FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET SURAKARTA 2010

Transkripsi

1 EFEK ANTIHELMINTIK EKSTRAK ETANOL DAUN KEMANGI (Ocimum americanum L.) TERHADAP KEMATIAN Ascaris suum Goeze sp SECARA in vitro SKRIPSI Untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran OKKIE MHARGA SENTANA G FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET SURAKARTA 2010

2 PENGESAHAN SKRIPSI Skripsi dengan judul : Efek Antihelmintik Ekstrak Etanol Daun Kemangi (Ocimum americanum L.) terhadap Kematian Ascaris suum Goeze sp secara In vitro Okkie Mharga Sentana, G , Tahun 2010 Telah diuji dan sudah disahkan di hadapan Dewan Penguji Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta Pada Hari Selasa, Tanggal 23 November 2010 Pembimbing Utama Nama : Sri Haryati, Dra., M.Kes NIP : (...) Pembimbing Pendamping Nama : Yul Mariyah, Dra., APTH., M.Si NIP : (...) Penguji Utama Nama : Sutarmiadji Djumarga P, Drs., M.Kes NIP : (...) Anggota Penguji Nama : Tri Nugraha Susilowati, dr., M.Med NIP : (...) Ketua Tim Skripsi Surakarta, Dekan FK UNS Muthmainah, dr., M.Kes. Prof. Dr. A.A. Subijanto, dr., M.S. NIP NIP

3 PERNYATAAN Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan penulis juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang tertulis diacu dalam naskah dan disebutkan dalam daftar pustaka. Surakarta, 2010 Okkie Mharga Sentana NIM : G

4 ABSTRAK Okkie Mharga Sentana, G , Efek Antihelmintik Ekstrak Etanol Daun Kemangi (Ocimum americanum L.) terhadap Kematian Ascaris suum Goeze sp secara in vitro Tujuan Penelitian: Penelitian ini bertujuan mengetahui hubungan antara pemberian ekstrak etanol daun kemangi terhadap angka mortalitas Ascaris suum Goeze secara in vitro Metode Penelitian: Penelitian ini merupakan eksperimental laboratorium dengan desain penelitian the post test with controlled group design. Sampel penelitian adalah cacing Ascaris suum Goeze yang masih aktif bergerak dan diperoleh dari usus babi. Teknik sampling yang digunakan yaitu purposive sampling dengan cara menyamakan jenis dan ukuran panjang cacing serta tidak membedakan jenis kelamin cacing. Subjek dibagi menjadi 5 kelompok, masing-masing terdiri dari 5 cacing dan dilakukan pengulangan 6 kali. Kelompok kontrol mengandung 25 ml larutan garam fisiologis dan 25 ml pirantel pamoat 5 mg/ml. Tiga kelompok lainnya mengandung ekstrak daun kemangi yang terdiri dari berbagai konsentrasi, yaitu 30 %, 40 %, 50 %. Pengamatan dan penghitungan jumlah cacing yang mati dihitung setiap 2 jam hingga semua cacing dalam kelompok mati. Data yang sudah diperoleh kemudian dianalisa menggunakan analisis regresi linier dan analisis probit. Hasil Penelitian: Uji statistik regresi linear sederhana menunjukkan signifikansi korelasi sebesar 0,000 dengan koefisien korelasi 0,837 bertanda negatif, R square 0,701, dimana signifikan korelasi <0,05 atau nilai hitung F 37,565 dengan signifikansi 0,000 artinya terdapat hubungan negatif antara lama waktu kematian cacing dengan besar konsentrasi ekstrak daun kemangi. Analisa dengan menggunakan analisis probit diperoleh harga LC50 pada konsentrasi 40 % dan LT50 pada konsentrasi 40 % adalah 2 jam. Simpulan Penelitian: Ekstrak etanol daun kemangi (Ocimum americanum L) dapat mempengaruhi kematian Ascaris suum Goeze secara in vitro dengan LC50 pada konsentrasi 40 % dan LT50 pada konsentrasi 40 % adalah 2 jam. Kata kunci: Daun kemangi, angka mortalitas, Ascaris suum Goeze, in vitro

5 ABSTRACT Okkie Mharga Sentana, G , Effects of Antihelminthic Ethanol Extract of Leaf Basil (Ocimum americanum L.) against Ascaris suum Goeze sp Death in vitro Research Objectives: This research aims to examine the relationship between the ethanol extract of basil leaf against Ascaris suum Goeze mortality rates in vitro Research Methods: This study was an experimental laboratory with research design the post test with controlled group design. The samples were Ascaris suum Goeze are still actively moved and obtained from pig intestines. The sampling technique is purposive sampling by equating the type and length of worms and do not distinguish the sex of worms. Subjects were divided into 5 groups, each group consist of 5 worms and repeated 6 times. The control group contained 25 ml of physiological saline solution and 25 ml pirantel pamoat 5 mg/ml. Three other groups containing basil leaf extracts which consist of various concentrations, that is 30 %, 40 %, 50 %. Observation and counting the number of dead worms counted every 2 hours until all the worms in the group died. The data was analyzed by using linear regression analysis and probit analysis. Research Results: Simple linear regression statistical test showed significance correlation at with correlation coefficient is negative, R square 0,701, which is significant correlation <0.05 or the value of with a significance of means there is a negative relationship between the length of time of death of worms with large concentrations of basil extract. Analysis using probit analysis obtained LC50 at a concentration of 40% and LT50 at a concentration of 40% is 2 hours. Research Conclusions: Ethanol extract of basil leaf (Ocimum americanum L) could affect the death of Ascaris suum Goeze in vitro with the LC50 at a concentration of 40% and LT50 at a concentration of 40% is 2 hours. Keywords: basil leaves, mortality, Ascaris suum Goeze, in vitro

6 PRAKATA Alhamdulillah, puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul Efek Antihelmintik Ekstrak Etanol Daun Kemangi (Ocimum americanum L.) terhadap Kematian Ascaris suum Goeze sp secara in vitro. Kendala dalam penyusunan skripsi ini dapat teratasi atas pertolongan Allah SWT melalui bimbingan dan dukungan banyak pihak. Untuk itu, perkenankan penulis mengucapkan terima kasih kepada: 1. Prof. Dr. H. A.A. Subijanto, dr., MS., selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. 2. Muthmainah, dr., M.Kes., selaku Ketua Tim Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. 3. Sri Haryati, Dra, M.Kes selaku Pembimbing Utama yang telah memberikan waktu, pengarahan, bimbingan, serta motivasi kepada penulis. 4. Yul Mariyah, Dra, APTH, M.Si selaku Pembimbing Pendamping yang telah memberikan waktu, pengarahan, bimbingan, serta motivasi kepada penulis. 5. Sutarmiadji Djumarga P, Drs,M.Kes selaku Penguji Utama yang telah berkenan menguji serta memberi saran dalam penyelesaian skripsi ini. 6. Tri Nugroho Susilowati, dr., M.Med selaku Penguji Pendamping yang telah memberikan saran dan juga koreksi bagi penulis. 7. Kedua Orang Tua tercinta, Rusbandi dan Titik Sudharini serta kakak - kakakku Oddie Budi Sentosa, Onnie Wira Tama dan adikku Deanita Puspitasari, yang telah memberi dukungan moral, material, serta senantiasa mendoakan untuk terselesaikannya skripsi ini. 8. Segenap staf skripsi, staf laboratorium parasit atas bantuan dan kerjasamanya dalam penyusunan skripsi ini. 9. Sahabat-sahabatku Galih, Haris, Tri budi Laksono, Reza untuk semua bantuan dan dukungan, serta untuk teman teman LKMI Solo, pondok kantjil, kakak kakak tingkat, semua teman angkatan 2007 dan seluruh pihak yang telah membantu dalam penyusunan skripsi ini. Surakarta, 2010 Okkie Mharga Sentana

7 DAFTAR ISI PRAKATA... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR LAMPIRAN... vi vii x xi xii BAB I PENDAHULUAN... 1 A. Latar Belakang Masalah... 1 B. Perumusan Masalah... 4 C. Tujuan Penelitian... 4 D. Manfaat Penelitian... 4 BAB II LANDASAN TEORI... 6 A. Tinjauan Pustaka Askariasis... 6 a. Etiologi... 6 b. Epidemiologi... 6 c. Patogenesis dan patofisiologi... 6 d. Manifestasi Klinis... 8 e. Pemeriksaan laboratorium dan penegakkan diagnosis.. 9 f. Diagnosis Banding... 9 g. Penatalaksanaan Ascaris Lumbricoides Linn a. Taksonomi b. Morfologi c. Habitat dan Daur Hidup... 13

8 3. Ascaris suum Goeze perpustakaan.uns.ac.id 4. Kemangi (Ocimum americanum L.) a. Taksonomi b. Nama Daerah Tumbuhan c. Deskripsi Tumbuhan d. Kandungan Kimia e. Khasiat Kandungan Daun Kemangi yang Mempunyai Efek Antihelmintik Metode Metode Ekstrak B. Kerangka Pemikiran C. Hipotesis BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian B. Lokasi Penelitian C. Subjek Penelitian D. Teknik Sampling E. Identifikasi Variabel F. Definisi Operasional Variabel G. Rancangan Penelitian Penelitian Pendahuluan Penelitian Akhir H. Alat dan Bahan I. Cara Kerja J. Analisis Data BAB IV HASIL PENELITIAN A. Data Hasil Penelitian... 37

9 1. Penelitian Pendahuluan perpustakaan.uns.ac.id 2. Penelitian Akhir B. Analisis Data Uji Regresi Linier Uji Analisis Probit BAB V PEMBAHASAN BAB VI SIMPULAN DAN SARAN A. Simpulan B. Saran DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

10 DAFTAR TABEL Tabel 4.1. Lama Kematian Cacing pada Kontrol Negatif dan Kontrol Positif Tabel 4.2. Lama Kematian Cacing pada Ekstrak Etanol Daun Kemangi sebagai Penelitian Pendahuluan Tabel 4.3. Lama Kematian Cacing pada Ekstrak Etanol Daun Kemangi sebagai Penelitian Akhir Tabel 4.4. Presentase Daya Antihelmintik Ekstrak Etanol Daun Kemangi Dibandingkan Pirantel Pamoat Tabel 4.5. Hasil Uji Statistik Regresi Linier Tabel 4.6. Hasil Analisis Probit LC50 Ekstrak Daun Kemangi terhadap Cacing Ascaris suum Goeze Secara In Vitro Tabel 4.7. Hasil Analisis Probit untuk Mengetahui LT50 Ekstrak Etanol Daun Kemangi 40 % Tabel 4.8. Hasil Analisis Probit untuk Mengetahui LT50 Obat Pirantel Pamoat 5 mg/ml... 48

11 DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Skema Kerangka Pemikiran Gambar 3.1 Skema Rancangan Penelitian Pendahuluan Gambar 3.2 Skema Rancangan Penelitian Akhir Gambar 4.1 Grafik Rerata Waktu Kematian cacing Gambar 4.2 Diagram Presentase Daya Antihelmintik Ekstrak Etanol Daun Kemangi Dibanding Pirantel Pamoate... 42

12 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Uji Regresi Linier Lampiran 2. Uji Analisis Probit (Untuk mengetahui LC50 Ekstrak Daun Kemangi terhadap Cacing Ascaris suum Goeze Secara In vitro) Lampiran 3. Uji Analisis Probit (Untuk mengetahui LT50 Ekstrak Daun Kemangi Konsentrasi 40 % terhadap Cacing Ascaris suum Goeze sp Secara In vitro) Lampiran 4. Uji Analisis Probit (Untuk mengetahui LT50 Pirantel Pamoat 5 mg/ml terhadap Cacing Ascaris suum Goeze sp Secara In vitro) Lampiran 5. Dokumentasi Penelitian Lampiran 6. Lembar Kerja Uji Ekstraksi Laboratorium Pengujian LPPT- UGM Lampiran 7. Surat Ijin Penelitian

13 1 BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang Masalah Askariasis tersebar di seluruh dunia, dengan frekuensi terbesar berada di negara tropis yang lembab d imana angka prevalensi mencapai lebih dari 50%. Angka prevalensi dan intensitas infeksi biasanya paling tinggi pada anak-anak antara usia 3 dan 8 tahun. (Chin, 2006) Di Indonesia prevalensi askariasis masih tinggi antara 60-90% tergantung pada lokasi dan sanitasi lingkungan, terutama pada anak-anak (Pohan, 2006). Di daerah pesisir di Semarang utara, prevalensi askariasis pada anak balita berkisar antara 34%- 73%, dimana askariasis tersebut sudah mulai ditemukan pada anak usia 4 bulan dan dalam usia 2 tahun hampir semua anak balita di daerah kumuh pernah terkena askariasis. Sedangkan prevalensi askariasis pada anak usia sekolah dasar di daerah tersebut berkisar antara 38%-98%. (Hestiningsih dkk, 2004) Angka-angka prevalensi penyakit askariasis tersebut di atas menunjukkan bahwa kasus-kasus askariasis di dunia maupun di Indonesia masih tinggi. Infeksi cacing ini sendiri banyak menimbulkan kerugian bagi manusia seperti menyebabkan obstruksi usus, berkurangnya nafsu makan, diare dan konstipasi. Cacing dewasa juga dapat menyebabkan gangguan penyerapan nutrisi terutama pada anak-anak yang tentu akan menyebabkan gangguan pertumbuhan dan perkembangan anak. (Laskey, 2007) Untuk itu

14 2 penanganan yang tepat sangat dibutuhkan untuk mengobati dan membunuh cacing-cacing ini supaya mati. Sampai saat ini jenis-jenis obat yang digunakan untuk membunuh cacing dewasa dalam usus adalah mebendazole, pirantel pamoat dan levamizole. Meskipun obat-obatan tersebut efektif tetapi masih juga dilaporkan adanya efek samping obat seperti diare, mual, muntah, sakit kepala, demam, dan sebagainya. (Katzung, 1998) Selain efek samping, beberapa obat juga dikontra-indikasikan untuk wanita hamil dan penderita sirosis hepatis. (Katzung, 1998) Oleh karena itu, penggunaan bahan bahan yang berasal dari tumbuh-tumbuhan perlu dipertimbangkan sebagai obat cacing jika memang terbukti berpengaruh terhadap mortalitas cacing tersebut. Telah banyak dilaporkan adanya beberapa tanaman di Indonesia yang dapat digunakan sebagai antihelmintik, di antaranya tanaman putri malu dan ketepeng. Syahid (2006) meneliti efek antihelmintik ekstrak putri malu (Mimosa pudica, Linn.) terhadap Ascaris suum Goeze sp secara in vitro. Kandungan bahan kimia dari ekstrak putri malu di antaranya mimosin, asam pipekolinat, tannin, alkaloid, dan saponin. Selain itu, putri malu juga mengandung triterpenoid, sterol, polifenol dan flavonoid. Kandungan bahan kimia tersebut yang memiliki efek antihelmintik adalah mimosin dan tanin. Senyawa tanin memiliki kemampuan denaturasi protein menyebabkan protein pada permukaaan tubuh cacing terdenaturasi sehingga permukaan tubuh cacing menjadi tidak permeabel lagi terhadap zat di luar tubuh cacing. Mimosin memiliki efek antihelmintik melalui mekanisme neurotoksik dengan

15 3 menghambat asetilkolinesterase sehingga terjadi penumpukkan asetilkolin pada tubuh cacing yang menyebabkan cacing mati dalam keadaan kaku. Kemudian Kuntari (2008) meneliti efek antihelmintik air rebusan daun ketepeng (Cassia alata L) terhadap cacing tambang anjing secara In vitro. Daun Cassia alata L diketahui mengandung alkaloid, flavonoid, tanin, saponin dan antrakinon. Daya antihelmintik air rebusan daun ketepeng diduga disebabkan oleh senyawa aktif saponin yang menghambat kerja kholinesterase sehingga cacing akan mengalami paralisis spastik otot yang akhirnya dapat menimbulkan kematian. Berdasarkan laporan penelitian-penelitian tersebut di atas, maka dapat dilihat bahwa kandungan kimia yang bermanfaat sebagai antihelmintik adalah saponin, mimosin, dan tanin. Penelitian lain yang dilakukan oleh Vinca Medica, Komar Ruslan W, dan As ari Nawawi (2004) menyebutkan bahwa hasil penapisan fitokimia ekstrak etanol daun kemangi (Ocimum americanum L.) menunjukkan adanya golongan senyawa flavonoid, saponin, tanin dan triterpenoid/steroid. Meskipun daun kemangi memiliki kandungan kimia seperti saponin dan tanin, yang menurut teori bisa membunuh cacing, belum ada penelitian yang menyebutkan secara ilmiah bahwa daun kemangi bisa bermanfaat sebagai antihelmintik. Hal inilah yang membuat penulis tertarik untuk mengetahui seberapa besar efek antihelmintik yang dimiliki oleh tumbuhan kemangi yang juga mengandung tanin dan saponin. Sebagai objek penelitian digunakan cacing Ascaris suum Goeze sp (cacing gelang pada hewan) sebagai pengganti Ascaris lumbricoides, Linn.

16 4 (cacing gelang pada manusia) karena kesulitan untuk mendapatkan cacing Ascaris lumbricoides, Linn. dalam jumlah banyak untuk penelitian ini. Secara morfologi Ascaris suum Goeze sp hampir sama dengan Ascaris lumbricoides, Linn., dan Ascaris suum Goeze sp dapat menginfeksi manusia walaupun tidak menimbulkan manifestasi klinis yang berarti. (Laskey, 2007; Miyazaki, 1991). B. Perumusan Masalah 1. Apakah ada efek ekstrak etanol daun kemangi terhadap kematian Ascaris suum Goeze sp secara In vitro? 2. Seberapa besar konsentrasi untuk mencapai LC 50 dan berapa LT 50 konsentrasi tersebut? C. Tujuan Penelitian Penelitian ini bertujuan mengetahui hubungan antara pemberian ekstrak etanol daun kemangi terhadap angka mortalitas Ascaris suum Goeze sp secara In vitro D. Manfaat Penelitian 1. Manfaat teoritis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan pengetahuan tentang pengaruh pemberian ekstrak daun kemangi terhadap kematian Ascaris suum Goeze sp secara In vitro. 2. Manfaat aplikatif Memberikan informasi ilmiah kepada masyarakat ilmiah pada khususnya dan masyarakat luas pada umumnya tentang manfaat ekstrak

17 5 daun kemangi (Ocimum americanum, L) yang memiliki khasiat sebagai antihelmintik. Selain itu, penelitian ini diharapkan bisa membuka peluang kemungkinan pembuatan preparat obat antihelmintik dari ekstrak daun kemangi (Ocimum americanum, L).

18 6 BAB II LANDASAN TEORI A. Tinjauan Pustaka 1. Askariasis a. Etiologi Penyebab penyakit askariasis ini adalah cacing Ascaris lumbricoides Linn. Manusia merupakan satu-satunya hospes Ascaris lumbricoides Linn. (Utari, 1997) b. Epidemiologi Prevalensi askariasis di Indonesia tergolong tinggi, terutama pada anak. Frekuensinya antara 60-90%. (Pohan, 2006) Kurangnya pemakaian jamban keluarga menimbulkan pencemaran tanah dengan tinja di sekitar halaman rumah, di bawah pohon, di tempat mencuci, dan di tempat pembuangan sampah. (Margono dan Abidin, 2003) Prevalensi askariasis pada anak balita di daerah pesisir di Semarang utara, berkisar antara 34%-73% dan pada anak usia sekolah dasar 38%-98%. (Hestiningsih dkk, 2004) c. Patogenesis dan Patofisiologi Patogenesis yang disebabkan infeksi Ascaris lumbricoides berhubungan dengan respon imun hospes, efek migrasi larva, efek mekanik cacing dewasa, defisiensi gizi akibat keberadaan cacing dewasanya. (Garcia, 1996)

19 7 Perjalanan larva melalui hati dan paru pada infeksi ringan biasanya tidak menimbulkan gejala-gejala, tetapi pada infeksi yang berat dapat menimbulkan tanda-tanda pneumonitis. Pada infeksi berat, larva yang pertama kali menembus jaringan paru masuk ke dalam alveoli akan menimbulkan sedikit kerusakan pada epitel bronkhial. Tetapi jika terjadi reinfeksi dan migrasi larva berikutnya, hal ini dapat menimbulkan reaksi jaringan yang hebat. Reaksi jaringan yang hebat itu terjadi di sekitar larva di dalam hati dan paru, disertai infiltrasi eosinofil, makrofag, dan sel-sel epiteloid. Keadaan ini disebut sebagai pneumonitis Ascaris dengan disertai reaksi alergik yang terdiri dari dispnea, batuk kering, atau batuk produktif, mengi atau ronkhi kasar, demam ( 39,9 0 C 40 0 C), eosinofilia yang bersifat sementara, dan rontgen foto paru mengarah kepada pneumonia virus. (Garcia, 1996) Terdapatnya cacing dewasa dalam usus biasanya tidak menyebabkan kelainan kecuali jumlahnya banyak sekali, karena cacing-cacing tersebut menggumpal dalam usus sehingga terjadi obstruksi usus. (Margono dan Abidin, 2003) Migrasi cacing dapat terjadi karena rangsangan seperti demam (biasanya di atas 38,9 0 C), penggunaan anestesi umum, atau kondisi abnormal lainnya. Migrasi ini dapat menimbulkan obstruksi usus; masuk ke dalam saluran empedu, saluran pankreas, atau tempat-tempat kecil lainnya; masuk ke dalam hati atau rongga peritonium. Dapat juga bermigrasi ke luar melalui anus, mulut atau hidung. Bagian tubuh lainnya seperti ginjal,

20 8 appendiks, rongga pleura dapat terkena juga. (Garcia, 1996) Infeksi berat pada anak-anak, terutama di bawah 5 tahun, dapat menimbulkan gangguan gizi berat. (Margono dan Abidin, 2003) d. Manifestasi klinis Gejala yang timbul pada penderita dapat disebabkan oleh cacing dewasa dan larva. Selama bermigrasi larva dapat menimbulkan gejala bila merusak kapiler atau dinding alveolus paru seperti terjadinya perdarahan, penggumpalan sel leukosit dan eksudat, yang akan menghasilkan konsolidasi paru dengan gejala panas, batuk, batuk darah, sesak nafas, dan pneumonitis askaris. (Pohan, 2006) Larva cacing ini dapat menyebar dan menyerang organ lain seperti otak, ginjal, mata, sumsum tulang belakang dan kulit. Dalam jumlah sedikit, cacing dewasa akan menimbulkan gejala gangguan usus ringan seperti mual, nafsu makan berkurang, diare, konstipasi, atau bahkan tidak menimbulkan gejala sama sekali. Bila infestasi tersebut bertambah berat akan menunjukkan gejala obstruksi usus (ileus). (Pohan, 2006) Cacing dewasa dapat juga menyebabkan gangguan nutrisi terutama pada anak-anak. Cacing ini dapat menyebabkan sumbatan pada saluran empedu, saluran pankreas, divertikel, dan usus buntu. Selain hal tersebut di atas, cacing ini dapat juga menimbulkan gejala alergik seperti urtikaria, gatal-gatal, dan eosinofilia. Cacing dewasa

21 9 dapat ke luar melalui mulut dengan perantaraan batuk, muntah atau langsung ke luar melalui hidung. (Pohan, 2006) e. Pemeriksaan laboratorium dan penegakkan diagnosis Pada fase migrasi larva, diagnosis dapat dibuat dengan menemukan larva dalam sputum atau bilas lambung. Sindroma Loefller yang spesifik sering terlihat. (Onggowaluyo, 2002) Selama fase intestinal, diagnosis dapat dibuat dengan menemukan telur dan cacing dewasa dalam tinja. Telur cacing ini dapat ditemukan dengan mudah pada sediaan basah langsung atau sediaan basah dari sedimen yang sudah dikonsentrasikan. Cacing dewasa dapat ditemukan dengan pemberian antelmintik atau keluar dengan sendirinya melalui mulut karena muntah atau melalui anus bersama tinja. (Onggowaluyo, 2002) f. Diagnosis banding Askariasis pneumonitis harus dibedakan dengan kelainan alergi seperti urtikaria, Loeffler s syndrome, dan asma. (Pohan, 2006) Pneumonitis yang disebabkan Ascaris Lumbricoides menyerupai gejala pneumonitis yang disebabkan cacing tambang atau Strongiloides. Ascaris Lumbricoides dapat menyebabkan pencetus untuk terjadinya pankreatitis, apendesitis, diverkulitis, dan lain-lain. (Pohan, 2006)

22 10 g. Penatalaksanaan Obat-obat yang digunakan untuk membasmi cacing ini adalah : 1) Piperazin. Merupakan obat pilihan utama, diberikan dengan dosis sebagai berikut : berat badan 0-15 kg : 1 gr sekali sehari selama 2 hari berturut-turut; berat badan kg : 2 gr sekali sehari selama 2 hari berturut-turut; berat badan kg : 3 gr sekali sehari selama 2 hari berturut-turut; berat badan lebih dari 50 kg : 3 ½ g sekali sehari selama 2 hari berturut-turut. Satu tablet obat ini mengandung 250 mg dan 500 mg piperazin. Efek samping penggunaan obat ini adalah pusing, rasa melayang, dan gangguan penglihatan. (Pohan, 2006) 2) Pirantel pamoat Obat ini cukup efektif bila diberikan dengan dosis 10 mg/kg berat badan, maksimum 1 gr. Efek samping obat ini adalah rasa mual, muntah, diare, pusing, ruam kulit, dan demam. (Katzung, 1998) Pirantel pamoat menimbulkan depolarisasi pada otot cacing dan meningkatkan frekuensi impuls, sehingga cacing mati dalam keadaan spastis. Pirantel pamoat juga berefek menghambat enzim kolinesterase, terbukti pada askaris meningkatkan kontraksi ototnya. ( Sukarban dan Santoso, 2003) 3) Levamisol

23 11 Obat ini cukup efektif bila diberikan dengan dosis tunggal 150 mg. (Pohan, 2006) 4) Albendazol Obat ini cukup efektif bila diberikan dengan dosis tunggal 400 mg. (Pohan, 2006) Efek samping obat ini adalah diare, sakit kepala, mual, lesu, susah tidur pada 6% penderita, gangguan epigastrik ringan. Kontra indikasinya yaitu pada anak kurang dari 2 tahun, wanita hamil, penderita sirosis. (Katzung, 1998) 5) Mebendazol Obat ini cukup efektif bila diberikan dengan dosis 100 mg, 2 kali sehari selama 3 hari. (Pohan, 2006) Efek samping obat ini adalah mual ringan, muntah, diare, nyeri perut, gatal, kulit kemerahan, eosinofilia, demam, nyeri muskuloskeletal, iritasi lambung, fungsi hati abnormal. (Katzung, 1998) 2. Ascaris Lumbricoides Linn. a. Taksonomi Subkingdom : Metazoa Filum Kelas Subkelas Bangsa Superfamili : Nemathelmintes : Nematoda : Scernentea (Phasmidia) : Ascarida : Ascaridoidea

24 12 Famili Marga : Ascarididae : Ascaris Jenis : Ascaris lumbricoides Linn. (Utari, 2002) b. Morfologi Cacing dewasa mempunyai ukuran paling besar di antara Nematoda intestinalis yang lain. Bentuknya silindrik, ujung anterior lancip. Bagian anterior dilengkapi oleh tiga bibir (triplet) yang tumbuh dengan sempurna. Cacing betina panjangnya cm dengan ujung posteriornya membulat dan lurus, dan 1/3 pada anterior tubuhnya terdapat cincin kopulasi. Sedangkan pada cacing jantan panjangnya cm dengan ujung posteriornya lancip dan melengkung ke arah ventral, dilengkapi papil kecil dan dua buah spekulum berukuran 2 mm. (Onggowaluyo, 2002) Selain ciri ciri di atas, masih ada ciri-ciri khas lainnya. Seperti warna cacing dewasa yang sudah besar putih atau kemerahan, serta kutikelnya yang halus dan bergaris tipis-tipis. (Soedarto, 1996) Telur berbentuk ovoid, mempunyai ukuran mikron X mikron dan mempunyai dinding 3 lapis : lapisan yang paling dalam tipis halus, vitelin, dan lipoidol, serta tidak dapat ditembus (= membrana vitelina); lapisan yang tengah tebal jernih (= selubung hialin); lapisan yang paling luar tebal dan berbenjol benjol kasar atau berlekuk-lekuk (lapisan albuminoid), biasanya terwarnai oleh

25 13 pigmen empedu di dalam intestinum sehingga berwarna coklat keemasan. (Utari, 1997). Tipe telur Ascaris lumbricoides Linn. sendiri dibagi menjadi 4, yaitu tipe dibuahi (fertilized), tidak dibuahi (afertilized), matang, dan dekortikasi. Telur yang dibuahi besarnya 60x45 mikron, dinding tebal terdiri dari dua lapis. Lapisan luarnya terdiri dari jaringan albuminoid, sedangkan lapisan dalam jernih. Isi telur berupa massa sel telur. Telur yang tidak dibuahi berbentuk lonjong dan lebih panjang daripada tipe yang dibuahi, besarnya 90x40 mikron, dan dinding luarnya lebih tipis. Isi telur adalah massa granula refraktil. Telur matang berisi larva (embrio), tipe ini menjadi infelatif setelah berada di tanah kurang lebih 3 minggu. Telur yang dekortikasi tidak dibuahi tetapi lapisan luarnya (albuminoid) sudah hilang. (Onggowaluyo, 2002) Seekor cacing betina dapat bertelur sebanyak sehari ; terdiri dari telur yang dibuahi dan yang tidak dibuahi. (Margono dan Abidin, 2003) c. Habitat dan Daur hidup Dalam lingkungan yang sesuai, telur yang dibuahi berkembang menjadi bentuk infektif dalam waktu kurang lebih 3 minggu. (Margono dan Abidin, 2003) Infeksi pada manusia terjadi karena menelan telur matang yang berasal dari tanah yang terkontaminasi. Telur yang tertelan akan menetas di lambung dan duodenum, kemudian larvanya secara aktif

