PEMERIKSAAN BAKTERI Escherichia coli PADA BEBERAPA SAMPEL AIR BERSIH YANG DIAMBIL DI LABORATORIUM MIKROBIOLOGI BTKL-PP KELAS 1 MEDAN TUGAS AKHIR

Transkripsi

1 PEMERIKSAAN BAKTERI Escherichia coli PADA BEBERAPA SAMPEL AIR BERSIH YANG DIAMBIL DI LABORATORIUM MIKROBIOLOGI BTKL-PP KELAS 1 MEDAN TUGAS AKHIR Oleh: ELSA APRIANTY CHANIAGO NIM PROGRAM STUDI DIPLOMA III ANALIS FARMASI DAN MAKANAN FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2017

2 PEMERIKSAAN BAKTERI Escherichia coli PADA BEBERAPA SAMPEL AIR BERSIH YANG DIAMBIL DI LABORATORIUM MIKROBIOLOGI BTKL-PP KELAS 1 MEDAN TUGAS AKHIR Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh Gelar Ahli Madya pada Program Studi Diploma III Analis Farmasi dan Makanan Fakultas Farmasi Oleh: ELSA APRIANTY CHANIAGO NIM PROGRAM STUDI DIPLOMA III ANALIS FARMASI DAN MAKANAN FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2017

3 PENGESAHAN TUGAS AKHIR PEMERIKSAAN BAKTERI Escherichia coli PADA BEBERAPA SAMPEL AIR BERSIH YANG DIAMBIL DI LABORATORIUM MIKROBIOLOGI BTKL-PP KELAS 1 MEDAN Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh Gelar Ahli Madya pada Program Studi Diploma III Analis Farmasi dan Makanan Fakultas Farmasi Oleh: ELSA APRIANTY CHANIAGO Medan, Agustus 2017 Disetujui Oleh: Pembimbing, Vriezka Mierza, S.Farm., M.Si., Apt NIP Disahkan Oleh: Dekan, Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP

4 KATA PENGANTAR Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang senantiasa mencurahkan segala rahmat-nya kepada kita semua khususnya saya sebagai penulis untuk dapat menyelesaikan Tugas Akhir yang berjudul Pemeriksaan Bakteri Escherichia coli pada beberapa sampel Air Bersih yang diambil di Laboratorium Mikrobiologi BTKL-PP Kelas 1 Medan. Tugas Akhir ini dibuat sebagai salah satu syarat untuk mendapat gelar ahlimadya analis farmasi dan makanan pada Fakultas Farmasi. Dalam menyelesaikan Tugas Akhir ini penulis banyak mendapat saran, dorongan, bimbingan dari berbagai pihak, hingga akhirnya terselesaikan Tugas Akhir ini. Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih yang sebesarbesarnya kepada : 1. Ibu Vriezka Mierza, S.Farm., M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang senantiasa sabar dan ikhlas dalam memberikan ilmu, waktu, nasehat, arahan serta semangat selama proses penyelesaian penelitian dan tugas akhir ini. 2. Ibu Prof. Dr.Masfria, MS,. Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi. 3. Bapak Popi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt. selaku ketua Program Studi D-III Analis Farmasi dan Makanan. 4. Kedua orang tua tercinta saya, Ayahanda Rizwan, Ibunda Murni Pasaribu serta Abang dan adik saya, Rizky Saputra Caniago, Rizka

5 Aprillah Caniago, serta dukungan baik moral maupun materil. Semoga selalu dalam lindungan Allah SWT. 5. Seluruh teman-teman kuliah Angkatan 2014 yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu, namun tidak mengurangi arti keberadaan mereka terutama Resmiyani Gultom, Arda Lestari Tampubolon, Febri Sitepu, Jetri Silalahi dan Irene Aritonang. 6. Teman yang membantu dan mendukung penulis untuk menyelesaikan Tugas akhir penulis, Budi Prasetya Harahap dan Novayanti. Penulis menyadari bahwa Tugas Akhir ini masih sangat jauh dari kesempurnaan. Oleh karena itu, penulis sangat membuka luas bagi yang ingin menyumbangkan masukan dan kritikan demi kesempurnaan Tugas Akhir ini. Akhir kata penulis berharap semoga Tugas Akhir ini dapat bermanfaat bagi penulis sendiri maupun bagi pembaca. Medan, Agustus 2017 Penulis Elsa Aprianty Chaniago

6 SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS Saya yang bertanda tangan di bawah ini: Nama : Elsa Aprianty Chaniago Nomor Induk Mahasiswa : Program Studi Judul Tugas Akhir : D III Analis Farmasi dan Makanan : Pemeriksaa Bakteri Escherichia coli pada beberapa Sampel Air Bersih yang diambil di Laboratorium Mikrobiologi BTKL-PP Kelas 1 Medan. dengan ini menyatakan bahwa tugas akhir ini ditulis berdasarkan data dari hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain untuk memperoleh gelar ahli madya di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat karena kutipan yang ditulis telah menyebutkan atau mencantumkan sumbernya di dalam daftar pustaka. Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam tugas akhir ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima sanksi apapun oleh Program Studi Diploma III Analis Farmasi dan Makanan Fakultas Farmasi, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing. Demikian surat pernyataan ini saya buat dengan sebenarnya untuk dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya. Medan, Agustus 2017 Yang Menyatakan, Materai Rp Elsa Aprianty

