BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Bahan dan Alat Metode Percobaan

Transkripsi

1 12 BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Percobaan lapangan dilaksanakan pada bulan Oktober 2009 hingga Maret 2010 di kebun percobaan Pusat Kajian Buah Tropika (PKBT) IPB, Tajur dengan elevasi m dpl (di atas permukaan laut). Analisis sifat fisik dan kimia buah pepaya dilakukan di Laboratorium Terpadu I, Departemen Agronomi dan Hortikultura, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor. Bahan dan Alat Bahan tanaman yang digunakan, yaitu bunga hermaprodit pepaya IPB 9 sebagai bakal buah (induk betina) dan bunga hermaprodit pepaya IPB 1, IPB 3, dan IPB 4 sebagai sumber pollen. Bahan-bahan untuk analisis laboratorium meliputi akuades, alkohol, larutan NaOH, larutan Iodin, amilum, Asam Oksalat, dan Natrium Tiosulfat. Alat yang digunakan, yaitu pinset untuk melakukan emaskulasi. Sungkup untuk melindungi bunga hasil penyerbukan. Label untuk memberikan identitas penyerbukan. Jangka sorong dan meteran, untuk mengukur panjang dan diameter buah. Timbangan untuk menghitung bobot buah, kulit, dan biji. Pisau untuk memotong dan mengupas buah. Penetrometer untuk mengukur tingkat kekerasan kulit dan daging buah. Blender untuk menghancurkan buah. Pemanas untuk mendidihkan air akuades dan pengaduk untuk menghomogenkan ekstrak buah dan larutan kimia. ph meter untuk mengukur ph ekstrak buah, hand refractometer untuk mengukur tingkat kemanisan buah, buret untuk titrasi, dan kamera digital untuk keperluan dokumentasi. Metode Percobaan Percobaan lapangan yang berupa penyerbukan IPB 9 dengan tiga genotipe sumber pollen dilakukan dengan Rancangan Kelompok Lengkap Teracak

2 13 (RKLT). Genotipe sumber pollen merupakan faktor tunggal yang diuji pengaruhnya terhadap mutu buah pepaya IPB 9 hasil selfing dan penyerbukan dengan pollen pepaya IPB 1, IPB 3, dan IPB 4. Percobaan terdiri atas empat kelompok dan setiap perlakuan terdiri atas lima buah sebagai ulangan, sehingga total percobaan diperlukan 20 buah. Model rancangan yang digunakan yaitu: Y ij = μ + τ i + β j + ε ij Keterangan: Y ij μ = Nilai pengamatan pada sumber polen ke-i dan kelompok ke-j = Nilai tengah umum τ i = Pengaruh sumber polen ke-i (1, 2, 3,4) β j = Pengaruh kelompok ke-j (1, 2, 3, 4, 5) ε ij = Pengaruh acak pada sumber polen ke-i dan kelompok ke-j Data kualitas buah hasil selfing dan penyerbukan dianalisis dengan analisis ragam (uji F) pada taraf 5% untuk mengetahui pengaruh genotipe sumber pollen terhadap mutu buah IPB 9. Jika analisis ragam menunjukkan pengaruh nyata maka dilanjutkan dengan uji beda nilai tengah dengan uji Beda Nyata Jujur (BNJ) pada taraf 5%. Pelaksanaan Percobaan Tanaman pepaya IPB 9 yang digunakan untuk penelitian sebagai tetua betina, diberi label pada saat muncul bunga. Pollen sebagai perlakuan dikumpulkan dari bunga hermaprodit yang sedang mekar (anthesis), dari tanaman hermaprodit pepaya IPB 1, IPB 3, dan IPB 4. Bunga-bunga pepaya IPB 9 yang akan diserbuki dengan pollen perlakuan, diemaskulasi sebelum anthesis. Penyerbukan antara pepaya IPB 9 dengan pollen dari pepaya IPB 1, IPB 3, dan IPB 4 berturut-turut diberi kode IPB (9 x 1), IPB (9 x 3), dan IPB (9 x 4). Pelaksanaan penyerbukan dilakukan pada saat anthesis. Setiap bunga yang telah diserbuki diberi label yang berisi induk betina, induk jantan, dan tanggal penyerbukan, kemudian disungkup. Tahapan penyerbukan bunga hermaprodit pepaya IPB 9 disajikan pada Gambar 5.

