HASIL DAN PEMBAHASAN. Tabel 1 Aktivitas antibakteri filtrat daun sengggugu Diameter zona hambat. Tabel 2 Polaritas beberapa pelarut

Transkripsi

1 6 Model rancangannya adalah sebagai berikut: Yij = µ + τi + εij Yij = Diameter zona hambat pada dosis ke-i dan ulangan ke-j µ = Pengaruh rataan umum τ = Pengaruh dosis ke-i ε =Pengaruh acak pada dosis ke-i ulangan ke-j dengan i: 1 = 5 mg/ml 2 = 25 mg/ml 3 = 125 mg/ml 4 = 75 mg/ml 5 = 3 mg/ml 6 = 15 mg/ml 7 = 1 mg/ml 8 = 5 mg/ml 9 = 2 mg/ml 1 = 1 mg/ml 11=.8 mg/ml 12=.5 mg/ml 13=.2 mg/ml 14=.1 mg/ml 15=.5 mg/ml j: 1, 2. Rancangan ini digunakan pada uji antibakteri penentuan KHTM menggunakan metode Bintang. Data yang diperoleh dianalisis dengan ANOVA (analysis of variance) pada tingkat kepercayaan 95% dan taraf α.5. Uji lanjut yang digunakan adalah uji Tukey. Semua data dianalisis dengan program SPSS 13.. HASIL DAN PEMBAHASAN Aktivitas Antibakteri Filtrat Daun Senggugu Uji pendahuluan yang dilakukan adalah uji aktivitas antibakteri dari filtrat daun senggugu. Daun senggugu dipisahkan antara daun tua dengan daun muda. Hal ini dilakukan untuk melihat daun mana yang lebih besar aktivitas antibakterinya, yang nantinya digunakan untuk penelitian selanjutnya, yaitu uji aktivitas antibakteri dan uji fitokimia. Dapat dilihat pada Tabel 1 bahwa diameter zona hambat antara daun muda dan daun tua tidak terlalu berbeda. Daun yang dipilih untuk penelitian selanjutnya adalah daun tua, karena ketersediannya yang lebih banyak dibandingkan dengan daun muda. Tabel 1 Aktivitas antibakteri filtrat daun sengggugu Diameter zona hambat Bakteri Uji daun (mm) Tua Muda E. coli P. aeruginosa S. aureus B. subtilis Ekstraksi dan Rendemen Hasil Ekstraksi Penelitian ini menggunakan metode maserasi untuk mengekstrak daun senggugu. Metode ini dipilih karena sederhana. Untuk zat-zat yang tidak tahan panas, maserasi merupakan metode yang cocok digunakan. Proses maserasi itu sendiri adalah perendaman sampel dengan pelarut dalam jangka waktu tertentu dengan atau tanpa pengadukan. Proses maserasi pada penelitian ini selama 24 jam dengan menggunakan shaker dengan kecepatan 1 rpm secara terus menerus. Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi dalam penelitian ini adalah heksana, aseton, dan metanol. Pemilihan ketiga pelarut ini dimaksudkan untuk mencari senyawa yang terdapat dalam daun senggugu baik polar, semipolar, atau nonpolar yang aktivitas antibakterinya paling besar. Salah satu ekstrak dari ketiga pelarut yang aktivitas antibakterinya paling besar nantinya digunakan untuk penelitian selanjutnya, yaitu untuk penentuan Konsentrasi Hambat Tumbuh Minimum (KHTM) dan uji fitokimia. Ekstraksi dengan pelarut-pelarut ini didasarkan pada prinsip ekstraksi yang disebut like disolve like, pelarut akan melarutkan senyawa sesuai dengan kepolarannya (Khopkar 199). Tabel 2 menunjukkan tingkat kepolaran masingmasing pelarut. Ekstrak yang digunakan pada penelitian ini yaitu ekstrak dari daun senggugu kering. Daun senggugu kering ini dipakai karena daya tahan penyimpanannya yang lebih lama dibandingkan dengan yang segar, sehingga rusak akibat jamur dan mikroba lainnya dapat diperkecil. Daun senggugu kering ini diekstraksi dengan ketiga macam pelarut, kemudian dirotavaporasi pada suhu 5 C sehingga semua pelarut hilang, dan akhirnya didapatkan ekstrak. Zona hambat ekstrak daun senggugu kering dari ketiga macam pelarut dapat dilihat pada Gambar 2. Konsentrasi masing-masing ekstrak daun senggugu adalah sebesar 25% atau 25 mg/ml, yaitu 25 mg ekstrak dalam 1 ml pelarut. Tabel 2 Polaritas beberapa pelarut Pelarut Polaritas Air.9 Metanol.73 Aseton.47 Heksana. (Mukhopadhyay 22 dalam Melawati 26)

