40 PERBANDINGAN PROFIL KROMATOGRAM 5 PRODUK MINYAK JINTEN HITAM (Nigella sativa) YANG BEREDAR DI INDONESIA DENGAN KROMATOGRAFI GAS SKRIPSI Oleh : HANIF FAIZAH K 100 080 127 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2012
41 PERBANDINGAN PROFIL KROMATOGRAM 5 PRODUK MINYAK JINTEN HITAM (Nigella sativa) YANG BEREDAR DI INDONESIA DENGAN KROMATOGRAFI GAS SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta Oleh : HANIF FAIZAH K 100 080 127 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2012 ii
iii 42
43 DEKLARASI Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Surakarta, 30 Mei 2012 Peneliti (Hanif Faizah) iv
44 KATA PENGANTAR Bismillahirrohmanirrohiim Assalamu alaikum Wr. Wb Alhamdulillahirobbil alamiin, segala puji syukur kehadirat Allah SWT atas rahmat dan kasih sayang-nya sehingga penulis diberi kemampuan dan kesempatan untuk menyusun dan menyelesaikan skripsi yang berjudul PERBANDINGAN PROFIL KROMATOGRAM 5 PRODUK MINYAK JINTEN HITAM (Nigella sativa) YANG BEREDAR DI INDONESIA DENGAN KROMATOGRAFI GAS. Skripsi ini diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Dalam pelaksanaan penelitian sampai penyelesaian skripsi ini, tidak lepas dari bantuan dan dukungan berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih kepada: 1. Bapak Dr. Muhammad Da i, M.Si., Apt, selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. 2. Bapak Dr. Muhtadi, M.Si selaku pembimbing akademik. 3. Ibu Rosita Melannisa, M.Si., Apt selaku dosen pembimbing utama 4. Bapak Andi Suhendi, S.Farm., Apt selaku dosen pembimbing pendamping 5. Bapak Budi Santoso dan ibu Warsilah selaku orang tua. 6. Mahfur, Netri, Nita, dan Ana selaku tim peneliti. Semoga segala kebaikan yang diberikan menjadi sebuah amalan tersendiri dan semoga kerjasama yang pernah terjalin dapat terus berjalan dengan baik. Penulis berharap agar hasil penelitian ini dapat bermanfaat dan memberikan sumbangan bagi perkembangan ilmu pengetahuan. Wassalaamu alaikum Wr. Wb Surakarta, 30 Mei 2012 Penulis v ( Hanif Faizah )
45 DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL...... ii HALAMAN PENGESAHAN...... iii DEKLARASI... iv KATA PENGANTAR... v DAFTAR ISI... vi DAFTAR TABEL...... viii DAFTAR GAMBAR... ix DAFTAR LAMPIRAN...... x DAFTAR SINGKATAN.... xi INTISARI...... xii BAB I. PENDAHULUAN.... 1 A. Latar Belakang Masalah... 1 B. Perumusan Masalah... 2 C. Tujuan Penelitian... 2 D. Tinjauan Pustaka... 3 1. Tanaman Jinten Hitam...... 3 a. Taksonomi...... 3 b. Deskripsi Tanaman Dan Biji Jinten Hitam... 3 c. Khasiat Jinten Hitam... 3 d. Minyak Atsiri Jinten Hitam... 4 2. Metabolit Sekunder dan Profil Metabolit...... 6 3. Marker Profiling dan Kontrol kualitas...... 7 4. Gas Chromatography Mass Spectroscopy (GC-MS)...... 8 a. Gas Pembawa...... 9 b. Detektor... 9 c. Suhu..... 9 d. Sistem Injeksi... 10 e. Sistem Ionisasi..... 10 f. Metode GC-MS...... 10 E. Keterangan Empiris.... 11 BAB II. METODE PENELITIAN... 12 vi
46 A. Jenis Penelitian... 12 B. Alat dan Bahan... 12 1. Alat yang Digunakan... 12 2. Bahan yang Digunakan... 12 3. Jalannya Penelitian... 12 a. Pengumpulan Produk Minyak Jinten... 12 b. Pemeriksaan Organoleptis Minyak Jinten Hitam... 12 c. Penetapan Bobot Jenis Minyak Jinten Hitam... 12 d. Penetapan Indeks Bias Minyak Jinten Hitam... 13 e. Analisis Minyak Jinten Hitam dengan Menggunakan GC-MS... 13 f. Analisis Data... 13 C. Skema Prosedur Kerja... 14 BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN... 15 A. Kualitas Minyak Jinten Hitam Secara Organoleptis dan Parameter Fisika... 15 B. Profil Metabolit Dengan GC-MS... 16 BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN... 25 A. Kesimpulan... 25 B. Saran... 25 DAFTAR PUSTAKA... 26 LAMPIRAN... 31 vii