7 PEMERIKSAAN BAKTERI Escherichia coli PADA BEBERAPA SAMPEL AIR BERSIH YANG DIAMBIL DI LABORATORIUM MIKROBIOLOGI BTKL-PP KELAS 1 MEDAN ABSTRAK LatarBelakang :BakteriEscherichia coli adalah salah satu sumber kontaminan air bersih dalam makanan dan air minum. Air bersih ada beberapa macam yaitu air sumur, air hujan, air tanah. Bakteri Escherichia coli yang terdapat pada air bersih dapat menyebabkan infeksi saluran cerna seperti diare. Tujuan :Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui jumlah bakteri Escherichia coli didalam air bersih yang diambil di Laboratorium Mikrobiologi BTKL-PP Kelas 1 Medan. Metode :Sampel diperiksa di Laboratorium Mikrobiologi BTKL-PP Medan. Penentuan jumlah bakteri Escherichia coli dilakukan menurut metode Most Probable Number(MPN) sesuai dengan prosedur yang digunakan dilaboratorium balai teknik kesehatan lingkungan (BTKL-PP). Hasil :Dari hasil pemeriksaan yang dilakukan pada sampel air bersih dengan nomor sampel 975/B/AB/21/02/2017 adalah 430MPN/100ml, dengan nomor sampel 978/B/AB/21/02/2017 adalah <1.8 MPN/100ml, dengan nomor sampel 979/B/AB/21/02/2017 adalah <1.8MPN/100ml. Menurut Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia, No 416/Menkes/Per/IX/1990. Kadar maksimum bakteri Escherichia coli dalam air bersih adalah 0. Kesimpulan :Air bersih yang diuji dengan nomor sampel 975/B/AB/21/02/2017, 978/B/AB/21/02/2017, dan 979/B/AB/21/02/2017tidak memenuhi persyaratan menurut Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia, No 416/Menkes/Per/IX/1990 Kata kunci : air bersih, bakteri Escherichia coli, metode MPN.

8 DAFTAR ISI Halaman HALAMAN PENGESAHAN... KATA PENGANTAR... SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS... ABSTRAK... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR LAMPIRAN... iii iv vi vii viii x xi BAB I PENDAHULUAN Latar Belakang Tujuan Manfaat... 3 BAB II TINJAUAN PUSTAKA Air Air Bersih Sumber Air Bersih Kriteria Kualitas Air Efek Pencemaran Air IndikatorPencemaran Air Bakteri Bakteri Escherichia coli Metode MPN BAB III METODE PENGUJIAN... 14

9 3.1 Tempat dan Waktu Alat dan Bahan Alat Bahan Sampel Pembuatan Media Pembuatan media LSB (Lauryl Sulfath Broth) Pembuatan media Brilliant Green Lactose Broth Pembuatan media Eosin Methylene Blue Agar Prosedur Tetap BTKL-PP Kelas 1 Medan Tes Perkiraan Tes Penegasan Identifikasi Bakteri Escherichia coli ke Media EMBA Tes Pelengkap (Complete Test) Uji Indol BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN HasilPemeriksaan Bakteri Escherichia coli Pembahasan BAB V KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Saran DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

10 DAFTAR TABEL Tabel 4.1 Hasil pemeriksaan bakteri Escherichia coli... 18

11 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 Gambar Alat dan Bahan Lampiran 2 Tabel Perkiraan Terdekat Jumlah (MPN) Lampiran 3 Baku Mutu Air Bersih... 28

12 BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Mikrobiologi adalah ilmu yang mempelajari organisme (makhluk) kecil yang tidak dapat dilihat dengan mata telanjang dan hanya dapat dilihat dengan mikroskop (bahasa Yunani: micros = kecil, bios = hidup, dan logos = ilmu). Organisme kecil itu disebut dengan mikroorganisme. Mikrobiologi merupakan bagian ilmu dari biologi, tersusun oleh banyak disiplin ilmu. Bagian dari mikrobiologi yang mempelajari peranan mikroorganisme di dalam lingkungan adalah mikrobiologi lingkungan. Lingkungan yang dimaksud terutama terdiri dari air, tanah, dan udara (Waluyo, 2009). Mikrobiologi air adalah mikrobiologi yang mempelajari kehidupan di dalam lingkungan air. Kehidupan mikroba pada lingkungan air dapat berada di air laut, air tawar, air limbah, air bersih, air minum, dan sebagainya. (Waluyo, 2009). Air adalah materi esensial di dalam kehidupan. Tidak ada satupun mahluk hidup yang berada dibumi yang tidak membutuhkan air. Para ahli berkecimpung di dalam masalah air baik air untuk keperluan rumah tangga ataupun untuk kepentingan lainnya (industri, pertanian) sepakat bahwa penyebab terjadinya krisis air dapat secara langsung dapat pula secara tidak langsung (Suriawiria, 2005). Didalam sel hidup, baik pada tumbuh-tumbuhan ataupun pada hewan (termasuk didalamnya manusia) akan terkandung sejumlah air, yaitu lebih dari 75% kandungan sel tumbuh-tumbuhan atau lebih dari 67% kandungan sel hewan, terdiri dari air. Kebutuhan terhadap air untuk keperluan sehari-hari di lingkungan

