Oleh: Ary Andini. Lokasi: Desa Kedung Banteng, Tanggulangin, Sidoarjo

Transkripsi

1 69 Lampiran 1 Identifikasi Taksonomi Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Oleh: Lokasi: Desa Kedung Banteng, Tanggulangin, Sidoarjo Identifikasi Lele Sangkuriang dilakukan berdasarkan struktur morfologinya dengan hasil sebagai berikut. Berat Umur : 300 gr : 3 bulan Panjang standar: 26 cm Lebar badan Lebar ekor : 4 cm : 16,7 cm Bentuk tubuh ikan Lele Sangkuriang memanjang, licin, berlendir, dan tidak bersisik. Bentuk kepala menggepeng (depress) dan mulutnya relatif besar. Terdapat 4 pasang sungut dan terdapat 3 sirip tunggal di punggung, ekor dan anus. Selain itu, terdapat

2 70 dua pasang sirip di dada dan perut. Pada sirip dada terdapat patil dan bagian atas ruangan rongga terdapat alat pernapasan tambahan seperti batang pohon. Setelah dilakukan identifikasi, diketahui bahwa ikan tersebut adalah ikan Lele Sangkuriang dengan klasifikasi taksonomi sebagai berikut. Filum: Chordata Klas: Pisces Ordo: Siluriformis Famili: Claridae Genus: Clarias Speses: Clarias gariepinus var

3 71 Lampiran 2 Dokumentasi Kegiatan Ekstraksi Kolagen dari Kulit Ikan Lele Sangkuriang Proses Pembuatan Sampel Awal Kulit Ikan Lele Sangkruriang (Clarias gariepinus var var) Ikan Lele Sangkuriang dibeli dari petani tambak ikan, yaitu Bpk Moch. Kohar, S.Sos di desa Kedung Banteng, Tanggulangin, Sidoarjo. Persiapan alat dan bahan: 1. Beaker glass 2. Aluminium Foil 3. Toples 4. Baskom 5. Penyaring 6. Plastik Klip 7. Gelas Ukur 8. Pengaduk 9. Pipet Tetes 10. NaOH 11. Kulit Ikan Lele Sangkuriang 12. Es Batu Membersihkan kulit Ikan Lele Sangkuriang dari sisa-sisa daging yang menempel

4 72 Memotong Kulit Ikan Lele Sangkuriang menjadi 2-5 mm Mencuci Potongan kulit ikan Lele Sangkuriang hingga bersih dengan air dingin Membuat 8 Volume larutan NaOH 0,1 M sebanyak 8 kali Dilakukan Perendaman dengan NaOH sebanyak 8 kali

5 73 Proses Penirisan kulit Ikan Lele Sangkuriang setelah di rendam dengan NaOH Proses pencucian kulit ikan Lele Sangkuriang dengan akuades dingin hingga mencapai ph dasar akuades Sampel kulit ikan Lele Sangkuriang untuk isoolasi kolagen dimasukkan ke dalam plastik Dimasukkan ke dalam Freezer bersuhu - 20 o C Kulit ikan Lele Sangkuriang di lyopilisasi dalam freeze dryer sampai kering seluruhnya selama jam.

6 74 Proses Isolasi Kolagen Kulit Lele Sangkruriang (Clarias gariepinus var) Melarutkan lemak kulit Ikan Lele Sangkuriang dalam Heksan selama 2 hari lalu dilakukan pencucian dengan akuades hingga mencapai ph dasar akuades. Merendam kulit ikan Lele Sangkuriang dalam 0,5 M asam asetat selama 24 jam. Mengangkat dan meniriskan kulit ikan Lele Sangkuriang dari larutan asam asetat 0,5 M untuk diambil cairan kentalnya (hasil ekstrak dalam asam asetat 0,5 M). Hasil ekstrak dari asam asetat 0,5 M yang berupa cairan kental.

7 75 Lampiran 3 Dokumentasi Kegiatan Pembuatan Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit Proses pembuatan komposit kolagen-hidroksiapatit Kolagen dilarutkan ke dalam asam asetat 0,5M, kemudian ditambahkan dengan Na 2 HPO 4,2H 2 0 0,02 M, dan larutan HA dikontrol ph-nya hingga netral dengan NaOH, Mencampurkan kolagen dan hidroksiapatit selama 1,5 jam, lalu diinkubasi pada suhu ruang selama 24 jam Pencucian dengan akuades dan disentrifugasi sehinga terbentuk endapan, lalu dimasukkan ke dalam cetakan, lalu dimasukkan ke dalam freezer Freeze drying Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit

8 76 Lampiran 4 Preparasi Uji FTIR Media Preparasi uji FTIR Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit dan Hidroksiapatit yang Dipreparasi menjadi Pellet untuk Uji FTIR

9 77 Lampiran 5 Dokumentasi Uji Densitas dan Porositas Pengukuran Volume Scaffold dari Selisih Volume Awal (V 1 ) dan Volume Akhir (V 2 ) Air Saat Scaffold Dicelupkan Penimbangan Berat Kering (W k ) dan Berat Basah Scaffold (W b )

10 78 Lampiran 6 Data Hasil Uji densitas dan porositas No Kolagen (%) N Wk Wb Vawal Vakhir Vbenda D (gr) (gr) (ml) (ml) (ml) (gr/cm 3 ) P (%) % % % Rata-rata % % % % Rata-rata % % % % Rata-rata % % % % Rata-rata % % % % Rata-rata % % % % Rata-rata %

11 79 Lampiran 7 Dokumentasi Uji MTT Proses Inkubasi Sel BHK-21 pada suhu 37 o C Media Sel Sel Fibroblas BHK-21 Sel Fibroblas Baby Hamster Kidney (BHK-21)

12 80 Proses Pemasukan MTT pada tiap well-plate Proses Penghitungan Sel Fibroblast BHK yang Hidup dengan Menggunakan Elisa Reader Sebelum Pemberian Pereaksi MTT Setelah Pemberian MTT Perbandingan antara Well-plate Sampel Sebelum Diberi Pereaksi MTT dengan Setelah Diberi Pereaksi MTT

13 81 Lampiran 8 Hasil Uji MTT Kontrol Media Kontrol Sel Hidroksiapatit (HA) Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit