AKTIVITAS SUPEROKSIDA DISMUTASE SEMEN ENTOG MENGGUNAKAN PENGENCERAN DAN LAMA SIMPAN BEDA SUHU 27 0 C. Fitriani dan Erna Yuniati ABSTRAK

Transkripsi

1 AKTIVITAS SUPEROKSIDA DISMUTASE SEMEN ENTOG MENGGUNAKAN PENGENCERAN DAN LAMA SIMPAN BEDA SUHU 27 0 C Fitriani dan Erna Yuniati Universitas Nusantara PGRI Kediri. Jl. KH. Ahmad Dahlan No.76 Kediri ipit.peternakan@gmail.com ABSTRAK Pada masa penyimpanan semen entog (Muscovy duck), terjadi penurunan kualitas seiring bertambahnya lama penyimpanan terhadap semen. Penelitian ini bertujuan mengetahui lama simpan terhadap kualitas semen entog encer selama penyimpanan 27 0 C.Rangkaian penelitian di exsprimental dalam pengenceran semen entog dengan lama penyimpanan berbeda disimpan suhu 27 0 C. Analisa yang digunakan Split Plot yang dilanjutkan dengan uji BNT untuk membandingkan perlakuan. Parameter analisa yang digunakan persentase motilitas dan aktivitas SOD. Sebanyak 5 ekor entog dewasa berkisar umur 1,5 2 tahun, 3 ekor entog jantan dan 2 entog betina, sehat dan mempunyai libido tinggi digunakan sebagai ternak penelitian dan dikandangkan secara individual. Dilakukan tingkat pengenceran 0,5X,10X dan 15X serta lama simpan 0,60,120 dan 180 menit. Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat perubahan kualitas semen mentog yang pada tingkat pengenceran dan lama simpan beda disimpan pada suhu 27 0 C. Pengenceran 5X ( )dapat meningkatkan kualitas semen mentog secara tidak nyata berbeda (P > 0.05) terhadap motilitas pada suhu 27 0 C dan semen mentog yang tanpa simpan. (230, ). Tingkat pengenceran dan lama simpan terhadap aktivitas SOD di suhu 27 0 C rataan tertinggi ( ) pada tingkat pengenceran 5X dan penyimpanan 120 menit ( ).Berdasarkan hasil tersebut, bahwa motilitas dan aktivitas SOD dengan tingkat pengenceran dan lama simpan dalam semen mentog (Muscovy Duck) dapat mempertahankan kualitas semen entog pada penyimpanan di suhu 27 0 C. Untuk mendapatkan kualitas semen entog yang terbaik disarankan pengenceran 5X. Kata kunci: SOD, Semen entog, Tingkat Pengenceran dan Lama Simpan, Suhu 27 0 C 18 PENDAHULUAN Usaha peternakan di Indonesia masih belum berkembang, beberapa upaya pemerintah melakukan peningkatan pupolasi ternaknya dengan teknologi reproduksi Inseminasi Buatan (IB). IB adalah perkawinan dengan bantuan manusia dilakukan mengkawinkan ternak lokal dengan ternak impor mengharapkan keturunan keduanya. Dalam menunjang perkawinan silang (IB) itu perlu semen cukup secara kualitas dan kuantitas dimana semen cepat menurun disebabkan adanya peningkatan senyawa oksigen reaktif (SOR) akibatnya sress oksidatif. Semen setelah dikoleksi menjadi menurun disebabkan oleh faktor lingkungan, aktivitas metabolisme spermatozoa pada penyimpanan suhu ruang C tinggi, sehingga untuk keperluan inseminasi tidak lebih 45 menit (Charle et al 1982, Saleh 2004). Tubuh memiliki sistem antioksidan primer berupa superoxida dismutase (SOD), kekurangan SOD memberikan konsekuensi atas meningkatnya malondialdehyde (MDA) sebagai indikator adanya radikal bebas yang dapat menyebabkan kondisi stress oksidatif pada sel. Beberapa faktor yang berperan dalam mempertahankan kualitas semen selama penyimpanan antara lain bahan pengenceran dan kondisi penyimpanan seperti waktu, aerasi dan temperatur (Dumpala et al, 2006 Siudzinska dan Lukaszewiez, 2008).

