LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA KLINIK PEMERIKSAAN UREA

Transkripsi

1 LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA KLINIK PEMERIKSAAN UREA OLEH : KELOMPOK 1 GANJIL NI KADEK PRIDAYANTI (P ) PUTU NIKHITA FEBRYANTI (P ) IGA. AYU SATWIKHA DEWI (P ) KOMANG NINA SHINTARINI (P ) NI LUH CANDRA WATI (P ) JURUSAN ANALIS KESEHATAN POLITEKNIK KESEHATAN DENPASAR TAHUN 2016

2 PEMERIKSAAN UREA I. TUJUAN a. Tujuan Umum Untuk dapat mengetahui dan menjelaskan cara pemeriksaan urea. b. Tujuan Khusus 1. Untuk dapat melakukan cara pemeriksaan urea pada serum atau plasma pasien. 2. Untuk dapat menentukan kadar urea pasien dan menginterpretasikan hasilnya. II. METODE Metode yang digunakan dalam praktikum ini adalah kinetic enzimatik talke and sehubert III. PRINSIP Urea + 2H 2 O Urase 2NH4+ + CO32- NH Oxoglutarate + NADH GLDH L-Glutamete + NAD+ + H2O Rentang nilai absorbansi berubah pada panjang gelombang 340 nm, panjang gelombang ini sesuai untuk konsentrasi urea IV. DASAR TEORI Ureum adalah suatu molekul kecil yang mudah mendifusi ke dalam cairan ekstrasel, tetapi pada akhirnya dipekatkan dalm urin dan diekskresikan. Jika keseimbangan nitrogen dalam keadaan mantap ekskresi ureum kira-kira 25 mg per hari Ureum juga merupakan produk akhir dari metabolism nitrogen yang penting pada manusia, yang disintesis dari ammonia, karbon dioksida dan nitrogen amida aspartat (Riswanto.2013). Definisi lain dari ureum adalah hasil akhir metabolisme protein. Berasal dari asam amino yang telah dipindah amonianya di dalam hati dan mencapai ginjal, dan diekskresikan rata-rata 30 gram sehari. Kadar ureum darah yang normal adalah 20 mg ~ 40 mg setiap 100 ccm darah, tetapi hal ini tergantung dari jumlah normal protein yang di makan dan fungsi hati dalam pembentukan ureum Rumus bangun ureum:

3 Rumus molekul ureum adalah, dengan berat molekul 60 (Anonim. 2010) Pemeriksaan ureum dipakai sebagai parameter tes fungsi faal ginjal. Ureum merupakan senyawa kimia yang menandakan fungsi ginjal masih normal. Oleh karena itu, tes ureum selalu digunakan untuk melihat fungsi ginjal kepada pasien yang diduga mengalami gangguan pada organ ginjal (Gandasoebrata, R. 2006) Ginjal merupakan salah satu organ yang penting bagi makhluk hidup. Ginjal memiliki berbagai fungsi seperti pengaturan keseimbangan air dan elektrolit, pengaturan konsentrasi osmolalitas cairan tubuh dan konsentrasi elektrolit, pengaturan keseimbangan asam-basa, ekskresi sisa metabolisme dan bahan kimia asing; pengatur tekanan arteri, sekresi hormon, dan glukoneogenesis. Jika ginjal dibagi dua dari atas ke bawah, akan terlihat dua bagian utama yaitu korteks di bagian luar dan medulla di bagian dalam. Unit terkecil dari ginjal adalah nefron. Ginjal tidak dapat membentuk nefron baru sehingga apabila terjadi trauma pada ginjal, penyakit ginjal, atau terjadi penuaan normal, akan terjadi penurunan jumlah nefron secara bertahap Sebagian besar penyakit ginjal menyerang nefron, menyebabkan mereka kehilangan kapasitas penyaringan mereka. Kerusakan pada nefron bisa terjadi dengan cepat, sering sebagai akibat dari cedera atau keracunan. Tetapi penyakit ginjal yang paling merusak nefron adalah yang perlahan-lahan dan diam-diam. Hanya setelah tahunan atau bahkan puluhan tahun akan terlihat jelas kerusakannya. Sebagian besar penyakit ginjal menyerang kedua ginjal secara bersamaan (NIDDK, 2009). Dua penyebab paling umum dari penyakit ginjal adalah diabetes dan tekanan darah tinggi. Orang dengan riwayat keluarga apapun masalah ginjal juga di risiko untuk penyakit ginjal (NIDDK, 2009).Banyak faktor yang mempengaruhi kecepatan gagal ginjal yang tidak sepenuhnya dipahami. Para peneliti masih mempelajari bagaimana protein dalam diet dan tingkat kolesterol dalam darah mempengaruhi fungsi ginjal (NIDDK, 2009). Karena seseorang dapat memiliki penyakit ginjal tanpa gejala, dokter mungkin pertama mendeteksi kondisi melalui darah rutin dan tes urin. National Kidney Foundation