13 rumah tangga, ternyata berbeda untuk tiap tempat, tiap tingkatan kehidupan atau untuk tiap bangsa dan negara (Suriawiria, 2005). Escherichia coli adalah bakteri yang merupakan bagian dari mikroflora yang secara normal ada dalam saluran pencernaan manusia dan hewan berdarah panas. Escherichia coli termasuk ke dalam bakteri heterotrof yang memperoleh makanan berupa zat organik dari lingkungannya karena tidak dapat menyusun sendiri zat organik yang dibutuhkannya. Zat organik diperoleh dari sisa organisme lain. Bakteri ini menguraikan zat organik dalam makanan menjadi zat anorganik, yaitu CO 2, H 2 O, energi, mineral. Di dalam lingkungan, bakteri pembusuk ini berfungsi sebagai pengurai dan penyedia nutrisi bagi tumbuhan (Kusuma, 2010). Escherichia coli juga merupakan bakteri indikator kualitas air karena keberadaannya di dalam air mengindikasikan bahwa air tersebut terkontaminasi oleh feses, yang kemungkinan juga mengandung mikroorganisme enterik patogen lainnya. Escherichia coli menjadi patogen jika jumlah bakteri ini dalam saluran pencernaan meningkat atau berada diluar usus. Escherichia coli menghasilkan enterotoksin yang menyebabkan beberapa kasus diare (Brooks, 2001). 1.2 Tujuan 1. Untuk mengetahui jumlah bakteri Escherichia coli didalam sampel air bersih dengan menggunakan metode Most Probable Number (MPN). 2. Untuk mengetahui jumlah bakteri Escherichia coli didalam sampel air bersih apakah memenuhi persyaratan yang diterapkan dalam PERMENKES 416/MENKES/PER/IX/1990.

14 1.3 Manfaat Manfaat yang didapat dari tugas akhir ini adalah untuk dapat mengetahui dan mempraktikkan secara langsung metode yang digunakan oleh Instansi Balai Teknik Kesehatan Lingkungan dan Pengendalian Penyakit Kelas 1 Medan dalam hal pengukuran jumlah bakteri Esherichia coli. Hal tersebut akan bermanfaat dalam hal pengaplikasian pengukuran jumlah bakteri Esherichia coli pada sampel yang lain.

15 BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Air Air merupakan sumber daya alam yang diperlukan untuk kebutuhan hidup orang banyak, bahkan oleh semua makhluk hidup. Oleh karena itu, sumber daya air harus dilindungi agar tetap dapat dimanfaatkan dengan baik oleh manusia serta makhluk hidup yang lain. Pemanfaatan air untuk berbagai kepentingan harus dilakukan secara bijaksana dengan memperhitungkan kepentingan generasi sekarang maupun generasi yang akan datang dan aspek penghematan dan pelestarian sumber daya air harus ditanamkan pada segenap pengguna air (Effendi, 2003). Dengan meningkatnya industrialisasi, sumber-sumber air yang tersedia untuk konsumsi dan rekreasi telah tercemari oleh limbah industri serta kotoran manusia dan hewan. Akibatnya, air kini menjadi faktor penyebab penyakit yang tidak dapat diabaikan. Air yang tercemar mengandung sejumlah besar bahan yang merupakan sumber nutrisi yang sangat baik bagi partumbuhan dan perkembangbiakan mikrooragnisme. Keberadaan organisme nonpatogen tidak menjadi fokus utama, tetapi kontaminan intestinal yang berasal dari feses (kotoran manusia atau hewan). Patogen tersebut dapat menyebabkan infeksi saluran cerna, seperti disentri basiler, demam tifoid, kolera, dan demam paratifoid (Cappucino& Natalie, 2013).

16 2.2 Air Bersih Air bersih merupakan salah satu kebutuhan pokok manusia yang diperoleh dari berbagai sumber tergantung pada kondisi daerah setempat. Kondisi air bersih pada setiap daerah berbeda-beda tergantung pada kegiatan manusia yang terdapat di daerah tersebut. Air yang sudah terpenuhi syarat fisik, kimia, namun bakteriologi belum terpenuhi. Air bersih ini diperoleh dari sumur gali, sumur bor, air hujan, air dari sumber mata air. Pemanfaatan air bersih secara umum dapat dikatakan penggunaan air bersih sebagai berikut : 1. Akan diolah menjadi air siap minum. 2. Untuk keperluan keluarga (cuci, mandi). 3. Sarana pariwisata (air terjun). 4. Pada industri (sarana pendingin). 5. Sebagai alat pelarut (dalam bidang farmasi / kedokteran). 6. Pelarut obat. 7. Obatan dan infus (apabila air tersebut telah diolah menjadi air steril). 8. Sebagai sarana irigasi. 9. Sebagai sarana peternakan. 10. Sebagai sarana olah raga (kolam renang) (Gabriel.J,2001). 2.3 Sumber Air Bersih Jumlah air di dunia ini relatif tetap dan mengikuti suatu aliran yang dinamakan siklus hidrologi. Sumber-sumber air yang ada pada bumi, dapat berasal dari : Air permukaan yang mengalir di permukaan bumi akan membentuk air permukaan. Air ini umumnya mendapat pengotoran selama pengalirannya.