26 14 menembus dinding usus; dan via sirkulasi portal menuju jantung kanan. Kemudian larvanya masuk ke dalam sirkulasi pulmonal dan tersaring oleh kapiler. Setelah kira-kira 10 hari di paru, larva menembus kapiler dan masuk ke alveoli, dan melalui bronkhi bermigrasi sampai ke trakea dan faring, lalu tertelan. Cacing akan menjadi matur dan kawin di dalam usus, dengan demikian akan memproduksi telur yang akan ke luar bersama tinja. Seluruh proses perkembangannya dari tertelannya telur hingga dikeluarkannya telurtelur yang diproduksi oleh cacing betina membutuhkan waktu 8-12 minggu. Selama masa hidupnya, jumlah total telur yang dikeluarkan dapat mencapai telur. (Garcia, 1996) 3. Ascaris suum Goeze sp Umumnya, cacing ini bisa ditemukan pada babi. Tetapi cacing ini juga bisa ditemukan dan menginfeksi manusia, sapi, kambing, domba, anjing. (Miyazaki, 1991) Bukti-bukti ilmiah menunjukkan bahwa larva Ascaris suum Goeze sp dapat hidup pada cacing tanah dan kumbang tinja (Geotrupes) yang bertindak sebagai hospes cadangan. (Noble E.R dan Noble G.A, 1989) Secara morfologi cacing Ascaris suum Goeze sp ini kurang lebih sama dengan Ascaris lumbricoides. Melalui scanning mikograf elektron 2000 X, Ascaris suum Goeze sp menunjukkan lapisan albuminoid yang tebal dan irreguler. Tampak pada ujung anteriornya terdapat struktur

27 15 seperti operkulum. (Zaman, 1997) Morfologi yang membedakan kedua jenis cacing ini terletak pada daerah mulut mereka (Faust, 1976) yaitu pada daerah deretan gerigi dan bentuk bibirnya yang berbeda. (Noble E.R dan Noble G.A, 1989) Telur telur mereka pun sulit untuk dibedakan dengan mikroskop cahaya. (Miyazaki, 1991) Gejala klinis yang ditimbulkan oleh cacing Ascaris suum Goeze sp dan Ascaris lumbricoides Linn. berbeda saat menginfeksi hewan babi percobaan. (Noble E.R dan Noble G.A, 1989) Tidak ada perbedaan antara siklus hidup dan cara infeksi Ascaris suum Goeze sp dengan cacing Ascaris lumbricoides Linn. (Miyazaki, 1991) 4. Kemangi (Ocimum americanum L.) a. Taksonomi Divisi Sub divisi Kelas Bangsa Suku Marga : Spermatophtya : Angiospermae : Dicotyledonae : Tubiflorae : Lamiaceae : Ocimum Jenis : Ocimum americanum L. (Tjitrosoepomo, 2002)

28 16 b. Nama daerah tumbuhan Surawung, ruku-ruku, klampes (Sunda); Kemangi (Jawa); Kemanghi (Madura); Balakama (Manado); Uku-uku (Bali); Lufe-lufe (Ternate); Ruruku (Maluku); Baramakusa (Minahasa); Hairy Basil (Inggris) (Adhyana dan Firmansyah, 2006; Ciptadi, 1998; Hariana, 2007) c. Deskripsi tumbuhan Kemangi (Ocimum americanum L.) merupakan tanaman semak yang tumbuh semusim. Tumbuhan ini banyak ditemukan di Pulau Jawa dan Madura, terutama di pinggiran ladang, sawah kering, juga ditanam di taman, di pinggiran jalan, hutan terbuka, padang rumput, liar di jalanan, dan kadang-kadang dibudidayakan. Tanaman ini juga dapat tumbuh pada ketinggian m di atas permukaan laut. (Sudarsono dkk, 2002) Karakteristik kemangi yaitu perawakan : herba tegak/semak, tajuk membulat, bercabang banyak, sangat harum, tinggi 0,3 m-1,5 m; batang : batang pokok tidak jelas, bercabang banyak, hijau sering keunguan, berambut atau tidak; daun : tunggal, berhadapan, helaian daun bulat telur elip memanjang, ujung meruncing-runcing/tumpul, tangkai daun 0,25-3 cm, pangkal bangun pasak sampai membulat, dikedua permukaan berambut halus, berbintik-bintik, tepi daun bergerigi lemah bergelombang rata; bunga : susunan majemuk berkarang/tandan, terminal, 2,5-14 cm, diketiak daun ujung, daun pelindung elip/bulat telur, panjang 0,5-1 cm; kelopak : berjumlah 5

29 17 saling berlekatan membentuk bibir, 1 membentuk bibir atas, bentuk bulat telur 2-3,5mm, 1 bibir buah membentuk 4 gigi, sisi luar berambut kelenjar, ungu atau hijau; mahkota : berbibir, 3 bibir atas, 2 bibir bawah, panjang tabung 1,5-2mm, cuping mahkota 3-5mm, putih; benang sari : berjumlah 4, tersisip di dasar mahkota, ada 2 yang panjang; putik : kepala putik bercabang dua, tidak sama; buah : kelopak ikut menyusun buah, buah tegak dan tertekan. (Sudarsono dkk, 2002) d. Kandungan kimia Bahan-bahan kimia yang terkandung di seluruh bagian tanaman kemangi di antaranya adalah 1,8 sineol, anethol, apigenin fenkhona, stigmaasterol, triptofan, tannin, sterol, dan boron (Hariana, 2007 ; Dharmayanti, 2003) Hasil penapisan fitokimia ekstrak daun kemangi (Ocimum americanum L. Lamiaceae) menunjukkan adanya golongan senyawa flavonoid, saponin, tanin dan triterpenoid/steroid. (Medica dkk, 2004). Sementara itu, daun kemangi juga mengandung minyak atsiri dengan eugenol sebagai komponen utamanya. Biji kemangi mengandung saponin, flavonoid, dan polivenol. (Mangoting dkk, 2005) e. Khasiat Daun kemangi dapat menyembuhkan sakit kepala, pilek, diare, sembelit, gangguan ginjal, mengatasi sakit maag, perut kembung,

30 18 masuk angin, kejang-kejang, dan badan lesu. Selain itu minyak atsiri kemangi juga bisa digunakan sebagai pelancar ASI, mengatasi demam, batuk, selesma, gangguan pencernaan, muntah-muntah, infeksi usus, radang lambung, serta gas dalam usus. Aroma kemangi dapat menolak gigitan nyamuk. (Dharmayanti, 2003) Senyawa 1,8 sineol dalam kemangi dapat mengatasi masalah ejakulasi prematur pada pria. Sementara apigenin fenkhona dan eugenol-nya dapat memudahkan terjadinya ereksi. (Dharmayanti, 2003) Senyawa anethol dan boron dapat merangsang hormon estrogen pada wanita, sedangkan senyawa eugenol juga dapat membunuh jamur penyebab keputihan. Zat stigmaasterol dalam kemangi merangsang pematangan sel telur. Zat triptofan bisa menunda menopause. (Dharmayanti, 2003) Bijinya memiliki khasiat sebagai peluruh air kencing, peluruh keringat, mengatasi sembelit, kencing nanah, penyakit mata, pencahar dan kejang perut. Akarnya bisa digunakan sebagai upaya mengobati penyakit kulit. (Sudarsono dkk, 2002) Flavonoid yang terkandung pada daunnya, juga memilki efek sebagai anti-inflamasi, anti-alergi, anti-mikroba,dan anti-kanker. (Wikipedia, 2010)

