ARTIKEL. LOKAL TERHADAP JENTIK NYAMUK Aedes aegypti dan

Transkripsi

1 ARTIKEL EFIKASI Bacillus thuringiensis 2 isolat serotipe H-10 GALUR LOKAL TERHADAP JENTIK NYAMUK Aedes aegypti dan Anopheles aconitus Blondine Ch.P Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Vektor dan Reservoir Penyakit, Salatiga. blondine157@gmail.com Efficacy Two Isolates of Bacillus thuringiensis Local Strains Towards Aedes aegypti and Anopheles aconitus Larvae Abstrak Bacillus thuringiensis serotipe H-10 telah diketahui dapat mengendalikan jentik nyamuk (Diptera) berdasaarkan tipe kristal protein toksin yang dihasilkan. Tujuan penelitian adalah menentukan efikasi 2 isolat (isolat KT dan isolat PS) B. thuringiensis serotipe H-10 galur lokal terhadap jentik nyamuk Aedes aegpti dan Anopheles aconitus. Untuk memperoleh B. thuringiensis H-10 dilakukan dengan cara isolasi, identifikasi dan uji serologi dari habitat tanah yang dilakukan di laboratorium Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Vektor dan Reservoir Penyakit Salatiga dan Bioteknologi Perkebunan Bogor. Isolat KT pada konsentrasi 148,95 ppm dan 341,21 ppm mampu mematikan jentik Ae. aegypti berturut-turut sebesar 50 % dan 90 %. Sedangkan pada konsentrasi 49,44 ppm dan 147,07 ppm dapat mematikan jentik An. aconitus berturut-turut sebesar 50 % dan 90 %. Isolat B. thuringiensis H-10 (isolat PS) pada konsentrasi 159,98 ppm dan 341,91 ppm mampu mematikan jentik Ae. aegypti berturut-turut sebesar 50 % dan 90 %. Sedangkan pada konsentrasi 50,84 ppm dan 141,46 ppm dapat mematikan jentik An. aconitus berturut-turut sebesar 50 % dan 90 %. Jumlah sel hidup B. thuringiensis H-10 isolat KT dan PS berturut-turut sebesar 10,7 x 10 7 sel/ml dan 9,3 x 10 7 sel/ml. Sedangkan masing-masing mempunyai jumlah spora sebesar 10,5 x 10 7 spora/ml dan 10,1 x 10 7 spora/ml. Hasil toksisitas residual isolat B. thuringiensis H-10 (isolat KT) dengan konsetrasi 341,21 ppm dan B. thuringiensis H-10 (isolat PS) dengan konsentrasi 341,91 ppm terhadap jentik Ae. aegypti instar III akhir menunjukkan persentase kematian lebih besar dari 70 % berturut-turut pada hari ke 5 dan ke 4. Sedangkan toksisitas residual isolat B. thuringiensis H-10 (isolat KT) dengan konsetrasi 147,07 ppm dan isolat PS dengan konsentrasi 141,46 ppm terhadap jentik An. aconitus. instar III akhir menunjukkan persentase kematian lebih besar dari 70 % berturut-turut pada hari ke 4. Untuk meningkatkan daya bunuh isolat B. thuringiensis H-10 galur lokal perlu dibuat formulasi bakteri tersebut dalam bentuk cair atau bubuk (powder). Kata kunci: B. thuringiensis H-10, Galur lokal, Ae. aegypti, An. aconitus Abstract Bacillus thuringiensis serotype H-10 known to control the mosquito larvae (Diptera) based on type of crystal protein toxin produced. The research objective was to determine the efficacy of two isolates (KT isolates and PS isolates B. thuringiensis serotype H-10 local strains against of Aedes aegypti mosquito larvae and Anopheles aconitus. To obtain B. thuringiensis H-10 conducted by the isolation, identification and serologic testing of the soil habitat conducted in the