DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL...i HALAMAN PENGESAHAN...iii HALAMAN PERNYATAAN... iv PRAKATA...v HALAMAN PERSEMBAHAN...ix DAFTAR ISI...x DAFTAR TABEL...xii DAFTAR GAMBAR...xiii DAFTAR LAMPIRAN...xv DAFTAR SINGKATAN...xvi INTISARI...xvii ABSTRACT...xviii I PENDAHULUAN... 1 A. Latar Belakang... 1 1. Perumusan Masalah... 9 2. Keaslian Penelitian... 10 3. Manfaaat Penelitian... 13 B. Tujuan Penelitian... 14 1. Tujuan Umum... 14 2. Tujuan Khusus... 14 II TINJAUAN PUSTAKA... 16 A. Telaah Pustaka... 16 1. Korosi pada Komponen Alat Cekat Ortodonti... 16 1.1. Peran Saliva terhadap Terjadinya Korosi... 19 2. Pengaruh Ion Nikel yang Terlepas dari Alat Ortodonti Cekat terhadap Jaringan di Rongga Mulut... 21 2.1. Sitotoksitas...25 2.2. Pengaruh Ion Nikel terhadap Fibroblas Gingiva......26 2.2.1 Kerusakan DNA... 28 2.2.2 Apoptosis Sel... 30 3. Pengaruh Pemakaian Alat Ortodonti terhadap Peningkatan Pertumbuhan Bakteri dan Fungi di Rongga Mulut... 31 3.1. Streptococcus mutans...34 3.2. Candida albicans...35 4. Kitosan... 37 4.1. Sifat Adsorbsi Kitosan...38 4.2. Interaksi Kitosan dengan Ion logam... 40 4.3. Kitosan sebagai Antibakteri dan Antifungi...41 4.4. Nanokitosan... 43 5. Hidrogel Gelatin... 45 B. Landasan Teori... 49 x
C. Kerangka Teori... 53 D. Hipotesis... 54 III METODE PENELITIAN...56 A. Jenis Penelitian... 56 B. Identifikasi Variabel Penelitian... 56 C. Definisi Operasional Variabel... 57 D. Bahan dan Alat Penelitian... 61 E. Jalannya Penelitian... 64 1. Pembagian Kelompok Penelitian... 64 2. Pembuatan Larutan Nikel pada Saliva Tiruan...64 3. Prosedur Pembuatan Nanokitosan... 65 4. Preparasi Pembuatan Hidrogel Gelatin... 65 5. Karakterisasi Membran Hidrogel Nanokitosan...66 6. Penentuan Daya Serap Membran Hidrogel Nanokitosan dengan Variasi Berat Nanokitosan...66 7. Penentuan Daya Serap Membran Hidrogel Nanokitosan dengan Variasi Waktu Perendaman... 67 8. Pengambilan Sampel Jaringan Gingiva... 67 9. Persiapan Kultur Primer Sel Fibroblas Gingiva Manusia... 67 10. Pembuatan Sub kultur... 68 11. Pembuatan Sampel untuk Uji Sitotoksisitas:... 69 12. Pembuatan Sampel untuk Uji Proliferasi Sel... 70 13. Uji Apoptosis... 71 14. Pengujian Daya Hambat Pertumbuhan S. mutans... 72 15. Pengujian Daya Hambat Pertumbuhan C. albicans... 73 16. Bagan Penelitian...76 F. Analisis Hasil... 81 IV HASIL DAN PEMBAHASAN.......... 83 A. Hasil Penelitian..........83 B. Pembahasan.... 118 V. KESIMPULAN DAN SARAN...142 A. Kesimpulan...142 B.Saran...143 RINGKASAN...145 SUMMARY...153 DAFTAR PUSTAKA.............160 LAMPIRAN.................171 xi
DAFTAR TABEL Tabel 4.1 Rerata penyerapan ion nikel oleh membran hidrogel nanokitosan... 86 Tabel 4.2 Tabel 4.3 Hasil uji anova dua jalur penyerapan ion nikel...89 Ringkasan uji LSD penyerapan ion nikel...89 Tabel 4.4 Rerata dan simpangan baku viabilitas sel fibroblas... 91 Tabel 4.5 Tabel 4.6 Hasil uji anova dua jalur viabilitas sel fibroblas...93 Ringkasan uji LSD viabilitas sel fibroblas...94 Tabel 4.7 Rerata nilai persentase viabilitas/ proliferasi sel fibroblas. 96 Tabel 4.8 Tabel 4.9 Tabel 4.10 Tabel 4.11 Tabel 4.12 Hasil uji anova dua jalur nilai proliferasi sel fibroblas...101 Ringkasan uji LSD proliferasi sel fibroblas...102 Rerata apoptosis sel fibroblas terhadap membran hidrogel nanokitosan-nikel...106 Hasil analisis Friedman untuk kelompok membran hidrogel nanokitosan dan kelompok waktu perendaman.....107 Ringkasan uji Wilcoxon apoptosis sel fibroblas....108 Tabel 4.13 Rerata zona hambat pertumbuhan S. mutans... 109 Tabel 4.14 Analisis statistik dengan Anova dua jalur zona hambat S. mutans... 111 Tabel 4.15 Ringkasan uji LSD zona hambat S. Mutans...112 Tabel 4.16 Rerata zona hambat pertumbuhan C. albicans......114 Tabel 4.17 Tabel 4.18 Analisis statistik dengan Anova dua jalur zona hambat C. albicans...116 Ringkasan uji LSD zona hambat C. Albicans...117 xii
DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Struktur kitosan......38 Gambar 2.2 Bagan kerangka teori...53 Gambar 3.1 Pengukuran diameter zona hambat....75 Gambar 3.2 Bagan penelitian penyerapan ion nikel...76 Gambar 3.3 Gambar 3.4 Gambar 3.5 Gambar 3.6 Gambar 3.7 Gambar 4.1 Bagan penelitian viabilitas sel fibroblas...77 Bagan penelitian proliferasi sel fibroblas...78 Bagan penelitian apoptosis sel fibroblas...79 Bagan penelitian zona hambat pertumbuhan S. mutans...80 Bagan penelitian zona hambat pertumbuhan C. albicans...80 Karakteristik fisik membran hidrogel nanokitosan sebelum dan sesudah perendaman...83 Gambar 4.2 Foto TEM nanokitosan perbesaran 20.000x...85 Gambar 4.3 Gambar 4.4 Gambar 4.5 Gambar 4.6 Gambar 4.7 Foto TEM nanokitosan perbesaran 40.000x...85 Gambaran proliferasi sel fibroblas setelah diberi paparan membran Hg NK 0,6g - Ni, (b) membran Hg NK 0,8g Ni, membran Hg NK 1g Ni, jam ke-24 dilihat menggunakan mikroskop cahaya perbesaran 100x.... 99 Gambaran proliferasi sel fibroblas setelah diberi paparan membran Hg NK 0,6g - Ni, (b) membran Hg NK 0,8g Ni, membran Hg NK 1g Ni, jam ke-48 dilihat menggunakan mikroskop cahaya perbesaran 100x... 99 Gambaran proliferasi sel fibroblas setelah diberi paparan membran Hg NK 0,6g - Ni, (b) membran Hg NK 0,8g Ni, membran Hg NK 1g Ni, jam ke-72 dilihat menggunakan mikroskop cahaya perbesaran 100x... 99 Gambaran sel setelah pewarnaan double staining pada paparan membran Hg NK 0,6g Ni dengan lama peredaman (a) 15, (b) 30 dan (c) 45 menit... 105 xiii
Gambar 4.8 Gambar 4.9 Gambaran sel setelah pewarnaan double staining pada paparan membran Hg NK 0,8g Ni dengan lama peredaman (a) 15, (b) 30 dan (c) 45 menit... 105 Gambaran sel setelah pewarnaan double staining pada paparan membran Hg NK 1g Ni dengan lama peredaman (a) 15, (b) 30 dan (c) 45 menit...105 Gambar 4.10 Gambaran sel setelah pewarnaan double staining pada paparan kontrol membran NK 0,8g Ni dengan lama peredaman (a) 15, (b) 30 dan (c) 45 menit... 105. Gambar 4.11 Zona hambat S. mutans dalam sumuran setelah diberi perlakuan (a) membran Hg NK 0,6g; (b) membran Hg NK 0,8g; (c) membran Hg NK 1g... 109 Gambar 4.12 Zona hambat C. Albicans dalam sumuran setelah diberi perlakuan (a) membran Hg NK 0,6g; (b) membran Hg NK 0,8g; (c) membran Hg NK 1g....... 113 Gambar 4.13 Gambar ikatan ion nikel dengan gugus amina dan hidroksil nanokitosan...,...122 Gambar 4.14 Pengaruh logam berat pada kerja enzim...126 xiv
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 Lampiran 2 Lampiran 3. Lampiran 4 Lampiran 5 Lampiran 6 Lampiran 7 Lampiran 8 Lampiran 9 Lampiran 10 Lampiran 11 berat kitosan dan waktu perendaman terhadap penyerapan ion nikel....171 berat kitosan dan waktu perendaman terhadap viabilitas sel fibroblas...175 berat kitosan dan waktu perendaman terhadap proliferasi sel fibroblas 179 berat kitosan dan waktu perendaman terhadap apoptosis sel fibroblas...182 berat kitosan dan waktu perendaman terhadap pertumbuhan bakteri S. Mutans...184 berat kitosan dan waktu perendaman terhadap pertumbuhan C. Albican...187 Surat-surat perijinan dan keterangan selesai penelitian....190 Data hasil penelitian penyerapan ion nikel...196 Data hasil penelitian sitotoksisitas sel fibroblas... 200 Data hasil penelitian proliferasi sel fibroblas........201 Data hasil penelitian zona hambat C. albicans...204 Lampiran 12 Data hasil penelitian zona hambat S. mutans...205 xv