III. METODOLOGI PENELITIAN

Transkripsi

1 III. METODOLOGI PENELITIAN 3.1. WAKTU DAN TEMPAT Penelitian ini merupakan bagian dari program SawitA yaitu suatu program kerjasama Fakultas Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor dan PT SMART Tbk dalam memanfaatkan minyak sawit mentah (MSMn) untuk mengatasi kekurangan vitamin A di Indonesia. Keseluruhan penelitian dilakukan pada bulan Mei 2011 hingga Maret Pengambilan data penerimaan sensori responden dilaksanakan pada bulan Mei 2011 hingga Juli 2011 berlokasi di Desa Neglasari dan Sukadamai, Kecamatan Dramaga, Kabupaten Bogor, Jawa Barat. Responden di Desa Neglasari berasal dari RT 01 RW 03, RT 02 RW 03, RT 03 RW 03, dan RT 04 RW 03. Pengambilan darah hanya dilakukan pada responden di RW 02 Desa Sukadamai, Kecamatan Dramaga, Kabupaten Bogor, Jawa Barat. Pemisahan komponen darah serta persiapan sampel eritrosit dilakukan di Laboratorium Biokimia Pangan Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan, dan analisis konsentrasi α-tokoferol eritrosit dilakukan di Laboratorium Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan (LD-ITP), Institut Pertanian Bogor BAHAN DAN ALAT Analisis Penerimaan Konsumen Bahan utama yang digunakan untuk mendukung analisis penerimaan konsumen produk SawitA yaitu produk SawitA Tumis dan Gurih. Produk SawitA Tumis terbuat dari minyak sawit mentah (MSMn) netto 140 ml/botol. Sedangkan produk SawitA Gurih terbuat dari minyak sawit merah tanpa fraksinasi (MSMTF) dan bawang merah kering netto 140 ml/botol. Produk SawitA diproduksi oleh tim produksi Program SawitA di Technopark Institut Pertanian Bogor. Alat yang digunakan berupa brosur yang berisi tentang pengenalan minyak sawit mentah dan program SawitA dan leaflet tentang cara mengkonsumsi produk SawitA. Selain itu, digunakan juga kuisioner sebagai panduan dalam melakukan wawancara terhadap responden Analisis Konsentrasi α-tokoferol Eritrosit Bahan yang digunakan untuk analisis konsentrasi α-tokoferol eritrosit yaitu sampel eritrosit dari 4 responden sebelum dan sesudah pengkonsumsian minyak sawit mentah (MSMn), metanol, asam askorbat, heptana, larutan standar rac-all-α-tokoferol, fase gerak berupa metanol dan air serta nitrogen. Alat yang digunakan untuk analisis ini adalah syringe pengambilan darah, vial 5 ml, freezer dengan suhu (-20 0 C), tabung sentrifuse 10 ml, labu takar 10 ml, gelas ukur 50 ml, aluminium foil, sudip, label, stopwatch, bulb, pipet Mohr, mikropipet µl, mikropipet µl, vortex mixer, sentrifuse, sonikator dan HPLC dengan kolom silika C 18 dengan spesifikasi pada Tabel

2 Tabel 18. Kondisi HPLC untuk analisis konsentrasi α-tokoferol Kondisi Deskripsi Kolom Zorbax C mm x i.d. 4.6 mm nucleosil 5μm Fase gerak 98 % metanol / 2 % isopropanol Laju alir fase gerak 1 ml/menit Suhu operasi suhu kamar Detektor UV pada 292 nm Volume injeksi 300 μl 3.3. PEMILIHAN RESPONDEN Responden Analisis Penerimaan Konsumen Pada penelitian ini pemilihan responden untuk analisis penerimaan konsumen dilakukan dengan metode non probability sampling (NPS), yaitu seleksi unsur populasi berdasarkan pertimbangan peneliti sehingga tidak setiap orang memiliki kesempatan untuk dipilih dalam suatu populasi. Pertama dilakukan penentuan daerah yang merupakan sasaran Dinas Kesehatan Kabupaten Bogor dalam mengatasi kekurangan vitamin A di Kabupaten Bogor. Kecamatan Dramaga merupakan salah satu kecamatan yang memiliki lebih dari keluarga pra sejahtera yang masih sulit mengakses informasi dan pelayanan kesehatan. Kemudian dilakukan pengocokan terhadap 10 desa di Kecamatan Dramaga dan terpilih dua Desa yaitu Desa Neglasari dan Desa Sukadamai sebagai wilayah penelitian. Setelah dipilih wilayah penelitian dilakukan pemilihan responden secara simple random sampling dengan pendataan kepala keluarga prasejahtera di RT 01 RW 03 Desa Neglasari, RT 02 RW 03 Desa Neglasari, RT 04 RW 03 Desa Neglasari, dan RW 02 Desa Sukadamai. Pemilihan responden dilakukan berdasarkan pertimbangan peneliti yaitu dengan menyesuaikan responden yang akan digunakan sesuai dengan tujuan penelitian. Pemilihan responden dilakukan dengan pendataan kepala keluarga prasejahtera berdasarkan data kependudukan di Kantor Kepala Desa Neglasari dan Sukadamai. Kemudian dilakukan pengundian sampai didapatkan 78 responden. Responden pada penelitian ini terdiri dari anak berumur 1-2 tahun (baduta), anak berumur < 5 tahun (balita), remaja putri, ibu hamil, ibu menyusui, ibu biasa dan manula. Jumlah proporsi baduta, balita, remaja putri, ibu hamil, ibu menyusui, ibu biasa dan manula tidak ditentukan dalam penelitian ini, namun memenuhi ketentuan jumlah sampling. Sebagian besar responden diambil dari populasi ibu yang mempunyai peranan penting dalam kesehatan keluarga. Orang-orang yang terpilih sebagai responden adalah mereka yang mau mengikuti kegiatan penelitian ini selama 2 bulan, tanpa paksaan, dan telah menandatangani Informed Concern yang diajukan Responden Analisis Konsentrasi α-tokoferol Eritrosit Mengingat program SawitA merupakan proyek besar yang dilaksanakan untuk beberapa parameter penelitian, maka Desa Sukadamai dipilih menjadi salah satu daerah dimana responden akan diambil darahnya sebelum dan setelah pengkonsumsian produk SawitA. Responden pada penelitian ini tidak ditujukan untuk mewakili dari populasi manapun. Pemilihan responden untuk analisis konsentrasi α-tokoferol eritrosit bersifat tidak acak, secara sengaja dan hanya ibu-ibu saja. Responden yang diambil darahnya juga disyaratkan memiliki kondisi kesehatan yang baik. Responden terdiri dari populasi ibu menyusui yang dianggap memiliki peranan penting dalam asupan vitamin bagi anaknya. 32

3 Pemilihan responden berdasarkan data baduta dan ibu menyusui di posyandu RW 02 Desa Sukadamai. Terdapat 3 orang ibu yang bersedia menjadi responden yang diambil darah serta memiliki karakteristik sesuai dengan tujuan penelitian. Responden ibu berasal dari kelompok ibu menyusui yang dianggap mempengaruhi asupan vitamin kepada anaknya. Ibu-ibu yang terpilih sebagai responden adalah mereka yang mau mengikuti kegiatan penelitian ini selama 2 bulan, tanpa paksaan, telah menandatangani Informed Concern yang diajukan dan bersedia diambil darahnya. Responden akan diambil darahnya sebanyak dua kali yaitu sebelum dan sesudah pengkonsumsian produk SawitA. Penelitian ini tidak menggunakan placebo mengingat tujuan dalam penelitian mengenai perlunya edukasi dan tambahan pengetahuan akan manfaat MSMn TAHAPAN PENELITIAN Tahap penelitian ini terbagi menjadi dua tahapan besar yaitu analisis penerimaan konsumen dan analisis konsentrasi α-tokoferol eritrosit. Analisis penerimaan konsumen dilakukan dengan menggunakan metode Home Use Test (HUT). Analisis konsentrasi α-tokoferol eritrosit dilakukan dengan menggunakan instrumen High Performance Liquid Chromatography (HPLC) mengacu pada metode dari penelitian Bieri et al. (1979) Analisis Penerimaan Konsumen Analisis penerimaan konsumen dilakukan dalam tiga tahap kegiatan, yaitu sosialisasi, pemberian produk di rumah, dan 3) monitoring Tahap Sosialisasi Produk SawitA merupakan produk baru yang belum dikenal masyarakat. Sosialisasi sangat diperlukan untuk memperkenalkan produk meliputi manfaat dan cara penggunaan kepada masyarakat. Tahap sosialisasi dilakukan pada warga yang telah bersedia untuk menjadi responden. Sosialisasi produk SawitA dilakukan di tempat yang strategis yaitu di posyandu dan Sekolah