JURNAL KESEHATAN RAJAWALI

Transkripsi

1 Volume 5, Nomor 9, Oktober 2015 ISSN JURNAL KESEHATAN RAJAWALI Jurnal Ilmu-Ilmu Kesehatan JURNAL ENAM BULANAN Hubungan Cara Menyusui Dengan Kejadian Payudara Bengkak Pada Ibu Nifas Di Puskesmas Parongpong Periode Mei Tahun 2015 Gambaran Penilaian Status Gizi Riwayat Kehamilan Pada Ibu Bersalin Dan Berat Badan Bayi Baru Lahir Di Puskesmas Melong Asih Kota Cimahi Tahun 2014 Pola Asuh, Kecerdasan Emosional, Dan Anak Usia Pra Sekolah (3-6 Tahun) Di Tk-Nurul Ikhlas Cibiru Bandung Peran Bidan Dalam Mendukung Pemberian Air Susu Ibu Pengujian Konsentrasi Gel Agarosa 1% Dan 1,2% Pada Elektroforesis DNA Mycobacterium Tuberculosis Perbandingan Hasil Pemeriksaan Hitung Jenis Leukosit Menggunakan Metode Manual Dengan Laser-Based Flowcytometry Diterbitkan oleh Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan (STIKes Rajawali Bandung)

2 JURNAL KESEHATAN RAJAWALI Jurnal Ilmu-Ilmu Kesehatan Volume 5, Nomor 9, Oktober 2015 ISSN Jurnal Kesehatan Rajawali merupakan jurnal ilmu-ilmu kesehatan yang memuat naskah hasil penelitian bidang ilmu keperawatan, kebidanan dan analis kesehatan. Diterbitkan 6 bulan sekali pada bulan Maret dan Oktober Penanggungjawab Tonika Tohri. S.Kp., M.Kes Pemimpin Redaksi Eny Kusmiran, S.Kp., M.Kes Wakil Pimpinan Redaksi Ally Kafesa, S.ST.,M.Si Redaksi Pelaksana Iga Retia, S.ST Redaksi Rustandi, dr., M.P.H. H. Rachmat Sobarna, dr., Sp.O.G. Handarini, S.Pd.,M.Si Istianah S.Kep. Ners Erni Hernawati, S.S.T.,M.M Sekretaris Redaksi Artha Kusumawardani, S.ST Humas Faruk Rasyid, S.E. Tata Usaha Fotuho Woruwu, S.E. Alamat Redaksi Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Rajawali Jalan Rajawali Barat Nomor 38 Bandung humas@stikesrajawali.ac.id