2 Zona Hambat (mm) E. coli P. aeruginosa S. aureus B. subtilis bakteri uji Gambar 2 Aktivitas antibakteri berbagai ekstrak daun senggugu kering 25 mg/ml metanol ( ) aseton ( ) heksan ( ). Ekstrak aseton memiliki zona hambat paling besar, yaitu sebesar 5.75 mm pada bakteri E. coli, mm pada P. aeruginosa, mm pada S. aureus, dan 7.3 mm pada B. subtilis. Hal ini mungkin karena senyawa yang diduga sebagai antibakteri merupakan senyawa semipolar yang dapat dilarutkan oleh aseton, sedangkan aseton sendiri tidak memiliki aktivitas antibakteri. Selanjutnya ekstrak aseton digunakan untuk menentukan KHTM dan untuk uji fitokimia. Gambar 2 juga menunjukkan bahwa ekstrak heksana tidak memiliki aktivitas antibakteri, ditunjukkan dengan zona hambat yaitu sebesar. mm. Hal ini terjadi mungkin karena senyawa nonpolar dalam daun senggugu, yang diduga sebagai senyawa antibakteri menguap akibat pemanasan. Selain itu, hal ini diduga karena metode ekstraksi dan jenis pelarut yang digunakan dalam mengekstrak daun senggugu untuk menghasilkan ekstrak non polar juga belum tepat, sehingga senyawa non polar yang aktif tidak terekstrak bersama pelarut. Rendemen yang dihasilkan dari hasil ekstraksi metanol, heksana, dan aseton dapat dilihat pada Tabel 3. Metanol menghasilkan rendemen ekstrak paling besar dibandingkan dengan pelarut lainnya yaitu sebesar %. Hal ini menunjukkan bahwa senyawa yang paling banyak terdapat pada daun senggugu adalah senyawa polar. Jumlah rendemen dari daun senggugu dengan ketiga pelarut adalah kecil. Jumlah rendemen yang terhitung besar yaitu diatas 2%. Jumlah rendemen yang banyak, belum tentu menghasilkan aktivitas antibakteri yang besar pula. Karena rendemen yang banyak belum tentu semuanya senyawa aktif yang berpotensi sebagai antibakteri. Untuk itu perlu dilakukan metode dan penggunaan jenis pelarut lainnya untuk menghasilkan rendemen yang banyak dengan aktivitas yang besar. Tabel 3 Rendemen daun senggugu hasil maserasi metanol, aseton, dan heksana Pelarut Bobot ekstrak Rendemen Metanol g % Aseton g 5.87 % Heksana.9725 g 3.22 % Analisis Kadar Air dan Fitokimia Kadar air pada tumbuhan menunjukkan persen bahan kering pada tumbuhan dan menyatakan ketahanan tumbuhan dalam penyimpanan (Haryadi 1993). Daun senggugu memiliki kadar air sebesar 78.44%.Kadar air daun senggugu yang begitu besar menunjukkan bahwa daun senggugu tidak bisa disimpan terlalu lama, kemungkinan rusak karena jamur sangat besar. Kadar air yang baik bagi tumbuhan untuk penyimpanan yang cukup lama adalah sebesar 1% (Tiagarna 24). Oleh karena itu dalam penelitian ini digunakan daun kering. Uji fitokimia dilakukan untuk mengetahui secara kualitatif adanya golongan senyawa aktif dalam tumbuhan yang diharapkan dapat berperan sebagai senyawa antibakteri. Menurut Pelczar dan Chan (1988), senyawasenyawa metabolit seperti flavonoid, tanin, alkohol, klor, iodium, dan etilen oksida, dapat bersifat sebagai antimikrob. Hasil dari uji fitokimia ekstrak aseton daun senggugu dapat dilihat pada Tabel 4. Daun senggugu pada penelitian ini hanya memiliki senyawa alkaloid dan steroid. Adanya senyawa alkaloid ini ditandai dengan terbentuknya endapan cokelat pada pereaksi Wagner, endapan putih pada pereaksi Mayer, dan endapan merah pada pereaksi Dragendorf. Hasil positif steroid ditandai dengan terbentuknya warna hijau kebiruan. Gambar uji fitokimia dapat dilihat pada lampiran 15. Berbeda dengan penelitian ini, Dalimarta (2), menyatakan bahwa daun senggugu mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, dan triterpenoid. Dalimarta (2) dalam bukunya tidak menyebutkan bagaimana daun senggugu itu diekstraksi, dengan pelarut apa, dan dengan kondisi daun yang bagaimana. Jadi mungkin saja bila hasil uji fitokimia anatara Dalimarta (2) dengan penelitian yang dilakukan kali ini berbeda.