Dasar Negeri 1 Desa Neglasari. Sosialisasi dilakukan sebanyak tiga kali selama dua bulan, yaitu pada awal, tengah, dan akhir kegiatan Program SawitA. Pada awal bulan pertama, kegiatan sosialisasi dilakukan sebelum pemberian produk SawitA berupa wawancara mengenai karakteristik responden berdasarkan demografi, kebiasaan makan responden dan pengetahuan awal responden mengenai minyak sawit dan vitamin A. Selanjutnya, pada pertemuan massal dilakukan pemberian pengetahuan umum mengenai sumber vitamin A dan manfaatnya bagi kesehatan, kelapa sawit dan produknya, program sawita, manfaat dan cara penggunaan produk SawitA, kemudian disusul dengan pemberian produk SawitA secara cuma-cuma kepada responden. Pada pertemuan massal juga dilakukan berbagai kegiatan berupa olahraga bersama, penyuluhan, pembagian produk SawitA, demo masak, dan diskusi mengenai produk SawitA. Sosialisasi kedua dilaksanakan pada akhir bulan pertama, dimana responden telah menggunakan produk SawitA selama sebulan. Pada sosialisasi kedua dilaksanakan kembali pertemuan massal dengan kegiatan yang hampir sama, dilakukan penguatan informasi mengenai produk SawitA. Selain itu, dilakukan diskusi mengenai pengalaman responden selama menggunakan produk SawitA, kemudian dilakukan pergantian produk dari produk CPO menjadi produk MSMTF yang dikenal dengan SawitA Gurih. Sosialisasi ketiga dilaksanakan pada akhir bulan kedua. Sosialisasi dilakukan dengan meninjau kembali tanggapan responden terhadap produk SawitA Gurih. Selain itu, dilakukan penimbangan berat badan bagi anak baduta dan balita, demo masak, permainan interaktif mengenai 33

4 pengetahun responden terhadap produk SawitA dan manfaatnya, dan lomba memasak dengan menggunakan produk SawitA. Pada akhir kegiatan, beberapa responden menyampaikan pesan dan kesan selama mengikuti program SawitA Pemberian Produk di Rumah Produk SawitA dibagikan dan dikonsumsi responden setelah kegiatan sosialisasi. Produk SawitA dikonsumsi secara aktual dan tanpa ada campur tangan peneliti perihal cara penyajian dan konsumsinya. Uji ini dinamakan Home Use Test (HUT), dimana pengujian produk sepenuhnya diserahkan kepada responden, baik jenis maupun jumlah masakan yang ditambahkan, namun memenuhi ketentuan penggunaan. Penggunaan produk SawitA disarankan dengan menambahkan pada makanan matang, dikonsumsi langsung maupun sebagai pengganti minyak goreng untuk menumis. Responden juga diperbolehkan untuk mengkonsumsi produk SawitA dengan cara lain sesuai dengan kebiasaan mengkonsumsi sehari-hari. Produk yang diberikan kepada responden ada dua yaitu SawitA MSMn Tumis dan SawitA MSMTF Gurih. Produk SawitA yang diberikan sebanyak 1 botol 140 ml/keluarga cukup untuk memenuhi kebutuhan vitamin A keluarga selama seminggu dengan takaran penggunaan sebanyak 4 ml/orang/hari atau setara dengan 1-2 sendok/per hari. Produk SawitA didistribusikan setiap minggu untuk mengontrol pengkonsumsian. Responden di Desa Neglasari mendapatkan produk SawitA Tumis pada bulan pertama dan SawitA Gurih pada bulan kedua. Sedangkan responden di Desa Sukadamai hanya mendapatkan produk SawitA Tumis. Hal ini bertujuan untuk mempermudah pengontrolan responden di Desa Sukadamai yang akan diambil darahnya Monitoring Monitoring dilakukan seminggu sekali selama dua bulan masa penelitian dengan melakukan wawancara langsung kepada responden. Mengingat pengujian produk SawitA dilakukan di rumah masing-masing responden sehingga tidak dapat dikontrol secara penuh oleh peneliti, maka responden perlu diingatkan untuk mengkonsumsi produk SawitA. Oleh karena itu, dilakukan pengontrolan terhadap pengkonsumsian produk SawitA dengan melihat isi produk dalam kemasan, apabila isi produk telah mencapai