasukkan ke media MHA lalu diletakkan paper dish yang telah dicelupkan ekstrak uji sesuai dengan perlakuan. Setelah 48 jam diamati dan diukur luas zona hambat yang terbentuk. Kemampuan daya hambat ekstrak buah mengkudu terhadap bakteri Shigella dysenteriae dianalisis dengan analisis varians dan selanjutnya untuk mengetahui perbedaan bermakna dari analisis maka dilakukan Post Hoc Only Test. HASIL DAN PEMBAHASAN Berdasarkan hasil analisis varians (Tabel 1) menunjukkan bahwa pemberian ekstrak buah mengkudu berpengaruh sangat signifikan terhadap pertumbuhan bakteri Shigella dysentriae. Untuk mengetahui perbedaan antar perlakuan ekstrak uji maka dilakukan uji lanjut. Hasil uji lanjut dapat dilihat pada Tabel 2 di bawah ini. Tabel 2. Luas Zona Hambat Ekstrak Buah Mengkudu Terhadap Pertumbuhan Bakteri Shigella dysenteriae Perlakuan Ekstrak Buah Mengkudu ( % ) Luas Zona Hambat (mm 2 ) 0 0 ± 0 a 10 32,12± 0,18 b 20 48,76 ± 1,57 c 30 64,36 ± 1.22 d 40 98,50± 1,35 e ,18 ± 1,88 f ,98 ± 1,96 g ,55 ± 1,45 h ,57 ± 1,73 i BNT 0,01 = 5,9 Keterangan: Angka-angka yang diikuti oleh huruf yang sama artinya tidak berbeda nyata pada uji lanjut DMRT dengan α = 0,01 ISSN X 4

5 Tabel 1. Hasil Analisis Varians Kemampuan Daya Hambat Ekstrak Buah Mengkudu Terhadap Pertumbuhan Shigella dysenteriae Dependent Variable: luas zona hambat Source Corrected Model Intercept Perlakuan Error Total Corrected Total Type III Sum of Squares (a) df Mean Square F Sig R Square=.998 (Adjusted R Squared=. 995) Kemampuan ekstrak buah mengkudu dalam menghambat pertumbuhan bakteri ditunjukkan dengan terbentuknya zona hambat di sekitar kertas cakram. Zona hambat merupakan daerah bening di sekitar kertas cakram yang tidak ditumbuhi bakteri uji karena pada kertas cakram terkandung senyawa antibakteri. Semakin besar zona hambat yang terbentuk berarti kemampuannya sebagai antibakteri juga besar. Pada Tabel 2 terlihat adanya perbedaan nyata antar perlakuan ekstrak buah mengkudu terhadap luas zona hambat yang terbentuk. Pada konsentrasi 10% ekstrak buah mengkudu sudah dapat menghambat pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak buah mengkudu yang diberikan maka semakin besar pula zona hambat yang terbentuk. Pada perlakuan konsentrasi 0% (kontrol negatif; hanya menggunakan aquabidest steril) tidak terbentuk zona hambat. Aquabidest tidak bersifat sebagai antibakteri. Hasil dari penelitian Purwantiningsih dkk (2014) bahwa ekstrak buah mengkudu mengandung senyawa antibakteri yaitu flavonoid dan fenol. Kedua senyawa tersebut efektif menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Senyawa fenol dapat menghambat pertumbuhan bakteri dengan cara koagulasi protein dan lisis membran sel bakteri. Terjadinya lisis pada membran sel mengakibatkan kebocoran pada sel sehingga metabolit esensial yang dibutuhkan oleh mikroba keluar dari sel dan kemudian fenol di dalam sel akan merusak sistem kerja sel, merusak membran sitoplasma yang mengakibatkan terhambatnya pertumbuhan sel atau matinya sel, mendenaturasikan protein dan asam-asam nukleat, menghambat sintesis asam nukleat dan protein. Senyawa fenol telah dipelajari secara ekstensif sebagai desinfektan yang mempunyai aktivitas antibakteri berspektrum luas terhadap bakteri Gram positif ISSN X 5

6 Uji Bioaktifitas Antibakteri,..Dewi Novianti, Sainmatika,...Volume 11,...No.2,..Desember 2014, 1-7 dan Gram negatif (Oliver dkk., 2010). Menurut Rohman dkk (2006), senyawa fenol yang terdapat pada buah mengkudu berkisar antara 5,94 sampai 36,52 gram setara asam galat/100 g bahan kering. KESIMPULAN Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, maka dapat diambil kesimpulan sebagai berikut: 1. Ekstrak buah mengkudu memiliki kemampuan daya hambat terhadap pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae. 2. Pada konsentrasi 10% ekstrak buah mengkudu sudah dapat menghambat pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae, dan pada konsentrasi 80% didapatkan zona hambat yang tertinggi. 3. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak buah mengkudu yang diberikan maka semakin besar pula zona hambat yang terbentuk. SARAN Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mendapatkan senyawa murni dan penelitian lanjutan secara in vivo DAFTAR PUSTAKA Departemen Kesehatan RI Petunjuk Pemeriksaan Mikrobiologi. Jakarta. ( diakses 10 Juni 2010). Jawetz, E. 1995, Mikrobiologi untuk Profesi Kesehatan. Edisi 20. EGC. Jakarta. Madigan MT., JM, Martinko., PV, Dunlap., dan Clark Biology of Microorganisms. 12th edition. Pearson. San Francisco. Oliver, SP., BE. Gillespie., MJ. Lewis., S. J. Ivey., R. A. Almeida., D. A. Luther., DL. Johnson., K. C. Lamar., HD. Moorehead and HH.Dowlen Efficacy of a new Premilking Teat Disinfectant Containing a Phenolic Combination for the Prevention of Mastitis. J. Dairy Sci. 84: Rarasandy, L Bakteri Shigella dysenteriae Penyebab Penyakit Disentri. ( diakses 10 Mei 2015). ISSN X 6

7 Uji Bioaktifitas Antibakteri,..Dewi Novianti, Sainmatika,...Volume 11,...No.2,..Desember 2014, 1-7 Rohman, A., S. Riyanto, dan D. Utari Aktivitas Antioksidan, Kandungan Fenol Total dan Kandungan Flavonoid Total Ekstrak Etil Asetat Buah Mengkudu Serta Fraksi-fraksinya. Majalah Farmasi Indonesia 17: Usha, R., S. Sangeetha and P. Palaniswamy Antimicrobial activity of rarely known Species, Morinda citrifolia, L. Ethnobotanical Leaflet 14: Pelczar, MJ dan ECS, Chan Dasar Dasar Mikrobiologi. Jilid II. Penerjemah: Hadioetomo, RS., Tjitrosomo, SS., SL, Angka,dan T, Imas. Penerbit UI Press. Jakarta. Purwaningsih,TI.,.Suranindyah., dan Widodo Aktivitas Senyawa Fenol Dalam Buah Mengkudu (Morinda citrifolia) Sebagai Antibakteri Alami untuk Penghambatan Bakteri Penyebab Mastitis. Buletin Peternakan Vol. 38(1): 59-64, Februari 2014 ISSN ISSN X 7