3 PERBANDINGAN HASIL PEMERIKSAAN HITUNG JENIS LEUKOSIT MENGGUNAKAN METODE MANUAL DENGAN LASER-BASED FLOWCYTOMETRY ABSTRACT Introduction: Examination of leukocyte count is used to determine the percentage of the various types of leukocytes. Visual examination of blood smear that has been dyed is still the main way to calculate white blood cells, but the method is now increasingly comprehensive automated inspection diterima.salah the examination methods hiting leukocyte automatically using laserbased techniques flowcytometry.purpose This study aims to determine the difference leukocyte count results of the manual method and laser-based flowcytometry. Methods: This study is a research analitik.data collected in this research is the primary data with the population is patients undergoing routine hematological examination in Hospital Clinical Laboratory Al-Ihsan. The number of samples taken is 50 samples. Results: From a statistical test to the results of leukocyte count (basophils, eosinophils, neutrophils, lymphocytes and monocytes) p value = (<0.05) in basophils, eosinophils while at p = (> 0.05), monocytes p = (> 0.05), neutrophil p = (> 0.05), and lymphocytes p = (p => 0.05). Conclusion: From this study it can be concluded that there are significant differences in the results of basophil counts, but there is no significant difference in the results of the counts of eosinophils, neutrophils, lymphocytes and monocytes using manual methods and laser-based flowcytometry. Keywords: count of leukocytes, laser-based flowcytometry, manual PENDAHULUAN Pemeriksaan hematologi merupakan bagian kelompok pemeriksaan laboratorium klinik yang terdiri dari beberapa macam pemeriksaan seperti kadar hemoglobin, hitung jumlah leukosit, eritrosit, trombosit, laju endap darah (LED), sediaan apus darah tepi, hematokrit, retikulosit dan pemeriksaan hemostasis. (Wirawan, et al: 1996) Pemeriksaan hitung jenis leukosit (Differential Count) digunakan untuk mengetahui jumlah berbagai jenis leukosit. Terdapat lima jenis leukosit yang masing-masing memiliki fungsi yang khusus. Sel-sel itu adalah neutrofil, limfosit, monosit, eosinofil, dan basofil. (Freud, 2012) Hitung jenis leukosit dapat dilakukan dengan menggunakan berbagai cara. Pada diagnosis rutin pemeriksaan hitung jenis leukosit dilakukan dengan mesin penghitung sel. Teknologi yang digunakan untuk pemeriksaan hitung jenis bergantung pada tipe mesin, dengan mengenali berbagai karakteristik sel, seperti ukuran, pembiasan optik, impedansi dan sebagian juga menurut pulasan sitokimiawi. Namun bila hal tersebut berkenaan dengan pengenalan sel-sel patologis, validitas jenis pemeriksaan diferensiasi tersebut sebagian besar terbatas. Karena itu penilaian morfologis sediaan apus darah dengan menggunakan mikroskop masih menjadi dasar diagnosis hematologi. (Freud, 2012) Pada pemeriksaan hitung jenis leukosit dengan cara otomatis yang menggunakan alat hematology analyzer bekerja berdasarkan beberapa prinsip diantaranya impedance dan laserbased (optical) flowcytometry. Pada impedance flowcytometry, jenis-jenis leukosit dibedakan menurut ukurannya saja, sehingga hanya bisa membedakan 3 (tiga) jenis leukosit yaitu sel yang berukuran kecil dimasukkan dalam kelompok limfosit, sel yang berukuran besar dimasukkan kelompok granulosit dan sel yang berukuran sedang dimasukkan dalam kelompok mid-cells. Pada laser-based flowcytometry, untuk membedakan sel-sel darah putih selain berdasarkan ukuran sel juga berdasarkan granula yang kompleks dari masing-masing sel sehingga teknik ini dapat membedakan seluruh jenis leukosit yang ada pada darah. Pada kondisi di lapangan tidak semua pemeriksaan hitung jenis leukosit berlangsung lancar seperti yang diharapkan. Terkadang alat tidak dapat membaca karena berbagai faktor sehingga diperlukan teknik lain, teknik lain yang digunakan untuk melakukan perhitungan jenis leukosit adalah dengan cara manual yaitu dengan membuat sediaan apus darah tepi. Pembuatan preparat (Aziz Ansori Wahid dan Wahyu Purwaganda) 24

4 sediaan apus darah adalah untuk menilai berbagai unsur sel darah tepi seperti eritrosit, leukosit, trombosit dan mencari adanya parasit seperti malaria, microfilaria dan lain sebagainya. Bahan pemeriksaan yang digunakan biasanya adalah darah kapiler tanpa antikoagulan atau darah vena dengan antikoagulan EDTA dengan perbandingan 1mg/ cc darah. (Wahid, 2008) Pada penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Afida (2005) bahwa pemeriksaan hitung jenis menggunakan apus buffy coat pada penderita leukopenia menggunakan alat hematology analyzer dan manual, tidak terdapat perbedaan bermakna pada hitung jenis eosinofil, netrofil, limfosit dan monosit. Sedangkan terdapat perbedaan bermakna pada hitung jenis basofil dengan menggunakan buffy coat dan metode otomatis. METODE Penelitian ini merupakan penelitian analitik, yaitu untuk mengetahui perbedaan hasil pemeriksaan hitung jenis leukosit dengan tehnik manual dan teknik laser-based flowcytometry menggunakan alat hematology analyzer. Pengambilan data dilakukan dengan menggunakan data primer dimana peneliti melakukan perlakuan langsung terhadap sampel. Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah pasien yang melakukan pemeriksaan hematologi rutin menggunakan darah vena dengan hasil pemeriksaan hitung jenis leukosit yang normal di laboratorium klinik RSUD Al Ihsan. Teknik pengambilan sampel pada penelitian ini menggunakan teknik quota sampling, dimana sampel dengan ciri-ciri tertentu yang akan diukur, akan diambil oleh pengumpul data dimana sebelumnya telah ditentukan jumlah yang akan diambil sampai quota yang diinginkan. Bahan pemeriksaan yang didapat selanjutnya diperiksa dengan dua metode yang berbeda, yaitu dengan cara manual dan otomatis. Cara manual dilakukan dengan pembuatan apusan darah, dilanjutkan dengan pewarnaan menggunakan pewarna giemsa dan dibaca pada mikroskop menggunakan perbesaran obyektif 100 kali. Pembacaan dilakukan dengan menghitung persentase basofil, eosinofil, netrofil, limfosit dan monosit. Pada cara otomatis dilakukan dengan melakukan pemeriksaan hitung jenis leukosit menggunakan hematology analyzer yang pada penghitungan sel-selnya menggunakan teknik laser-based flowcytometry. Hasil yang diperoleh kemudian dibandingkan antara hasil manual dan otomatis pada masing-masing jenis sel leukosit. Selanjutnya pada masing-masing jenis leukosit tersebut dilakukan uji statistik. HASIL PENELITIAN Data yang terkumpul dari hasil penelitian kemudian diuji secara statistik. Uji statistik pertama terhadap data penelitian adalah menguji apakah data penelitian berdistribusi normal atau tidak. Hal ini karena syarat untuk menggunakan Uji T Berpasangan adalah distribusi data harus normal. Table 1 Hasil Uji Normalitas Data Menggunakan Uji Shapiro-Wilk jenis leukosit basofil otomatis 0,060 basofil manual 0,000 eosinofil otomatis 0,001 eosinofil manual 0,002 netrofil otomatis 0,120 netrofil manual 0,866 Limfosit otomatis 0,248 limfosit manual 0,278 monosit otomatis 0,023 Nilai Signifikansi monosit manual 0,023 Dari tabel 1 terlihat bahwa distribusi data normal terdapat pada nilai hitung jenis netrofil (Aziz Ansori Wahid dan Wahyu Purwaganda) 25

