PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA DAGANG DAN GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI

PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA DAGANG DAN GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI SKRIPSI Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi OLEH: ELLORA NIM 081501037 PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2012

PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA DAGANG DAN GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI SKRIPSI Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi OLEH: ELLORA NIM 081501037 PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2012

PENGESAHAN SKRIPSI PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA DAGANG DAN GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI OLEH: ELLORA NIM 081501037 Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Pada Tanggal : Juli 2012 Pembimbing I, Panitia Penguji, Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt. Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt. NIP 195306191983031001 NIP 195008281976032002 Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt. Pembimbing II, NIP 195306191983031001 Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt. Drs. Syafruddin, M.S., Apt. NIP 195201041980031002 NIP 194811111976031003 Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt. NIP 195406281983031002 Medan, Juli 2012 Fakultas Farmasi Dekan, Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002

KATA PENGANTAR Puji dan syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala karunianya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi ini. Skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dengan judul Penetapan Kadar Cefadroxil Dalam Sediaan Kapsul dengan Nama Dagang dan Generik secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi. Pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada, Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi USU Medan, yang telah memberikan fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan. Bapak Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt., dan Bapak Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt., yang telah membimbing dan memberikan petunjuk serta saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ibu Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt., Bapak Drs. Syafruddin, M.S., Apt., dan Bapak Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama perkuliahan dan Bapak Drs. Rasmadin Muchtar, M.S., Apt., selaku penasehat akademik yang selalu memberikan bimbingan, perhatian dan motivasi kepada penulis selama masa perkuliahan. Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tiada terhingga kepada Papa dan Mama yang telah memberikan cinta dan kasih sayang

yang tidak ternilai dengan apapun, pengorbanan baik materi maupun motivasi beserta doa yang tulus yang tidak pernah berhenti. Kakak, Hen dan adik-adikku tercinta serta seluruh keluarga yang selalu mendoakan dan memberikan semangat. Sahabat-sahabat terbaikku STF 2008, terima kasih untuk perhatian, semangat, doa dan kebersamaannya selama ini. Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua. Medan, Juli 2012 Penulis, Ellora NIM 081501037

PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA DAGANG DAN GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI ABSTRAK Kapsul cefadroxil merupakan salah satu antibiotik golongan β-laktam yang banyak terdapat di pasaran. Penetapan kadar kapsul cefadroxil dalam USP Edisi XXX tahun 2007 ditentukan secara KCKT menggunakan fase gerak campuran buffer ph 5 dan asetonitril (960:40). Tujuan penelitian ini adalah menetapkan kadar cefadroxil dalam kapsul generik dan nama dagang secara KCKT menggunakan kolom VP-ODS (250 x 4,6 mm) (Shimadzu) dengan fase gerak metanol:air (60:40), laju air 1 ml/menit dan dideteksi pada panjang gelombang 264 nm.. Untuk menguji validitas metode ini dilakukan uji akurasi, presisi, batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ). Uji validasi metode yang dilakukan terhadap kapsul Librocef (PT Hexpharm Jaya) diperoleh persen perolehan kembali sebesar 99,86%, Relatif Standar Deviasi (RSD) = 0,86%. Ini berarti metode yang digunakan memiliki ketepatan dan ketelitian yang baik. Batas Deteksi (LOD) = 0,8974 µg/ml dan Batas Kuantitasi (LOQ) = 2,9915 µg/ml. Hasil penelitian menunjukkan kadar cefadroxil (PT Dexa Medica) = 118,06% ± 1,51%, cefadroxil (PT Hexpharm Jaya) = 117,56% ± 0,97%, cefadroxil (PT Bernofarm) = 114,41% ± 1,34%, cefadroxil (PT Sanbe Farma) = 118,87% ± 0,64%, Longcef (PT Dankos) = 96,25% ± 0,58%, Librocef (PT Hexpharm Jaya) = 102,94% ± 1,57%, Alxil (PT Bernofarm) = 116,03% ± 1,24%, Cefat (PT Sanbe Farma) = 110,88% ± 1,62%. Hal ini menunjukkan bahwa semua kapsul cefadroxil yang dianalisis memenuhi persyaratan kadar dari sediaan kapsul yang tercantum dalam USP Edisi XXX tahun 2007, yaitu mengandung cefadroxil tidak kurang dari 90% dan tidak lebih dari 120% dari jumlah yang tertera pada etiket. Kata kunci : Cefadroxil, KCKT, validasi, generik dan nama dagang.