laboratory of IVRCRD Salatiga and Institute of Biotechnology Bogor. Isolates KT at a concentration of ppm and ppm could kill larvae of Ae. aegypti, respectively for 50% and 90%. The concentration of ppm and ppm can kill larvae An. aconitus respectively by 50% and 90%. Isolates of B. thuringiensis H-10 ( isolates PS) at a concentration of ppm and ppm could kill larvae of Ae. aegypti, respectively for 50% and 90%. While the concentration of ppm and ppm can kill larvae An. aconitus respectively by 50% and 90%. Total Viable Spore Count (TVSC) B. thuringiensis H-10 isolates KT and PS respectively of 10.7 x 10 7 cells / ml and 9.3 x 10 7 cells / ml. Each isolates has a number of spores was 10.5 x 10 7 spores / ml and 10.1 x 10 7 spores / ml. The results of residual toxicity isolate B. thuringiensis H-10 (KT isolates) with a concentration of ppm and B. thuringiensis 28 Jurnal Vektora Vol. V No. 1, Juni 2013

2 H-10 (PS isolate) with a concentration of ppm against the larvae of Ae. aegypti instar III shows the percentage of mortality was greater than 70%, respectively on day 5 and 4. While the residual toxicity of isolated B. thuringiensis H-10 (KT isolates) with a concentration of ppm and PS isolates with ppm concentration against larvae An. aconitus instar III shows the percentage of mortality was greater than 70%, respectively on day 4. The investigation shoud be developed further for formulation liquid and powder the local strain of B. thuringiensis H-10. Keywords: B. thuringiensis H-10, the local strain, Ae. aegypti, An. aconitus Submitted: 28 Maret 2013, Review 1: 3 April 2013, Review 2: 17 Mei 2013, Eligible article: 24 Mei Pendahuluan Demam Berdarah Dengue (DBD) dan malaria meru pakan masalah kesehatan masyarakat. Demam Berdarah Dengue yang ditularkan oleh nyamuk Ae. aegypti banyak di daerah perkotaan dan sekitarnya yang padat pemukiman penduduk serta ada juga di pedesaan, sedangkan malaria yang ditularkan nyamuk Anopheles aconitus lebih banyak terjadi di daerah persawahan bertingkat. Penyakit malaria sering menimbulkan Kejadian Luar Biasa (KLB) dengan angka kematian yang tinggi. Pengendalian penyakit DBD dan malaria serta penyakit menular lainnya didasarkan atas pemutusan rantai penularan. Penelitian menunjukkan bahwa penggunaan insektisida kimia untuk pengendalian vektor dalam waktu lama dan frekuensi tinggi dapat menimbulkan resistensi. Penggunaan larvasida kimia temephos 1% dalam waktu lama mengakibatkan penurunan status kerentanan jentik Aedes aegypti (Depkes, 2003). Kejadian penurunan status kerentanan vektor terhadap insektisida dan mempertimbangkan keamanan lingkung an mendo rong dikembangkan bioinsektisida. Pengendalian secara biologi saat ini telah menjadi alternatif dalam pengendalian vektor karena tidak menim bulkan pengaruh samping yang buruk baik terhadap pekerja, maupun masyarakat dan lingkungan. Salah satu pengendali hayati yang saat ini dikembangkan adalah B. thuringiensis serotipe israelensis (H-14), yang telah dijadikan sebagai bahan bioinsektisida untuk pengendali larva nyamuk dan lalat hitam (WHO, 1979). Bakteri ini bersifat gram