UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL 70% DAUN BAMBU TALI (Gigantochloa apus) SEBAGAI ANTHELMINTIK PADA CACING Ascaris suum

Transkripsi

1 UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL 70% DAUN BAMBU TALI (Gigantochloa apus) SEBAGAI ANTHELMINTIK PADA CACING Ascaris suum EFFECTIVENESS TEST ETHANOL EXTRACT 70% BAMBOO LEAVES ROPE (Gigantochloa apus) AS ANTHELMINTIC AT Ascaris suum Abdul Aziz Setiawan 1*, Achdissam Noor Habibi 2 1,2 Sekolah Tinggi Farmasi Muhammadiyah Tangerang * Corresponding Author alaziz_setiawan@yahoo.co.id ABSTRAK Infeksi cacing memerlukan tanah sebagai media perkembangan telur menjadi bentuk infektif. Mebendazol digunakan sebagai drug of choice infeksi ini namun, antihelmintik sintetis ini menimbulkan efek samping yang mengganggu. Bambu merupakan obat herbal, ekstrak akar tumbuhan bambu berkhasiat sebagai anthelmintik. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui apakah pada bagian daun bambu memiliki efektivitas seperti akarnya sebagai anthelmintik. Penelitian ini dilaksanakan secara eksperimental dilaboratorium. Sampel menggunakan daun kering, dihaluskan kemudian diekstraksi menggunakan etanol 70% dengan metode maserasi dan dikentalkan dengan rotary evaporator. Ekstrak diuji terhadap cacing Ascaris suum dengan 4 kelompok pengujian yaitu, kelompok kontrol positif (mebendazol 100 mg/ml), kelompok uji 1 ekstrak daun bambu 25 mg/ml, kelompok uji 2 (50 mg/ml) dan kelompok uji 3 (75 mg/ml), direplikasi 3 kali selama ± 24 jam. Hasil analisis uji statistik ANOVA satu arah menunjukkan p > 0,05 dan hasil uji Tukey HSD menunjukkan tidak adanya perbedaan yang bermakna pada setiap kelompok pengujian. Semua kelompok menunjukkan kemampuan menimbulkan efek anthelmintik terhadap cacing namun, pada pengujian yang menunjukkan hasil optimal ditunjukkan ekstrak daun bambu pada kelompok uji 3 yaitu, dosis 75 mg/ml. Kata Kunci : Daun Bambu, Ascaris suum, Anthelmintik ABSTRACT Worm infections require soil as a medium development of the egg into the infective form. Mebendazole is used as the drug of choice this infection however, this synthetic anthelmintics cause side effects that interfere. Bamboo is a herbal medicine, extract of bamboo plant roots efficacious as an anthelmintic. This study was conducted to determine whether the piece of bamboo leaves may be as effective as its roots as anthelmintic.this study was conducted in an experimental laboratory. Samples using dried leaves, crushed then extracted using 70% ethanol by maceration method and thickened with a rotary evaporator. The extract was tested against Ascaris suum with four test groups, namely, the positive control group (mebendazole 100 mg / ml), the test group 1 bamboo leaf extract 25 mg / ml, the test group 2 (50 mg / ml) and test group 3 (75 mg / ml), replicated three times for ± 24 hours.the results of the analysis of one-way ANOVA statistical test showed p> 0.05 and Tukey HSD test results showed no significant difference in each test group. All groups demonstrated ability anthelmintic effect against worms however, the testing showed optimal results indicated bamboo leaves extract in the test group 3, namely, a dose of 75 mg / ml. Keywords: Bamboo Leaves, Anthelmintic, Ascaris suum Farmagazine Vol. 3 No. 1 Februari

