Tanggal : 05 Maret 2010 LAPORAN PRAKTIKUM ANALISIS KLINIK FKK (SEMESTER GENAP 2010) Golongan : III Nama/NIM : 1. Hivo Grashia Leony FA/08103 2. Candra Dwipayana H FA/08104 3. Amelinda Nurjayanti FA/08123 4. Fitria Anggraini FA/08128 5. Dheny Cahyo Saputro FA/08129 6. Teng Thien Wun FA/08223 7. Mesa Sukmadani Rusdi FA/08143 8. Jasson Yohanes Jr. FA/08148 9. Rina Mai Saroh FA/08155 10. Dandiko Galanova FA/08156 11. Titis Janu Wiyamti FA/08157 12. Bakiyarathi Seridaran FA/08224 13. Anisa Ika Oktaviani FA/08169 14. Hela Putri Kusumo FA/08172 15. Aimerul Asyraff Bin Zaaismail FA/08222 16. Hesti Prihastuti D FA/08136 17. Kunthi Hari Pratiwi FA/08165 Dosen Pembimbing : Adam Hermawan, M.Sc.,Apt Asisten Jaga : Indah Ikawati Inna Armandari
I. TUJUAN Menetapkan kadar kreatinin dalam sampel urin dan plasma dengan metode Jaffe modifikasi tanpa deproteinisasi serta menghitung jumlah leukosit, eritrosit, dan trombosit darah. II. PRINSIP DASAR PERCOBAAN Percobaan ini sederhana, untuk penentuan kadar dengan bantuan larutan pikrat basa tanpa deproteinisasi. Reaksinya yaitu dengan mereaksikan kreatinin dengan asam pikrat membentuk kompleks kreatinin pikrat yang berwarna jingga dan memiliki serapan pada 492 nm. III. ALAT DAN BAHAN Alat 1. Pipet volume 1 ml 2. Vacutainer K 3 EDTA 3. Pipet tetes 4. Yellow tip 5. Blue tip 6. Tabung reaksi 7. Labu takar 50 ml 8. Kuvet dan Spektrofotometer 9. Mikropipet 10. Eppendorf 11. Syringe dan jarum 12. Kapas 13. Beaker glass 14. Sentrifuge Bahan 1. Sampel urin
2. Sampel plasma 3. Reagen 1 4. Reagen 2 5. Aquadest 6. Alkohol IV. CARA KERJA Preparasi Sampel Darah Ambil darah 3 ml melalui vena di lengan Masukkan ke vacutainer K 3 EDTA Bolak-balik tube 3-5 kali Pindah darah 1mL dalam eppendorf(2 buah) Sentrifuge 1300 rpm, 4 C, 3 menit Ambil supernatan 50 µl
PENETAPAN KADAR KREATININ Sampel Urin Ambil sampel urin 1 ml diencerkan sampai 50 ml Sampel urin Baku kreatinin Blanko aquadest ( 50 µl) ( 50 µl) ( 50 µl) Tambah Reagen 1 1.000 µl, diamkan 5 menit Tambah Reagen 2 250 µl, tunggu 1 menit, Baca absorbansi ( A 1 ) Tunggu 2 menit, baca absorbansi ( A 2 ) Sampel Plasma Sampel plasma Baku kreatinin Blanko aquadest ( 50 µl) ( 50 µl) ( 50 µl) Tambah Reagen 1 1.000 µl, diamkan 5 menit Tambah Reagen 2 250 µl, tunggu 1 menit, Baca absorbansi ( A 1 )
Tunggu 2 menit, baca absorbansi ( A 2 ) V. HASIL PERCOBAAN ( DATA DAN PERHITUNGAN) DATA HASIL PERCOBAAN Kelompok Menit Ke- Absorbansi Plasma Absorbansi Urine II 1 0.150-0.001 3 0.162 0.006 III 1 0.180-0.020 3 0.197-0.009 IV 1 0.151 0.125 3 0.170 0.142 V 1 0.176 0.081 3 0.185 0.086 BakuŁ Menit Ke I = 0.012 Ke III = 0.016 Konsentrasi Baku = 177µmol/L PERHITUNGAN Konsentrasi Kreatinin = X Konsentrasi Baku X faktor pengenceran Kelompok II Plasma Konsentrasi Kreatinin = X 177 µmol/l X 1 Urine = 531 µmol /L Konsentrasi Kreatinin = X 177 µmol/l X 50 Kelompok III Plasma = 15487,5 µmol /L