3 1 Tabel 4 Hasil uji fitokimia ekstrak aseton daun senggugu kering Senyawa Hasil Sampel Dalimarta (2) Pembanding Alkaloid + + Daun tapak dara Flavonoid - + Buah pinang Steroid Triterpenoid Saponin - - Som Jawa Tanin - - Daun teh Penelitian ini menggunakan pelarut aseton yang sifatnya semipolar, jadi ekstrak yang dihasilkan hanya mengandung senyawasenyawa semipolar, sedangkan flavonoid merupakan senyawa larut air yang sifatnya polar, baik diekstraksi dengan etanol 7% (Suradikusumah 1989). Jadi pada penelitian ini tidak ditemukan senyawa flavonoid, atau mungkin bila ditemukan, jumlahnya sangat kecil. Triterpenoid merupakan golongan senyawa terpen. Penelitian ini tidak menemukan adanya senyawa triterpenoid dalam daun senggugu, berbeda dengan Dalimarta (2) yang menyatakan bahwa daun senggugu mengandung senyawa triterpenoid. Hal ini mungkin disebabkan karena ada beberapa senyawa triterpenoid seperti monoterpenoid dan sisterpenoid yang merupakan salah satu senyawa yang diduga sebagai antibakteri hilang pada saat proses pengeringan daun. Menurut Harborne (1987), alkaloid merupakan senyawa metabolit terbesar yang terdapat dalam tumbuhan. Alkaloid mengandung atom nitrogen dan sering digunakan dalam bidang pengobatan. Alkaloid biasanya berbentuk kristal, bersifat optis aktif, dan tidak berwarna. Fungsi alkaloid dalam tumbuhan belum begitu jelas, namun menurut Dzulkarnaen et.al (1996), alkaloid dalam daun Psidium guajava dapat bersifat sebagai antibakteri. Steroid banyak terdapat di alam sebagai fraksi lipid dari tanaman atau hewan. Zat ini penting sebagai pengatur aktivitas biologis dalam organisme hidup. Steroid dibentuk oleh bahan yang disebut sterol. Sterol yang terdapat dalam jaringan tumbuhan sering dinamakan fitosterol (Martin 1987). Steroid pada tumbuhan terdapat dalam lapisan lilin daun yang berfungsi sebagai pelindung dari serangga. Menurut Zhu et al. (2), steroid dapat menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif. Senyawa yang juga berperan dalam pertahanan tumbuhan adalah flavonoid (Harborne 1987). Flavonoid merupakan senyawa fenol terbesar di alam. Flavonoid merupakan turunan dari flavon. Flavonoid terutama larut dalam air, dan dapat diekstraksi dengan etanol 7%. Flavonoid dalam tumbuhan terikat dalam gula sebagai glikosida (Suradikusumah 1989). Menurut Dzulkarnaen et al. (1996), flavonoid dapat menghambat pertumbuhan bakteri S. aureus. Penentuan Konsentrasi Hambat Tumbuh Minimum (KHTM) KHTM ditentukan untuk mengetahui konsentrasi terkecil yang masih bisa menghambat pertumbuhan bakteri uji. Ekstrak yang digunakan dalam penentuan KHTM ini adalah ekstrak aseton dari daun senggugu kering. Alasan memakai ekstrak aseton karena zona hambat pertumbuhan bakterinya paling besar. Menurut Suryawiria (1978), aktivitas antibakteri dapat digolongkan berdasarkan besarnya zona hambat yang terbentuk (Tabel 5). Aktivitas antibakteri yang tergolong lemah adalah yang memiliki zona hambat kurang dari 5 mm, sedangkan yang yang tergolong sedang zona hambatnya berkisar antara 5 mm sampai 1 mm, yang tergolong kuat zona hambatnya berkisar antara 1 sampai 2 mm, dan yang tergolong sangat kuat zona hambatnya lebih dari 2 mm. Konsentrasi yang dipakai dalam penentuan KHTM ini bervariasi, yaitu dari 1 mg/ml sampai 5 mg/ml. Tiap-tiap bakteri memiliki konsentrasi hambat tumbuh minimum yang berbeda-beda. Ekstrak daun senggugu pada konsentrasi 2 mg/ml dapat menghambat bakteri P. aeruginosa dengan zona hambat. mm. Jadi konsentrasi terkecil ekstrak daun senggugu kering yang masih bisa menghambat bakteri P. aeruginosa adalah 3 mg/ml, dengan zona hambat sebesar 1.85 mm. Sedangkan pada konsentrasi 1 mg/ml, ekstrak daun senggugu dapat menghambat bakteri S. aureus, B. subtilis, E.