5 otomatis dan manual dan nilai limfosit otomatis dan manual sehungga uji statistik yang digunakan adalah Uji T Berpasangan. Sedangkan pada pada hitung jenis basofil, eosinofil, dan monosit diperoleh distribusi data yang tidak normal, sehingga pada parameter-parameter ini digunakan uji Wilcoxon. Hasil Uji T-Berpasangan dapat dilihat pada Tabel 2, sedangkan hasil uji Wilcoxon dapat dilihat pada Tabel 3. Tabel 2 Analisis Nilai Pemeriksaan Persentase Netrofil dan Limfosit Metode Otomatis dan Manual Menggunakan Uji T Berpasangan n Rerata ± SB Netrofil Otomatis 72,17 ±7, Netrofil Manual 71,40 ± 7,726 Limfosit Otomatis 20,14 ± 7, Limfosit Manual 21,47 ± 7,601 Perbedaan Rerata ± SB IK 95% P 0,77 ± 0,025 1,70-3,23 0,530 1,33 ± 0,355 12,99-19,20 0,310 Tabel 3 Analisis Nilai Pemeriksaan Persentase Basofil, Eosinofil dan Monosit Metode Otomatis dan Manual Menggunakan Uji Wilcoxon jenis leukosit P Basofil 0,000 Eosinofil 0,854 Monosit 0,744 Pada Tabel 2 menunjukan bahwa Uji T Berpasangan yang telah dilakukan diperoleh nilai netrofil p=0,530 (p=>0,05) dan nilai limfosit p=0,310 (p=>0,05). Hal ini menunjukan bahwa tidak terdapat perbedaan yang bermakna antara hitung jenis leukosit netrofil dan limfoit metode otomatis dan manual. Sedangkan pada Tabel 3 menunjukan hasil Uji Wilcoxon, diperoleh nilai signifycancy basofil 0,000 (<0,05), eosinofil 0, 854 (>0,05), dan monosit 0,744 (>0,05) antara metode otomatis dan manual, yang berarti bahwa terdapat perbedaan yang bermakna antara hitung jenis leukosit basofil metode otomatis dan manual, serta tidak terdapat perbedaan yang brmakna secara statistik antara hitung jenis leukosit eosinofil dan monosit metode otomatis dan manual. PEMBAHASAN Pemeriksaan hitung jenis leukosit pada peneltian ini dilakukan dengan menggunakan metode otomatis dan manual. Pada metode otomatis menggunakan alat penghitung sel darah (Hematology Analyzer) Mindray BC-5380, hitung jenis leukosit pada alat tersebut dilakukan dengan menggunakan metode laser-based (optical) flowcytometry. Sedangkan metode manual yaitu dengan melihat preparat sediaan apus darah tepi di bawah mikroskop. Pada proses penelitian ini, yang pertama dilakukan adalah mengambil sampel darah vena kemudian sampel darah dimasukkan kedalam tabung vakum EDTA yang kemudian di homogenkan. Tahap selanjutnya sampel diperiksa hitung jenis leukositnya dengan menggunakan alat hematology analyzer (Mindray BC-5380). Setelah tahap pemeriksaan hitung jenis leukosit menggunakan metode otomatis selesai selanjutnya sampel di homogenkan kembali untuk mencegah adanya pembekuan pada saat proses pembuatan preparat sediaan apus darah tepi untuk perhitungan jenis leukosit dibawah mikroskop. Uji normalitas data menunjukan bahwa hasil basofil, eosinofil dan monosit tidak normal maka uji statistik yang digunakan adalah Uji Wilcoxon, yang ditunjukkan dengan nilai signifikansi lebih kecil dari 0.05, sementara itu uji normalitas data pada netrofil dan limfosit menunjukan distribusi data normal yang ditunjukan dengan nilai signifikansi lebih besar dari 0,05. Dari uji statistik menggunakan Uji Wilcoxon diperoleh nilai signifikansi basofil 0,000 (<0,05), eosinofil 0,854(>0,05) dan monosit 0,744 (>0,05). Hal ini menunjukan bahwa terdapat perbedaan bermakna antara hitung jenis basofil otomatis dan manual, serta tidak terdapat perbedaan bermakna secara statistik antara hitung jenis eosinofil dan monosit metode otomatis dan manual. (Aziz Ansori Wahid dan Wahyu Purwaganda) 26

6 Sedangkan pada uji statistik menggunakan Uji T-Berpasangan diperoleh nilai signifikansi netrofil 0,530 dan limfosit 0,310 (>0.05) yang berarti bahwa tidak terdapat perbedaan yang bermakna secara statistik pada hitung jenis netrofil dan limfosit metode otomatis dan manual. Adanya perbedaan hasil pemeriksaan hitung jenis basofil dipengaruhi oleh jumlah basofil yang sedikit yaitu antara 0-1% sehingga pada saat pemeriksaan hitung jenis leukosit metode manual yang dihitung 100 leukosit tidak pernah ditemukan basofil, sedangkan pada cara otomatis leukosit yang dihitung dengan menggunakan prinsip laser-based flowcytometri dalam waktu beberapa detik dapat menghitung ribuan sel, sehingga basofil yang sedikit tetap terdeteksi, hasil ditunjukan dengan nilai rerata basofil yang ditemukan 0,68 % (kurang dari 1%). Pada jenis sel yang lain (eosinofil, netrofil, limfosit dan monosit) tidak terdapat perbedaan yang bermakna antara metode manual dan laser-based flowcytometry menunjukkan bahwa metode otomatis tersebut telah cukup baik dan dapat digunakan dalam pemeriksaan sehari-hari. KESIMPULAN 1) Terdapat perbedaan yang bermakna secara statistik pada hitung jenis basofil 2) Tidak terdapat perbedaan yang bermakna secara statistik antara nilai hitung jenis leukosit eosinofil, netrofil, limfosit dan monosit. 3) Pemeriksaan hitung jenis leukosit menggunakan metode laser-based flowcytometry dapat digunakan karena sebagian besar tidak memiliki perbedaan yang signifikan dengan metode manual. SARAN 1) Untuk laboratorium, hematology analyzer yang dalam penghitungan selnya menggunakan prinsip laser-based flowcytometry dapat digunakan untuk menghitung jenis leukosit karena alat otomatis tersebut lebih efisien dan efektif dalam pemeriksaan hitung jenis leukosit. 2) Untuk peneliti selanjutnya dapat dilakukan penelitian terhadap hasil pemeriksaan hitung jenis leukosit menggunakan alat hematology analyzer yang menggunakan prinsip pemeriksaan yang berbeda. DAFTAR PUSTAKA 1. Afida MA. Pemeriksaan hitung jenis menggunakan sediaan apus buffy coat pada penderita leukopenia. [serial online] 2005 [cited 16 Oktober 2014]; Available From: URL: 2. Arif M. Penuntun praktikum hematologi. [serial online] 2015 [cited 24 juni 2015]; Available From: URL: CSL-1-HEMATOLOGI-2.pdf 3. Bintang M. Biokimia tekhnik penelitian. Jakarta: Erlangga; Freud M, Hecner F, Dany F alih bahasa. Atlas hematologi. Jakarta: Buku kedokteran EGC; Gandasoebrata R. Penuntun laboratorium klinik. Jakarta: PT Dian Rakyat; Hidayat AAA. Metode penelitian kebidanan dan teknik analisis data. Jakarta: Salemba Medika; Kasjono HS. Teknik sampling untuk penelitian kesehatan. Yogyakarta: Graha Ilmu; Mulyatno CK. Struktur darah. [serial online] [cited 16 Oktober 2014]; Available From: URL: 9. Nugroho WSH. Laboratorium klinik I pemeriksaan hematologi. [serial online] [cited 16 Oktober 2014]; Available From: URL: Operator s manual. Clinical case study BC 5300/5380 auto hematology analyzer. (Aziz Ansori Wahid dan Wahyu Purwaganda) 27