4 merekomendasikan tiga tes sederhana untuk skrining penyakit ginjal: tekanan darah pengukuran, cek spot untuk protein atau albumin dalam urin, dan perhitungan laju filtrasi glomerulus (GFR) berdasarkan pengukuran kreatinin serum. Mengukur urea nitrogen dalam darah memberikan informasi tambahan (NIDDK, 2009). Metabolisme ureum terjadi dengan rangkaian sebagai berikut. Gugusan amino dilepas dari asam amino bila asam amino ini didaur ulang menjadi sebagian dari protein atau dirombak dan dikeluarkan dari tubuh, aminotransferase yang ada di berbagai jaringan mengkatalisis pertukaran gugusan amino antara senyawa-senyawa yang ikut serta dalam reaksi-reaksi sintetsis. Deaminasi oksidatifmemisahkan gugusan amino dari molekul aslinya dan gugusan amino yang dilepaskan itu diubah menjadi ammonia. Amonia diangkut ke hati dan diubah menjadi reaksi-reaksi bersambung. Hampir seluruh urea dibentuk di dalm hati, dari katabolisme asam-asam amino dan merupakan produk ekskresi metabolisme protein yang utama. Konsetrasi urea dalam plasma darah terutama menggambarkan keseimbangan antara pembentukkan urea dan katabolisme protein serta ekskresi urea oleh ginjal : sejumlah urea dimetabolisme lebih lanjut dan sejumlah kecil hilang dalam keringat dan feses Pada orang sehat yang makanannya banyak mengandung protein, ureum biasanya berada di atas rentang normal. Kadar rendah biasanya tidak dianggap abnormal karena mencerminkan rendahnya protein dalam makanan atau ekspansi volume plasma. Namun, bila kadarnya sangat rendah bisa mengindikasikan penyakit hati berat. Kadar urea bertambah dengan bertambahnya usia, juga walaupun tanpa penyakit ginjal. Pada orang normal ureum diekskresikan melalui urine. Konsentrasi nitrogen / urea dalam darah bukan untuk mengukur fungsi glomerulus yang ideal, karena peningkatannya dalam darah dipengaruhi oleh banyak faktor diluar ginjal 1. Urea Plasma yang tinggi (Azotemia) Urea plasma yang tinggi merupakan salah satu gambaran abnormal yang utama dan penyebabnya diklasifikasikan sebagai berikut : a) Peningkatan katabolisme protein jaringan disertai dengan keseimbangan nitrogen yang negative. Misalnya terjadi demam, penyakit yang menyebabkan atrofi, tirotoksikosis, koma diasbetika atau setelah trauma ataupun operasi besar. Karena sering kasus peningkatan katabolisme protein kecil, dan tidak ada kerusakan ginjal primer atau sekunder, maka ekskresi ke urin akan membuang kelebihan urea dan tidak ada keanikan bermakna dalam urea plasma.