4 8 Tabel 4 Hasil uji fitokimia ekstrak aseton daun senggugu kering Senyawa Hasil Sampel Dalimarta (2) Pembanding Alkaloid + + Daun tapak dara Flavonoid - + Buah pinang Steroid Triterpenoid Saponin - - Som Jawa Tanin - - Daun teh Penelitian ini menggunakan pelarut aseton yang sifatnya semipolar, jadi ekstrak yang dihasilkan hanya mengandung senyawasenyawa semipolar, sedangkan flavonoid merupakan senyawa larut air yang sifatnya polar, baik diekstraksi dengan etanol 7% (Suradikusumah 1989). Jadi pada penelitian ini tidak ditemukan senyawa flavonoid, atau mungkin bila ditemukan, jumlahnya sangat kecil. Triterpenoid merupakan golongan senyawa terpen. Penelitian ini tidak menemukan adanya senyawa triterpenoid dalam daun senggugu, berbeda dengan Dalimarta (2) yang menyatakan bahwa daun senggugu mengandung senyawa triterpenoid. Hal ini mungkin disebabkan karena ada beberapa senyawa triterpenoid seperti monoterpenoid dan sisterpenoid yang merupakan salah satu senyawa yang diduga sebagai antibakteri hilang pada saat proses pengeringan daun. Menurut Harborne (1987), alkaloid merupakan senyawa metabolit terbesar yang terdapat dalam tumbuhan. Alkaloid mengandung atom nitrogen dan sering digunakan dalam bidang pengobatan. Alkaloid biasanya berbentuk kristal, bersifat optis aktif, dan tidak berwarna. Fungsi alkaloid dalam tumbuhan belum begitu jelas, namun menurut Dzulkarnaen et.al (1996), alkaloid dalam daun Psidium guajava dapat bersifat sebagai antibakteri. Steroid banyak terdapat di alam sebagai fraksi lipid dari tanaman atau hewan. Zat ini penting sebagai pengatur aktivitas biologis dalam organisme hidup. Steroid dibentuk oleh bahan yang disebut sterol. Sterol yang terdapat dalam jaringan tumbuhan sering dinamakan fitosterol (Martin 1987). Steroid pada tumbuhan terdapat dalam lapisan lilin daun yang berfungsi sebagai pelindung dari serangga. Menurut Zhu et al. (2), steroid dapat menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif. Senyawa yang juga berperan dalam pertahanan tumbuhan adalah flavonoid (Harborne 1987). Flavonoid merupakan senyawa fenol terbesar di alam. Flavonoid merupakan turunan dari flavon. Flavonoid terutama larut dalam air, dan dapat diekstraksi dengan etanol 7%. Flavonoid dalam tumbuhan terikat dalam gula sebagai glikosida (Suradikusumah 1989). Menurut Dzulkarnaen et al. (1996), flavonoid dapat menghambat pertumbuhan bakteri S. aureus. Penentuan Konsentrasi Hambat Tumbuh Minimum (KHTM) KHTM ditentukan untuk mengetahui konsentrasi terkecil yang masih bisa menghambat pertumbuhan bakteri uji. Ekstrak yang digunakan dalam penentuan KHTM ini adalah ekstrak aseton dari daun senggugu kering. Alasan memakai ekstrak aseton karena zona hambat pertumbuhan bakterinya paling besar. Menurut Suryawiria (1978), aktivitas antibakteri dapat digolongkan berdasarkan besarnya zona hambat yang terbentuk (Tabel 5). Aktivitas antibakteri yang tergolong lemah adalah yang memiliki zona hambat kurang dari 5 mm, sedangkan yang yang tergolong sedang zona hambatnya berkisar antara 5 mm sampai 1 mm, yang tergolong kuat zona hambatnya berkisar antara 1 sampai 2 mm, dan yang tergolong sangat kuat zona hambatnya lebih dari 2 mm. Konsentrasi yang dipakai dalam penentuan KHTM ini bervariasi, yaitu dari 1 mg/ml sampai 5 mg/ml. Tiap-tiap bakteri memiliki konsentrasi hambat tumbuh minimum yang berbeda-beda. Ekstrak daun senggugu pada konsentrasi 2 mg/ml dapat menghambat bakteri P. aeruginosa dengan zona hambat. mm. Jadi konsentrasi terkecil ekstrak daun senggugu kering yang masih bisa menghambat bakteri P. aeruginosa adalah 3 mg/ml, dengan zona hambat sebesar 1.85 mm. Sedangkan pada konsentrasi 1 mg/ml, ekstrak daun senggugu dapat menghambat bakteri S. aureus, B. subtilis, E.