31 19 5. Kandungan Daun Kemangi yang Mempunyai Efek Antihelmintik Dalam beberapa literatur, belum ada penelitian ilmiah yang menyebutkan bahwa kemangi (Ocimum americanum L.) dapat berkhasiat sebagai antihelmintik. Hasil penapisan fitokimia ekstrak daun kemangi telah menunjukkan bahwa daun tumbuhan ini mengandung bahan kimia yaitu tanin, saponin, triterpenoid/steroid, dan flavonoid. (Medica dkk, 2004) Beberapa kandungan kimia tersebut yang memiliki sifat antihelmintik adalah tanin dan saponin. 6. Metode-Metode Ekstrak Metode-metode ekstrasi dengan menggunakan pelarut dapat dibagi menjadi dua cara, yaitu cara dingin dan cara panas. a. Cara Dingin 1) Maserasi Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukkan pada temperatur ruangan (kamar). Secara teknologi termasuk ekstraksi dengan prinsip metode pencapaian konsentrasi pada keseimbangan. Maserasi kinetik berarti dilakukan pengadukan yang kontinu (terus menerus ). Remaserasi berarti dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan pertama yang merata, dan seterusnya.

32 20 2) Perkolasi Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna (Exhaustive extraction) yang umumnya dilakukan pada temperature ruangan. Proses terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak), terus menerus sampai diperoleh ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan. b. Cara panas 1) Refluks Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu pertama sampai 3-5 kali sehingga dapat termasuk proses sempurna. 2) Sokletasi Sokletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik. 3) Digesti Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukkan kontinu) pada temperatur yang lebih tinggi dari temperature

33 21 ruangan (kamar), yaitu secara umum dilakukan pada temperatur C. 4) Infus Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air (bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih, temperatur terukur C) selama waktu tertentu (15 20 menit) 5) Dekok Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama ( > 30 0 C) dan temperatur sampai titik didih air. (Departemen Kesehatan RI Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan Direktorat Pengawasan Obat Tanaman, 2000) Peneliti menggunakan metode sokletasi untuk dengan pelarut etanol 90 % untuk mendapatkan kandungan kimia seperti tanin dan saponin yang ada pada daun kemangi. Penggunaan etanol sebagai bahan ekstrasi dengan alasan karena pelarut etanol dapat melarutkan kandungan kimia dari sampel, baik yang bersifat polar maupun non polar, sehingga komponen kimia yang ada pada sampel diharapkan dapat diekstraksi secara sempurna, selain itu untuk menghindari pertumbuhan mikroba pada ekstrak yang diperoleh dan juga karena etanol merupakan pelarut yang aman digunakan untuk kosmetika. (Ristek-MTIC AWARD, 2007)

34 22 B. Kerangka Pemikiran Ekstrak Daun Kemangi (Ocimum americanum, L.) mengandung saponin, flavonoid, tanin, triterpenoid / steroid Variabel luar terkendali dalam pembuatan ekstrak Variabel luar tidak terkendali dalam pembuatan ekstrak Konsentrasi Larutan Uji Suhu Percobaan C. D. Umur tanaman Asal tanaman Saponin Tanin Menghambat enzim kemotripsin, proteinase, dan kolinesterase Denaturasi Protein Cacing Gelang Babi Ascaris suum Goeze Variabel luar terkendali dalam perlakuan Variabel luar tidak terkendali dalam perlakuan Jenis Cacing Panjang Cacing Umur cacing Kepekaan cacing Kematian Cacing Gambar 2.1. Skema kerangka pemikiran

35 23 B. Hipotesis Ekstrak etanol daun kemangi (Ocimum americanum, Linn.) pada konsentrasi tertentu memiliki efek antihelmintik terhadap Ascaris suum Goeze sp In vitro.

36 24 BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorium dengan rancangan penelitian the post test with controlled group design. B. Lokasi dan Waktu Penelitian Penelitian ini dilakukan di laboratorium Parasitologi Universitas Setia Budi, Surakarta pada tanggal 14 Agustus 2010 s/d 31 Agustus C. Subjek Penelitian Subjek penelitian/hewan uji adalah Ascaris suum Goeze sp yang masih aktif bergerak diperoleh dari usus babi dari tempat penyembelihan Radjakaja Kotamadia Surakarta. D. Teknik Sampling Penelitian ini menggunakan teknik incidental sampling dengan menyamakan jenis cacing dan tidak membedakan jenis kelamin cacing. E. Identifikasi Variabel 1. Variabel bebas : Kadar ekstrak daun kemangi 2. Variabel tergantung : Waktu kematian semua cacing dalam tiap rendaman setelah pemberian perlakuan. 3. Variabel luar a. Dapat dikendalikan : Jenis cacing, besar cacing, konsentrasi larutan uji, suhu percobaan.

37 25 b. Tidak dapat dikendalikan : Umur cacing, Variasi kepekaan cacing terhadap larutan uji, asal dan umur tanaman kemangi (Ocimum americanum L.) F. Definisi Operasional Variabel 1. Variabel bebas : Kadar Konsentrasi Ekstrak Daun Kemangi Konsentrasi ekstrak daun kemangi adalah konsentrasi yang dibuat dengan cara melarutkan ekstrak daun kemangi yang didapatkan melalui metode sokletasi dengan pelarut Tween 5 % hingga tercapai konsentrasi yang diinginkan. Konsentrasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah 20%, 30%, 40%, dan 50%. Pemilihan konsentrasi tersebut mengacu penelitian yang telah dilakukan Kuntari (2008) yang meneliti efek antihelmintik air rebusan daun ketepeng terhadap cacing tambang anjing secara In vitro. Pada konsentrasi 20% air rebusan daun ketepeng yang dipakai sudah menimbulkan efek. Sehingga pada penelitian ini konsentrasi dimulai dari 20 %. Konsentrasi tertinggi pada penelitian ini yang dipakai adalah 50%, karena pada konsentrasi tersebut hasil ekstrak yang dihasilkan dengan metode sokletasi sangat kental. Skala pengukuran variabel ini adalah rasio. 2. Variabel tergantung : Waktu Kematian Cacing Waktu kematian cacing adalah waktu matinya semua cacing dalam tiap rendaman setelah pemberian perlakuan. Cacing dianggap mati

38 26 apabila disentuh dengan pinset anatomis tidak ada respon gerakan. Skala pengukuran variabel ini adalah rasio. 3. Variabel perancu terkendali a) Jenis Cacing Cacing yang digunakan adalah cacing pada usus halus babi (Ascaris suum, Goeze). b) Ukuran Cacing Ukuran cacing dikendalikan dengan memilih cacing yang memiliki panjang 30 cm sampai 35 cm. c) Suhu Percobaan Suhu percobaan dikendalikan dengan inkubator bersuhu 37 0 C. 4. Variabel perancu tidak terkendali a) Umur cacing Umur cacing merupakan variabel luar yang tidak dapat dikendalikan karena cacing yang didapat adalah cacing yang berasal dari usus babi yang tidak dapat dipastikan kapan babi tersebut terinfeksi cacing dan kapan telur cacing menetas menjadi cacing dewasa. b) Variasi kepekaan cacing terhadap larutan obat yang diujikan Variasi kepekaan cacing terhadap obat larutan yang diujikan merupakan variabel luar yang tidak dapat dikendalikan karena pertumbuhan dipengaruhi oleh banyak faktor.