5 b) Pemecahan protein darah yang berlebihan Pada leukemia, pelepasan protein leukosit menyokong urea plasma yang tinggi. c) Pengurangan ekskresi urea Merupakan penyebab utama dan terpenting bias prerenal, renal atau postrenal. Penurunan tekanan darah perifer adatau bendungan vena atau volume plasma yang rendah dan hemokonsentrasi, mengurangi aliran plasma ginjal. Filtrasi glomelurus untuk urea turun dan terdapat peningkatan urea plasma, pada kasus yang ringan, bila tidak ada kerusakan struktur ginjal yang permanen, maka urea plasma akan kemabli normal bila keadaan prerenal dipulihkan ke yang normal. d) Penyakit ginjal yang disertai dengan penurunan laju filtrasi glomelururs yang menyebabkan urea plasma menjadi tinggi. e) Obstruksi saluran keluar urin menyebabkan urea plasma menjadi tinggi (Riswanto. 2010). Peningkatan kadar urea disebut uremia. Azotemia mengacu pada peningkatan semua senyawa nitrogen berberat molekul rendah (urea, kreatinin, asam urat) pada gagal ginjal. Penyebab uremia dibagi menjadi tiga, yaitu penyebab prarenal, renal, dan pascarenal. Uremia prarenalterjadi karena gagalnya mekanisme yang bekerja sebelum filtrasi oleh glomerulus. Mekanisme tersebut meliputi : a) Penurunan aliran darah ke ginjal seperti pada syok, kehilangan darah, dan dehidrasi; b) Peningkatan katabolisme protein seperti pada perdarahan gastrointestinal disertai pencernaan hemoglobin dan penyerapannya sebagai protein dalam makanan, perdarahan ke dalam jaringan lunak atau rongga tubuh, hemolisis, leukemia (pelepasan protein leukosit), cedera fisik berat, luka bakar, demam,. Uremia renal terjadi akibat gagal ginjal (penyebab tersering) yang menyebabkan gangguan ekskresi urea. Gagal ginjal akut dapat disebabkan oleh glomerulonefritis, hipertensi maligna, obat atau logam nefrotoksik, nekrosis korteks ginjal. Gagal ginjal kronis disebabkan oleh glomerulonefritis, pielonefritis, diabetes mellitus, arteriosklerosis, amiloidosis, penyakit tubulus ginjal, penyakit kolagen-vaskular. Uremia pascarenal terjadi akibat obstruksi saluran kemih di bagian bawah ureter, kandung kemih, atau urethra yang menghambat ekskresi urin. Obstruksi ureter bisa oleh batu, tumor, peradangan, atau kesalahan pembedahan. Obstruksi leher kandung kemih atau uretra bisa oleh prostat, batu, tumor, atau peradangan. Urea yang tertahan di urin dapat berdifusi masuk kembali ke dalam darah.