17 Dengan adanya pengotoran ini menyebabkan kualitas air permukaan menjadi berbeda-beda. Air ini umumnya mendapat pengotoran selama pengalirannya (Waluyo, 2009). Sumber-sumber air bersih : 1. Air Tanah Air tanah secara umum terbagi menjadi: a. Air Tanah Dangkal Air tanah dangkal terjadi akibat proses penyarapan air dari permukaan tanah dam mengalami proses filtrasi secara alamiah. Lumpur akan tertahan, demikian juga dengan sebagai bakteri, sehingga air tanah dangkal terlihat terlarut. b. Air Tanah Dalam Air tanah dalam terdapat pada lapis rapat air yang pertama. Pengambilan air tanah dalam lebih sulit dari pada air tanah dangkal. Air tanah mengandung zat-zat mineral dalam konsentrasi tinggi. 2. Air Hujan Air hujan merupakan sumber utama air bumi. Air hujan dalam keadaan murni sangat bersih, tetapi sering terjadi pengotoran karena industri, debu, dan lain sebagainya. Oleh karena itu, untuk menjadikan air hujan sebagai sumber air minum hendaknya pada waktu menampung air hujan jangan dimulai pada saat hujan mulai turun, karena masih banyak mengandung kotoran (Waluyo, 2009).

18 3. Air Laut Mempunyai sifat asin, karena mengandung garam natrium klorida(nacl). Kadar garam natrium klorida(nacl) dalam air laut 3%. Dengan keadaan ini, maka air laut tak memenuhi syarat untuk air minum (Sutrisno, 1991). 2.4 Kriteria Kualitas Air Air yang digunakan untuk keperluan sehari-hati sebaiknya adalah air yang memenuhi kriteria sebagai air bersih. Air bersih merupakan air yang dapat digunakan untuk keperluan sehari-hari yang kualitasnya memenuhi syarat-syarat kesehatan dan dapat diminum apabila telah dimasak. Sedangkan yang dinamakan air minum adalah air yang melalui proses pengolahan atau tahap proses pengolahan memenuhi syarat kesehatan dan dapat langsung diminum. Persyaratan terbaru seperti yang telah ditetapkan oleh Menteri kesehatan Republik Indonesia melalui Kepmenkes RI Nomor 907/menkes/SK/VII/2002/Tanggal 29 Juli Jenis-jenis air minum seperti yang yang dimaksud adalah meliputi: 1. Air yang didistribusikan melalui pipa untuk keperluan rumah tangga. 2. Air yang didistribusikan melalui tangki air. 3. Air kemasan. 4. Air yang digunakan untuk produksi bahan makanan dan minuman yang disajikan untuk masyarakat. 5. Persyaratan kesehatan untuk air bersih dan air minum meliputi persyaratan bakteriologis, kimiawi, radioaktif, dan fisik.

19 2.5 Efek Pencemaran Air Efek pencemaran air dapat mempengaruhi kualitas lingkungan serta daya dukungnya serta berdampak terhadap berbagai segi kehidupan. Untuk itu maka efek pencemaran air dijelaskan sebagai berikut: 1. Lingkungan Hidup dan Pencemaran Air Pelepasan/pembuangan material yang sudah tercemar ke lingkungan perairan umum untuk merubah ekosistemnya. Bahan pencemar yang menjadi peran utama transformasi hidup, yaitu: a. Bau busuk yang menyengat b. Mikro-organisme c. Kenaikan suhu d. Perubahan ph 2. Pengaruh Pada Kesehatan Manusia Air yang telah tercemar oleh organisme patogen seperti bakteri atau virus dapat secara langsung mempengaruhi kesehatan tubuh manusia. Untuk itu maka sumber air yang digunakan untuk memasok kebutuhan air minum harus dicegah dari pencemaran yang membahayakan kesehatan tubuh manusia (Sunu, 2001). 2.6 IndikatorPencemaran Air Eksploitasi sumber-sumber air tanah secara berlebihan yang tidak mempertimbangkan daya dukung lingkungan serta upaya konservasi lingkungan yang tidak seimbang akan mempengaruhi kualitas air. Disamping itu juga kurangnya kesadaran berbagai pihak baik langsung maupun tidak langsung seperti membuang limbah akan mengakibatkan pencemaran air semakin meningkat (Sunu, 2001).