39 27 c) Umur tanaman kemangi Umur tanaman kemangi merupakan variabel luar yang tidak dapat dikendalikan karena tanaman ini merupakan tanaman liar yang tidak dibudidayakan sehingga tidak diketahui kapan tumbuhan yang digunakan ditanam. Pada penelitian ini tanaman kemangi yang sedang atau sudah pernah berbunga.

40 28 G. Rancangan Penelitian 1. Penelitian Pendahuluan Ascaris suum Goeze Direndam dalam larutan garam fisiologis Direndam dalam larutan ekstrak daun kemangi konsentrasi 20%, 30%, 40%, 50% Direndam dalam larutan pirantel pamoat 5 mg/ml Inkubasi pada suhu 37 0 C Selama 15 menit Inkubasi pada suhu 37 0 C Selama 15 menit Inkubasi pada suhu 37 0 C Selama 15 menit Pengamatan tiap 2 jam hingga semua cacing mati Pengamatan tiap 2 jam hingga semua cacing mati Pengamatan tiap 2 jam hingga semua cacing mati Dicatat lama waktu kematian semua cacing Dicatat lama waktu kematian semua cacing Dicatat lama waktu kematian semua cacing Hasil yang diperoleh digunakan sebagai kontrol negatif Dipilih konsentrasi terendah dengan lama waktu kematian yang tidak terlalu jauh dari kontrol positif Hasil yang diperoleh digunakan sebagai kontrol positif Gambar 3.1. Skema Rancangan Penelitian Pendahuluan

41 29 2. Penelitian Akhir Ascaris suum Goeze Direndam dalam larutan ekstrak daun kemangi dengan konsentrasi terendah yang didapatkan dari uji pendahuluan sebelumnya Direndam dalam larutan pirantel pamoat 5 mg/ml Inkubasi pada suhu 37 0 C Selama 15 menit Inkubasi pada suhu 37 0 C Selama 15 menit Pengamatan tiap 2 jam hingga semua cacing mati Pengamatan tiap 2 jam hingga semua cacing mati Dihitung Waktu kematian semua cacing Dihitung Waktu kematian semua cacing Uji regresi linier Analisis Probit Gambar 3.2. Skema Rancangan Penelitian Akhir

42 30 H. Alat dan Bahan 1. Cawan petri diameter 15 cm. 2. Batang pengaduk kaca. 3. Pinset anatomis. 4. Gelas piala. 5. Gelas ukur. 6. Labu takar. 7. Toples untuk menyimpan cacing. 8. Inkubator. 9. NaCl 0,9% b/v. 10. Ekstrak Daun Kemangi 11. Cacing Ascaris suum Goeze sp I. Cara Kerja 1. Tahap Persiapan Ekstraksi daun kemangi dengan metode sokletasi dilakukan di Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu Universitas Gadjah Mada (LPPT UGM). a. Pembuatan Ekstrak Daun Kemangi 1) Pengambilan bahan Daun kemangi bisa didapat dari Pasar Beringharjo, Yogyakarta. Dipilih daun - daun yang masih segar, berwarna hijau tapi belum kering dan tidak busuk. 2) Pembuatan serbuk daun kemangi

43 31 Daun kemangi tersebut segera dicuci bersih pada air mengalir, tujuannya untuk menghilangkan kotoran yang melekat kemudian dikeringkan dalam almari pengering pada suhu 45 0 C selama 24 jam sampai kering untuk mencegah terjadinya pembusukan oleh bakteri atau cendawan dan lebih mudah dihaluskan untuk diserbuk. Tanaman kemangi yang sudah kering kemudian diserbuk dengan mesin penyerbuk dengan saringan diameter lubang saringan 1 mm. 3) Ekstraksi Daun Kemangi Ekstraksi daun kemangi dilakukan dengan metode sokletasi. Serbuk Daun Kemangi Dibungkus kertas saring dimasukkan ke dalam alat Soklet ditambah Ethanol 90%, dipanaskan sampai filtrat jernih Ampas Filtrat Diuapkan dengan Vacuum Rotary Evaporator pemanas water bath suhu 70 0 C. Ekstrak Kental Dituang dalam cawan porselin, dikeringkan pada suhu 50 0 C. Ekstrak Daun Kemangi

44 32 b. Perhitungan Konsentrasi Larutan Uji yang Digunakan Perhitungan konsentrasi larutan uji yang akan digunakan adalah dengan cara sebagai berikut : V 1.M 1 = V 2.M 2 Keterangan : V 1 = Volume awal V 2 = Volume akhir M 1 = Konsentrasi awal M 2 = Konsentrasi akhir Pada uji pendahuluan, peneliti akan memakai larutan ekstrak pada konsentrasi 20%, 30%, 40%, 50%. c. Penentuan besar sampel Penentuan besar sampel dihitung dengan rumus Federer (Arkeman dan David, 2006) sebagai berikut : (n-1) (t-1) >15 Keterangan : n = besar sampel t = jumlah kelompok perlakuan d. Penentuan besar jumlah ulangan (Replikasi) Penentuan besar replikasi juga dihitung dengan rumus Federer sebagai berikut : (n-1) (t-1) >15

45 33 Keterangan : n = jumlah ulangan (replikasi) t = jumlah kelompok perlakuan 2. Tahap Penelitian a. Uji pendahuluan 1) Penetapan waktu hidup Ascaris suum Goeze sp di luar tubuh babi (Kontrol Negatif) a) Cawan petri disiapkan, diisi larutan garam fisiologis 25 ml dan dihangatkan terlebih dahulu pada suhu 37 o C di dalam inkubator selama kurang lebih 15 menit. b) Ke dalam cawan petri dimasukkan Ascaris suum Goeze sp 5 ekor. c) Diinkubasi pada suhu 37 o C d) Untuk melihat apakah cacing mati atau hidup cacing cacing tersebut disentuh dengan pinset anatomis. Jika sudah tidak bergerak, maka cacing dinyatakan mati. Pengamatan dilakukan tiap 2 jam. e) Hasil waktu kematian yang diperoleh kemudian dicatat f) Penelitian direplikasi 2 kali. g) Lama waktu yang diperoleh, akan ditetapkan sebagai waktu maksimal pengamatan penelitian efek antihelmintik ekstrak daun kemangi ( Ocimum americanum L. )

46 34 2) Pengamatan lama waktu hidup Ascaris suum Goeze sp yang diberi perlakuan dengan pirantel pamoat 5 mg/ml (Kontrol Positif) a) Cawan petri disiapkan, diisi larutan pirantel pamoat 25 ml dan dihangatkan terlebih dahulu pada suhu 37 o C di dalam inkubator selama kurang lebih 15 menit. b) Ke dalam cawan petri dimasukkan Ascaris suum Goeze sp 5 ekor. c) Diinkubasi pada suhu 37 o C d) Untuk melihat apakah cacing mati atau hidup cacing cacing tersebut disentuh dengan pinset anatomis. Jika sudah tidak bergerak, maka cacing dinyatakan mati. Pengamatan dilakukan tiap 2 jam. e) Hasil waktu kematian yang diperoleh kemudian dicatat f) Penelitian direplikasi 2 kali. g) Lama waktu yang diperoleh, akan ditetapkan sebagai kontrol positif. 3) Uji penelitian pendahuluan a) Cawan petri disiapkan, masing-masing berisi larutan ekstrak etanol dalam konsentrasi 20%, 30%, 40%, 50% sebanyak 25 ml dan dihangatkan terlebih dahulu pada suhu 37 o C di dalam inkubator selama kurang lebih 15 menit.

