LAMPIRAN. Tabel 1: Hasil Analisis Bakteri Koliform dengan Metode MPN. Sampel Kode sampel Tes perkiraan

Transkripsi

1 LAMPIRAN Lampiran 1 Tabel 1: Hasil Analisis Bakteri Koliform dengan Metode MPN Sampel Kode sampel Tes perkiraan Tes penegasan MPN Air Bersih 290/B/AB/02/

2 Lampiran 2 Flowsheet Pembuatan Media Lactose Broth Pembuatan Media Lactose Broth Double D bl Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 52 gr. Dimasukkan ke dalam beker gelas. Dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 5 ml dalam 5 tabung. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121 C selama 15 menit. Setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering. Hasil

3 Pembuatan media lactose broth single Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 13 gr. Dimasukkan ke dalam beker gelas. Dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 10 ml dalam 10 tabung. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121 C selama 15 menit. Setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering. Hasil

4 Media Brilliant Green Lactose Broth Ditimbang seksama media Brilliant Green Lactose Broth sebanyak 40 gr. Dimasukkan ke dalam beker gelas. Dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 10 ml. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121 C selama 15 menit. Setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering. Hasil

5 Uji Perkiraan Pada tes perkiraan digunakan media Lactose Broth. Tes perkiraan dilakukan dengan 2 cara, yaitu single dan double. Single : 13 gram Lactose Broth dalam 1000 ml aquadest. Caranya : Siapkan 10 buah tabung reaksi yang telah diisi dengan tabung durham dengan posisi terbalik. 10 tabung diisi dengan masing-masing 10 ml media. Double : 52 gram Lactose Broth dalam 1000 ml aquadest. Caranya : Siapkan 5 buah tabung reaksi yang telah diisi dengan tabung durham dengan posisi terbalik. 5 tabung tersebut diisi dengan 10 ml media. Hasil

6 Sampel Masukkan sampel yang sudah dihomogenkan secara aseptik ke dalam masing-masing tabung media LB. Tabung-tabung dalam rak digoyang, supaya sampel air dengan media bercampur rata. Inkubasikan pada inkubator pada suhu 35 C selama 24 jam. Reaksi dinyatakan positif bila terbentuk asam dan gas dalam tabung fermentasi. Bila tidak ada reaksi asam atau gas, inkubasikan kembali sampai 48 jam. Bila pada tabung fermentasi tidak terbentuk asam dan gas dalam waktu 48 jam, maka tes perkiraan dinyatakan negatif. Bila pada tabung fermentasi terbentuk asam dan gas dalam waktu 48 jam, maka tes perkiraan dinyatakan positif. kemudian tabung-tabung yang positif dilanjutkan ke tes penegasan. Hasil

7 Uji Penegasan Setiap tabung yang positif pada tes perkiraan dikocok. kemudian dipindahkan dengan ose/lop ke dalam media Brilliant Green Lactose Broth (BGLB). Inkubasikan pada inkubator pada suhu 35 C selama 24 jam. Reaksi dinyatakan positif bila terbentuk gas dalam tabung fermentasi. Bila tidak ada reaksi gas, inkubasikan kembali sampai 48 jam. Bila pada tabung fermentasi tidak terbentuk gas dalam waktu 48 jam, maka tes penegasan dinyatakan negatif. Bila pada tabung fermentasi terbentuk gas dalam waktu 48 jam, maka tes penegasan dinyatakan positif. Hitung MPN total koliform dengan menggunakan tabel MPN dari jumlah tabung BGLB yang positif, dibaca pada tabel MPN. Hasil

8 Total Koliform Tabung yang dinyatakan positif pada uji perkiraan, diinokulasikan kedalam tabung yang berisi media Brilla. Masing-masing diisi satu sampai dua ose yang pengerjaanya dilakukan secara aseptis. Diinkubasi pada suhu 35 C selama 2x24 jam. Dilakukan pengamatan dengan melihat tabung yang menunjukkan adanya terbentuk gas dalam tabung durham yang menyatakan positif. Pembacaan hasil dilakukan dengan menghitung jumlah tabung yang positif. Angka yang diperoleh dicocokkan dengan tabel MPN. Hasil

9 Lampiran 3 Tabel 2. Perkiraan Terdekat Jumlah (MPN) Koliform Untuk Kombinasi Porsi: 5 x 10 ml; 5 x 1 ml; 5 x 0,1 ml dengan 95% batas kepercayaan Jumlah tabung yang positif MPN / 95% batas kepercayaan 5 tabung 5 tabung 5 tabung 100 ml Lebih rendah Lebih tinggi 10 ml 1 ml 0,1 ml < 1,8-6, ,8 0,090 6, ,8 0,090 6, ,6 0, ,7 0, ,5 1, ,6 1, ,0 0, ,0 0, ,0 1, ,0 0, ,1 1, ,1 3, ,1 1, ,2 3, ,3 3, , , ,5 0, ,8 1, ,1 3, ,8 1, ,2 3, , ,3 3, , , , , , ,8 2, , , , , ,0 36

10 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,

11 >

12 Lampiran 4 Tabel 3. BAKU MUTU MIKROBIOLOGI AIR NOMOR : 492/MENKES/PER/IV/2010 TANGGAL : 19 APRIL 2010 NO JENIS SATUAN PARAMETER 1 E. Coli Jumlah per ml Sampel KADAR MAX YG DIPERBOLEHKAN 2 Total Bakteri Jumlah per 0 Koliform 100 ml Sampel Lampiran 5 Tabel 4. Hasil Pengamatan Bakteri Koliform Jenis Nomor Sampel Hasil Test Koliform MPN Sampel Perkiraan Air Minum 289/B/AM/02/ ,0 Air Bersih 290/B/AB/02/ Air Badan 291/B/ABA/02/ Air Air 292/B/AL/02/ Air Minum 293/B/AM/02/ >1600 Air 294/B/AL/02/ Air 295/B/AL/02/ Air 296/B/AL/02/ Air 297/B/AL/02/ >1600 Air Bersih 298/B/AB/02/ ,8 Air Minum 299/B/AM/02/ Air Minum 300/B/AM/02/ ,8 Air Minum 301/B/AM/02/ <1,8 Air 302/B/AL/02/ Air 303/B/AL/02/ ,8

13 Air 314/B/AL/02/ >1600 Air 315/B/AL/02/ Air Bersih 316/B/AB/02/ >1600 Air Badan 324/B/ABA/02/ >1600 Air Air Badan Air 323/B/ABA/02/ >1600 Lampiran 6 Gambar Alat dan Bahan Gambar 1. Alat Timbangan Analitik Gambar 2. Hot Plate Gambar 3. Inkubator Suhu 35 C Gambar 4. Oven

14 Gambar 5. Media BGLB Gambar 6. Media Lactose Broth