2 Seminar Nasional Peternakan 2, Fakultas Peternakan Universitas Hasanuddin Makassar, 25 Agustus 2016 Mengingat permasalahan tersebut maka perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui aktivitas superoksida dismutase semen entog menggunakan pengenceran dan lama simpan berbeda pada suhu 27 0 C Materi penelitian MATERI DAN METODE Penelitian dilakukan di simpang candi panggung Malang, dan Laboratorium MIPA, Laboratorium FAAL Brawijaya. Entog yang digunakan dalam penelitian ini adalah 3 ekor ternak entog jantan berumur sekitar 1,5 2 tahun dengan berat badan 3 3,5 kg dan 1 ekor entog betina. Prosedur penelitian Penelitian dilaksanakan secara eksperimental menggunakan rancangan petak terbagi (Split Plot). Faktor pertama sebagai petak utama adalah tingkat pengencer yaitu 0(A0); 5 X(A1); 10X(A2) dan 15X (A3), faktor kedua sebagai anak petak adalah lama simpan 0(B0); 60 (B1); 120 (B2) dan 180 menit yang disimpan pada suhu 27º C. Tiga kelompok (3 kandang entog yang diambil semennya, digunakan sebagai ulangan. Apabila hasil yang diperoleh melalui analisis ragam menunjukkan adanya pengaruh perbedaan yang nyata antar perlakuan (P<0,05), diuji lebih lanjut uji BNT (Still dan Torrie, 1990). Entog dipelihara dalam kandang individu yang terbuat dari kawat dengan ukuran 60x60x80 cm. Entog diadaptasikan dengan lingkungan kandang individu selama empat sampai enam minggu, pakan yang diberikan yaitu campuran dengan dedak dan konsentrat tepung itik petelur dengan komposisi nutrisi : kadar air max 12.0%, protein max %, lemak min 2.0%, serat max 6.0%, abu max 35.0%, calsium min 12.0% dan phosphor min 1.20%, dengan perbandingan (4:1) + vitamin untuk itik petelur dicampur sedikit air diaduk sampai rata dalam pakan diberikan setiap pagi dan siang hari. Penampungan semen dilakukan dua kali seminggu. Entok betina yang berfungsi sebagai pemancing dimasukkan ke dalam kandang entok jantan. Jantan yang terangsang ditandai dengan mengkibas-kibaskan ekor ke kiri dan ke kanan. Selanjutnya pejantan akan menaiki betina dan ketika proses ejakulasi hampir terjadi, dilakukan penampungan semen dengan tabung. Pejantan yang akan ditampung semennya tidak diberikan pakan dan minum sebelum penampungan. Hal ini dimaksudkan untuk mencegah kontaminasi semen dengan feses atau kotoran (Nuryadi, 2002). Parameter yang diamati Kualitas semen segar Evaluasi semen segar, meliputi: volume, warna, bau, motilitas massa, konsistensi, ph, motilitas individu, persentase hidup, abnormalitas dan konsentrasi spermatozoa (Zelleka, et al, 2005). Uji aktivitas Superoksida Dismutase (SOD) Aktivitas enzim superoksida dismutase (SOD) semen diukur berdasarkan laju penghambatan reduksi Ferisitokrom C oleh anion superoksida yang dihasilkan oleh xantin/xantin oksidase (Wood et al., 2003). 19

3 Fitriani dan Erna Yuniati Evaluasi Semen Entog 20 HASIL DAN PEMBAHASAAN Hasil pemeriksaan semen segar setelah penampungan selama penelitian dapat dilihat pada Tabel 3. Tabel 3. Kualitas semen entog segar setelah penampungan No Parameter pengamatan Rataan Volume (ml) Warna ph Konsistensi Konsentrasi (x 10 7 /ml) Motilitas massa (+) Motilitas individu (%) Spermatozoa hidup (%) Aktivitas SOD (Unit/ml) - Tingkat Pengenceran - Lama Simpan putih s/d putih keruh 7.5 encer s/d kental 0,83 s/d 1,30 ++ s/d s/d 80 5,77 70 s/d 80 5, Rataan volume semen entog per ejakulasi yang diperoleh selama penelitian sebesar ml. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa volume semen yang dihasilkan banyak disebabkan semen yang didapat lebih encer.diduga dihasilkan saat ejakulasi semen yang ditampung bercampur dengan sekresi lipatan lipatan limpa dan badan badan vaskuler di dalam cloaca sehingga encer. Ini sesuai dengan penyataan Hafez (2000) semen dibagi menjadi dua bagian padat disebut spermatozoa yang dihasilkan oleh testes dan bagian yang cair disebut seminal plasma (cairan semen) yang dihasilkan oleh kelenjar asesoris jantan 9 bulbo urethralis, prostata, vesicular seminalis, sekresi tersebut berfungsi sebagai buffer dan medium bagi spermatozoa agar daya hidupnya dapat dipertahankan secara normal setelah ejakulasi. Warna semen yang diperoleh selama penelitian adalah putih sampai putih keruh. Partodihardjo (1992) menyatakan bahwa warna semen unggas yang normal adalah putih susu, Pada perlakuan ini, semen yang berwarna putih keruh menunjukkan bahwa semen tersebut memiliki tingkat konsentrasi yang lebih tinggi dari pada semen yang berwarna putih. Rataan derajat keasaman (ph) semen yang diperoleh selama penelitian adalah 7,5. Hafez (1993) menyatakan bahwa, semen unggas yang normal memiliki ph dalam kisaran 7,2 7,6. Toelihere (1993) menyatakan bahwa semen segar bersifat agak basa dengan rataan ph berkisar antara 7,0 7,6. Nilai ph yang tinggi selama penelitian disebabkan karena pengaruh cairan transparan atau seminal plasma dalam semen yang menyebabkan semen menjadi lebih basa. Konsentrasi yang diperoleh selama penelitian semen entog adalah encer sampai kental. Konsistensi semen berhubungan dengan konsentrasi semen yang terkandung didalamnya. Salisbury dan VanDemark (1978) menyatakan bahwa, kekentalan semen akan naik selaras dengan kandungan semennya. Rataan konsentrasi semen segar diperoleh selama perlakuan adalah 0,83 sampai 1,30 (10 7 /ml). Menurut Hafez (1993), konsentrasi semen unggas berkisar antara Setyowati dan Budiarti (1992) menjelaskan bahwa, konsentrasi unggas dipengaruhi oleh pertumbuhannya. Faktor yang lain yang mempengaruhi konsentrasi semen antara lain umur, cahaya, nutrisi, genetik dan frekuensi penampungan.

4 Seminar Nasional Peternakan 2, Fakultas Peternakan Universitas Hasanuddin Makassar, 25 Agustus 2016 Menurut Lake 1978 dalam Toelilehe (1993), konsentrasi semen yang rendah disebabkan adanya cairan transparan dalam semen. Semen yang berwarna krem keputihan dan keruh memiliki jumlah semen kurang 1 milyar/ml, tetapi jika warnanya lebih jernih dari air susu maka diperkirakan mengandung 500 juta semen/ml. Rataan konsentrasi semen segar hasil penelitian kategori sedang karena memiliki jumlah semen yang lebih dari 1 milyar/ml. Rataan motilitas massa yang diperoleh selama penelitian berkisar antara + sampai dengan ++, Toelihere (1993) menyatakan bahwa, kualitas semen tergolong bagus jika dibandingkan motilitas massa semen mempunyai (++) nilai baik dan (+) kurang baik. Partodihardjo (1993) menyatakan bahwa, gerakan massa diberi skor (+++) jika terlihat gelombong besar banyak, gelap, tebal dan aktif. Skor (++) diberikan jika terdapat gelombong kecil tipis, jarang, bergerak lambat dan kurang jelas. Skor (+) diberikan untuk semen yag tidak menunjukkan gerakan massa bergelombong dengan jelas dan hanya nampak gerakan gerakan individu semen. Rataan persentase motilitas individu semen segar yang diperoleh selama penelitian adalah 75%. Semen unggas yang normal menurut Hafez (1993) memiliki motilitas individu berkisar antara 60 80%. Rataan persentase semen hidup dalam semen segar yang diperoleh selama penelitian adalah 80%. Semen unggas yang normal menurut Toelihere (1993) persentase hidup segar kira kira 80%. Hasil yang diperoleh selama penelitian menunjukkan bahwa semen entog yang ditampung memiliki kualitas yang baik dan dapat digunakan untuk kepentingan IB. Aktivitas SOD Semen Entog Superoxida Dismutase (SOD) sebagai enzim antioksidan terpenting yang sudah terdapat dalam sel sebagai pertahanan, dimana bertanggung jawab terhadap terjadinya kerusakan akibat radikal bebas seperti radikal reactive superoxida. Reactive Superoxida merupakan radikal superoxida atau anion yang diproduksi