DETERMINATION OF CEFADROXIL IN CAPSULE WITH TRADE AND GENERIC NAMES BY HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY ABSTRACT Capsule cefadroxil is one of the β-lactam group of antibiotics that can be found easily in the market. Determination of capsule cefadroxil in USP 30 th Edition 2007 confirmed by HPLC use mobile phase of buffer ph 5 and acetonitrile (960:40). The purpose of this study is the determination of cefadroxil in the capsule of generic and trade names by HPLC using column VP-ODS (250 x 4,6 mm) (Shimadzu) with mobile phase methanol:water (60:40), flow rate 1 ml/minute and detected at wavelength of 264 nm.. The validity test of this method is performed test of the accuracy, the precision, the Limit of Detection (LOD) and the Limit of Quantitation (LOQ). Validation test performed at the Librocef capsules (PT Hexpharm Jaya) show the percent recovery 99.86%, the Relative Standard Deviation (RSD) = 0.86%. This means that the method used has good accuracy and precision. The Limit of Detection (LOD) = 0.8974 µg/ml and the Limit of Quantitation (LOQ) = 2.9915 µg/ml. The results showed that the levels of cefadroxil (PT Dexa Medica) = 118.06% ± 1.51%, cefadroxil (PT Hexpharm Jaya) = 117.56% ± 0.97%, cefadroxil (PT Bernofarm) = 114.41% ± 1.34%, cefadroxil (PT Sanbe Farma) = 118.87% ± 0.64%, Longcef (PT Dankos) = 96.25% ± 0.58%, Librocef (PT Hexpharm Jaya) = 102.94% ± 1.57%, Alxil (PT Bernofarm) = 116.03% ± 1.24%, Cefat (PT Sanbe Farma) = 110.88% ± 1.62%. This indicated that all the analyzed cefadroxil capsules meet the requirements levels specified in USP 30 th Edition 2007, which contains not less than cefadroxil 90.0 percent and not more than 120.0 percent of the labeled amount. Keywords : Cefadroxil, HPLC, validation, generic and trade names.

DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL... LEMBAR PENGESAHAN... KATA PENGANTAR... ABSTRAK... ABSTRACT... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR LAMPIRAN... Halaman i iii iv vi vii viii xii xiii xiv BAB I PENDAHULUAN... 1 1.1 Latar Belakang... 1 1.2 Perumusan Masalah... 2 1.3 Hipotesis... 2 1.4 Tujuan Penelitian... 3 1.5 Manfaat Penelitian... 3 BAB II TINJAUAN PUSTAKA... 4 2.1 Cefadroxil... 4 2.1.1 Sifat Fisikokimia... 4 2.1.2 Farmakologi... 4 2.2 Kromatografi... 5 2.2.1 Penggunaan Kromatografi... 5 2.3 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)... 5

2.3.1 Cara Kerja KCKT... 6 2.3.2 Komponen KCKT... 7 2.3.3 Wadah Fase Gerak... 7 2.3.4 Pompa... 7 2.3.5 Injektor... 8 2.3.6 Kolom... 9 2.3.7 Detektor... 9 2.3.8 Pengolahan Data... 10 2.3.9 Fase Gerak... 10 2.3.10 Fase Diam... 11 2.3.11 Elusi Gradien dan Isokratik... 11 2.3.12 Jenis Pemisahan KCKT... 12 2.4 Validasi Metode... 12 2.4.1 Akurasi (Kecermatan)... 13 2.4.2 Presisi (Keseksamaan)... 13 2.4.3 Batas Deteksi (LOD)... 13 2.4.4 Batas Kuantitasi (LOQ)... 13 BAB III METODE PENELITIAN... 14 3.1 Tempat dan Waktu Penelitian... 14 3.2 Alat... 14 3.3 Bahan... 14 3.4 Pengambilan Sampel... 15 3.5 Prosedur Penelitian... 15 3.5.1 Pembuatan Fase Gerak... 15