Konsentrasi Kreatinin = X 177 µmol/l X 1 Urine = 752,25 µmol /L Konsentrasi Kreatinin = X 177 µmol/l X 50 = 24337,5 µmol /L Kelompok IV Plasma Konsentrasi Kreatinin = X 177 µmol/l X 1 Urine = 840,75 µmol /L Konsentrasi Kreatinin = X 177 µmol/l X 50 Kelompok V Plasma = 37612,5µmol /L Konsentrasi Kreatinin = X 177 µmol/l X 1 Urine = 398,25 µmol /L Konsentrasi Kreatinin = X 177 µmol/l X 50 = 11062,5 µmol /L Rata Rata Konsentrasi Kreatinin di Plasma = = = 630,5625 µmol /L
Rata Rata Konsentrasi Kreatinin di Urine = = = 22125 µmol /L VI. DAFTAR PUSTAKA Folin,O., 1914, On The Determination of Creanitine in Blood,Milk,and Tissues, J.biol.Chem., USA Levinson,S.A.,and Mc.Fate.R.P., 1961, Clinical Laboratory Diagnosis, 6 th Ed., Lea&Febiger, Philadelphia Richterich,R.,and Colombo,J.P., 1981, Clinical Chemistry, John Wiley&Sons, New York
PENGAMATAN DARAH TUJUAN Menghitung jumlah trombosit,leukosit,dan Eritrosit kemudian dibandingkan dengan jumlah pada keadaan normal PRINSIP DASAR Menghitung jumlah trombosit,leukosit dan eritrosit dilakukan dengan teknik pengecatan.penghitungan eritrosit,leukosit dan trombosit ppenting untuk mengetahui normal atau tidak jumlah sel yang dianalisis.setelah di lakukan pengecatan kemudian diamati di bawah mikroskop.untuk eritrosit menggunakan hayem,,leukosit menggunakan reagen turk,dan trombosit menggunakan ammonium oksalat. Gambar eritrosit
ALAT DAN BAHAN ALAT - Tabung Reaksi - Pipet tetes - Mikropipet - Bluetip BAHAN - Sampel darah - Reagen Hayem : Natrium sulfat Kristal 5gram,Natrium Klorida 1gram,HgCl2 0,5gram,aquades 200ml Turk : Gentian violet 1%dalam air 1ml,asam asetat glacial 1ml,aquades add 1ml Amonium oksalat 1% PROSEDUR KERJA 1. Penghitungan Eritrosit Pereaksi hayem 4ml masukkan ke tabung reaksi + 20 mikroliter darah di goyangkan 2-3 menit amati di bawah mikroskop di hitung dan di foto 2. Penghitungan Leukosit Pereaksi turk 0,5ml masukkan dalam tabung reaksi +20 mikroliter darah goyangkan 15-20 menit amati di bawah mikroskop hitung sel dan di foto 3. Penghitungan Trombosit Amonium oksalat 2ml masukkan ke dalam tabung +20 mikroliter darah goyangkan 3-5 menit amati dio bawah mikroskop hitung sel dan foto
HASIL PERCOBAAN ( DATA DAN PERHITUNGAN ) 1. LEUKOSIT Pengenceran = (0,5+0,02) : 0,02 = 20x Volume kotak = (1x1x0,1) x 0,4 = 0,4 mm3 Jumlah leukosit = (1 ; vol kotak ) xp x N = (1 : 0,4) x 20 x 41 = 2050 sel/mm3 2. ERITROSIT Pengenceran = (4+0,02) : 0,02 = 200x Volume kotak = (0,04x5 )= 0,2 mm3 Jumlah leukosit = (1 ; vol kotak ) xp x N = (1 : 0,2) x 200 x 389 = 389000 sel/mm3 3. TROMBOSIT Pengenceran = (2+0,02) : 0,02 = 101x Volume kotak = 0,4x 10 = 0,4 mm3 Jumlah leukosit = (1 ; vol kotak ) xp x N = (1 : 0,4) x 101 x 257 = 64892 sel/mm3