ketika oksigen kehilangan satu elektronnyasuperoxida Dismutase/ SOD bertanggung jawab untuk mengkatalisir perubahan dari superoxida menjadi elemen oksigen dan hydrogen peroxida. Transformasi ini disebut dismutase dan bergantung dari nama enzimnya (Kieler, 2006). Hasil rataan SOD berdasarkan tingkat pengenceran dan lama penyimpanan pada suhu 27 0 C setelah perlakuan terlihat pada Tabel 4. Tabel 4. Rataan aktivitas SOD semen entog dengan tingkat pengenceran dan lama penyimpanan pada suhu 27 0 C Perlakuan SOD Perlakuan SOD Tingkat ( X SD) Lamasimpan (menit) Pengenceran(X) ( X SD) Dari hasil pengukuran aktivitas SOD tingkat pengenceran dan lama penyimpanan diperoleh rataan tertinggi ( ) unit/ml dengan pengenceran 5X, penyimpanan 120 menit ( ) unit/ml. Hasil Analisis Ragam menunjukkan bahwa pengenceran berbeda dan lama penyimpanan tidak berbeda nyata (p > 0.05). Rataan pengenceran 5X lebih tinggi karena pengenceran ditambahkan kuning telur dimana kuning telur mampu 21

5 Fitriani dan Erna Yuniati melindungi proses kolesterol perubahan suhu dan bahaya dari ROS menggantikan struktur lipid eksogen dengan mengekstrak kolesterol membran plasma sel terhadap fosfolid ( Rizal dan Herdis, 2008). Penambahan kuning telur dalam pengenceran sebagai antioksidan eksogen pada penelitian dalam pengenceran semen entog tidak terlalu efektif berpengaruh pada antioksidan endogen (SOD) dalam spermatozoa masih dapat mencukupi persedian makanan untuk kebutuhannya. Diduga SOD dalam pengenceran semen entog masih dapat melawan banyaknya oksigen radikal yang merusak dinding sel akibat lama penyimpanan. Penambahan kuning telur dapat mempertahankan aktivitas SOD pada lama penyimpanan dapat menurunkan aktivitas SOD akibat perlakuan ini terdapatnya endapan warna unggu muda pada pengenceran. Karena spermatozoa sudah memiliki antioksidan endogen berupa enzim superoksida dismutase (SOD) dalam jumlah yang cukup dalam mempertahankan hidupnya. KESIMPULAN DAN SARAN Kombinasi tingkat pengenceran dan lama simpan dimana aktivitas uji SOD tertinggi adalah tingkat pengenceran 5X dan lama simpan 120 menit. 22 DAFTAR PUSTAKA Agarwal, A., R. A. Saleh dan M. A. Bedaiwy Role of Reactive Oxygen Species in the Pathophysiology of Human Reproduction. Fertil Steril. 79: Clarke, R.N., M. R. Bakst, dan M. A. Ottinger Morphological changers in Chicken and Turkey Spermatozoa Incubated under Various Conditions. Poult.Sci., 63: Dandaker, S. P., G.D. Nadkani dan S. Punekar Lipid peroxidation and Antioxidant Enzymes in male Infertilyti. Brief Report. 48: Dumpala, R.R., H. M. Parker, dan C. D. McDaniel The effect of semen storage temperature and diluent type on the sperm quality index of broiler breeder semen. Int. J. Poult. Sci. 5(9): Dorota, S. dan M, Kurpisz Reactive Oxygen Species and Sperm Cells. Jounal Reproduction Biology and Endocrinology, March 2: 1-7 Fitriani Pengaruh Tingkat Pengenceran dan Dosis Semen Entog Terhadap Fertilitas Telur hasil Persilangan Entog dengan Itik melalui teknologi IB. Tesis. Universitas Brawijaya. Malang Kusniasih, R., dan A, Wijaya Peran Radikal Bebas pada Iskemia Reperfusi Serebral or Miakardium. Laboratorium Klinik, Fakultas MIFA, Universitas Padjadjaran Bandung. Laboratorium Klinik Prodia. ISSN Mentor Evalutation Semen of Fertility Network. (online). Siswono Kuning Telur Bukan Sekedar Warna. www / google/gizi Net Soeradi, A Peranan Radikal Oksigen Bebas terhadap Fungsi Sperma.Asosiasi Politeknik Indonesia. Sofiyana Plasma Nuftah. (Online). Balitnak. Pusat Penelitian dan Pengembangan Perternakan. Bogor. Wood, L. G., D. A. Fitzgerald, A. K. Lee, L.G. Manohar Improved antioxidant and fatty acid status of patients with cystic fibrosis after antioxidant supplementation is linked to improved lung function. Am J Clin Nutr., 77:150 9.