UJI PENDAHULUAN KANDUNGAN KIMIA BAHAN ALAM 1. Pemeriksaan Kandungan Kimia Alkaloid a. Cara Calvenor & Fitzgeraldo Sampel Segar (2-4 g) Dipotong Kecil Digerus NH 4 OH & CHCl 3 5 ml H 2 SO 4 2 N 10 tts Fase Air Pereaksi Meyer + Alkaloid Jika Terdapat Endapan Page 1
b. Tes Kimia Ekstrak Setara 20 g Bahan HCl 2 N 10 ml Dipanaskan Kemudian Didinginkan Dipanaskan 2-3' Kemudian Didinginkan H 2 SO 4 2 N 10 tts NaCl 0,5 g Disaring A Pereaksi Meyer + Alkaloid Jika Terdapat Endapan HCl 2 N 10 ml C NH 4 OH 20 % CHCl 3 10ml B Blangko Fase Air Ekstraksi Fase CHCl 3 HCl 2N 10 ml Na 2 SO 4 eksikatus Disaring & Meyer & Wagner Ekstrak + Alkaloid Jika Terdapat Endapan Page 2
2. Pemeriksaan Kandungan Kimia Triterpen/Steroid & Saponin Sampel Segar (2-4 g) Dipotong Kecil Etanol Digerus, Didihkan 15' & Disaring Diuapkan Ekstrak Kering Air Sedikit Disuspensikan Eter Secukupnya Air Sedikit Libermann & Bauchard Terbentuk Busa Merah-Merah Muda + Saponin + Triterpen/Saponin Page 3
3. Pemeriksaan Kandungan Kimia Glikosida Saponin a. Percobaan Pendahuluan 3 Tabung Reaksi * Tes Buih Ekstrak Setara 2 g Sageneae Radix 1 g Aquadest 10 ml Buih Cat : buih 3 cm dari permukaan * Tes Hemolisis Darah Alkohol Aquadest 10 ml Buih 3 Tabung Reaksi Aquadest 10 ml Buih Ekstrak Setara 2 g Sageneae Radix 1 g Aquadest 10 ml Beberapa tts darah Alkohol Aquadest 10 ml Aquadest 10 ml Beberapa tts darah Amati visual & mikroskop Beberapa tts darah Amati visual & mikroskop Amati visual & mikroskop Page 4
b. Reaksi Kimia Ekstrak setara 10 g bahan Heksan 10 ml Residu & Dekanter bbrp kali hingga heksan tdk berwarna CHCl 3 5' Na 2 SO 4 anhidrta 100 ml Dekanter Saring A CH3COOH anhidrat 3 tts B H 2 SO 4 1-2 ml H 2 SO 4 1 tts Hijau/biru (Saponin Steroid) Merah/Violet (Terpenoid Steroid) Kuning muda (Saponin jenuh) Blangko Merah pada fase air (Saponin tdk jenuh) A : Tes libermann-bauchard B : Tes Salkowki Page 5
c. Kromatografi Lapis Tipis () Ekstrak Setara 10 g Bahan HCl 1 N 2 ml Refluks 2-6 jam; didinginkan Amonia Netralkan; Ekstrak Kental Heksan, Ekstraksi dgn Hexan Dekanter 2 kali Fase Hexan Fase Air Balangko Residu CHCl 3 3 tts Hexan : Aseton Antimon (III) Klorida / CH 3 CHOOH Merah Muda - Violet Page 6
4. Pemeriksaan Kandungan Kimia Glikosida Jantung a. Tes Warna Ekstrak setara 10 g bahan Heksan 10 ml & Dekanter bbrp kali hingga heksan tdk berwarna A FeCl 3 3ml Dekanter Saring HCl Pekat 1 ml Melalui Dinding Coklat merah menjadi biru/hitam Residu B CHCl 3 10 ml Na 2 SO 4 anhidrat 100 ml Dekanter Saring Kocok 5' CH 3 COOH anhidrat 3 tts H 2 SO 4 1 tts A : Tes Killer Keliani B : Tes Libermann-Bauchard Hijau/biru (Saponin Steroid) Merah/violet(Terpen Steroid) Kuning muda (Steroid jenuh) Page 7
5. Pemeriksaan Kandungan Kimia Falvonoid Ekstrak setara 10 g bahan Heksan Metanol 80 % Ekstrasi berulang hingga heksan tidak berwarna NaCl 0,5 g Panaskan HCl 0,5 ml HCl 0,5 ml Blangko Na 2 SO 4 eksikatus Totol Orange/merah (flavon) Merah (Flavonoid) Merah pucat-merah tua (Flavonon) Mg 3-4 potong Biarkan 10 ' Aquades & Asetil OH 1 ml BuOH : CH 3 COOH : H 2 O 4 : 5 : 1 Lampu UV Biru - Hijau Merah - Orange Kuning/Coklat - Hijau Kuning Page 8
b. Kromatografi Lapis Tipis () Ekstrak setara 0,1-0,2 ml c. Kromatografi Lapis Tipis () CHCl 3 : Metanol (4:1) Pereaksi Kedde Noda Violet (+ G. Jantung) Ekstrak setara 0,1-0,2 ml Benzen : Etil Asetat : CH 3 COOH 75 : 24 : 1 10 % KOH metanol Kuning - Coklat Merah Violet Hijau-Violet Page 9
6. Pemeriksaan Kandungan Kimia Tannin & Polifenol Ekstrak setara 10 g bahan Aquades panas 20 ml Kocok NaCl 10% 5 tts Saring Gelatin 1% NaCl 10% Blangko Na 2 SO 4 eksikatus Totol Jika terdapat endapan + Tannin & Polifenol FeCl 3 3 tts Gelatin 1% Hijau biru-hitam hijau (+ tannin cathecol) Biru hitam (+ tannin poligalol) NaCl 10% FeCl 3 3 tts Hijau-Biru hitam (+ polifenol) (-tannin) Page 10
7. Pemeriksaan Kandungan Kimia Antrakinon a. Reaksi Warna * Tes Borntrager Ekstrak setara 1g bahan Aquades 10 ml Saring Benzen Fase Benzen Ekstraksi 2 kali Amonia 5 ml Kocok Blangko Fase air merah Page 11
* Tes Modifikasi Borntrager Ekstrak setara 1g bahan KOH 5 N 10 ml H 2 SO 4 encer 1 ml Panaskan 10 ' & Saring CH 3 COOH glasial Hingga Bereaksi Asam Benzen Fase Benzen Ekstraksi 2 kali Amonia 5 ml Kocok Blangko Fase air merah Page 12
8. Pemeriksaan Kandungan Kimia Glikosida Bahan segar 2-5 g Dipotong kecil Aquades & CHCl 3 bbrp tts Kocok Cairan Emulsi 1 ml Kertas Pikrat Tabung Rx Panaskan 34-35 0 C Tabung Rx + Bayangan merah 9. Pemeriksaan Kandungan Kimia Minyak Atsiri Bahan segar 2-5 g Destilasi Uap Air Ekstrak 0,1-0,2 ml Kocok CHCl 3 : Benzen (1:1) Pereaksi as. fosfomolibdat Noda biru (+ M. Atsiri) Page 13