2 PENDAHULUAN Infeksi cacing adalah infeksi yang disebabkan oleh cacing kelas nematoda usus Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura, dan cacing tambang (Ancylostoma duodenale dan Necator americanus) dan Strongyloides stercoralis (Gandahusada et al, 2000). Cacing Ascaris lumbricoides dapat membahayakan tubuh manusia, dalam jumlah yang besar cacing ini dapat menyebabkan obstruksi usus, berkurangnya nafsu makan, diare, konstipasi, gangguan penyerapan nutrisi, dan gangguan perkembangan anak, sedangkan dalam jumlah kecil cacing ini jarang menunjukkan gejala dan baru diketahui setelah cacing keluar dari tubuh penderita atau ditemukannya telur dalam tinja (Kazura, 2007). Beberapa anthelmintik seperti pirantel pamoate dan mebendazol digunakan sebagai drug of choice penyakit askariasis, bahkan telah dijual bebas di pasaran tanpa harus menggunakan resep dokter (Syarif dan Elysabeth, 2007). Namun, anthelmintik sintetis ini kadang menimbulkan efek samping yang mengganggu penderita. Pirantel pamoate yang bekerja dengan mengakibatkan depolarisasi pada cacing dapat menyebabkan mual, muntah, dan diare (Urbani dan Albonico, 2003). Sedangkan mebendazole dapat menyebabkan efek samping yang lebih berat seperti erratic migration atau perpindahan (migrasi) yang tak menentu(albonico et al., 2008). Masyarakat pedesaan yang menjadi sasaran utama penyakit askariasis pun enggan menggunakan obat ini dikarenakan faktor ekonomi dan kesulitan untuk mendapatkan obat tersebut, sebagian besar dari mereka lebih suka menggunakan obat-obat tradisional yang diresepkan secara turun temurun walaupun manfaatnya belum dapat dibuktikan secara ilmiah (Manoj et al., 2008). Salah satu jenis tanaman yang biasa digunakan untuk obat tradisional adalah bambu namun, di Indonesia sendiri pemanfaatannya sebagai tumbuhan yang berkhasiat sangat jarang dilakukan melainkan hanya digunakan sebagai pakan ternak atau hanya sebagai pembungkus makanan. Berdasarkan International Research Journal of Pharmacy pada tahun 2013 disebutkan bahwa ekstrak dari tumbuhan bambu menunjukkan beberapa aktifitas diantaranya anthelmintik (Kumar et al, 2012), antidiabetik (Macharla et al, 2011), antibakteri (Zhang et al, 2010), antifertilitas (Vanithakumari et al, 1989), antiartritis (Rathod et al, 2012), antideuretik (Krishna et al, 2006), antithiroid (Amar et al, 2004) dan lain sebagainya. Aktivitas ini pada penelitian tersebut dikaitkan dengan adanya senyawa α-amirin yang termasuk senyawa fenolik. Senyawa α-amirin merupakan salah satu senyawa golongan triterpenoid. Triterpenoid memiliki nilai ekologi karena senyawa ini bekerja sebagai anti fungus, insektisida, anti pemangsa, anti bakteri dan anti virus (Robinson, 1995). Selain itu, senyawa α-amirin yang termasuk dalam golongan triterpenoid memiliki aktivitas sebagai analgesik, anti inflamasi (anti peradangan) dan anti kanker (Dzubak, et al., 2005). METODE PENELITIAN Alat Alat yang digunakan untuk mengekstraksi adalah botol kaca tertutup dan rotary evaporator. Alat yang digunakan untuk menganalisis adalah tabung reaksi, rak tabung reaksi, penjepit anatomis, dan pipet tetes serta kertas ph. Bahan Bahan yang diperlukan untuk ekstraksi adalah etanol 70%. Bahan yang digunakan untuk proses menganalisa ekstrak adalah ekstrak etanol daun bambu tali, aquadest, kloroform, etanol, FeCl 3 1%, serbuk Mg, HCl, meyer, dragendroff, wagner, Liebermann-Burchard, mebendazol (10mg/ml), NaCl 0,9% dan cacing Ascaris suum. Cara Pengujian Terhadap Cacing Ascaris suum Hewan uji yang digunakan adalah cacing Ascaris suum. Konsentrasi yang digunakan untuk uji dimulai dari konsentrasi 25 mg, 50 mg dan 75 mg. Untuk kontrol positif digunakan Mebendazol (10 mg/ ml). Aktivitas anthelmintik diperoleh dengan menghitung jumlah cacing yang mati dalam waktu Farmagazine Vol. 3 No. 1 Februari