20 Telah dikemukakan bahwa membicarakan kualitas air pada dasarnya adalah membicarakan karakteristik kualitas air yang berasal dari sumber perairan alamiah, maka uraian tentang kualitas air akan dimulai dengan membahas karakteristik-karakteristik fisik seperti suhu dan bahan terlarut dalam air. Karakteristik lain (kimia) yang terbentuk oleh persenyawaan bahan-bahan organik non-organik yang mempunyai peranan penting sebagai indikator kualitas air (Asdak, 2007). Sesuai dengan ketentuan badan dunia (WHO) maupun badan setempat (Departemen Kesehatan) serta ketentuan atau peraturan lain yang berlaku seperti APHA (American Public Health Association atau Asosiasi Kesehatan Masyarakat AS), layak tidaknya air untuk kehidupan manusia ditentukan berdasarkan persyaratan kualitas secara fisik, kimia, dan biologis. Kualitas secara fisik meliputi kekeruhan, temperatur, warna, bau, dan rasa (Suriawiria, 2005). Air yang digunakan untuk keperluan sehari-hari sebaiknya adalah air yang memenuhi kriteria sebagai air bersih. Air bersih merupakan air yang dapat digunakan untuk keperluan sehari-hari yang kualitasnya memenuhi syarat kesehatan dan dapat diminum. Air yang mengandung kekeruhan tinggi akan mengalami kesulitan jika diproses untuk air bersih. Kesulitannya antara lain dalam proses penyaringan. Jika proses penyaringan dapat dilakukan akan memerlukan biaya yang lebih besar dan mungkin pula mahal (Suriawirria, 2005). Kualitas air secara biologis khususnya secara mikrobiologis ditentukan oleh banyak diameter, yaitu parameter mikroba pencemar, patogen, dan penghasil toksin. Misalnya kehadiran mkiroba, khususnya bakteri pencemar tinja (coli) di

21 dalam air, sangat tidak diharapkan apalagi kalau air tersebut untuk kepentingan kehidupan manusia (rumah tangga) (Suriawiria, 2005). 2.6 Bakteri Bakteri umumnya uniseluler atau sel tunggal, tidak mempunyai khlorofil, berkembang biak dengan pembelahan sel secara transversal atau biner. Hidup bebas secara cosmopolitan dimana mana, khususnya di udara, di tanah, di dalam air, pada bahan makanan, pada tubuh manusia, hewan atau ataupun tanaman. Adapula yang hidup bersimbiosis dengan jasad hidup lainnya., baik hewan ataupun tanaman. Bakteri masuk ke dalam divisi Schizophyta yang terbagi ke dalam beberapa kelas, antara lain Pseudomonadales, Chlamydobacteriales, Eubacteriales, Actinomycetales, Spirochaetales, dan Rickettsiales (Suriawiria, 1996) Bakteri Escherichia coli Escherichia mula mula ditemukan oleh Escherich pada 1885 dari feses seorang bayi.hasil penelitiannya membuktikan bahwa Escherichia juga banyak ditemukan pada saluran pencernaan makanan manusia dewasa dan hewan-hewan berdarah panas. Bakteri ini dapat hidup pada suhu 42 C. Dari sekitar gram feses yang setiap hari dikeluarkan oleh seorang manusia, ternyata di dalamnya mengandung sekitar 3 x 1011 (300 milyar) sel Bakteri coli. Oleh karena itu, kelompok Escherichia lebih dikenal dengan sebutan Kelompok Bakteri coli Fecal (Fecal Coliform Bacterial/FCB). Escherichia coli digunakan sebagai indikator pemeriksaan kualitas bakteriologis secara universal dalam analisis dengan alasan :

22 Escherichia coli secara normal hanya ditemukan di saluran pencernaan manusia (sebagai flora normal) atau hewan mamalia, atau bahan yang telah terkontaminasi dengan tinja manusia atau hewan; jarang sekali ditemukan dalam air dengan kualitas kebersihan yang tinggi. Escherichia coli mudah diperiksa di laboratorium dan sensitivitasnya tinggi jika pemeriksaan dilakukan dengan benar. Bila dalam air tersebut ditemukan Escherichia coli maka air tersebut dianggap berbahaya bagi penggunaan domestik. Ada kemungkinan bakteri enterik patogen yang lain dapat ditemukan bersama-sama dengan Escherichia coli dalam air tersebut (Radji, 2011). Sejak saat itu, bila dalam sumber air ditemukan bakteri coli fecal maka hal ini dapat menjadi indikasi bahwa air tersebut telat mengalami pencemaran oleh feses manusia atau hewan-hewan berdarah panas (Nugroho, 2009). Didalam usus, umumnya bakteri ini tidak menimbulkan penyakit dan dapat membantu fungsi normal usus, dapat membuat sintesa vitamin K. Tetapi pada kondisi tertentu dapat berubah menjadi patogen bila mencapai permukaansel-sel epitel usus halus, saluran kemih, saluran empedu, paru-paru dan selaput otak yang menyebabkan peradangan pada tempat tersebut (Bonang, 1986). Escherichia coli adalah kuman oportunis yang banyak ditemukan di dalam usus besar manusia sebagai flora normal. Bakteri ini bersifat unik karena dapat menyebabkan infeksi primer pada usus, misalnya diare pada anak, seperti juga kemampuannya menimbulkan infeksi pada jaringan tubuh lain di luar usus. Escherichia coli terdiri dari 2 species yaitu: Escherichiacoli dan Escherichia hermanis (Zuhri, 2009).

23 Bakteri Escherichia coli terdiri dari ketiga kelompok, yaitu : a. Kelompok Escherichia, misalnya Escherichia coli, Escherichia freundi, dan Escherichia intermedia. b. Kelompok Aerobacter, misalnya Aerobacter aerogenes, dan Aerobacter cloacae. c. Kelompok Klebsiela, misalnya Klebsiela pneumonia Dari ke tiga kelompok tersebut kelompok Escherichia coli yang merupakan bakteri yang paling tidak dikehendaki kehadirannya di dalam air minum maupun makanan.aerobacter dan Klebsiela merupakan bakteri yang termasuk golongan perantara dan mempunyai sifat seperti kolifeka, tetapi tidak dapat hidup pada suhu diatas 37 o C dan lebih sering dijumpai di dalam tanah dan air daripada di dalam saluran pencernaan manusia. Umumnya genus-genus tersebut tidaklah patogen sehingga sehingga Aerobacter dan Klebsiela disebut kelompok bakteri coli non-fekal (Nugroho, 2006). Escherichia coli menyebabkan diare akut dapat dikelompokkan menjadi 4: 1. Escherichia coli Enteropatogenik Bakteri ini menyebabkan gastroenteritis pada bayi yang baru lahir sehingga terjadi kegagalan pertumbuhan pada bayi 2. Escherichia coli Enteroinvasif Bakteri ini menyebabkan diare akut pada anak dan orang dewasa.selain itu, bakteri ini meyerang epitel usus besar dan meyebabkan sindrom klinis seperti sindrom shingella. 3. Escherichia coli Enterotoksigenik

24 Bakteri ini meyebabkan diare pelancong yang menyerang bayi di Negara berkembang. Bakteri ini menghasilkan enterotoksin yang dapat menyebabkan kematian pada anal-anak dan orang dewasa. 4. Escherichia coli Enterohemorganik Bakteri ini dijumpai pada makanan yang tercemar oleh feses sapi dan menghasilkan toksin yang dapat berkembang menjadi uremik hemofilik dan gagal ginjal akut (Anwar, 2003). 2.7 Metode MPN (Most Probable Number) Metode MPN (Most Probable Number)terdiri dari tiga tahap, yaitu uji pendugaan (presumtive test), uji konfirmasi (confirmed test), dan uji kelengkapan (completed test). Dalam uji tahap pertama, keberadaan coliform masih dalam tingkat probabilitas rendah; masih dalam dugaan. Uji ini mendeteksi sifat fermentatif coliform dalam sampel. Karena beberapa jenis bakteri selain coliform juga memiliki sifat fermentatif, diperlukan uji konfirmasi untuk mengetes kembali kebenaran adanya coliform dengan bantuan medium selektif diferensial. Uji kelengkapan kembali meyakinkan hasil tes uji konfirmasi dengan mendeteksi sifat fermentatif dan pengamatan mikroskop terhadap ciri-ciri coliform: berbentuk batang, Gram negatif, tidak-berspora (Widyastuti, 2011). Output metode MPN adalah nilai MPN. Nilai MPN adalah perkiraan jumlah unit tumbuh (growth unit) atau unit pembentuk-koloni (colony-forming unit) dalam sampel. Namun, pada umumnya, nilai MPN juga diartikan sebagai perkiraan jumlah individu bakteri. Satuan yang digunakan, umumnya per 100 ml atau per gram. (Widyastuti, 2011).

25 BAB III METODE PENGUJIAN 3.1 Tempat dan Waktu Pengujian pemeriksaan bakteri Escherichia coli pada air bersih dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Balai Teknik Kesehatan lingkungan dan Pengendalian Penyakit (BTKLPP) Kelas I Medan di jalan KH.Wahid Hasyim No.15 Medan, dilakukan pada tanggal 01 Februari Alat, Bahan, dan Sampel Alat Alat-alat yang digunakan adalah autoklaf (HL340), alat-alat gelas (pyrex), bola hisap, bunsen, hot plate (Velp), inkubator suhu 35 ºC (Memmert), Jarum Inokulasi, magnetic stirrer (MS-PA), neraca analitik (Ohaus), oven (Memmert) Bahan Bahan yang digunakan adalah akuades, media Brilliant Green Lactose Broth (BGLB), media Lauryl Sulfath Broth (LSB)), media Trypton soy broth (TSB), reagen konvac Sampel Sampel yang digunakan adalah air bersih dengan kode sampe l975/b/ab/21/02/2017, 978/B/AB/21/02/2017, 979/B/AB/21/02/2017 yang diambil di Laboratorium Mikrobiologi BTKL-PP Kelas 1 Medan. 3.3 Pembuatan Media Pembuatan Media LSB (Lauryl Sulfath Broth) Pembuatan media Lauryl Sulfath Broth (LSB) dibagi 2 yaitu:

26 1. Single Streng Ditimbang seksama media Lauryl Sulfath Broth (LSB) sebanyak 35,6 gr. Dimasukkan kedalam beaker glass 1000 ml. dilarutkan ke dalam akuades sebanyak 1 liter. Dimasukkan magnetic stirrer. Digunakan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan kedalam 10 tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-masing 5 tabung berisi 1 ml dan 5 tabung berisi 0,1 ml. Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121ºC selama 15 menit, setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering. 2. Double streng Ditimbang seksama media Lauryl Sulfath Broth (LSB) sebanyak 71,2 gr. Dimasukkan kedalam beker glass 1000 ml, dilarutkan kedalam akuades sebanyak 1 liter. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-masing 5 ml. Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121ºC selama 15 menit, setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering Pembuatan Media Brilliant Green Lactose Broth (BGLB) Ditimbang seksama media Brilliant Green Lactose Broth (BGLB) sebanyak 40 gr. Dimasukkan kedalam beaker glass, dilarutkan kedalam akuades sebanyak 1 liter. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-masing 10 ml. Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121ºC selama 15 menit, setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering.