kurang dari setengah botol maka responden mendapatkan satu botol produk SawitA baru. Wawancara dilakukan dengan menanyakan respon terhadap produk SawitA yang telah diberikan pada atribut rasa, warna, aroma dan overall, kesan dan cara mengkonsumsi. Penilaian respon dari responden dilakukan menggunakan kuesioner. Kuisioner yang digunakan sebagai panduan wawancara untuk mempermudah pengambilan data penerimaan konsumen. Kuesioner diberikan sebanyak lima kali selama dua bulan. Kuisioner didapatkan dari Program SawitA. Kuisioner terdiri dari pertanyaan-pertanyaan sesuai dengan tujuan penelitian yang selanjutnya akan ditanyakan kepada responden. kuisioner terkait dapat dilihat pada Lampiran 2. Kuisioner dibedakan menjadi 2 yaitu (a) kuisioner untuk responden ibu dan balita, dan (b) kuisioner untuk responden diluar ibu dan balita seperti anak dan orang tua. Respon balita tidak ditanyakan langsung, namun ditanyakan kepada ibu yang mengamati respon anaknya. Selama monitoring juga dilakukan penguatan kembali informasi responden terhadap produk SawitA. Hasil monitoring berupa pola konsumsi responden yang meliputi tingkat kesukaan responden terhadap produk, cara konsumsi yang paling sering dilakukan, pengaruh keberadaan produk terhadap penggunaan minyak goreng, dan prediksi respon apabila produk dijual di pasaran. Selain itu, 34

5 responden juga diminta untuk membandingkan produk mana yang lebih disukai antara SawitA Tumis dan Gurih Analisis Konsentrasi α-tokoferol Eritrosit Analisis konsentrasi α-tokoferol eritrosit dilakukan dalam dua tahap kegiatan, yaitu pengambilan darah dan analisis laboratorium Pengambilan Darah Pengambilan darah dilakukan sebelum dan sesudah pengkonsumsian produk minyak sawit mentah (MSMn) SawitA. Sebelum dilakukan pengambilan darah, peneliti menjelaskan pada responden mengenai tujuan dilakukannya pengambilan darah. Responden selanjutnya menandatangani Informed Concern (surat persetujuan) untuk diambil darahnya. Pengambilan darah dilakukan di balai Desa Sukadamai oleh perawat dari Puskesmas Dramaga yang memiliki sertifikat berkompeten pada pekerjaan tersebut. Responden harus dalam keadaan nyaman dan tanpa paksaan, maka sebelum pengambilan darah dilakukan pengukuran tensi darah terlebih dahulu. Ruangan dan peralatan yang digunakan dalam keadaan bersih, steril dan nyaman. Sampel darah diambil dengan menggunakan syringe sekali pakai sebanyak 12 ml, kemudian segera dimasukkan ke dalam falcon steril dan disentrifus 2000 rpm selama 30 menit. Sentrifugasi dilakukan di Laboratorium Biokimia Pangan Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan IPB. Eritrosit, plasma dan platelet masing-masing dipisahkan pada tempat yang berbeda, lalu disimpan dalam freezer -20 o C Analisis Laboratorium Konsentrasi α-tokoferol Eritrosit Analisis konsentrasi α-tokoferol dilakukan pada sampel eritrosit dengan menggunakan instrumen High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Prinsip dasar instrumen tersebut adalah memisahkan setiap komponen dalam sampel pada panjang gelombang dan waktu retensi tertentu untuk selanjutnya diidentifikasi secara kualitatif berdasarkan luas area. Tahapan analisis konsentrasi α-tokoferol terdiri dari 3 sub analisis, antara lain : 1. Persiapan fase gerak dan instrumen HPLC Fase gerak yang digunakan pada analisis konsentrasi α-tokoferol dalam eritrosit adalah campuran metanol : isopropanol dengan perbandingan 98 : 2. Sebelum fase gerak digunakan ke dalam instrumen HPLC, dilakukan sonikasi terlebih dahulu selama 30 menit dengan tujuan menghilangkan gelembung udara dalam larutan fase gerak. Selanjutnya, dilakukan conditioning instrumen HPLC dengan pelarut selama 1 jam. 2. Pembuatan larutan standar