47 35 b) Kedalam cawan petri dimasukkan Ascaris suum Goeze sp sejumlah 5 ekor. c) Diinkubasi pada suhu 37 o C d) Untuk melihat apakah cacing mati atau hidup cacing-cacing tersebut disentuh dengan pinset anatomis. Jika sudah tidak bergerak, maka cacing dinyatakan mati. Pengamatan dilakukan tiap 2 jam. e) Hasil yang diperoleh dicatat. f) Masing-masing larutan ekstrak daun kemangi akan dicatat persentase kematian cacingnya tiap 2 jam. Kemudian dipilih ekstrak daun kemangi dengan konsentrasi terendah yang lama waktu kematian cacingnya tidak jauh dari lama waktu kematian kontrol positif. Konsentrasi ini digunakan sebagai konsentrasi terendah untuk melakukan uji penelitian berikutnya. b. Uji Penelitian Akhir 1) Cawan petri disiapkan, masing-masing diisi larutan uji sebanyak 25 ml (dengan konsentrasi terendah yang diketahui setelah melakukan uji pendahuluan) dan dihangatkan terlebih dahulu pada suhu 37 0 C di dalam inkubator selama kurang lebih 15 menit 2) Ke dalam masing-masing cawan petri dimasukkan Ascaris suum Goeze sp 5 ekor. 3) Diinkubasi pada suhu 37 o C

48 36 4) Untuk melihat apakah cacing mati atau hidup, cacing-cacing tersebut disentuh dengan pinset anatomis. Jika sudah tidak bergerak maka cacing dinyatakan mati. Pengamatan dilakukan tiap 2 jam. 5) Penelitian direplikasi 6 kali. 6) Hasil yang diperoleh dicatat J. Analisis Data Data yang didapat berupa waktu kematian cacing dianalisis secara statistik dengan regresi linier dan analisis probit. Uji regresi linier menunjukkan hubungan antara 2 variabel numerik. Berbeda dengan korelasi, uji regresi linier berfungsi untuk memprediksi nilai variabel numerik dengan nilai variabel numerik yang lain. Variabel yang ingin diprediksi adalah variabel tergantung, sedang yang diukur adalah variabel bebas. (Sastroasmoro dan Ismael, 2002) Analisis probit digunakan untuk mengetahui daya bunuh ekstrak daun kemangi terhadap Ascaris suum yang dinyatakan dengan lethal death time. (Matsumura, 1975)

49 37 BAB IV HASIL PENELITIAN A. Data Hasil Penelitian 1. Penelitian Pendahuluan Uji tahap pendahuluan dilakukan dengan mengamati jumlah cacing Ascaris suum Goeze sp yang mati pada perendaman dengan berbagai konsentrasi ekstrak etanol daun kemangi. Hasil uji tahap 1 disajikan pada tabel 1. Dari hasil penelitan pendahuluan didapatkan hasil pada tabel berikut ini : Tabel 4.1. Lama Kematian Cacing pada Kontrol Negatif dan Kontrol Positif Ulangan Lama Kematian Cacing (jam) NaCl 0,9% Pirantel Pamoat 5mg/ml I 90 2 II 96 2 III IV 96 2 Rerata 96 2

50 38 Tabel 4.2. Lama Kematian Cacing pada Ekstrak Etanol Daun Kemangi sebagai Penelitian Pendahuluan Konsentrasi Lama Kematian Waktu Cacing (Jam) 20 % 12 30% 6 40% 4 50% 2 Hasil uji penelitian pendahuluan, berdasarkan lama waktu kematian cacing, konsentrasi ekstrak etanol daun kemangi 20 % paling lama waktunya yaitu 12 jam. Sedangkan konsentrasi ekstrak etanol daun kemangi 30 % lama waktu kematian cacingnya yaitu 6 jam. Untuk penelitian akhir diambil konsentrasi terendah dengan lama waktu kematian cacing yang tidak terlalu jauh dari lama waktu kematian cacing kontrol positifnya. Sehingga untuk hasil penelitian akhir diambil konsentrasi terendah 30 % dan konsentrasi tertinggi 50 % 2. Penelitian Akhir Setelah dilakukan penelitian mengenai pengaruh ekstrak etanol daun kemangi (Ocimum americanum, Linn) terhadap mortalitas Ascaris suum Goeze sp In vitro, maka didapatkan hasil pada tabel berikut ini.

51 39 Tabel 4.3. Lama Kematian Cacing pada Ekstrak Etanol Daun Kemangi sebagai Penelitian Akhir Ulangan Lama Kematian Cacing (jam) Ekstrak Kemangi Pirantel Pamoat 30% 40% 50% 5 mg/ml I II III IV V VI Rerata Berdasarkan hasil uji penelitian pada tabel 4.1 dan tabel 4.3, kemudian dibuat grafik yang menggambarkan rerata waktu kematian cacing pada masing-masing kelompok perlakuan.

52 40 Perlakuan Ekstrak Daun Kemangi (%) Gambar 4.1. Grafik Rerata Waktu Kematian cacing Perbedaan rerata waktu kematian cacing yang menunjukkan efek antihelmintik pada masing-masing perlakuan dapat dilihat pada gambar 4.1. Efek antihelmintik terhadap Ascaris suum Goeze sp secara In vitro meningkat seiring meningkatnya konsentrasi ekstrak yang terlihat dari semakin cepatnya waktu kematian cacing pada kelompok ekstrak etanol daun kemangi. Waktu kematian kelompok ekstrak etanol daun kemangi pada konsentrasi 50% lebih lama daripada waktu kematian pada kelompok perlakuan pirantel pamoat. Kontrol negatif dengan menggunakan larutan garam fisiologis (NaCl 0,9%) commit diperoleh to user rerata waktu kematian cacing 96

53 41 jam. Waktu ini menunjukkan kemampuan hidup cacing di luar tubuh babi dan digunakan sebagai waktu maksimal pengujian larutan ekstrak. Untuk mengetahui besarnya persentase daya antihelmintik, lama waktu kematian cacing ekstrak etanol daun kemangi dibandingkan dengan lama waktu kematian cacing pirantel pamoat. Berdasarkan data yang tercantum pada hasil penelitian tabel 4.3 maka dapat diketahui besar persentase daya antihelmintik ekstrak etanol daun kemangi dibandingkan pirantel pamoat sebagai berikut : Tabel 4.4 Persentase Daya Antihelmintik Ekstrak Etanol Daun Kemangi Dibandingkan Pirantel Pamoat Perlakuan Persentase daya antihelmintik Ekstrak 30% 29,985 % Ekstrak 40% 50 % Ekstrak 50% 74,9 %

54 42 Gambar 4.2. Diagram Presentase Daya Antihelmintik Ekstrak Etanol Daun Kemangi Dibanding Pirantel Pamoat B. Analisis Data Dari data hasil penelitian pada tabel 4.3. yang berupa lama waktu kematian cacing dianalisis dengan uji regresi linier, yang kemudian dilanjutkan dengan analisis probit. Data diolah dengan program Statistical product and Service Solution (SPSS)16,0 for Windows. 1. Uji Regresi Linier Hasil Penelitian pada tabel 4.3., setelah diuji dengan uji regresi linier menggunakan Statistical product and Service Solution (SPSS)16,0 for Windows, didapatkan hasil sebagai berikut :