3 14 a b c Gambar 5. Tahapan Penyerbukan Bunga Hermaprodit Pepaya IPB 9; a) emaskulasi bunga hermaprodit, b) proses penyerbukan buatan, dan c) pelabelan dan penyungkupan Perlakuan kontrol adalah bunga hermaprodit tanaman IPB 9 dengan penyerbukan sendiri (selfing). Bunga hermaprodit yang belum anthesis diberi label untuk identitas. Kemudian disungkup tanpa diberikan pollen dari genotipe yang lain. Pengamatan panjang dan diameter buah (tengah) dilakukan dari saat buah berumur 2 Minggu Setelah Penyerbukan (MSP) hingga buah dipanen. Pengamatan dilakukan dengan interval 2 minggu. Buah siap dipanen jika sudah menunjukkan perubahan warna kulit sekitar 20%, dari hijau menjadi kekuningkuningan atau jingga. Suhu rata-rata selama percobaan o C dengan suhu minimum 23 o C dan maksimum o C. Jumlah curah hujan mm, kelembaban rata-rata 86.17%, dan lama penyinaran matahari rata-rata 47.67% (Lampiran 1). Penyerbukan mulai dilakukan pada tanggal 3 Oktober Penyerbukan dilakukan pada pagi hari untuk menghindari kerontokan bunga akibat hujan sehingga diharapkan akan memperbesar peluang terbentuknya buah. Pada awal penelitian, kondisi cuaca sangat tidak menentu. Cuaca pada pagi hingga siang hari sangat panas, sedangkan pada sore hari curah hujan sangat tinggi. Antisipasi yang dilakukan dalam mengatasi kerontokan bunga yang telah diserbuki yaitu dengan melakukan penyerbukan setiap hari apabila terdapat bunga yang anthesis. Selama pelaksanaan percobaan di lapang, telah dilakukan sebanyak 111 penyerbukan. Kondisi lingkungan yang tidak menentu menyebabkan banyaknya

4 penyerbukan yang gagal, dari seluruh penyerbukan yang dilakukan hanya terbentuk 44 buah. Rincian penyerbukan yang dilakukan disajikan pada Tabel 1. Tabel 1. Penyerbukan yang Dilakukan Selama Percobaan di Lapang Perlakuan Penyerbukan yang Penyerbukan yang Persentase Dilakukan Berhasil Keberhasilan (%) IPB 9 selfing IPB (9 x 1) IPB (9 x 3) IPB (9 x 4) Terdapat serangan hama pada buah selama perkembangan buah di lapangan. Hama yang menyerang buah pepaya ialah kutu putih (Paracocus marginatus). Serangan kutu putih ditandai dengan munculnya koloni kutu putih pada buah. Terdapat delapan buah dari total 44 buah hasil persilangan yang terserang kutu putih. Buah yang terserang kutu putih tidak digunakan untuk pengamatan karakter fisik, kimia, dan uji organoleptik. Penyakit yang menyerang tanaman ialah layu bakteri. Penyakit layu bakteri yang disebabkan oleh bakteri Erwinia papayae, menyebabkan sebagian daun pepaya terkulai dan gugur. Pucuk tanaman akan membusuk dan menjalar ke bagian bawah tanaman, sehingga tanaman harus dibongkar. Terdapat satu tanaman penelitian yang mati karena terserang penyakit layu bakteri, sehingga harus diganti dengan tanaman sehat lain yang terdapat di lahan. 15 Pengamatan a. Karakter mutu fisik yang diamati meliputi: - Panjang buah dan diameter buah diukur setiap minggu hingga panen. Diameter buah yang diukur adalah diameter terbesar (bagian tengah buah). - Kekerasan kulit buah (ujung, tengah, dan pangkal), diukur tiga hari setelah buah dipanen. Pengukuran kekerasan kulit buah ini dilakukan pada buah yang belum dikupas pada bagian pangkal, tengah dan ujung buah. Pengukuran pada tiap bagian buah dilakukan sebanyak tiga kali (triplo).