positif, dan dapat memproduksi kristal protein toksin (delta endotoksin) selama proses sporulasi. Mempunyai efek toksisitas yang tinggi terhadap serangga vektor, bersifat spesifik target dan belum menyebabkan resistensi vektor (Mulla dkk, 1986). Bacillus thuringiensis bersifat kosmopolitan antara lain dapat diisolasi dari tamah misalnya tanah yang ber ada di bawah pohon, cabang dan lobang pohon yang sudah tua umurnya, tanah yang berbecek, tempat perinduk an jentik nyamuk maupun jentik yang sakit. Telah ditemukan B. thuringiensis H-14 galur lokal hasil isolasi tanah di wilayah Salatiga, dan toksisitasnya tinggi terhadap jentik Ae. aegypti, An.aconitus dan Cx.quenquefasciatus di Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Vektor dan Reservoir Penyakit (B2P2VRP) (Blondine, 2003). Keanekaragaman ekosistem di Indonesia memberi peluang ditemukan berbagai patogen jentik nyamuk. Selain B. thuringiensis H-14 galur lokal ditemukan pula B. thuringiensis H-10 yang diisolasi dari habitat tanah(blondine dkk, 1998/1999). Bacillus thuringiensis H-10, mempunyai protein paraspora berbentuk tidak beraturan toksik terhadap golongan Diptera dan Lepidoptera (Leodegario. dkk, 1980). Tujuan: Tujuan Umum: Menentukan efikasi 2 serotipe Bacillus thuringiensis H-10 galur lokal terhadap jentik nyamuk Ae. aegypti dan An. aconitus Tujuan khusus: a. Menghitung jumlah sel hidup dan spora hidup 2 serotipe H-10 B. thuringiensis galur lokal b. Menentukan toksisitas residual 2 serotipe H-10 B. thuringiensis galur lokal terhadap jentik nyamuk Ae. aegypti dan An. aconitus. Metodologi Penelitian Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian dilakukan di Laboratorium B2P2VRP Salatiga pada tahun Variabel Penelitian Variabel bebas Dua serotipe H-10 Bacillus thuringiensis galur lokal Variabel Terikat Jurnal Vektora Vol. V No. 1, Juni

3 Jumlah kematian jentik Ae. aegypti dan An. aconitus Variabel Pengganggu terukur Suhu air dan ph air Disain Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian dasar dengan rancangan eksperimental murni Populasi dan Sampel Populasi penelitian ini adalah jentik nyamuk Ae.aegypti dan An. aconitus hasil pemeliharaan laboratorium B2P2VRP. Sampel penelitian adalah jentik Ae.aegypti dan An. aconitus masing-masing instar III akhir. Pengambilan sampel pada kelompok perlakuan dan pembanding dilakukan secara completely randomized sampling. Hal ini disebabkan percobaan bersifat homogen. Randomisasi dilakukan dengan menempatkan perlakuan secara random terhadap unit percobaan ( Nasir,M. 1983). Ulangan atau replikasi Banyaknya ulangan untuk uji efikasi dihitung menurut rumus (Kemas, 1993) sebagai berikut: (t 1) (r 1) > 15 (9 1) (r 1) > 15 r > 2.8 ~ 3 Keterangan: t = jumlah perlakuan r = jumlah ulangan Cara Pengumpulan data Data primer kematian jentik Ae. aegypti dan An. aconitus pada uji efikasi B.thuringiensis H-10 di laboratorium Data primer jumlah sel dan spora hidup pada biakan. Bahan dan Cara Kerja Bahan dan Alat Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Nutrien agar, TPB, Akuades, peralatan jarum ose, plat petri untuk isolasi dan pengembangbiakan B.thuringiensis H-10 di laboratorium. Cara Kerja Uji hayati (Bioassay Test) (Chilcott dan Wigley, 1988). Diambil 2 ose penuh kultur murni isolat KT B. thuringiensis H-10 dari media NA /NYSMA miring dan dimasukkan ke dalam shake glass (gelas kocok) ukur an 250 ml yang diisi dengan 50 ml TPB, sampel tersebut digojog dengan menggunakan penggojog pada suhu kamar selama 48 jam. Sebanyak 15 ml sampel yang sudah digojog dimasukan ke dalam mangkok plastik yang diisi dengan 150 ml air suling dan 20 ekor jentik Aedes aegypti instar III akhir. Sebagai kontrol mangkok plastik hanya diisi dengan 150 ml air suling dan 25 ekor jentik Ae. aegypti instar III. Ulangan dilakukan sebanyak 3 kali. Pengamatan dilakukan 24 jam sesudah perlakuan. Perlakuan yang sama dilakukan pula terhadap jentik An. aconitus. Uji toksisitas isolat PS B. thuringiensis H-10 terhadap jentik Ae. aegypti dan An. aconitus dilakukan dengan cara yang sama. Perhitungan persentase kematian jentik uji dengan rumus: Kematian x 100 % Jumlah jentik Koreksi Abbott digunakan apabila pada kelompok kontrol terdapat kematian 5 20 % sebagai berikut: AK (%) Uji AK (%) Kontrol Akk (%) = x % - AK (%) Kontrol Keterangan: AKk : Angka Kematian koreksi AK : Angka Kematian jentik Penentuan LC50 dan LC90 2 isolat B.thuringiensis H-10 galur lokal Dilakukan penentuan LC50 dan LC90 dari 2 isolat B. thuringiensis H-10 yang ditemukan (WHO, 1989) 10. Perlakuannya sebagai berikut: Satu ml larutan stok kultur murni isolat KT B.thuringiensis H-10 galur lokal dimasukkan ke dalam beaker glass yang berisi 99 ml air, dikocok sampai homogen, kemudian dari biakan murni diambil 30 µl, 50 µl, 70 µl, 90 µl, 100 µl, 300 µl, 500 µl, 700 µl, 900 µl menggunakan Gilson micropipet E A dan dimasukkan kedalam mangkok plastik berisi 20 ekor jentik nyamuk,dengan volume total 100ml. Kematian jentik diamati selama 24 dan 48 jam pengujian. Untuk mendapatkan LC50 dan LC90 B.thuringiensis H-10 yang dibiakkan dengan media TPB digunakan analisis Probit (Finney, 1971). Penentuan LC50 dan LC 90 isolat PS B. thuringiensis H-10 dilakukan dengan cara yang sama. Penghitungan Jumlah sel hidup dan spora hidup (Soesanto,1994) B. thuringiensis H-10 galur lokal adalah sebagai berikut: 30 Jurnal Vektora Vol. V No. 1, Juni 2013

4 Penghitungan jumlah sel hidup Formulasi cair isolat KT B.thuringiensis H-10 yang diperoleh diambil sebanyak 1 ml dan ditambahkan 9 ml akuades dalam tabung gelas, kemudian dikocok sampai homogen, kemudian dibuat pengenceran seri dalam akuades. Dari masing masing pengenceran diambil 0,1 ml dan ditaburkan kedalam cawan petri dan ditambahkan agar nutrien sebanyak 20 ml. Selanjutnya diinkubasikan selama 48 jam pada suhu 30 0 C. Dihitung jumlah sel hidup B.thuringiensis H-10 galur lokal yang tumbuh pada petri berisi agar nutrien. Penentuan jumlah sel hidup isolat PS B. thuringiensis H-10 dilakukan dengan cara yang sama. Penghitungan jumlah spora hidup Untuk memperoleh jumlah spora hidup, maka kultur bakteri B.thuringiensis H-10 isolat KT yang berada dalam media pengembangbiakan masing-masing pengenceran dipanaskan selama 30 menit pada suhu 60 0 C. Maksud