6 Beberapa jenis obat dapat mempengaruhi peningkatan urea, seperti : obat nefrotoksik; diuretic (hidroklorotiazid, asam etakrinat, furosemid, triamteren); antibiotic (basitrasin, sefaloridin (dosis besar), gentamisin, kanamisin, kloramfenikol, metisilin, neomisin, vankomisin); obat antihipertensi (metildopa, guanetidin); sulfonamide; propanolol, morfin; litium karbonat; salisilat. Sedangkan obat yang dapat menurunkan kadar urea misalnya fenotiazin (Riswanto. 2010). 2. Urea plasma yang rendah (Uremia) Uremia kadang-kadang terlihat pada kehamilan, bias karena peningkatan filtrasi glomelurus, diversi nitrogen ke foetus atau karena retensi air. Pada nekrosis hepatic akuta, sering urea plasma rendah karena asam-asam amino tak dimetabolisme lebih lanjut. Pada sirosis hepatis, urea plasma yang rendah sebagian disebabkan oleh kecepatan anabolisme protein yang tinggi, bias timbul selama pengobatan dengan androgen yang intensif, juga pada malnutrisi protein jangka panjang. Ureum digunakan untuk menentukan tingkat keparahan status azotemia/uremia pasien, menentukan hemodialisis (BUN serum. 40 mmol/l atau lebih dari 120 mg). Hemodialisis tidak adekuat apabila rasio reduksi ureum,65%. Reduksi ureum yang tidak adekuat tersebut meningkatkan angka mortalitas pasien hemodialisa. Penurunan BUN (,50 ml/dl predialisis tidak menunjukkan dialysis yang baik, tetapi justru adanya malnutrisi dan penurunan massa otot karena dialysis inadekuat (Nyoman, 2008) Penurunan kadar urea sering dijumpai pada penyakit hati yang berat. Pada nekrosis hepatik akut, sering urea rendah asam-asam amino tidak dapat dimetabolisme lebih lanjut. Pada sirosis hepatis, terjadipengurangan sintesis dan sebagian karena retensi air oleh sekresi hormone antidiuretik yang tidak semestinya. Pada karsinoma payudara yang sedang dalam pengobatan dengan androgen yang intensif, kadar urea rendah karena kecepatan anabolisme protein yang tinggi. Pada akhir kehamilan, kadar urea kadang-kadang terlihat menurun, ini bisa karena peningkatan filtrasi glomerulus, diversi nitrogen ke fetus, atau karena retensi air. Penurunan kadar urea juga dijumpai pada malnutrisi protein jangka panjang. Penggantian kehilangan darah jangka panjang, dekstran, glukosa, atu saline intravena, bisa menurunkan kadar urea akibat pengenceran.

7 Untuk menilai fungsi ginjal, permintaan pemeriksaan BUN hampir selalu disatukan dengan kreatinin (dengan darah yang sama). Rasio BUN terhadap kreatinin merupakan suatu indeks yang baik untuk membedakan antara berbagai kemungkinan penyebab uremia. Rasio BUN/kreatinin biasanya berada pada rentang Peningkatan kadar BUN dengan kreatinin yang normal mengindikasikan bahwa penyebab uremia adalah nonrenal (prarenal). Peningkatan BUN lebih pesat daripada kreatinin menunjukkan penurunan fungsi ginjal. Pada dialysis atau transplantasi ginjal yang berhasil, urea turun lebih cepat daripada kreatinin. Pada gangguan ginjal jangka panjang yang paranh, kadar yrea terus meningkat, sedangkan kadar kreatinin cenderung mendatar, mungkin akibat akskresi melalui saluran cerna. Kadar ureum dalam serum/ plasma mencerminkan keseimbangan antara produksi dan ekskresi. Metode penetapan adalah dengan mengukur nitrogen, di Amerika Serikat hasil penetapan disebut sebagai nitrogen ureum dalam darah (Blood Urea Nitrogen, BUN). Dalam serum normal konsentrasi BUN adalah 8-25 mg/dl, dan kadar ureum dalam serum normal adalah mg/dl. Nitrogen menyusun 28/60 bagian dari berat ureum, karena itu konsentrasi ureum dapat dihitung dari BUN dengan menggunakan factor perkalian 2,14 (Widman, 1995). V. ALAT DAN BAHAN a. Alat 1. Tabung serologi 2. Spektrofotometer 3. Mikropipet 4. Yellow tip 5. Blue tip b. Bahan 1. Reagen a) Reagen 1 Tris Buffer (ph 8) 100 mmol/l Urase 10 ku/l GLDH 2,5 ku/l Oxaglutarate 5,49 mmol/l b) Bahan Reagen 2 NADH 2. Urea calibrator 3. Aquadest

