2. TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Klasifikasi tanaman nenas

Transkripsi

1 2. TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Klasifikasi tanaman nenas Nenas (Ananas comosus L. Merr) merupakan tanaman tahunan monokotil yang terdiri dari 45 genus dan 2000 jenis dalam satu famili. Nenas memiliki banyak macam dan jenis, tetapi yang bersifat komersil hanya Ananas comosus. Secara taksonomi Ananas comosus termasuk dalam Devisi Spermatophyta, Ordo Farinosae, Famili Bromeliaceae, Genus Ananas dan Spesies Ananas comosus. Ananas camosus terdiri dari 4 golongan Cayenne, Queen, Spanish dan Abacaxi-Punambuco (Dinas Pertanian Tanaman Pangan 1994; Samson 1980). Berdasarkan karakteristik tanaman dan buahnya, nenas dapat dikelompokkan dalam lima kelompok yaitu Cayenne, Queen, Spanish, Abacaxi dan Maipure (Nakasone & Paull 1999). Pengelompokan tersebut berdasarkan pada ukuran tanaman, ukuran buah, warna dan rasa daging buah, serta pinggiran daun yang rata dan berduri (Nakasone & Paull 1999). Kultivar Cayenne merupakan golongan yang heterozigot. Menurut sejarah, Cayenne adalah hibrida yang berasal dari tipe tetua yang tidak diketahui. Perubahan genotipe nenas Cayenne terjadi akibat mutasi gen dan kromosom somatik. Pada saat terjadi mutasi somatik, Cayenne mampu bertahan hidup, sehingga populasi nenas Cayenne yang ada sekarang, bukan lagi sebuah klon, tetapi merupakan klon yang penampilannya mirip (Collins 1968). Nenas Cayenne merupakan jenis yang paling banyak dibudidayakan, tinggi tanaman ini berkisar 1 m, lebar 1.5, berdaun panjang (100 cm x 6.5 cm), ujung daun sedikit berduri, jarak antar daun berdekatan, dan berbunga hanya satu kali (Samson 1980). Permukaan atas daun berwarna hijau tua dengan warna belang merah kecoklatan yang tidak teratur, karena adanya antocianin dalam epidermis. Pada permukaan daun atas terdapat beberapa trikoma yang tersebar. Permukaan daun bawah berwarna kelabu keperakan, karena tertutup oleh trikoma yang tebal. Pada saat pertumbuhan vegetatif maksimum, jumlah daun berkisar helai (Ratnaningsih 2002). Bobot buah 2.5 kg, bentuk buah silindris, daging buah berwarna kuning pucat sampai kuning (Coronel dan Verheij 1997; Wee dan Thongtham 1997).

2 Nenas Queen pada umumnya ditanam didataran rendah, ukuran tanaman, daun dan buah yang lebih kecil ( kg). Nenas Queen memiliki ciri-ciri, yaitu tepi daun berduri, bentuk buah konicol, mata menonjol, warna kulit kuning, warna daging buah kuning tua, hati kecil, rasa manis, kandungan asam dan serat rendah, kurang baik untuk pengalengan. Varietas yang termasuk jenis ini adalah Queen, Mac Gregor, Natal, Ripley dan Alexandria (Sari 2002). Nenas Queen kurang disukai untuk pengolahan dan pembekuan karena bau dan rasa tidak diinginkan untuk penyimpanan. Nenas Queen rasanya manis, renyah dan aromanya harum dibandingkan yang lain (Ensminger et al dalam Sari 2002) Nenas Spanish memiliki ukuran tanama n dan ukuran buah antara Cayenne dan Queen. Nenas ini mempunyai daun panjang dan berduri, berat buah berkisar kg dan berbentuk segi empat, tangkai buah ramping dengan panjang cm, fruitlet (buah kecil) lebih besar daripada Cayenne namun jumlahnya lebih sedikit. Rata-rata jumlah buah kecil antara Cawan bunga lebih dalam menyerupai Queen. Aroma menyenangkan sama sekali berbeda dengan Cayenne dan Queen. Kulit buah kasar dan kuat sehingga buah tidak mudah rusak dalam pengangkutan. Warna kulit buah merah oranye, hati buah relatif lebih besar dari pada Cayenne. Panjang mahkota cm, daun membengkok ke belakang, panjang dan berduri, seringkali terdapat mahkota-mahkota kecil mengelilingi dasar dari mahkota besar. Tunas tangkai berjumlah 2 8, tumbuh berdekatan dengan buah dan kadang melekat pada dasar buah. Tunas batang berjumlah 1 3 (Dinas Pertanian Tanaman Pangan 1994). Nenas Abacaxi, nenas ini memiliki ciri-ciri panjang daun berkisar antara cm dan berduri, tangkai buah kaku, dengan panjang sekitar 40 cm. Golongan Abacaxi banyak ditanam di Brazilia untuk keperluan lokal. Buah berbentuk seperti paramida, berat kurang lebih 1.5 kg, fruitlet kecil, cawan bunga dangkal, daging buah kuning pucat sekali. Buah mempunyai serat sangat kecil, cairan buah banyak, flavor bagus. Nenas ini kurang baik untuk pengalengan. Contoh varietas adalah Abacaxi, Abaka, Sugar Loaf, Papelon, Venezolara dan Amarela. Nenas Maipure, jenis ini dibudidayakan di Amerika Tengah dan Selatan sebagai buah segar untuk pasar lokal. Pinggir daun tidak berduri, bobot buah 7

3 sekitar kg, berbentuk silinder, warna kulit buah kuning atau merahorange, warna daging buah putih atau kuning tua, hati kecil sampai medium, rasa lebih manis dari Cayenne, berserat, sangat juicy, kurang baik untuk pengalengan. Maipure, Perolena, Lebrija, Monte Libio, dan Rondon termasuk varietas jenis Maipure. 2.2 Morfologi tanaman nenas Nenas memiliki daun berbentuk pedang dengan panjang mencapai 1 m atau lebih, lebar 5 sampai 8 cm, pinggir daun berduri atau hampir rata, berujung lancip, bagian atas daun berdaging, berserat, beralur, tersusun dalam spiral yang tertutup, bagian pangkalnya memeluk poros utama (Verheij & Coronel 1992). Jumlah daun yang terbentuk dapat mencapai 70 sampai 80 helai. Permukaan daun atas, licin seperti lapisan lilin, berwarna hijau terang atau coklat kemerahan, permukaan bawahnya terdapat garis-garis linier berwarna putih keperakan, mudah lepas dari epidermis yang berwarna hijau terang. Stomata tersusun dalam garis putus-putus. Stomata berada di bagian sisi dan bawah permukaan daun diantara garis-garis linier (Collins 1960). Batang nenas selalu tertutup daun, jika daun dilepas terlihat ruas-ruas pendek dengan panjang bervariasi antara 1 sampai 10 cm dengan ruas yang paling panjang terdapat di bagian tengah batang, panjang batang berkisar 20 sampai 25 cm dengan diameter bagian bawahnya 2 sampai 3.5 cm dan semakin ke atas diameter batang semakin besar yaitu 5.5 sampai 6.5 cm serta bagian puncaknya mengecil (Collins 1960). Nenas memiliki akar serabut dengan sebaran ke arah vertikal dan horizontal. Perakaran dangkal dan terbatas walaupun ditanam pada media yang paling baik. Kedalaman akar nenas tidak akan lebih dari 50 cm (Samson 1980). Akar tunggang hanya terbentuk jika bibit berasal dari biji. Rangkaian bunga dan buah tanaman nenas terdapat pada meristem apikal, batang berwarna lembayung kemerah-merahan, masing-masing bunga diiringi oleh satu braktea yang lancip. Nenas memiliki banyak bunga yang tak bertangkai (100 sampai 200), memiliki daun kelopak 3 helai, pendek dan berdaging, daun mahkota 3 helai, membentuk tabung yang mengelilingi 6 lembar benang sari dan 8

4 satu lembar tangkai putik yang bercabang tiga (Coronel & Verheij 1997), bersifat hermaprodit dan self incompatible (Collins 1960). Sifat self-incompatible pada nenas (A. comosus) karena adanya lokus tunggal S dengan multiple alel, tetapi pada spesies A. ananassoides, A. bracteatus, dan A. saginarius adalah self-fertile (Brewbaker & Gorrez 1967 dalam Hadiati 2002), sehingga biji akan terbentuk jika terjadi penyerbukan silang. A. comosus mempunyai fertilitas yang rendah. Hal ini terlihat dari persentase ovule yang menghasilkan biji setelah penyerbukan, yaitu kurang dari 5 %. Pada kultivar Cayenne, Red Spanish, Singapore Spanish, Perola, dan Queen dihasilkan kurang dari 2 biji/bunga, sedangkan pada genotipe yang mempunyai daun piping dihasilkan 2 sampai 5 biji/bunga (Leah & Coppens 1996). Buah nenas merupakan buah majemuk yang terbentuk dari gabungan 100 sampai 200 bunga, berbentuk silinder, dengan panjang buah sekitar 20.5 cm dengan diameter 14.5 cm dan beratnya sekitar 2.2 kg (Collins 1960). Kulit buah keras dan kasar, saat menjelang panen, warna hijau buah mulai memudar. Soedibyo (1992) menyatakan bahwa diameter dan berat buah nenas semakin bertambah sejalan dengan pertambahan umurnya, sebaliknya untuk tekstur buah nenas, semakin tua umur buah maka teksturnya akan semakin lunak (Coronel & Verheij 1997). 2.3 Persyaratan tumbuh tanaman nenas Nenas dapat tumbuh pada berbagai jenis tanah. Nenas sering ditemukan di daerah tropis, terutama di tanah latosol coklat kemerahan atau merah. Tanaman ini memiliki sistem perakaran yang dangkal, sehingga memerlukan tanah yang memiliki sistem drainase dan aerase yang baik, seperti tanah berpasir dan banyak mengandung bahan organik. ph yang optimum untuk pertumbuhan nenas adalah 4.5 sampai 6.5. Nenas secara alami merupakan tanaman yang tahan terhadap kekeringan karena nenas termasuk jenis tanaman CAM, yaitu tanaman yang membuka stomata pada malam hari untuk menyerap CO 2 dan menutup stomata pada siang hari. Hal ini akan mengurangi lajunya transpirasi. Nenas memerlukan sinar matahari yang cukup untuk pertumbuhan. Kondisi berawan pada musim hujan 9

5 menyebabkan pertumbuhannya terhambat, buah menjadi kecil, kualitas buah menurun dan kadar gula menjadi berkurang. Sebaliknya bila sinar matahari terlalu banyak maka tanaman akan terbakar dan buah cepat masak. Intensitas rata-rata cahaya matahari pertahunnya yang baik untuk pertumbuhan nenas berkisar 33 sampai 71 % (Coronel & Verheij 1997). Temperatur optimum untuk pertumbuhan nenas adalah 23 o C sampai 32 o C. Temperatur maksimum dan minimum adalah 30 o C-20 o C. Menurut Coronel & Verheij (1997) pada suhu dan kelembaban yang tinggi menyebabkan daun-daun tanaman menjadi lunak, buah menjadi besar dengan kandungan asam rendah dan pertumbuhan menjadi sangat rendah. Ketinggian tempat untuk tanaman nenas berkisar m dpl. Untuk varietas Cayenne, bila ditanam di dataran rendah akan menghasilkan kualitas yang lebih rendah dengan ciri buah nenas dan daunnya lebih kecil. Jika daerahnya lebih tinggi dari 760 m di atas permukaan laut, tanaman nenas menjadi lebih pendek, daun lebih pendek dan menyebar, nenas lebih ringan dan fruitlet menonjol keluar, sehingga permukaan lebih kasar. Nenas Cayenne yang ditanam di Kenya pada ketinggian 1400 sampai 1800 mdpl memiliki perbandingan gula-asam 16:1. Pada ketinggian 1150 mdpl perbandingan gula-asam menjadi 38:1. Sementara di Guatemala, Amerika Tengah ada nenas yang daunnya berduri, hidup pada ketinggian 1555 mdpl. Di Srilangka terdapat tanaman nenas yang ditanam pada daerah dengan ketinggian 1221 mdpl. Menurut Dinas Pertanian Tanaman Pangan (1994) tanaman nenas dapat tumbuh di daerah dengan curah hujan 635 mm sampai dengan 2500 mm per tahun, namun curah hujan optimum untuk pertumbuhan dan perkembangannya adalah antara 1000 sampai 1500 mm per tahun. Daerah yang memiliki kelembaban tinggi baik untuk mencegah transpirasi yang terlalu besar, sehingga lahan di dekat pantai akan sangat mendukung pertumbuhan dan produksi nenas. 2.4 Bahan perbanyakan tanaman nenas Bahan perbanyakan nenas dapat berasal dari organ generatif maupun vegetatif. Bahan perbanyakan generatif (sexual) membutuhkan waktu yang sangat lama (± 5 tahun) dan lebih diarahkan untuk program pemuliaan tanaman dengan tujuan menghasilkan varietas unggul (Sripaoraya et al. 2003). 10

6 Perbanyakan vegetatif lebih menguntungkan karena sifat-sifat tanaman induk dapat diturunkan kepada keturunannya secara identik dan dapat berproduksi dengan cepat. Perbanyakan tanaman nenas secara vegetatif dapat dilakukan dengan mengunakan anakan, tunas batang, tunas tangkai, tunas dasar buah, mahkota dan batang bermata. Sumber: Pineapple, the plant and its culture by Kenneth G. Rohrbach, Hawaii Agricultural Experiment Station, University of Hawaii, dalam (Bartholomew et al. 2000) Gambar 2. Bagian tanaman nenas pada penampang melintang. Anakan nenas tumbuh dari bagian batang yang berada di bawah permukaan tanah. Tunas ini jumlahnya sedikit dan biasanya telah berakar. Bahan tanaman yang berasal dari tunas anakan lebih cepat menghasilkan buah, yaitu lebih kurang satu tahun. Tunas batang (sucker) merupakan tunas yang keluar dari bagian batang bawah di atas tanah. Tunas menyebar dengan panjang 35 sampai 40 cm, jumlah tiap tanaman bisa 2 sampai 3 (Collins 1968). Biasanya, tunas seperti ini belum berakar, dan menghasilkan buah lebih lama di bandingkan anakan, yaitu 15 sampai 18 bulan setelah ditanam. 11

7 Tunas tangkai (rotons) muncul dari tangkai buah, pada umumnya ukuran tunas tangkai lebih kecil dari pada tunas batang. Jumlahnya relatif lebih sedikit, bentuknya lebih ramping dan daunnya lebih panjang dari pada tunas batang, mampu menghasilkan buah pada umur 18 bulan setelah ditanam. Tunas dasar buah (slips) adalah tunas yang keluar dari dasar buah atau ujung tangkai buah. Tunas dasar buah jumlahnya adalah 0 sampai 10 buah per tanaman, baik digunakan jika beratnya 340 sampai 450 g (Collins 1968). Tanaman dapat berbuah setelah berumur 20 bulan dari saat tanam. Mahkota (crown) merupakan tunas yang tumbuh pada bagian pucuk dari buah, umumnya hanya satu, namun kadang-kadang dapat lebih. Tanaman dapat menghasilkan buah pada umur 22 sampai 24 bulan setelah tanam (Dinas Pertanian Tanaman Pangan 1994). Mata tunas yang tidur terdapat pada bagian batang. Mata tunas ini dapat dijadikan sebagai bahan untuk perbanyakan. Satu batang nenas yang telah tua memiliki 80 mata tunas yang tidur maka dapat dihasilkan 80 bibit. Tanaman yang diperoleh akan berbunga setelah 2 sampai 3 tahun setelah ditanam. 2.5 Perbanyakan In-Vitro Perbanyakan bibit dalam skala besar merupakan salah satu aspek yang sangat penting, dimana produksi memerlukan bibit dari varietas unggul dalam jumlah banyak, seragam, bebas hama dan penyakit serta tersedia secara kontiniu. Perbanyakan dengan kultur jaringan atau disebut juga dengan in-vitro culture, merupakan suatu teknik perbanyakan vegetatif yang banyak digunakan karena memiliki beberapa keuntungan antara lain, tingkat mutiplikasi yang tinggi, seragam secara genetik, memiliki sifat seperti induknya, bibit dapat dihasilkan setiap waktu, tidak tergantung pada musim, dapat menghasilkan bibit yang bebas penyakit, bahan tanaman yang dibutuhkan sedikit, tidak merusak pohon induk, dan tempat untuk produksi bibit yang relatif sempit. Metode perbanyakan secara kultur jaringan dapat dilakukan melalui: 1) perangsangan tunas lateral untuk membentuk tunas ganda yang melebihi pertumbuhan normal. Bahan tanaman yang digunakan, biasanya berupa batang yang memiliki satu buku atau tunas terminal. Cara ini lebih mudah dan aman dalam mempertahankan sifat pohon induknya. 2) Inisiasi tunas adventif yang 12