5 9 coli dengan zona hambat. mm. Jadi konsentrasi terkecil ekstrak daun senggugu kering yang masih bisa menghambat bakteri S. aureus, B. subtilis, E. coli adalah 2 mg/ml. Ekstrak daun senggugu yang tergolong lemah dalam menghambat pertumbuhan bakteri P. aeruginosa yaitu pada konsentrasi 3 mg/ml sampai 1 mg/ml dengan zona hambat berkisar dari 1.85 mm sampai 4.43 mm, sedangkan pada konsentrasi 5 mg/ml sampai 5 mg/ml, aktivitas antibakteri ekstrak daun senggugu tergolong sedang dengan zona hambat berkisar dari 5.8 mm sampai 7.54 mm. Namun berdasarkan statistik (P<.5), konsentrasi 1 sampai 4, 3 sampai 1, 5 sampai 2, 1 sampai 25, dan 1 sampai 5 mg/ml menghasilkan zona hambat yang tidak berbeda nyata, artinya ekstrak daun senggugu dengan konsentrasikonsentrasi tersebut menghasilkan penghambatan pertumbuhan yang tidak terlalu berbeda terhadap bakteri P. aeruginosa. Bakteri S. aureus, B. subtilis, E. coli memiliki konsentrasi hambat tumbuh minimum yang sama yaitu 2 mg/ml, dengan masing-masing zona hambat 2.24 mm, 1.48 mm, dan 1.5 mm. Berdasarkan statistik (P<.5), konsentrasi ekstrak daun senggugu 1 mg/ml pada bakteri S. aureus dan B. subtilis memang berbeda nyata dalam hal penghambatan pertumbuhannya dengan ekstrak daun senggugu 2 mg/ml Berbeda pada E. coli, konsentrasi daun senggugu 1 mg/ml dengan 2 mg/ml tidak berbeda nyata. Aktivitas antibakteri ekstrak daun senggugu dalam menghambat bakteri S. aureus pada konsentrasi 2-1 mg/ml tergolong lemah, yaitu dengan zona hambat berkisar antara mm, sedangkan pada konsentrasi 5-5 mg/ml, ekstrak daun senggugu tergolong sedang dengan zona hambat berkisar antara mm. Berdasarkan statistik (P<.5), konsentrasi 2 sampai 4, 3 sampai 1, 1 sampai 2, 15 sampai 25, dan 25 sampai 5 mg/ml menghasilkan zona hambat yang tidak berbeda nyata. Tabel 5 Aktivitas antibakteri berdasarkan diameter zona hambat Aktivitas Diameter zona antibakteri hambat (mm) Lemah < 5 Sedang 5-1 Kuat 1-2 Sangat kuat > 2 (Suryawiria 1978) Aktivitas antibakteri ekstrak daun senggugu dalam menghambat bakteri B. subtilis pada konsentrasi 2-1 mg/ml tergolong lemah, yaitu dengan zona hambat berkisar antara mm, sedangkan pada konsentrasi 15-5 mg/ml, ekstrak daun senggugu tergolong sedang dengan zona hambat berkisar antara mm. Berdasarkan statistik (P<.5), konsentrasi 2 sampai 3, 5 sampai 5, 1 sampai 15, 1 sampai 2, dan 15 sampai 25 mg/ml menghasilkan zona hambat yang tidak berbeda nyata. Hasil statistik dapat dilihat pada lampiran 11. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak daun senggugu, maka semakin besar pula zona hambat yang terbentuk. Hal ini terjadi untuk semua bakteri uji. diameter zona hambat (mm) konsentrasi (mg/ml) Gambar 3 KHTM ekstrak daun senggugu kering terhadap bakteri S. aureus ( ) B. subtilis ( ) E. coli ( ) dan P. aeruginosa ( ). Efektivitas Penghambatan Ekstrak Aseton Daun Senggugu Terhadap Ampisilin.4 mg/ml Efektivitas ekstrak aseton daun senggugu jika dibandingkan dengan ampisilin masih sangat jauh. Jika konsentrasi tertinggi dari penelitian ini yaitu 5 mg/ml, dibandingkan dengan konsentrasi ampisilin.4 mg/ml, efektivitas penghambatan ekstrak daun senggugu terhadap bakteri uji masih tergolong lemah. Besarnya efektivitas penghambatan ekstrak aseton daun senggugu terhadap ampisilin.4 mg/ml pada bakteri S. aureus, B. subtilis, E. coli, P. aeruginosa, masingmasing adalah sebesar 36.51%, 34.57%, 39.36%, dan 39.68%. Perhitungan dapat dilihat pada lampiran 17. Efektivitas penghambatan yang lemah ini dikarenakan ekstrak daun senggugu pada penelitian ini adalah ekstrak kasar, sedangkan ampisilin adalah antibiotik murni. Jadi perlu dilakukan pemurnian lanjutan pada ekstrak daun senggugu untuk meningkatkan potensi daya hambat terhadap bakteri uji. Perbedaan