3 24 jam. Pengulangan uji dilakukan sebanyak 3 kali. Untuk mengetahui apakah cacing tersebut mati, paralisis, ataupun masih sehat, maka cacing disenggol dengan batang pengaduk. Jika diam saja maka dilakukan pengecekan dengan cara memasukkan cacing tersebut ke dalam air hangat atau dengan pemberian garam. Apabila cacing tidak bereaksi maka cacing tersebut dinyatakan mati, dan jika masih bergerak cacing tersebut hanya mengalami paralisis. Teknik Pengumpulan Data Data yang dikumpulkan yaitu jumlah cacing yang mati dalam tiap rendaman atau kelompok perlakuan. Parameter kematian cacing adalah tidak adanya respon gerakan ketika disentuh dengan pinset anatomis dan melalui pemanasan pada suhu 90 0 C. Skala variabel dari jumlah kematian cacing adalah skala rasio. Determinasi Tanaman Bahan yang digunakan adalah daun bambu yang diperoleh di desa Matagara, Tiga Raksa, Kab. Tangerang. Sebelum dilakukan penelitian terhadap tumbuhan terlebih dahulu dideterminasi untuk mengidentifikasi jenis dan memastikan kebenaran simplisia. Determinasi dilakukan di LIPI Biologi, Bogor. Penyiapan Bahan yang Digunakan Bahan dikumpulkan dan penyediaan simplisisa. Daun bambu beserta bahan lain yang akan digunakan di cuci hingga bersih, ditiriskan agar bebas dari sisa cucian, dikeringkan, dan digiling hingga menjadi serbuk, kemudian serbuk yang diperoleh disimpan dalam wadah bersih dan tertutup rapat. Pembuatan Sediaan 1. Pembuatan simplisia Semua bahan yang diperlukan dicuci hingga bersih dibawah air yang mengalir, kemudian ditiriskan. Keringkan semua bahan dengan menggunakan oven pada suhu tertentu atau dengan cara pengeringan dibawah sinar matahari. Setelah kering haluskan simplisia menggunakan mixer, ayak, hingga ditemukan serbuk yang diinginkan. 2. Pembuatan ekstrak Timbang bahan sesuai dengan yang ditentukan kemudian masukkan kedalam botol kaca dan tambahkan pelarut etanol 70% 5 kali dari jumlah serbuk bahan. Analisis Sediaan 1. Uji ph Ukur ph menggunakan kertas indicator ph. 2. Uji Kadar Air Menguapkan air yang terdapat dalam bahan dengan oven dengan suhu C dalam jangka waktu tertentu (3 24 jam) hingga seluruh air yang terdapat dalam bahan menguap atau penyusutan berat bahan tidak berubah lagi. 3. Uji Skrining Fitokimia a. Uji Polifenol Ekstrak kental ditambahkan aquadest Selanjutnya ditambahkan FeCl3 1% sebanyak 5 tetes dan diamati perubahan warna yang terjadi. Perubahan warna menjadi hijau biru hingga hitam menunjukkan adanya senyawa polifenol. b. Uji Flavonoid Ekstrak kental ditambahkan etanol kemudian ditambahkan 0.20 gram serbuk Mg dan 3 tetes HCl. Tebentuknya warna merah pada lapisan etanol menunjukkan adanya senyawa flavonoid. c. Uji Alkaloid d. Ekstrak kental ditambahkan dengan 5 ml kloroform dan 3 tetes amonia. Fraksi kloroform kemudian dipisah dan diasamkan dengan 10 tetes H 2SO 4 2M. Lapisan asam dipisah kedalam 3 bagian dan disebut sebagai bagian A, B dan C. Lapisan A ditambahkan pereaksi Meyer, lapisan B ditambahkan pereaksi Dragendorf dan lapisan C ditambahkan pereaksi Wagner. Diamati timbulnya endapan oleh masing-masing pereaksi. Terdapatnya alkaloid ditandai dengan terbentuknya endapan putih oleh pereaksi Meyer, endapan merah oleh Farmagazine Vol. 3 No. 1 Februari