8 langsung dari eksplan atau kalus. 3) Pembentukan benih somatik dari regenerasi melalui embriogenesis somatik. Cara ke 2 dan ke 3 telah banyak dilaporkan tetapi menyebabkan ketidakstabilan pada keturunannya apabila terbentuk melalui kalus. Jika dibandingkan dengan metode konvensional, metode kultur jaringan lebih menguntungkan, khususnya untuk perbanyakan yang dilakukan pada tanaman heterozigot, sexual incompatible, dan untuk genotipe yang steril (Connger 2000). Jika tanaman heterozigot diperbanyak secara konvensional, maka terjadi segregasi sehingga sifat anakan tidak sama dengan induknya. Permasalahan ini dapat diatasi dengan teknik perbanyakan in vitro. Demikian juga halnya untuk tanaman steril dan sex incompatible yang tidak menghasilkan biji, dapat diperbanyak dengan mudah. 2.6 Kultur jaringan nenas Menurut Wee dan Thongtham (1997) teknik kultur jaringan pada tanaman nenas telah dikembangkan untuk produksi secara besar-besaran. Zepeda dan Sagawa (1981) menyatakan bahwa rata-rata 16 tunas diperoleh dari 23 tunas aksilar per mahkota (crown) pada media ½ MS + 25% air kelapa. Sekitar planlet dapat dihasilkan dalam 12 bulan dari satu buah mahkota nenas dengan teknik in vitro. Berdasarkan penelitian Kiss et al. (1995) sekitar planlet pada medium N µm BA atau planlet pada medium N µm kinetin dapat dihasilkan dari satu planlet berakar selama 12 bulan. Hasil penelitian Kiss et al. (1995) pada tanaman nenas cv. Smooth Cayenne de Oriental dan Espenola Raja bahwa pangkal batang nenas hasil in vitro yang ditumbuhkan pada medium 10 µm NAA dan diinkubasi dalam ruang gelap pada suhu 28 o C akan menghasilkan tunas etiolasi. Tunas etiolasi yang diregenerasikan selama hari setelah tanam akan menghasilkan lebih dari satu tunas etiolasi per pangkal batang yang digunakan. Pada inkubasi hari setelah tanam dalam ruang gelap, panjang tunas etiolasi mencapai 6-10 cm dengan 7 buku per tunas. Tunas etiolasi yang dihasilkan selama hari setelah induksi di subkultur pada media N 6 +BA atau kinetin dengan rata-rata tunas per eksplan, setiap eksplan terdiri dari 7 buku pada ruang terang (16-h photoperiod) selama 4 minggu. 13

9 Hasil penelitian Devilana (2005) pada tanaman nenas cv. Queen yang ditumbuhkan pada media MS mg/l NAA, dan MS mg/l NAA dapat meningkatkan jumlah akar pada 15 dan 17 MST. Hasil penelitian Murtini (2005) pada tanaman nenas cv. Smooth Cayenne yang ditumbuhkan pada media MS dengan penambahan 1.0 mg/l dan 2.0 mg/l NAA dapat meningkatkan rata-rata eksplan bertunas berakar pada 7 MST. 2.7 Zat pengatur tumbuh (ZPT) Hormon merupakan senyawa organik yang mempengaruhi proses fisiologi tanaman pada konsentrasi rendah. Hormon tanaman mempengaruhi proses pertumbuhan, difrensiasi, dan perkembangan tanaman. Selain itu, hormon juga mengontrol proses pembukaan stomata (Devies 1995; Bidwell 1974). Secara umum, hormon disintesis di suatu tempat, kemudian ditransportasikan ke jaringan target, dan mempengaruhi proses fisiologi jaringan tersebut pada konsentrasi tertentu. Sitokonin merupakan hormon turunan adenin. Golongan ini berperan penting dalam pengaturan pembelahan sel dan morfogenesis (Gunawan 1988). Sitokinin dan turunannya, banyak terdapat pada bagian ujung akar dan meristem yang mengalami pembelahan sel secara cepat, serta bagian tanaman yang sedang berkembang. Fungsi fisiologis sitokinin antara lain, berkaitan erat dengan pembelahan sel, pembesaran sel, pertumbuhan tunas lateral, pembentukan kloroplas, pemecahan dormansi, pembukaan stomata, pembungaan dan pembentukan buah partenokarpi selain itu sitokinin juga berperan dalam penghambatan tumbuhan. Pembelahan mitosis tidak akan terjadi tanpa siokinin. Sitokinin memiliki peran utama dalam pembentukan benang gelondong pada fase metaphase mitosis Salah satu hormon yang dikenal mendorong perpanjangan sel pucuk adalah auksin. Seperti halnya dengan fitohormon lain, auksin juga aktif dalam kadar rendah. Hubungan antara pertumbuhan dan kadar auksin adalah sama pada akar, batang dan tunas. Auksin merangsang pertumbuhan pada kadar rendah, sebaliknya menghambat pertumbuhan pada kadar tinggi (Kusumo 1990). Kandungan auksin yang tinggi dapat menimbulkan terjadinya dominasi apikal. Auksin mengalir satu 14

10 arah yaitu dari pucuk ke pangkal melalui batang. Pada jaringan yang tua, biasanya batang atau tangkai daun, aliran hormon berlangsung melalui floem. Tidak semua auksin ditranslokasikan secara basepetal, tetapi ada juga auksin yang ditranslokasikan secara acropetal (Bidwell 1974). Dalam menginduksi tunas adventif, sitokinin dan auksin memiliki peran penting. Nisbah auksin dan sitokinin menentukan apakah suatu kalus akan membetuk tunas adventif atau akar. Sitokinin bersinergi dengan auksin dalam menstimulasi pembelahan sel secara kontiniu dalam kultur jaringan pith tembakau, tetapi bersifat antagonis dengan auksin dalam mengontrol inisiasi tunas dan akar dan juga dalam proses dominasi apikal (Binns 1994). Pada konsentrasi tinggi, sitokinin mendorong proliferasi, sebaliknya menghambat pembentukan akar. Penggunaan sitokinin pada konsentrasi tinggi pada Cymbidium sinensis willd menghambat pemanjangan tunas dan inisiasi akar (Chang dan Chang 2000), pada tanaman ubi kayu menghasilkan tunas hiperhidrik (Konan et al. 1997), dapat menyebabkan fitrifikasi atau suatu kondisi fisiologis in vitro yang menyebabkan disorganisasi seluler (Ziv 1991). Membentuk kalus pada bagian dasar eksplan (Lakshamana et al. 1997), pembengkakan akar dan pembentukan akar terhenti (Fratini dan Ruiz 2002) dan meningkatkan produksi etilen (Kevers dan Gasper 1985). Berdasarkan stuktur kimia ada dua kelompok sitokinin yaitu turunan adenin (BA, zeatin dan kinetin) dan turunan fenilurea (TDZ). TDZ (N-phenyl- N (1,2,3-thidiazol-5-yl)urea) adalah jenis herbisida yang mempunyai aktivitas sama dengan sitokinin. TDZ dapat mengsubstitusi sitokinin jenis adenin dalam beberapa sistem kultur sel, meliputi kultur kalus dan perbanyakan pada jenis tanaman berkayu. TDZ dilaporkan memiliki efektivitas yang tinggi pada konsentrasi rendah (nm-µm) (Thomas dan Katterman, 1986; Murthy et al. 1995) dan telah banyak digunakan untuk menstimulasi regenerasi dan proliferasi tunas aksilar, (Gribaudo dan Fronda 1991; Henny dan Fooshe, 1990; Kerns dan Martin 1986; kenyand et al. 1994; Mondal et al. 1998; Prathanturarug et al. 2005) kultur kalus (Thomas dan Katterman 1986), somatik embriogenesis (Victor et al. 1999) pada beberapa spesies tanaman. 15

