SEMINAR NASIONAL PERHIPBA JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS TANJUNGPURA PONTIANAK, 2011 EFEK EKSTRAK KLOROFORM BUAH Brucea javanica (L.) Merr. TERHADAP ANGIOGENESIS TUMOR PAYUDARA TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus L.) Ari Hepi Yanti Nyoman Puniawati L. Hartanto Nugroho Elvi Rusmiyanto P. Wardoyo
Latar Belakang Tumor ganas (kanker) salah satu penyakit yang mematikan Kanker payudara kanker ke dua yang banyak dialami oleh wanita (17,77%) Juga menyerang pria ± 1% (Tjindarbumi dan Mangunkusumo, 2002) Faktor pemicu : pola makan,faktor genetik, pengaruh hormon, virus, rokok, alkohol, polusi, radiasi pada daerah dada
Fisiologi sel tumor ganas : 1. Tidak sensitif terhadap signal antiproliferatif selalu proliferasi 2. Mampu menghindar dari mekanisme apoptosis 3. Mampu menginduksi angiogenesis memenuhi kebutuhan oksigen dan nutrisi
Angiogenesis Definisi: Pembentukan pembuluh darah baru (kapiler) dari pembuluh darah yg telah ada
ANGIOGENESIS lanjt. Proses alami pada perkembangan embrio, reproduksi, regenerasi jaringan, & pertumbuhan tumor Distimulasi oleh faktor pertumbuhan angiogenik VEGF yang dihasilkan oleh jaringan luka dan sel tumor Mrpkan tahap dasar dlm transisi tumor dr kondisi keadaan dorman maligna
Tumor Angiogenic Factor (TAF) AGF yang dieksresikan oleh inti dan sitoplasma sel tumor Menstimulasi proliferasi dan migrasi sel endotel dengan cepat ke arah jaringan tumor
Usaha pengobatan operasi, kemoterapi, radioterapi dan terapi hormonal Kelemahan : sulit dilakukan jika sudah terjadi metastasis, adanya efek samping yang merugikan, & mahal Metode baru pengobatan : angiogenesis inhibition alternatif eksplorasi tanaman obat Brucea javanica
Klasifikasi Divisi Subdivisi Kelas Familia Genus Spesies : Spermatophyta : Angiospermae : Dicotyledoneae : Simaroubaceae : Brucea : Brucea javanica L. (Merr) (Steenis, 1992)
Brucea javanica (L.) Merr. Morfologi Buah Nama lain : kwalot, buah makasar, kemuje Buah dan daun antimalaria, antitumor, antimikrobia, dan antituberculosis (Kim et al., 2004; Fukamiya et al., 1992) Ekstrak kloroform buah dan biji menunjukkan aktivitas sitotoksik terhadap sel T47D IC 50 thd T47D = 109 µg/ml (Wardoyo et al., 2009).
Permasalahan Apakah ekstrak kloroform buah B. javanica dapat menghambat angiogenesis pada MKA embrio ayam setelah diimplantasi dengan jaringan tumor payudara?
Tujuan Mempelajari pengaruh ekstrak kloroform buah B. javanica terhadap angiogenesis pada MKA embrio ayam setelah diimplantasi dengan jaringan tumor payudara
Manfaat Sebagai justifikasi ilmiah pada penggunaan bahan jamu tumbuhan B. javanica sehingga mendorong masyarakat untuk menggunakan jamu yang telah melalui telaah ilmiah sebagai pengobatan alternatif dan memelihara kesehatan
Metode Penelitian Lokasi : a. Ekstraksi bahan dilakukan di laboratorium Biokimia Fakultas Biologi UGM b. Pemeliharaan hewan uji dan induksi karsinogenesis dilakukan di UPHP UGM c. Pembuatan konsentrasi ekstrak dan Uji antiangiogenesis dilakukan di laboratorium Mikrobiologi FKH UGM
Alat : a. Ekstraksi buah Brucea javanica (L.) Merr. : alat-alat gelas, seperangkat alat sokletasi, neraca analitik, cawan porselin, oven, dan kompor listrik b. Alat untuk induksi kanker adalah jarum kanul (sonde lambung), timbangan, vortex, dan tabung reaksi c. Uji antiangiogenesis : seperangkat alat bedah, inkubator, alat candling, laminar air flow cabinet, mini drill, karet hisap, mikropipet, spuit 5 ml steril, cawan petri, pinset, botol vial (flakon) dan kamera digital
Bahan : Buah Brucea javanica (L.) Merr. Kloroform DMBA (7,12- Dimetilbenz[a]anthracene) PEG (Polietilen glikol) 400 Membran korio alantois (MKA) telur ayam berembrio umur 9-10 hari Betadine Bufer antibiotika Parafin solidum Alkohol 70% Garam fisiologis Minyak jagung Akuades
MKA + Jaringan Normal KELOMPOK KONTROL MKA + Jar. normal + Pelarut Ekstrak MKA + Jaringan Tumor MKA + Jar. Tumor + Pelarut ekstrak
PERLAKUAN EKSTRAK + Ekstrak B. javanica Konsentrasi 50 µg/ml + Ekstrak B. javanica Konsentrasi 75 µg/ml MKA + Jaringan tumor payudara + Ekstrak B. javanica Konsentrasi 100 µg/ml + Ekstrak B. javanica Konsentrasi 125 µg/ml + Ekstrak B. javanica Konsentrasi 150 µg/ml
Hasil Penelitian No Perlakuan pada MKA Rata-Rata Jumlah Pembuluh Darah Baru 1. Implan jaringan payudara normal 10,67 2. Implan jaringan payudara normal + pelarut ekstrak 9,33 3. Implan jaringan tumor payudara 33 4. 5. 6. 7. 8. 9. Implan jaringan tumor payudara + pelarut ekstrak Implan jaringan tumor payudara + ekstrak kloroform konsentrasi 50 µg/ml Implan jaringan tumor payudara + ekstrak kloroform konsentrasi 75 µg/ml Implan jaringan tumor payudara + ekstrak kloroform konsentrasi 100 µg/ml 30,67 26,67 17 13,33 Implan jaringan tumor payudara + ekstrak kloroform konsentrasi 125 µg/ml 7,33 Implan jaringan tumor payudara + ekstrak kloroform konsentrasi 150 µg/ml 7,67
Gambaran makroskopis respon angiogenesis MKA MKA + jar. normal MKA + jar. kanker 2 2 3 3 1 cm 1 cm 1 1 1 3 3 2 1 1 cm 1 cm
MKA + jar. tumor + ekstrak 125 µg/ml Keterangan : 1. Pembuluh darah utama 1 2 3 3 2 1 2. Pembuluh darah baru dari pembuluh darah yang sudah ada 3. Implan 1 cm 1 cm
Kesimpulan Ekstrak kloroform buah Brucea javanica (L.) (L.) Merr. mampu menghambat angiogenesis pada membran pada membran korio alantois korio alantois embrio embrio ayam setelah ayam diimplantasi setelah diimplantasi dengan jaringan dengan tumor jaringan payudara tumor tikus payudara putih tikus (Rattus putih norvegicus (Rattus norvegicus L.). L.) Konsentrasi efektif ekstrak kloroform buah Brucea javanica (L.) Merr. sebagai penghambat angiogenesis adalah 125 µg/ml.