27 3.3.3 Pembuatan Media Eosin Methylene Blue Agar (EMBA) Timbang 37,5 gram bubuk media EMBA, larutkan dengan akuades sebanyak 1 liter.panaskan sampai mendidih untuk melarutkan media.sterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 C selama 15 menit.tunggu suhu sampai hangat-hangat kuku (45 C-50 C), homogenkan.tuang kedalam cawan petri steril. Dibiarkan media membeku kemudian dibungkus dengan kertas putih dengan cara dibalik.dimasukkan kedalam lemari pendingin. 3.4 Prosedur Tetap BTKL-PP Kelas 1 Medan Tes Perkiraan Disiapkan 15 tabung dengan volume media Lauryl Sulfat Broth 10 ml tabung untuk setiap volume sampel yang akan dicoba : 1,0 ml, 0,1 ml, 0,01 ml, dengan konsentrasi media Lactose Broth : 35,6 mg/l.masukkan sampel yang sudah dihomogenkan secara aseptik ke dalam masing-masing media LSB. Tabung-tabung dalam rak digoyang, supaya sampel air bersih dengan media bercampur rata.inkubasikan pada suhu 35 C selama 24 jam. Reaksi dinyatakan positif bila terbentuk asam dan gas dalam tabung fermentasi. Bila tidak ada reaksi asam atau gas, inkubasikan kembali sampai 48 jam. Bila pada tabung fermentasi tidak terbentuk asam dan gas dalam waktu 48 jam, maka tes perkiraan dinyatakan negatif, bila pada tabung fermentasi terbentuk asam dan gas dalam waktu 48 jam, maka tes perkiraan dinyatakan positif. Kemudian tabung-tabung yang positif dilanjutkan ke tes penegasan.

28 3.4.2 Tes Penegasan Setiap tabung yang positif pada tes perkiraan dikocok, kemudian dipindahkan dengan ose/lop dari tiap tabung yang membentuk gas pada media Lauryl Sulfat Broth ke dalam tabung yang berisi 10 ml media Brilliant Green Lactose Broth (BGLB). Dinkubasikan smua tabung kedalam inkubator dengan suhu 44,5 C selama 24 jam. Adanya gas pada tabung durham dalam media Brilliant Green Lactose Broth (BGLB) memperkuat adanya bakteri coliform Identifikasi Bakteri Escherichia coli ke Media EMBA Buat goresan pada media EMBA dari tabung LSB yang positif, diinkubasi pada temperatur 37 C selama 18 jam sampai dengan 24 jam untuk diidentifikasi. Koloni yang diduga Escherichia coli berdiameter 2 mm sampai dengan 3 mm berwarna hitam atau gelap pada bagian pusat koloni, dengan atau tanpa metalik kehijauan yang mengkilap pada media Eosin Methylene Blue Agar (EMBA) Tes Pelengkap (Complete Test)Uji Indol Inokulasikan koloni dari media Eosin Methylene Blue Agar (EMBA) kemudian teteskan 0,2 ml-0,3 ml reagen kovacs. Bila terbentuk cincin merah pada permukaan media, maka tes dinyatakan positif. Bila tidak terbentuk cincin merah pada permukaan media, maka tes dinyatakan negatif.

29 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 HasilPemeriksaan Bakteri Escherichia coli Dari pemeriksaanbakteri Escherichia coli pada beberapa sampel air bersih yang diambil di laboratorium mikrobiologi BTKL-PP Kelas I Medan didapatkan hasil sebagai berikut: NO KodeSampel 975/B/AB/21/02/ /B/AB/21/02/ /B/AB/21/02/2017 Jumlah tabung yang positif 5 tabung 1 ml 5 tabung 10 ml 5 tabung 0,1 ml HasilUji 430 MPN/100 ml < 1,8 MPN/100 ml <1,8 MPN/100 ml Keterangan TMS TMS TMS Keterangan: Sampel pertama tidak memenuhi syarat Escherichia coli yaitu 430 MPN/100 ml, pada sampel kedua juga tidak memenuhi syarat yaitu <1,8 MPN/100 ml, serta sampel ketiga tidak memenuhi syarat yaitu <1,8 MPN/100 ml menurut syarat mutu air bersih berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia, No 416/Menkes/Per/IX/1990, Tanggal 3 September 1990 adalah 0/100 ml. 4.2 Pembahasan Escherichia coli merupakan salah satu kelompok bakteri yang dihindari kehadirannya dalam air minum dan makanan lainnya. Kehadiran kelompok bakteri ini digunakan sebagai indikator suatu sebagai suatu produk telah tercemar