11 TDZ telah banyak digunakan untuk meningkatkan kecepatan multiplikasi diantaranya pada tanaman Arachis hypogaea (Kanyand et al. 1994; Victor et al. 1999), Curcuma longa (Prathanturarug et al. 2005), hibrid Acer x freemanii (Kerns dan Meyer 1986), hibrid Alocasia x Chantrieri (Henny dan Fooshee 1990), grape (Gribaudo dan Fronda 1991). Efektivitas TDZ dan BA dalam menginduksi multiplikasi tunas berbedabeda, tergantung pada jenis tanamannya. Pada tanaman angrek phalaenopsis konsentrasi optimal untuk pambentukan tunas adventif adalah 5-10 µm TDZ, dan jika sitokinin yang digunakan BA konsentrasi optimal 40 µm (Chen dan Piluek, 1995). Pada tanaman ubi kayu perlakuan 10 mg/l BAP menghasilkan jumlah tunas/eksplan lebih banyak dibandingkan perlakuan 10 mg/l TDZ, tetapi persentase eksplan membentuk tunas pada perlakuan TDZ lebih tinggi dibandingkan perlakuan BAP (Konan et al. 1997). Efektivitas sitokinin berbeda-beda, pada tanaman lentil (Lensculinaris medik) dilaporkan efektivitas TDZ lebih tinggi dari BA, BA lebih tinggi dari kinetin dan efektivitas kinetin lebih tinggi dibanding zeatin dalam menginduksi tunas, sedangkan untuk pemanjangan tunas berlaku sebaliknya yaitu zeatin > kinetin > BA > TDZ (Fratini dan Ruiz 2002). Beberapa keuntungan pada mekanisme kerja TDZ seperti, dilaporkan pada kacang tanah tidak memerlukan jenis ZPT lain untuk menginduksi somatik embriogenesis, (Victor et al. 1999), meningkatkan biosintesis atau akumulasi sitokinin dan auksin endogen, menginduksi embrio somatik tanpa dikombinasikan dengan zat pengatur tumbuh lainnya (Murthy et al. 1995), merangsang proliferasi tunas dan regenerasi organ adventif pada tanaman berkayu (Huetteman dan Preece1993), menginduksi dan meningkatkan proliferasi protocorm like body (PLB) pada tanaman angrek (Ernst 1994), memiliki efektivitas yang tinggi pada konsentrasi rendah (Thomas dan Katterman 1986). Konsentrasi yang dibutuhkan dari masing-masing ZPT auksin dan sitokinin sangat tergantung dari jenis eksplan, genotipe, kondisi kultur serta jenis auksin dan jenis sitokinin yang digunakan, sehingga untuk mengetahui konsentrasi sitokinin dan auksin yang tepat untuk masing-masing tanaman perlu dilakukan studi tersendiri. Hal lain yang penting diperhatikan dalam perbanyakan in vitro 16

12 yaitu hilangnya beberapa aktivitas komponen media kultur yang disebabkan proses sterilisasi, seperti autoklaf, penggunaan antibiotik, serta pencampuran antibiotik dan fungisida untuk menghilangkan kontaminan dari bagian vegetatif (Gonzalez-olmedo et al. 2005). 17