pemanasan itu adalah untuk mematikan bakteri non spora (Streptococcus, Sthaphilococcus, Pseudomonas). Dari masing- masing pengenceran formulasi cair B.thuringiensis H-10 diambil sebanyak 0,1 ml dan ditaburkan ke dalam plat Petri, kemudian ditambahkan agar nutrien sebanyak 20 ml. Kemudian diinkubasikan selama 48 jam pada suhu 30 0 C. Sesudah itu dihitung jumlah spora B.thuringiensis H -10 yang tumbuh pada plat Petri berisi agar nutrien. Begitupula untuk isolat PS B. thuringiensis H-10 dihitung denan cara yang sama. Pengujian efek residu B. thuringiensis H-10 galur lokal: Efek residu 2 isolat (KT dan PS) B.thuringiensis H-10 galur lokal yang masing-masing dikembangbiakan dalam media TPB terhadap jentik Ae. aegypti dan An. aconitus dilakukan setelah diperoleh konsentrasi yang tepat pada LC90. Percobaan dilakukan menggunakan wadah plastik yang berisi 500 ml air dan 20 ekor jentik Ae. aegypti instar III akhir. Untuk kontrol, wadah plastik hanya diisi air 500 ml dan dimasukkan 20 ekor jentik nyamuk Ae. aegypti. Pengamatan kematian jentik dilakukan 24 jam sesudah perlakuan. Jentik yang mati dan yang masih hidup dikeluarkan dari wadah plastik. Penggantian jentik dilakukan sesudah pengamatan, sebanyak 20 ekor. Setiap 3 hari dilakukan penambahan air agar volume air tetap seperti semula (500 ml). Selama percobaan wadah ditutup dengan kain kasa. Pengamatan dilakukan setiap 24 jam, sampai kematian jentik nyamuk menurun kurang dari 70 %. Perlakuan yang sama dilakukan juga terhadap jentik An. aconitus. Hasil Penelitian Hasil pengujian efikasi 2 isolat (KT dan PS) B. thuringiensis H-10 yang diperoleh menunjukkan bahwa isolat KT pada konsentrasi 148,95 ppm dan 341,21 ppm mampu mematikan jentik Ae. aegypti berturut-turut sebesar 50 % dan 90 %. Sedangkan pada konsentrasi 49,44 ppm dan 147,07 ppm dapat mematikan jentik An. aconitus berturut-turut sebesar 50 % dan 90 % (Tabel 1). Isolat B. thuringiensis H-10 (isolat PS) pada konsentrasi 159,98 ppm dan 341,91 ppm mampu mematikan jentik Ae. aegypti berturut-turut sebesar 50 % dan 90 %. Sedangkan pada konsentrasi 50,84 ppm dan 141,46 ppm dapat mematikan jentik An. aconitus berturut-turut sebesar 50 % dan 90 % (Tabel 1). Jumlah sel hidup dan spora hidup yang diperoleh dari 2 isolat (KT dan PS) B. thuringiensis H-10 galur lokal disajikan pada Tabel 2. Tabel 1. Uji efikasi dua isolat B. thuringiensis H-10 galur lokal terhadap jentik Ae. aegypti dan An aconitus Kondisi laboratorium Ae. aegypti An. aconitus Isolat Bt H-10 LC50 (ppm) LC90 (ppm) LC50 (ppm) LC90 (ppm) 90% C.L* 90% C.L* 90% C.L* 90% C.L* 24 jam 24 jam KT PS ph air : 7 Suhu air : C Suhu udara : C Kelembaban nisbi udara : 77-92% * = Hasil pengenceran pada kematian 50 dan 90% serta berturut-turut mempunyai batas kepercayaan dalam logaritma Keterangan : LC50 : Lethal concentration 50% LC90 : Lethal concentration 90% ppm : part per million Jurnal Vektora Vol. V No. 1, Juni