4 pereaksi Dragendorf dan endapan coklat oleh pereaksi Wagner. e. Uji Tanin Ekstrak kental ditambahkan aquadest, didihkan selama 5 menit, ditambahkan dengan 5 tetes FeCl 3 1%. Diamati perubahan warna yang terjadi. Terbentuknya warna biru tua atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin. f. Uji Saponin Uji Saponin dilakukan dengan metode Forth yaitu dengan cara memasukkan 2 ml sampel kedalam tabung reaksi kemudian ditambahkan 10 ml akuades lalu dikocok selama 30 detik, diamati perubahan yang terjadi. Apabila terbentuk busa yang mantap (tidak hilang selama 30 detik) maka identifikasi menunjukkan adanya saponin. g. Uji Triterpenoid Filtrat yang dihasilkan dipindahkan kedalam pelat tetes dan dibiarkan sampai menguap pelarutnya. Kemudian ke dalamnya ditambahkan pereaksi Liebermann-Burchard (1 tetes asam sulfat pekat dan 3 tetes asam asetat anhidrat). Uji positif jika timbul warna merah, merah jambu atau ungu. h. Uji Farmakologi Hewan uji yang digunakan adalah cacing Ascariasis Summ. yang diperoleh dari lumen usus babi. Cacing di masukkan ke dalam wadah yang telah diberi larutan NaCl 0,9%. Konsentrasi yang digunakan untuk uji dimulai dari konsentrasi 25 mg, 50 mg dan 75 mg. Untuk kontrol positif digunakan Albendazol (10 mg / ml) dan kontrol negatif digunakan larutan NaCl 0,9%. Aktivitas anthelmintik diperoleh dengan menghitung jumlah cacing yang mati dalam variasi waktu 1, 3, 5, dan 7 jam. Pengulangan uji dilakukan sebanyak 3 kali. Untuk mengetahui apakah cacing tersebut mati, paralisis, Penapisan Fitokimia ataupun masih sehat, maka cacing disenggol dengan batang pengaduk. Jika diam saja maka dilakukan pengecekan dengan cara memasukkan cacing tersebut ke dalam air hangat atau dengan pemberian garam. Apabila cacing tidak bereaksi maka cacing tersebut dinyatakan mati, dan jika masih bergerak cacing tersebut hanya mengalami paralisis Analisis Data Data yang diperoleh dalam penelitian ini dianalisis dengan menggunakan aplikasi SPSS One Way ANOVA. HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi Daun Bambu Tabel 1. Hasil Ekstraksi daun bambu tali (Gigantochloa apus) No. Jenis Hasil 1 Daun segar 170,6 g 2 Daun kering 87,4 g 3 Serbuk 81 g 4 Ekstrak kental 5,8 g Karakteristik Ekstrak Tabel 2. Karakteristik Ekstrak Etanol Daun Bambu (Gigantochloa apus) No Jenis Hasil 1 Bentuk Kental 2 Bau Khas 3 Rasa Khas 4 Warna Coklat Kehitaman 5 Ph 6 6 Susut Pengeringan 0,769% Farmagazine Vol. 3 No. 1 Februari

5 Tabel 3. Hasil uji skiring fitokimia ekstrak kental etanol 70% daun bambu (Gigantochloa apus) sebagai anthelmintik pada cacing Ascaris Suum No Uji Fitokimia Reagen Hasil Keterangan 1 Polifenol dan tanin +FeCl 3 1% Hijau hitam dan endapan + 2 Saponin + Aquadest kocok, + HCl Busa 1,5 cm bertahan 10 + menit 3 Triterpenoid dan + Lieberman Buchardat Hijau-Biru + steroid 4 Alkaloid + Kloroform + Amoniak + H 2SO 4 pisahkan, bagi menjadi 3 A (Meyer), B (Wagner) dan C (dragendroff) A (tidak ada endapan) B ( tidak ada endapan ) - 5 Flavonoid + etanol + serbuk Mg + HCl Tidak ada perubahan warna - Uji Efektivitas Ekstrak Sebagai Anthelmintik Tabel 4. Hasil uji efektivitas ekstrak