30 oleh materi fekal, yaitu materi yang berada bersama feses atau kotoran manusia. Hal ini disebabkan oleh habitat alami kelompok bakteri ini adalah di dalam tinja manusia dan hewan berdarah panas lainnya. Pada pemeriksaan bakteri Escherichia coli pada tiga sampel air bersih yang diuji memiliki kode yang berbeda. Hasil ketiga Sampel tersebut adalah : kode 975/B/AB/21/02/2017 dengan hasil yang diperoleh 430 MPN/100 ml kode 978/B/AB/21/02/2017 dengan hasil yang diperoleh <1,8 MPN/100 ml kode 979/B/AB/21/02/2017 dengan hasil yang diperoleh <1,8 MPN/100 ml Dari hasil yang diperoleh bahwa ketiga sampel tersebut tidak memenuhi syarat atau melebihi kadar maksimum menurut PERMENKES. Sedangkan baku mutu air minum dan air bersih berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia, No 416/Menkes/Per/IX/1990, Tanggal 3 September 1990 adalah 0/100 ml. Namun pada sampel ini ditemukannya bakteri Escherichia coli, hal ini mungkin disebabkan oleh tempat pengambilan sampel yang dekat dengan pembuangan tinja ataupun sampel tersebut telah tercemar. Tingginya kadar atau kandungan bakteri Escherichia coli pada air bersih berasal dari pencemaran atau kontaminasi dari kotoran hewan dan manusia. Selama hujan, air membawa limbah dari kotoran hewan dan manusia meresap ke dalam tanah atau mengalir dalam sumber air. Escherichia coli dapat masuk ke dalam anak sungai, danau, atau air tanah. Dampak yang ditimbulkan dari bakteri tersebut adalah diare parah, dan kerum perut.

31 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan Berdasarkan hasil kerja praktek dan pembahasan yang telah dilakukan penulis di BTKLPP Kelas 1 Medan, maka penulis dapat mengambil beberapa kesimpulan sebagai berikut: 1. Jumlah bakteri Escherichia coli yang diuji pada sampel dengan kode sampel berbeda. Hasil ketiga sampel adalah kode 975/B/AB/21/02/2017 yaitu 430 MPN/100 ml, kode 978/B/AB/21/02/2017 yaitu <1,8 MPN/100 ml, kode 979/B/AB/21/02/2017 yaitu <1,8 MPN/100 ml. 2. Pada ketiga sampel yang diuji diperoleh kadar bakteri Escherichia coli melewati ambang batas sehingga ketiga sampel tidak memenuhi syarat mutu air bersih berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia, No 416/Menkes/Per/IX/1990, Tanggal 3 September Saran 1. Dalam memenuhi kebutuhannya, masyarakat sebaiknya harus lebih teliti dalam memilih air yang berkualitas untuk dikonsumsi supaya terhindar dari serangan penyakit yang mengganggu kesehatan. 2. Bagi peneliti selanjutnya diharapkan agar dapat melakukan pengujian bakteri-bakteri dengan metode yang yang lain seperti ALT.

32 DAFTAR PUSTAKA Asdak, C Hidrologi dan Pengelolaan Daerah Aliran Sunga. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. Hal: Cappuccino, J.G., dan Natalie, S. (2013). Manual Laborartorium Mikrobiologi Edisi 8. Jakarta: Buku Kedokteran EGC. Hal Bonang. G., dan Koeswardono, E. S. (1986). Mikrobiologi Kedokteran untuk Laboratorium dan Klinik. Jakarta: PT. Gramedia. Halaman 8-9. Brooks, J. (2001). Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta: Salemba Medika. Hal. 34. Effendi, H. (2003). Telaah Kualitas Air Bagi Pengelolaan Sumber Daya dan Lingkungan Perairan. Yogyakarta: Kanisius. Hal Gabriel, J.F. (2001). Fisika Lingkungan. Jakarta: Hipokrates. Hal Kusuma, Sri Agung Fitri Escherichia coli. Universitas Padjajaran Fakultas Farmasi Bandung. Nugroho, A.(2009). Bioindikator Kualitas Air. Jakarta: Universitas Trisakti. Halaman Sunu, P. (2001). Melindungi Lingkungan Dengan Menerapkan Iso Jakarta: PT. Gramedia Widiasarana Indonesia. Hal Suriawiria, U. (1996). Mikrobiologi Air. Bandung: Alumni. Hal. 5-6, 24-25, 79. Suriawiria, U Mikrobiologi Dasar. papas sinar sinanti, Jakarta. Hal: 6-9. Sutrisno, C.T. (2004). Teknologi Penyediaan Air Bersih. Edisi Baru. Jakarta: Rineka Cipta Halaman 19, 21, 23. Waluyo, Lud. (2009). Mikrobiologi Lingkungan. Universitas Muhammadiyah Malang Press. Malang Hal: , Zuhri, S. (2009). Pemeriksaan Mikrobiologi Air Bersih di Kecamatan Jebres Kota Surakarta. Skripsi. Surakarta: Fakultas Farmasi Muhammadiyah Surakarta. Hal:77-82.

33 Lampiran 1. Gambar Alat dan Bahan Inkubator suhu 35 ºC Inkubator suhu 35 ºC(Memmert) Bunsen Jarum Inokulasi

34 Alat-alat gelas(pyrex) Bola hisap Neraca analitik Hot plate(velp) Oven(Memmert)

35 Lampiran 1. (lanjutan) Magnetic stirrer(ms-pa) Media Lauryl Sulfath Broth (single dan double strength) Media Brilliant Green Lactose Broth(BGLB)

36

37

38

39