5 Jumlah sel hidup B. thuringiensis H-10 isolat KT dan PS berturut-turut sebesar 10,7 x 10 7 sel/ml dan 9,3 x 10 7 sel/ml. Sedangkan masing-masing mempunyai jumlah spora sebesar 10,5 x 10 7 spora/ml dan 10,1 x 10 7 spora/ml (Tabel 2). Hasil efikasi residual isolat (KT) B. thuringiensis H-10 pada konsetrasi 341,21 ppm dan isolat PS dengan konsentrasi 341,91 ppm terhadap jentik Ae. aegypti instar III akhir menunjukkan persentase kematian lebih besar dari 70 % berturut-turut pada hari ke 5 dan ke 4. Hasil efikasi residual isolat B. thuringiensis H-10 isolat KT dengan konsetrasi 147,07 ppm dan isolat PS dengan konsentrasi 141,46 ppm terhadap jentik An. aconitus. instar III akhir menunjukkan persentase kematian lebih besar dari 70 % berturut-turut pada hari ke 4 Tabel 2. Jumlah sel hidup dan spora hidup B. thuringiensis H-10 galur lokal isolat KT dan PS Serotipe -H Isolat Jumlah sel/ml Jumlah spora/ml 10 KT 10,7 x ,5 x10 7 PS 9,3 x ,1 x 10 7 Pembahasan Isolat KT dan PS B. thuringiensis H-10 galur lokal membutuhkan konsentrasi besar untuk mematikan jentik Ae. aegypti dan An. aconitus. Nilai LC50 dan LC90 isolat KT dan PS untuk mematikan jentik Ae. aegypti ternyata membutuhkan konsentrasi 16 sampai 35 kali lebih besar dibandingkan dengan B. thuringiensis H-14 galur lokal serta 6 15 kali lebih besar dibandingkan dengan B. thuringiensis H-14 galur lokal untuk mematikan jentik An. aconitus yaitu LC50 = 10,22 ppm dan LC90 = 27,11 ppm (Blondine, 2002). Begitupula penelitian yang dilakukan oleh Leodegario dkk (1980) dimana membutuhkan konsentrasi yang lebih kecil untuk mematikan jentik Ae. aegypti dan Culex sp. Perbedaan konsentrasi yang diperoleh mungkin disebabkan oleh daya bunuh di dalam usus tengah jentik tidak sama. Re aksi daya bunuh isolat KT dan PS B. thuringiensis H-10 di dalam usus tengah jentik memerlukan waktu yang lebih lama dari B. thuringiensis H-14 galur lokal maupun B. thuringiensis H-10 yang dilakukan oleh Leo degario dkk (1980). Telah diketahui bahwa B. thuringiensis H-14 merupakan isolat yang lebih dominan dalam mematikan jentik nyamuk dibandingkan dengan serotipe lain. Perbedaan patogenisitas dapat juga disebabkan oleh banyak sedikitnya toksin (kristal) bakteri yang termakan oleh jentik serta disebabkan pula oleh per bedaan serotipe. Walaupun jumlah sel dan spora hi dup tidak sama pada kedua isolat B. thuringiensis H-10 galur lokal, hal ini tidak merupakan prinsp. Yang lebih penting adalah toksisitas (bioassay test) dari bakteri ter se but dalam menentukan aktivitas larvasidanya. Hal ini didukung pula oleh Bulla dkk dalam Blondine dan Damar, 2000 yang menyatakan bahwa hasil pengujian toksisitas lebih penting untuk menentukan aktivitas larvasidanya. Toksisitas residual isolat KT dan PS terhadap jentik Ae. aegypti dan An. aconitus instar IIII akhir dalam wadah plastik masing-masing pada konsentrasi LC90 hanya bertahan lebih dari 70 % sekitar 4-5 hari diban dingkan B. thuringiensis H-14 galur lokal yang sampai 13 hari. Perbedaan tersebut dapat disebabkan oleh ke rentanan serangga sasaran terhadap toksin serta kemampuan cairan usus untuk melarutkan kristal protein toksin. Untuk memperoleh efek residual yang optimal terhadap jentik vektor demam berdarah maupun malaria, maka faktor lingkungan, kondisi alamiah air, bentuk formulasi, pembuangan dan penambahan