kental etanol 70% daun bambu (Gigantochloa apus) sebagai anthelmintik pada cacing Ascaris suum. Perlakuan Jumlah Kematian Replikasi 1 Mebendazole (+) 4 25 mg/ml 1 50 mg/ml 4 75 mg/ml 5 Replikasi 2 Mebendazole (+) 3 25 mg/ml 1 50 mg/ml 0 75 mg/ml 2 Replikasi 3 Mebendazole (+) 2 25 mg/ml 2 50 mg/ml 1 75 mg/ml 2 Tabel 5. Hasil uji efektivitas ekstrak kental etanol 70% daun bambu (Gigantochloa apus) sebagai anthelmintik pada cacing Ascaris suum. Waktu (jam) Perlakuan Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi onset Farmagazine Vol. 3 No. 1 Februari

6 Pengujian dilakukan selama 24 jam dengan suhu yang terkontrol pada suhu 37 o C. Waktu 0-7 jam pertama sampel didiamkan tanpa pengecekan guna mendapatkan onset obat yang sesuai dengan onset kerja dari mebendazole sebagai kontrol positif. Tabel 5 menunjukkan dimana obat mulai menunjukkan reaksi atau kerja terhadap sampel yang digunakan dalam penelitian ini. Penelitian ini menggunakan tiga replikasi atau pengulangan pada setiap perlakuan guna mendapatkan hasil yang relevan dalam pengujiannya. Waktu yang dibutuhkan oleh kontrol positif dan ekstrak uji dalam memberikan efek terhadap sampel pengujian dimulai pada jam ke-9 namun pada setiap perlakuan menunjukkan efek yang berbeda-beda bahkan efek terhadap sampel bisa saja muncul pada waktu yang relatif lebih lama dari replikasi yang sebelumnya. Hal ini dapat dikaitkan dengan kondisi fisik dari hewan uji yang berbeda-beda dimana untuk hewan yang digunakan tidak terpengaruh dari besar fisik namun didasarkan pada panjangnya, hewan uji yang relatif besar ketahanan tubuhnya cukup baik yang ditandai dengan refleks gerak yang aktif dan tubuh dari hewan ini yang kencang layaknya karet gelang, selain itu juga yang mempengaruhi dapat dikaitkan pada pola waktu penggunaan hewan yang sebaiknya digunakan langsung setelah didapatkan. Menilai efek kerja dari kontrol dan ekstrak dapat dilihat dari aktivitas sampel yang Gambar 1. Uji Efektivitas Terhadap Cacing Cacing relatif menurun yang ditunjukkan jika tidak disentuh menggunakan pinset maka sampel Farmagazine Vol. 3 No. 1 Februari

7 tidak akan bergerak atau bahkan harus dengan menaburkan garam pada sampel dan memasukkannyan kedalam air hangat untuk mengetahui sampel tersebut masih hidup atau tidak, pada kondisi sampel ditunjukkan dengankondisi fisik dari cacing yang mulai rusak dan megempis dan dilihat dari media pengujian pada media terlihat sedikit berbusa dan menimbulkan lendir. Hal ini sesuai dengan mekanisme mebendazol yang menyebabkan kerusakan struktur subseluler dan menghambat sekresi asetilkolinesterase cacing (Ganiswara, 1995). Ekstrak daun bambu pun menimbulkan efek yang sama terhadap cacing yang ditunjukkan pada Gambar 1 yang dapat diartikan bahwa ekstrak daun bambu memiliki mekanisme yang sama dengan kontrol positif yaitu mebendazole. Efek yang sama ini dikaitkan dengan senyawa triterpenoid dan steroid yang memiliki senyawa OCH 3 yang sama dengan yang dimiliki mebendazol. Data yang didapatkan dalam pengujian kemudian diolah menggunakan SPSS menggunakan analisis One Way ANOVA meliputi uji normalitas, homogenitas, Anova dan Tukey. Uji normalitas pada data yang diperoleh yang dilakukkan menggunakan SPPS diperoleh bahwa data ynag didapatkan distribusinya normal yang ditunjukkan bahwa nilai sig (0,530) > 0,05. Hasil uji homogenitas nilai sig (0,145) > 0,05, dari hasil tersebut menunjukkan bahwa data yang diperoleh homogen. Uji anova menunjukkan nilai sig (0,417) > 0,05 yang berarti dari data tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna. Hal ini ditunjukkan pula pada hasil pengujian yang dapat dilihat pada Tabel 4 dimana antara setiap perlakuan dalam pengujian hasil yang didapatkan relatif sama selain itu hasil ini juga diperkuat melalui uji tukey dimana dari hasil uji tersebut menunjukkan tidak adanya perbedaan yang bermakna dari setiap perlakuan uji. KESIMPULAN Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa ekstrak kental etanol 70% daun bambu (Gigantochloa apus) memiliki efektivitas sebagai anthelmintik yang ditunjukkan melalui pengujian terhadap cacing Ascaris suum yang dilakukan selama 24 jam. Ekstrak kental etanol 70% daun bambu (Gigantochloa apus) yang paling optimal dalam memberikan efek anthelmintik terhadap cacing Ascaris suum adalah dosis 75 mg/ml. DAFTAR PUSTAKA Albonico M, Allen H, Chitsulo L, Engels D, Gabrielli A-F, et al Controlling Soil-Transmitted Helminthiasis in Pre- School-Age Children through Preventive Chemotherapy. PLoS Negl Trop Dis 2(3): e126. doi: /journal.pntd Amar KC, Sanjukta M, Dishari L, Smritiratan T. Goitrogenic content of Indian cyanogenic plant foods and their in vitro anti-thyroidal activity. Indian J Med Res 2004; 119: Dzubak, P., M. Hadjuch., D. Vydra., A. Hustova., M. Kvasnica., D. Biederman., L. Markova, M. Urban, J. Sarek., 2006, Pharmacological Activities Of Natural Triterpenoids and Their Therapeutic Implication, United States: McGraw-Hill Gandahusada, S. Herry DI, Pribadi W., Parasitologi Kedokteran. Edisi ketiga. FKUI. Jakarta. Ganiswara, S.G., Setiabudi, R., Suyatna, F.D., Purwantyastuti, Nafrialdi (Editor) Farmakologi dan Terapi. Edisi 4.. Bagian Farmakologi FK UI: Jakarta Kazura JW Nematode infections. In: Goldman L, Ausiello D, eds. Cecil Medicine. 23rd ed. Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier; 2007: chap 378 Krishna KL, Agarwal SS. Diuretic activity of Sufoof-e-Suzak Qawianunanipolyherbomineral formulation. Iranian J Pharmacol Ther 2006; 5: Farmagazine Vol. 3 No. 1 Februari

8 Kumar HKS, Raju MBV, Dinda SC, Sahu S. Evaluation of anthelminthic acivity of Bambusa arundinacea. Asian J Pharm Tec 2012; 2: Manoj A,Urmila A, Bhagyashri W, Meenakshi V, Akshaya W, Gujar N. Kishore Anthelmintic activity of Ficus benghalensis. Indian journal ofgreen pharmacy,2(3), Rathod D, Pathak L, Patel G, Jivani P, Patel D, Chauhan V. Ameliorative effect of Bambusa arundinacea against adjuvant arthritis-with special reference to bone erosion and tropical splenomegaly. J of Drug DeliThera 2012; 2: Robinson, T., 1995, Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi, (Penterjemah : Prof. Dr. Kosasih Padmawinata), Edisi keenam, Institut Teknologi Bandung, Bandung Syarif, A dan Elysabeth Antelmintik. Dalam Farmakologi dan Terapi edisi 5. Jakarta : Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas KedokteranIndonesia. hlm: Vanithakumari G, Manonavagi S, Padma S, Malini T. Antifertility effect of Bambusa arundinacea shoot extracts in male rats. J Ethnopharmacol 1989; 25: Zhang J, Gong J, Ding Y, Lu B, Wu X, Zhang Y. Antibacterial activity of water-phase extracts from bamboo shavings against food spoilage microorganisms. African J of Biotech 2010; 9: Farmagazine Vol. 3 No. 1 Februari