6 1 efektivitas antara ampisilin.4 mg/ml dengan ekstrak daun senggugu dapat dilihat pada Gambar 4. Ampisilin digunakan sebagai kontrol positif pada penelitian ini karena spektrumnya yang luas, dan mekanisme kerja dari ampisilin yaitu dapat menghambat pertumbuhan bakteri, baik bakteri Gram positif maupun bakteri Gram negatif sama dengan senyawa antibakteri yang dimiliki oleh daun senggugu. zona hambat (mm) ampisilin konsentrasi Gambar 4 Perbandingan daya hambat ekstrak daun senggugu terhadap ampisilin.4 mg/ml. S. aureus ( ) B. subtilis ( ) E. coli ( ) dan P. aeruginosa ( ). SIMPULAN DAN SARAN Simpulan Metanol menghasilkan rendemen ekstrak paling besar yaitu %, namun ekstrak aseton menghasilkan zona hambat paling besar. Selanjutnya penelitian menggunakan ekstrak aseton daun senggugu kering. Daun senggugu memiliki kadar air sebesar 78.44%, menunjukkan bahwa daun senggugu tidak bisa disimpan terlalu lama. Senyawa aktif yang diduga berpotensi sebagai antibakteri yang dimiliki oleh daun senggugu pada penelitian ini antara lain alkaloid, dan steroid. Konsentrasi terkecil ekstrak daun senggugu kering yang masih bisa menghambat bakteri P. aeruginosa adalah 3 mg/ml, dengan zona hambat sebesar 1.85 mm, sedangkan pada S. aureus, B. subtilis, E. coli memiliki konsentrasi hambat tumbuh minimum yaitu 2 mg/ml, dengan masingmasing zona hambat 2.24 mm, 1.48 mm, dan 1.5 mm. Secara umum hubungan konsentrasi dengan zona hambat untuk semua bakteri uji berbanding lurus, yaitu semakin tinggi konsentrasi ekstrak daun senggugu kering, maka semakin tinggi zona hambat yang dihasilkan. Efektivitas daun senggugu 5 mg/ml dibandingkan dengan ampisilin.4 mg/ml terhadap bakteri S. aureus, B. subtilis, E. coli, P. aeruginosa, yaitu sebesar 36.51%, 34.57%, 39.36%, dan 39.68%. Potensi yang dimiliki oleh ekstrak daun senggugu kering adalah lemah. Saran Perlu dilakukan metode ekstraksi selain maserasi. Perlu dilakukan penelitian lanjutan tentang pemurnian ekstrak kasar dari daun senggugu, mekanisme penghambatan bakteri oleh ekstrak daun senggugu, serta perlu juga diadakan penelitian mengenai potensi-potensi lainnya dari daun senggugu selain sebagai antibakteri, seperti senggugu sebagai analgesik, antiasma, dan sebagainya. DAFTAR PUSTAKA Bintang M Studi antimikroba dari Streptococcus lactis BCC 2259 [disertasi]. Bandung: Institut Teknologi Bandung. Dalimarta S Atlas Tumbuhan Indonesia. Jilid ke-1. Jakarta: Trubus Agriwidya. Dzulkarnain B, Sundarl D, Chozin A Tanaman obat bersifat antibakteri. Cermin Dunia Kedokteran 11: Fardiaz S Bakteriologi Keamanan Pangan. Jilid I. Bogor: Jurusan Teknologi Pangan dan Gizi, Institut Pertanian Bogor. Fardiaz S Mikrobiologi Pangan Pusat Antar Universitas. Bogor: IPB Pr. Gan S et al Farmakologi dan Terapi. Ed ke-2. Jakarta: Farmakologi FKUI, Universitas Indonesia. Haryadi W Ilmu Kimia Analitik Dasar. Jakarta: Gramedia Harborne JB Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Padmawinata K, Soediro I, penerjemah; Niksolihin S, editor. Bandung: ITB. Terjemahan dari: Phtochemical Methodes. Holt JG, Krieg NR, Sneath PH, Stanley JT, Williams ST Burgey s Mannual of Determinative Bacteriology. Ed ke-9. Baltimore: William Wilkins.