5 16 - Kekerasan daging buah (ujung, tengah, dan pangkal), diukur pada bagian buah yang telah dikupas. Pada tiap bagian dilakukan pengukuran sebanyak tiga kali (triplo). a b Kulit tidak dikupas Kulit dikupas Gambar 6. Pengukuran dengan Penetrometer; a) Kekerasan Kulit Buah dan b) Kekerasan Daging Buah - Ketebalan daging buah (maksimum dan minimum) diukur dengan memotong buah secara melintang. Ketebalan daging buah pada lakukan cekung buah dicatat sebagai ketebalan minimum dan ketebalan daging pada bagian cembung dicatat sebagai ketebalan daging maksimum. Pengukuran ketebalan daging buah dilakukan sebanyak tiga kali (triplo). Ketebalan daging buah maksimum Ketebalan daging buah minimum Gambar 7. Pengukuran Ketebalan Daging Buah - Bobot buah utuh, ditentukan dengan menimbang buah utuh yang belum dikupas; bobot kulit buah ditentukan dengan menimbang kulit buah yang telah dikupas dari daging buahnya; bobot biji diukur dengan menimbang

6 17 seluruh biji. Dari data bobot utuh, bobot kulit buah dan bobot biji ditentukan persentase bagian dapat dimakan dengan rumus sebagai berikut: BDD % = Bobot buah utuh (Bobot kulit +Bobot biji ) Bobot buah utuh 100% - Bobot 100 biji, ditentukan dengan menimbang 100 biji yang telah dipisahkan dari seluruh biji yang ada pada buah yang telah dikupas. - Jumlah biji, ditentukan dengan menghitung seluruh biji yang ada pada buah yang telah dikupas. b. Karakter mutu kimia yang diamati meliputi: - Padatan Terlarut Total (PTT) diukur dengan mengambil sedikit daging buah dari buah pepaya yang sudah dikupas, kemudian dihancurkan. Air tetesan dari daging buah pepaya tersebut kemudian diteteskan ke hand refractometer untuk diukur kandungan o Brix nya. - Asam Tertitrasi Total (ATT), diukur dengan melakukan titrasi larutan NaOH 0.1 N. Sari buah yang akan dititrasi disiapkan dengan menghancurkan daging buah pepaya kemudian ditimbang 100 gram untuk dilarutkan dalam 300 ml air akuades. Suspensi daging buah tersebut kemudian disaring dan dimasukkan ke dalam labu takar 500 ml dan ditambah air akuades sampai tanda tera. Filtrat diambil sebanyak 50 ml kemudian dihomogenkan dengan stirer kemudian dititrasi dengan larutan NaOH 0.1 N. Perubahan ph diukur dengan langsung memasukkan elektroda ph meter ke dalam larutan yang dititrasi. Titrasi dihentikan pada saat ph meter menunjukkan angka ph Nilai ATT yang sebenarnya dapat dihitung setelah melakukan standarisasi titrasi dengan menggunakan kristal Asam Oksalat. - Vitamin C, diukur dengan melakukan titrasi larutan Iodin 0.01 N dengan indikator amilum. Persiapan yang dilakukan sampai sebelum titrasi sama dengan persiapan pada penentuan ATT. Filtrat sebanyak 25 ml dititrasi dengan larutan Iodin 0.01 N. Indikator amilum dibuat dengan melarutkan 1 gram amilum ke dalam 100 ml akuades yang dididihkan. Sebelum titrasi, filtrat ditambah indokator amilum. Akhir titrasi ditandai dengan terjadinya

7 18 warna biru dari iod-amilum. Perhitungan kandungan vitamin C dengan standarisasi larutan Iodin yaitu tiap 1 ml Iodin 0.01 N ekuivalen dengan 0.88 mg Asam Askorbat (Sudarmadji et al., 1989). Kandungan vitamin C dihitung dengan rumus: Vitamin C (mg/100mg) = N = Normalitas ml Iodin 0.01N 0.88 fk 100 Bobot contoh (g) fk = faktor konversi ( 500 ml 25 ml ) c. Uji organoleptik yang dilakukan oleh 30 responden untuk mengetahui tingkat penerimaan responen terhadap buah pepaya IPB 9 hasil selfing dan hasil penyerbukan IPB 9 dengan tiga genotipe sumber pollen berdasarkan rasa, aroma, warna, dan tekstur buah. Penilaian rasa, aroma, warna, dan tekstur buah dilakukan dengan menggunakan skor: 0-25 = tidak suka, = kurang suka, = suka, = sangat suka.