8 4. Sampel serum atau plasma VI. CARA KERJA 1. Alat dan bahan disiapkan pada meja praktikum. 2. Dua buah tabung disiapkan dan diberi label Standar, dan Sampel. 3. Reagen urea (Erba) dipipet sebanyak 500µl dan dimasukkan ke dalam masing-masing tabung. 4. Masing-masing tabung ditambahkan dengan : Tabung I (standar) : ditambahkan 5 µl larutan standar urea. Tabung II (sampel) : ditambahkan 5 µl sampel serum pasien. 5. Masing-masing tabung dihomogenkan dan diinkubasi pada suhu kamar selama 10 menit. 6. Kadar urea pada sampel dibaca dengan alat spektrofotometer dengan panjang gelombang 340 nm. * Pembacaan kadar urea pada sampel menggunakan spektrofotometer : a) Sebelum digunakan alat diwarming up selama ± 15 menit setelah ditekan tombol power ON, kemudian ditunggu sampai semua indikator menunjukkan tanda centang. b) Dilakukan pembersihan alat menggunakan aquadest. Aquadest dimasukkan ke dalam pipa kapiler lalu ditekan tombol wash/fn sehingga proses pembersihan akan berjalan. Tekan kembali tombol wash/fn untuk menghentikan proses pembersihan. c) Dipilih menu Run Test pada alat dengan menekan tombol 1. Tekan page 1 (jika menggunakan reagen Erba) untuk mencari parameter pemeriksaan yang diinginkan. Untuk pengukuran kadar urea dipilih UREA lalu tekan enter. d) Apabila waktu inkubasi telah selesai, maka proses pemeriksaan dimulai. Larutan blanko dimasukkan ke dalam pipa kapiler dengan posisi tegak lurus lalu tekan tombol di bawah pipa kapiler untuk menghisap cairan larutan blanko ke dalam alat spektrofotometer sehingga diperoleh nilai absorbansinya. Dicatat nilai absorbansi yang muncul pada layar dan dibersihkan pipa kapiler dengan tisu sebelum kembali digunakan. e) Lakukan langkan seperti nomor 4 untuk larutan standar dan sampel. Dicatat nilai absorbansi dan konsentrasi yang dihasilkan oleh larutan standar dan sampel pada panjang gelombang 340 nm. f) Apabila pengukuran sudah selesai, ditekan tombol Prev untuk kembali ke menu awal. Alat dan bahan yang telah selesai digunakan lalu dibersikan dan disimpan pada tempat semula. VII. INTERPRETASI HASIL Serum atau plasma : mg/dl

9 VIII. HASIL PENGAMATAN a. Data Serum Nama Jenis Kelamin Kondisi Sampel Hasil Pemeriksaan Absorbansi Standar : -0,045 : Fatimah : Perempuan : Kuning jernih Absorbansi Sampel : -0,210 Konsentrasi Sampel : 199,7 mg/dl Gambar Pengamatan SAMPEL SERUM STANDAR CHOLESTEROL ERBA REAGEN CHOLESTEROL ERBA Pemipetan Reagen/Standar/Serum secara vertikal Proses Pengukuran Dengan Spektrofotometer Reaksi Warna Pada Standar, dan Serum Hasil Pengukuran Standart Hasil Pengukuran Sampel

10 IX. PEMBAHASAN X. SIMPULAN

11 DAFTAR PUSTAKA Anonim Ureum. [online] tersedia : [diakses: 8 Oktober 2016] Gandasoebrata, R Penuntun Laboratorium Klinik, Cetakan Keduabelas, Jakarta : Dian Rakyat. NIDDK The Kidneys and How They Work. [online] tersedia: [diakses: 8 Oktober 2016] Nyoman, Suci W Kadar Ureum dalam Penderita Gagal Ginjal yang Menjalani Terapi Hemodialisis. [online] tersedia: [diakses: 8 Oktober 2016] Riswanto [online] tersedia : [diakses: 8 Oktober 2016]