47 DAFTAR TABEL Tabel 1. Komponen Minyak Atsiri Jinten Hitam yang Dianalisis dengan GC-MS 5 Tabel 2. Sistem GC-MS yang Pernah Dipakai oleh untuk Analisis Minyak atsiri Jinten Hitam... 10 Tabel 3. Hasil Analisis Organoleptis, Bobot Jenis, Indeks Bias Ke-5 Produk Minyak Jinten Hitam Serta Dari Lembaga Goerlich Pharma Internasional... 17 Tabel 4. Profil Kimia Senyawa dan Pola Fragmentasi... 19 Tabel 5. Senyawa Mayor Pada Minyak Jinten Hitam Pada Ke-5 Produk dan Penelitian Sebelumnya... 20 Tabel 6. Rata-Rata±SD Kadar Relatif (%) Senyawa Metabolit Sekunder Produk Dan Penelitian Sebelumnya... 22 Tabel 7. Perhitungan Indeks Bias Produk Minyak Jinten Hitam... 36 Tabel 8. Analisis Profil Metabolit ke-5 Produk Minyak Jinten Hitam dengan GC-MS... 37 viii
48 DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Rumus struktur metabolit sekunder dalam minyak atsiri jinten hitam.. 6 Gambar 2. Gas Chromatography Mass Spectroscopy... 9 Gambar 3. Perbedaan warna antara 5 produk minyak jinten hitam... 15 Gambar 4. Kromatogram GC-MS Minyak Jinten Hitam Produk A (a), B (b), C (c), D (d) dan E (e)... 18 Gambar 5. Spektrum Massa α-thujen... 43 Gambar 6. Spektrum Massa α pinen... 43 Gambar 7. Spektrum Massa Sabinen... 44 Gambar 8. Spektrum Massa 2-β-pinen... 44 Gambar 9. Spektrum Massa p-simen... 45 Gambar 10. Pola fragmentasi p-simen... 45 Gambar 11. Spektrum Massa Limonen... 46 Gambar 12. Spektrum Massa γ -terpinen... 46 Gambar 13. Spektrum Massa Timokuinon... 47 Gambar 14. Pola Fragmentasi Timokuinon... 47 Gambar 15. Spektrum Massa Karvakrol... 48 Gambar 16. Spektrum Massa Junipen... 48 Gambar 17. Kemasan Minyak Jinten Hitam Produk A, B, C, D dan E... 49 Gambar 18. Kapsul Minyak Jinten Hitam Produk A, B, C, D dan E... 49 Gambar 19. Alat Piknometer 5ml... 50 Gambar 20. Refaraktometer Abbe... 50 Gambar 21. Alat Gas Cromathogrphy-Mass Spektroscopy (GC-MS)... 50 ix
49 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Keterangan Produk Minyak Jinten Hitam... 13 Lampiran 2. Perhitungan Bobot Jenis Produk Minyak Jinten Hitam... 32 Lampiran 3. Perhitungan Indeks Bias Produk Minyak Jinten Hitam... 36 Lampiran 4. Analisis Profil Metabolit ke-5 Produk Minyak Jinten Hitam dengan GC-MS... 37 Lampiran 5. Analisis Cluster data minyak atsiri jinten hitam dengan GC-MS 40 Lampiran 6. Analisis anova kadar relatif timokuinon antar Produk Minyak Jinten Hitam... 42 Lampiran 7. Spektrum Massa Senyawa Pada Produk Minyak Jinten Hitam.. 43 Lampiran 8. Kemasan dan Kapsul Minyak Jinten Hitam Produk A, B, C, D, E 49 Lampiran 9. Gambar Alat-Alat yang Digunakan... 50 x
50 DAFTAR SINGKATAN Rt GC-MS Ip BM Retention Time Gas Cromathogrphy-Mass Spektroscopy Intra Peritonial Berat Molekul xi
51 INTISARI Jinten hitam (Nigella sativa) telah banyak digunakan dalam produksi obat bahan alam. Kualitas obat bahan alam perlu di jaga. Salah satu metode untuk memastikan kualitas obat bahan alam adalah dengan metabolite profiling. Analisis profil kromatogram dilakukan terhadap 5 produk yang beredar dipasaran dengan menggunakan GCMS dengan gas pembawa Helium (laju alir 2,83mL/menit), suhu kolom diprogram dari 70 sampai 150 o C dengan kenaikan suhu 3,5 o C/ menit. Sebanyak 0,5µL diinjeksikan secara manual dalam split mode (1:421,4). Penentuan metabolit dilakukan dengan cara membandingkan spektra massa sampel dengan internal Willey Library. Hasil penelitian dianalisis Cluster dengan mengelompokan data didasarkan pada keberadaan senyawa dan kadar relatif masing-masing senyawa. Hasil penelitian menunjukkan selain produk E memiliki metabolit sekunder yang mirip. Senyawa yang muncul 5-12 senyawa. Kadar relatif timokuinon berdasarkan analisis GC-MS produk A, B, C dan D berturutturut yaitu 33,70%±2,74; 32,80%±2,64; 24,91%±3,39; 28,78%±0,46, sedangkan pada produk E tidak ditemukan adanya timokuinon. Kata kunci: Jinten hitam, Nigella sativa, timokuinon. metabolit sekunder, GC- MS. xii