7 11 Jawetz E, Melnick JL, Adelberg EA Mikrobiologi Kedokteran. Ed ke-2. Nugroho E, Maulany RF, penerjemah; Jakarta: Kedokteran EGC. Terjemahan dari: Review of Medical Microbiology. Khopkar SM Konsep Dasar Kimia Analitik. Saptoraharjo A, penerjemah. Jakarta: UI Pr. Terjemahan dari: Basic Concepts of Analytical Chemistry. Lay W, Hastowo S Mikrobiologi. Jakarta: Rajawali. Martin DW Jr Biokimia: Harper s Review of Biochemistry. Jakarta: EGC Buku Kedokteran. Melawati. 26. Optimasi proses maserasi panili (Vanilla planifolia A) hasil modifikasi proses kuring [skripsi]. Bogor: Fakultas Teknik Pertanian, Institut Pertanian Bogor. Padmalatha K, BV Venkataraman, R Roopa. 2. Effect of DLH-721A and DLH- 721B (Polyherbal Formulations) on Rat mesenteric mast cell degranulation. Indian Journal of Pharmacology 32:7-1. Pelczar MJJr, Chan ECS Dasar- Dasar Mikrobiologi. Hadioetomo RS, Imas T, Tjitrosomo SS, Angka SL, penerjemah; Jakarta: UI Pr. Terjemahan dari: Elements of Microbiology. Wahid P Medicinal and Aromatic plant in Indonesia. Bangkok : RAPA Publication. Wattimena JR et al Farmakodinami dan Terapi Antibiotik. Yogyakarta: UGM Pr. Widowati L et al Penelitian Tanaman Obat di Beberapa Perguruan Tinggi di Indonesia. Jakarta: Pusat Penelitian dan Pengembangan Farmasi Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Departemen Kesehatan RI. Winarno, Fardiaz D, Fardiaz S Ekstraksi, Kromatografi, dan Elektroforesis. Bogor: Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor. Wulandari NDM. 25. Perbandingan metode ekstraksi buah mahkota dewa (Phaleria macrocarpa) dan uji toksisitas subkronis pada tikus putih [Skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor. Zhu Y, Qi XZ, Zhong JJ. 2. Epoxide Sesquiterpenes and Steroids from Cremanthodium Discoideum. Australian Journal of Chemistry 53(1): Suradikusumah E Kimia Tumbuhan. Bogor: Pusat Antar Universitas Ilmu Hayati, Institut Pertanian Bogor. Schunack W, Mayer K, Haake M Senyawa Obat. Ed ke-2. Wattimena JR, Subino, penerjemah; Yogyakarta: UGM Pr. Suryawiria U Mikroba Lingkungan. Ed ke-2. Bandung: Institut Teknologi Bandung. Tiagarna P. 24. Uji toksisitas akut ekstrak air dan ekstrak etanol 3% dari buah mahkota dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff.) (Boerl.) pada mencit [skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor. Todar K. 22. The Control of Microbial Growth. Wisconsin: University of Wisconsin.

