LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI PEWARNAAN SPORA BAKTERI UNTUK MEMENUHI TUGAS MATA KULIAH Mikrobiologi yang dibimbing oleh Bapak Agung Witjoro, S.Pd, M.Kes Oleh : Offering C/ Kelompok 5 1. Atika Anggraini (130341614798) 2. Hanifa Fitria Ratri (130341614781) 3. Herlizza Basyarotun A(130341614782) 4. Karima Zakiyulfani (130341614843) 5. Riska Nurlaili (130341614848) UNIVERSITAS NEGERI MALANG FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM JURUSAN BIOLOGI FEBRUARI 2014
A. TOPIK Pewarnaan spora bakteri B. TUJUAN Untuk mengetahui adanya spora bakteri C. PELAKSANAAN Laboratorium Mikrobiolgi O5.305, 15 Februari 2014 D. DASAR TEORI Spora bakteri ialah bentuk nakteri yang sedang dalam usaha mengamankan diri terhadap pengaruh buruk dari luar. Spora bakteri itu mempunyai fungsi seperti kista ameba, sebab bakteri dalan bentuk spora dan ameba dalam bentuk kista merupakan suatu fase, di mana kedua mikroorganisme itu berubah bentuk untuk melindungi diri terhadap faktor-faktor luar yang tidak menguntungkan. Segera setelah keadaan luar baik lagi bagi mereka maka pecahlah dinding spora atau kista, dan tumbuhlah bakteri atau ameba sebagaimana biasanya. (Dwijoseputro, 1978). Beberapa spesies dari Bacillus yang aerob dan Clostridium yang anaerob dapat dapat membentuk spora. Spora ni lazim disebut endospora, yaitu karena spora itu dibentuk dalam sel. Endospora itu jauh lebih tahan terhadap pengaruh luar yang buruk daripaad bakteri biasa, yaitu bakteri dalam bentuk vegetatif. Bentuk spora ada yang bulat dan ada pula yang bulat-panjang tergantung kepada spesies. Sel yang mengandung endospora itu kemudian disebut sporangium atau kotak spora. Biasanya satu sporangium berisi satu endospora, tetapi ada kalanya satu sporangium berisi dua spora, hal ini mungkin disebabkan pembelahan sel yang terlambat. (Dwijoseputro, 1978). Menurut Kusnadi, dkk. 2003, endospora tahan terhadap keadaan lingkungan yang merugikan seperti kering, panas, dan kurang tersedis nutrisi. Endospora yang sebenarnya merupakan suatu badan yang sangat membias terbentuk dalam sel bakteri vegetatif. Ukuran, bentuk, dan posisi spora dalam sel induk, sifatnya relatif tetap, menandai suatu spesies. Beberapa tipe endospora berdasarkan bentuk dan lokasinya pada sel bakteri : a). Tipe terminal : spora terletak di antara bagian tengah dan ujung sel. b). Tipe sentral : spora terletak di bagian tengah sel. c). Tipe lateral : spora terletak di bagian tengah sel tetapi sedikit menyamping. E. ALAT DAN BAHAN Alat : mikroskop, kaca benda, lampu spiritus, mangkuk pewarna, kawat penyangga, pipet, pinset, botol penyemprot, jarum inokulasi ujung berkolong, jarum Bahan : piaraan campuran atu murni bakteri, aquades steril, larutan hijau malakit 5 %, larutan safranin 0,5 %, kertas leensa, alkohol 70 %, lisol, sabun cuci,
F. CARA KERJA Secara aseptik Disediakan kaca benda yang bersih kemudian dilewatakan di atas nyala api lampu Diteteskan setetes aquades di atas kaca benda tersebut inokulum bakteri yang akan diperiksa diambil kemudian diletakkan di atas tetesan aquades tersebut lalu diratakan menggunakan jarum Dilakukan fiksasi dengan cara melewatkan sediaan tersebut di atas nyala api lampu spiritus dengan cepat Kelebihan larutan hijau malakit dicuci dengan air kran dalam botol penyemprot Diteteskan larutan hijau malakit di atas sediaan itu, lalu dipanaskan sediaan tersebut di atas nyala api lampu spiritus selama 3 menit. Dijaga agar sediaan tidak sampai mendidih atau mengering. Jika mengering ditambahkan tetesan Sediaan tersebut diletakkan di atas kawat penyangga yang diletakkan di atas mangkuk pewarna, lalu dibiarkan sampai dingin Diteteskan larutan safranin di atas sediaan tersebut lalu dibiarkan selama 3 menit Dicuci kelebihan larutan safranin menggunakan air kan. Sediaan dikeringkan dengan kertas penghisap kemudian diamati di bawah mikroskop dan dicatat hasilnya.
DISKUSI 1. Bilamanakah endospora terbentuk? Jawab : Pada kondisi yang tidak menguntungkan beberapa bakteri seperti Bacillus dan Clostridium memproduksi bentuk pertahanan hidup yang disebut endospora. Proses ini dikenal sebagai sporulasi. Tidak seperti spora pada Fungi, spora bakteri tidak memilik ifungsi reproduksi. Endospora ini tahan terhadap kondisi lingkungan ekstrim seperti suhuyang tinggi, kekeringan, senyawa kimia beracun (desinfektan, antibiotik) dan radiasi UV.Sekali endospora terbentuk, bagian vegetatif bakteri terhenti dan fase tidur dimulai. Endospora ini mampu bertahan sampai kondisi lingkungan kembali menguntungkan. Endospora ini lalu akan mengalami proses germinasi, dan membentuk bakteri sel tunggal. Jadi endospora terbentuk bilamana kondisi lingkungan bakteri tidak menguntungkan. 2. Apakah fungsi pemanasan dalam pewarnaan spora bakteri? jelaskan pengaruh pemanasan terhadap spora bakteri tersebut? Jawab : Fungsi pemanasan pada pewarnaan spora, agar hijau malakit (sebagai pewarna spora) dapat benar-benar masuk kedalam sel bakteri. Sehingga hasil pengamatan dapat terlihat dengan jelas.
DAFTAR PUSTAKA Dwidjoseputro. 1978. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta : Penerbit Djambatan. Kusnadi; Peristiwati; Syulasmi, Ammi; Purwianingsih, Widi; Rochintaniawati, Diana. 2003. Common Textbook Mikrobiologi Jica. Bandung : Universitas Pendidikan Indonesia FMIPA Jurusan Pendidikan Biologi.