3.5.2 Prosedur Analisis... 15 3.5.2.1 Penyiapan KCKT... 15 3.5.2.2 Penentuan Perbandingan Fase Gerak yang Optimum... 15 3.5.3 Analisis Kualitatif Menggunakan KCKT... 16 3.5.3.1 Uji Identifikasi Cefadroxil Menggunakan KCKT... 16 3.5.4 Analisis Kuantitatif... 16 3.5.4.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Cefadroxil BPFI... 16 3.5.4.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Cefadroxil BPFI... 16 3.5.4.3 Penetapan Kadar Sampel... 17 3.5.4.4 Analisis Data Penetapan Kadar Secara Statistik... 17 3.5.5 Validasi Metode... 18 3.5.5.1 Akurasi (Kecermatan)... 18 3.5.5.2 Presisi (Keseksamaan)... 19 3.5.5.3 Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ)... 20 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 21 4.1 Penentuan Komposisi Fase Gerak untuk Mendapatkan Kondisi Kromatografi yang Optimal... 21 4.2 Analisis Kualitatif... 21 4.3 Analisis Kuantitatif... 23 4.3.1 Penentuan Kurva Kalibrasi... 23 4.3.2 Penetapan Kadar Analit dalam Sampel yang Dianalisis... 24

4.4 Hasil Uji Validasi... 25 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN... 28 5.1 Kesimpulan... 28 5.2 Saran... 28 DAFTAR PUSTAKA... 29 LAMPIRAN... 31

DAFTAR TABEL Tabel 1. Tabel 2. Tabel 3. Halaman Pengaruh Komposisi Fase Gerak terhadap Parameter Kromatogram... 21 Hasil Penetapan Kadar Cefadroxil dalam Sediaan Kapsul dengan Nama Dagang dan Generik... 25 Hasil Pengujian Validasi, dengan parameter Akurasi, Presisi, Batas Deteksi (LOD), Batas Kuantitasi (LOQ) Cefadroxil pada kapsul Librocef (PT Hexpharm Jaya) dengan Menggunakan Metode Adisi Standar... 26

DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1. Struktur Cefadroxil... 4 Gambar 2. Instrumen Dasar KCKT... 7 Gambar 3. Tipe Injektor Putaran... 9 Gambar 4. Gambar 5. Gambar 6. Kromatogram kapsul cefadroxil secara KCKT menggunakan kolom Shimadzu VP-ODS (250 x 4,6 mm) dengan perbandingan fase gerak metanol:air (60:40) dan laju alir 1 ml/menit, volume penyuntikan 20 µl dan deteksi pada panjang gelombang 264 nm... 22 Kromatogram hasil spike secara KCKT menggunakan kolom Shimadzu VP-ODS (250 x 4,6 mm) dengan perbandingan fase gerak metanol:air (60:40) dan laju alir 1 ml/menit, volume penyuntikan 20 µl dan deteksi pada panjang gelombang 264 nm... 23 Kurva kalibrasi Cefadroxil BPFI secara KCKT menggunakan kolom Shimadzu VP-ODS (250 x 4,6 mm) dengan perbandingan fase gerak metanol:air (60:40) dan laju alir 1 ml/menit, volume penyuntikan 20 µl dan deteksi pada panjang gelombang 264 nm... 24 Gambar 7. Alat KCKT Shimadzu... 124 Gambar 8. Alat Sonifikator Branson (1510)... 125 Gambar 9. Pompa Vakum (Gast DO A-PG04-BN) dan Alat Penyaring Fase Gerak... 125 Gambar 10. Sonifikator Kudos... 126 Gambar 11. Neraca Analitik... 126 Gambar 12. Syringe KCKT... 127

DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Kromatogram Penyuntikan Larutan Cefadroxil untuk Mencari Komposisi Fase Gerak Metanol-Air yang Optimum pada Analisis... 31 Lampiran 2. Kromatogram Larutan Cefadroxil BPFI pada Pembuatan Kurva Kalibrasi... 33 Lampiran 3. Perhitungan Persamaan Regresi dari Kurva Kalibrasi Cefadroxil BPFI yang Diperoleh secara KCKT pada Panjang Gelombang 264 nm... 43 Lampiran 4. Perhitungan Recovery dengan Metode Adisi Standar... 45 Lampiran 5. Kromatogram Hasil Recovery dari sampel Librocef (PT Hexpharm Jaya)... 49 Lampiran 6. Hasil Pengujian Validasi, dengan parameter Akurasi, Presisi, Batas Deteksi (LOD), Batas Kuantitasi (LOQ) Cefadroxil pada Kapsul Librocef (PT Hexpharm Jaya)... 61 Lampiran 7. Contoh Perhitungan % Recovery dengan Metode Adisi Standar... 62 Lampiran 8. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas kuantitasi (LOQ) Persamaan Regresi : Y = ax + b... 63 Lampiran 9. Kromatogram dari Larutan kapsul Cefadroxil (PT Dexa Medica)... 64 Lampiran 10. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Penyuntikkan Larutan kapsul Cefadroxil (PT Dexa Medica)... 68 Lampiran 11. Kromatogram dari kapsul Cefadroxil (PT Hexpharm Jaya)... 70 Lampiran 12. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Penyuntikkan Larutan kapsul Cefadroxil (PT Hexpharm Jaya)... 74 Lampiran 13. Kromatogram dari larutan kapsul Cefadroxil (PT Bernofarm)... 76

Lampiran 14. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Penyuntikkan Larutan kapsul Cefadroxil (PT Bernofarm)... 80 Lampiran 15. Kromatogram dari Larutan kapsul Cefadroxil (PT Sanbe Farma)... 82 Lampiran 16. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Penyuntikkan Larutan kapsul Cefadroxil (PT Sanbe Farma)... 86 Lampiran 17. (Lanjutan) Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Larutan kapsul Cefadroxil (PT Sanbe Farma)... 87 Lampiran 18. Kromatogram dari Larutan kapsul Longcef (PT Dankos). 89 Lampiran 19. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Penyuntikkan Larutan kapsul Longcef (PT Dankos). 93 Lampiran 20. (Lanjutan) Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Larutan kapsul Longcef (PT Dankos)... 94 Lampiran 21. Kromatogram dari Larutan kapsul Librocef (PT Hexpharm Jaya)... 96 Lampiran 22. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Larutan kapsul Librocef (PT Hexpharm Jaya)... 100 Lampiran 23. Kromatogram dari Larutan kapsul Alxil (PT Bernofarm)... 102 Lampiran 24. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Larutan kapsul Alxil (PT Bernofarm)... 106 Lampiran 25. Kromatogram dari Larutan kapsul Cefat (PT Sanbe Farma)...... 108 Lampiran 26. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Larutan kapsul Cefat (PT Sanbe Farma)... 112 Lampiran 27. Contoh Perhitungan Penimbangan Sampel... 114 Lampiran 28. Hasil Analisa Kadar Cefadroxil dalam Sampel... 115 Lampiran 29. Contoh Perhitungan untuk Mencari Kadar Kapsul Cefadroxil (PT Dexa Medica)... 118

Lampiran 30. Daftar Spesifikasi Sampel... 119 Lampiran 31. Tabel Nilai Distribusi t... 122 Lampiran 32. Sertifikat Cefadroxil BPFI... 123 Lampiran 33. Gambar alat KCKT (Shimadzu)... 124 Lampiran 34. Gambar Sonifikator (Branson 1510) dan Penyaring... 125