8 9 coli dengan zona hambat. mm. Jadi konsentrasi terkecil ekstrak daun senggugu kering yang masih bisa menghambat bakteri S. aureus, B. subtilis, E. coli adalah 2 mg/ml. Ekstrak daun senggugu yang tergolong lemah dalam menghambat pertumbuhan bakteri P. aeruginosa yaitu pada konsentrasi 3 mg/ml sampai 1 mg/ml dengan zona hambat berkisar dari 1.85 mm sampai 4.43 mm, sedangkan pada konsentrasi 5 mg/ml sampai 5 mg/ml, aktivitas antibakteri ekstrak daun senggugu tergolong sedang dengan zona hambat berkisar dari 5.8 mm sampai 7.54 mm. Namun berdasarkan statistik (P<.5), konsentrasi 1 sampai 4, 3 sampai 1, 5 sampai 2, 1 sampai 25, dan 1 sampai 5 mg/ml menghasilkan zona hambat yang tidak berbeda nyata, artinya ekstrak daun senggugu dengan konsentrasikonsentrasi tersebut menghasilkan penghambatan pertumbuhan yang tidak terlalu berbeda terhadap bakteri P. aeruginosa. Bakteri S. aureus, B. subtilis, E. coli memiliki konsentrasi hambat tumbuh minimum yang sama yaitu 2 mg/ml, dengan masing-masing zona hambat 2.24 mm, 1.48 mm, dan 1.5 mm. Berdasarkan statistik (P<.5), konsentrasi ekstrak daun senggugu 1 mg/ml pada bakteri S. aureus dan B. subtilis memang berbeda nyata dalam hal penghambatan pertumbuhannya dengan ekstrak daun senggugu 2 mg/ml Berbeda pada E. coli, konsentrasi daun senggugu 1 mg/ml dengan 2 mg/ml tidak berbeda nyata. Aktivitas antibakteri ekstrak daun senggugu dalam menghambat bakteri S. aureus pada konsentrasi 2-1 mg/ml tergolong lemah, yaitu dengan zona hambat berkisar antara mm, sedangkan pada konsentrasi 5-5 mg/ml, ekstrak daun senggugu tergolong sedang dengan zona hambat berkisar antara mm. Berdasarkan statistik (P<.5), konsentrasi 2 sampai 4, 3 sampai 1, 1 sampai 2, 15 sampai 25, dan 25 sampai 5 mg/ml menghasilkan zona hambat yang tidak berbeda nyata. Tabel 5 Aktivitas antibakteri berdasarkan diameter zona hambat Aktivitas Diameter zona antibakteri hambat (mm) Lemah < 5 Sedang 5-1 Kuat 1-2 Sangat kuat > 2 (Suryawiria 1978) Aktivitas antibakteri ekstrak daun senggugu dalam menghambat bakteri B. subtilis pada konsentrasi 2-1 mg/ml tergolong lemah, yaitu dengan zona hambat berkisar antara mm, sedangkan pada konsentrasi 15-5 mg/ml, ekstrak daun senggugu tergolong sedang dengan zona hambat berkisar antara mm. Berdasarkan statistik (P<.5), konsentrasi 2 sampai 3, 5 sampai 5, 1 sampai 15, 1 sampai 2, dan 15 sampai 25 mg/ml menghasilkan zona hambat yang tidak berbeda nyata. Hasil statistik dapat dilihat pada lampiran 11. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak daun senggugu, maka semakin besar pula zona hambat yang terbentuk. Hal ini terjadi untuk semua bakteri uji. diameter zona hambat (mm) konsentrasi (mg/ml) Gambar 3 KHTM ekstrak daun senggugu kering terhadap bakteri S. aureus ( ) B. subtilis ( ) E. coli ( ) dan P. aeruginosa ( ). Efektivitas Penghambatan Ekstrak Aseton Daun Senggugu Terhadap Ampisilin.4 mg/ml Efektivitas ekstrak aseton daun senggugu jika dibandingkan dengan ampisilin masih sangat jauh. Jika konsentrasi tertinggi dari penelitian ini yaitu 5 mg/ml, dibandingkan dengan konsentrasi ampisilin.4 mg/ml, efektivitas penghambatan ekstrak daun senggugu terhadap bakteri uji masih tergolong lemah. Besarnya efektivitas penghambatan ekstrak aseton daun senggugu terhadap ampisilin.4 mg/ml pada bakteri S. aureus, B. subtilis, E. coli, P. aeruginosa, masingmasing adalah sebesar 36.51%, 34.57%, 39.36%, dan 39.68%. Perhitungan dapat dilihat pada lampiran 17. Efektivitas penghambatan yang lemah ini dikarenakan ekstrak daun senggugu pada penelitian ini adalah ekstrak kasar, sedangkan ampisilin adalah antibiotik murni. Jadi perlu dilakukan pemurnian lanjutan pada ekstrak daun senggugu untuk meningkatkan potensi daya hambat terhadap bakteri uji. Perbedaan