α-tokoferol Tahap analisis konsentrasi α-tokoferol eritrosit diawali dengan pembuatan kurva standar α- tokoferol yang dilakukan dengan cara membuat larutan stok standar α-tokoferol (1000 µg/ml) dengan menimbang 10 mg standar all-rac-α-tokoferol dalam labu takar 10 ml, kemudian dilarutkan dengan fase gerak yaitu metanol:isopropanol (98 : 2) hingga tanda tera. Tahap selanjutnya yaitu pembuatan larutan stok primer standar α-tokoferol (100 µg/ml) dengan mengambil 1 ml larutan stok α-tokoferol ke dalam labu takar 10 ml dan ditepatkan dengan fase gerak hingga tanda tera. Kemudian, pembuatan larutan stok sekunder standar α-tokoferol (50 µg/ml) dilakukan dengan mengambil 5 ml larutan stok 35

6 α-tokoferol ke dalam labu takar 10 ml, kemudian larutan ditepatkan dengan menambahkan fase gerak hingga tanda tera. Pembuatan deret ukur kurva standar α-tokoferol volume 1 ml dengan mencampurkan larutan stok sekunder dengan fase gerak sesuai proporsi pada Tabel 19. Tahap terakhir dilakukan pengukuran luas area standar pada panjang gelombang 292 nm. Konsentrasi (ppm) Tabel 19. Pembuatan larutan standar α-tokoferol Keterangan μl larutan standar 50 μg/ml ditambah dengan 950 μl fase gerak μl larutan standar 50 μg/ml ditambah dengan 900 μl fase gerak μl larutan standar 50 μg/ml ditambah dengan 800 μl fase gerak μl larutan standar 50 μg/ml ditambah dengan 750 μl fase gerak μl larutan standar 50 μg/ml ditambah dengan 700 μl fase gerak 3. Analisis konsentrasi α-tokoferol eritrosit Analisis konsentrasi α-tokoferol eritrosit dilakukan dengan mengacu pada metode Bieri et al. (1979) dengan beberapa modifikasi. Tahap pengukuran konsentrasi α-tokoferol diawali dengan persiapan sampel. Sampel eritrosit setelah di-thawing pada suhu ruang dan divorteks, sampel tersebut diambil 500 µl sel eritrosit ke dalam tabung sentrifuse dan ditambahkan dengan 500 µl metanol dingin (mengandung 0.15 g asam askorbat), lalu divortex selama 20 detik. Selanjutnya, Sampel tersebut ditambahkan dengan 2 ml heptana dan vortex kembali selama 5 menit. Kemudian sampel disentrifus pada kecepatan 3500 rpm selama 10 menit, suhu 4 o C. Setelah disentrifus, bagian supernatan diambil sebanyak 1.65 ml ke dalam vial. Tahap terakhir, sampel dipekatkan dengan nitrogen. Sebelum diinjeksi ke dalam instrumen HPLC, sampel terlebih dahulu dilarutkan dengan 300 µl fase gerak. Konsentrasi α-tokoferol didapatkan dengan menghitung konsentrasi α-tokoferol menggunakan kurva standar, kemudian memasukkannya ke dalam perhitungan berikut: Konsentrasi α-tokoferol (mg/ml) = [tokoferol standar] x volume tokoferol injeksi volume sampel eritrosit 3.5. PENGOLAHAN DAN ANALISIS DATA Data yang dihasilkan pada tahap sosialisasi dan monitoring dianalisis dengan menggunakan analisis univariat. Variabel yang dianalisis yaitu karakteristik responden meliputi kelompok usia, jenis kelamin, pekerjaan, pendidikan, dan pendapatan per kapita, pola konsumsi keluarga. Selain itu, dilihat pula pengetahuan responden tentang kelapa sawit dan produknya baik sebelum maupun setelah sosialisasi. Analisis ini juga digunakan untuk menganalisis perilaku mengkonsumsi produk meliputi kebiasaan makan keluarga, frekuensi mengkonsumsi, cara responden mengkonsumsi produk sawita, dan gambaran perbaikan kesehatan responden setelah mengkonsumsi produk SawitA. Pada analisis penerimaan konsumen terhadap produk SawitA, responden mengidentifikasi atribut-atribut meliputi rasa, aroma, dan warna, serta karakteristik produk yang lebih disukai. Variabel-variabel tersebut dianalisis secara deskriptif dalam ukuran persentase, rata-rata, standar deviasi, dan nilai maksimumminimum. Pengolahan dan analisis data dilakukan dengan menggunakan IBM SPSS 20 dan Microsoft excel