air pada tempat pembiakan jentik juga merupakan faktor yang dapat berpengaruh pada aktivitas larvisial B. thuringiensis. Walaupun bakteri B. thuringiensis H-10 dengan bentuk kristal tidak beraturan. dapat mematikan jentik nyamuk akan tetapi untuk meningkatkan keefektifan dari bakteri ini perlu diperhatikan beberapa hal seperi bentuk formulasi, kemurnian dari bakteri tersebut. Bentuk formulasi dari bakteri tersebut berpengaruh khususnya pada tingkat sedimentasi/pengendapan yang merupakan sasaran makan jentik yang diuji. Berdasarkan penelitian ini iso lat B. thuringiensis serotipe 10 akan dikembangkan lebih lanjut di laboratorium untuk kemudian digunakan dalam pengendalian jentik nyamuk di lapangan. Kesimpulan dan Saran Kesimpulan Efikasi B. thuringiensis H-10 isolat KT sebesar 50 % dan 90 % terhadap jentik Ae. aegypti dan An. aconitus berturut-turut pada konsentrasi 148,95 ppm dan 341,21 ppm serta 49,44 ppm dan 147,07 ppm mampu mematikan jentik Ae. aegypti berturut-turut sebesar 50 % dan 90 %. Bacillus thuringiensis H-10 (isolat PS) pada konsentrasi 159,98 ppm dan 341,91 ppm serta konsentrasi 50,84 ppm dan 141,46 ppm berturut-turut dapat mematikan jentik Ae. aegypti dan An. aconitus sebesar 50 % dan 90 %. Jumlah sel hidup B. thuringiensis H-10 isolat KT dan PS berturut-turut sebesar 10,7 x 10 7 sel/ml dan 9,3 x 10 7 sel/ml. Sedangkan masing-masing mempunyai jumlah spora sebesar 10,5 x 10 7 spora/ml dan 10,1 x 10 7 spora/ml. Toksisitas residual isolat B. thuringiensis H-10 (isolat KT) dan (isolat PS) terhadap jentik Ae. aegypti 32 Jurnal Vektora Vol. V No. 1, Juni 2013

6 instar III akhir menunjukkan persentase kematian lebih besar dari 70 % berturut-turut pada hari ke 5 dan ke 4. Sedangkan isolat B. thuringiensis H-10 (isolat KT) dan isolat PS dengan terhadap jentik An. aconitus instar III akhir menunjukkan persentase kematian lebih besar dari 70 % berturut-turut pada hari ke 4. Saran Penelitian ini perlu dilanjutkan untuk membuat formulasi B. thuringiensis H-10 dalam bentuk cair dan bubuk (powder) agar dapat meningkatkan daya bunuh. Ucapan terima kasih Dengan selesainya penelitian ini kami mengucapkan terima kasih kepada Kepala Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Vektor dan Reservoir Penyakit di Salatiga, Kepala Dinas Kesehatan Kabupaten Semarang, Kabupaten Magelang dan Kabupaten Kulon Progo berserta stafnya yang telah membantu dalam pelaksanaan penelitian ini. Ucapan terima kasih, kami sampaikan juga kepada semua pihak yang telah aktif membantu dalam pelaksanaan penelitian ini. Daftar Pustaka 1. Blondine Ch.P Patogenisitas 2 Formulasi (bubuk dan cair) dari Bacillus thuringiensis H-14 Galur Lokal Terhadap Jentik Anopheles aconitus dan Culex quinquefasciatus di dalam Laboratorium. Jurnal Kedokteran YARSI. 11(3): Blondine Ch. P, Widyastuti U, Widiarti, Sukarno, Subiantoro.1998/1999. Uji Serologi Isolat Bacillus thuringiensis dan Patogenisitasnya Terhadap Jentik Nyamuk Vektor 3. Buletin Penelitian Kesehatan. 26 (2 &3): Blondine Ch.P Efikasi Formulasi Cair dan Toksisitas Residual dari Galur Lokal Bacillus thuringiensis H-14 dan Vectobac 12 AS (Bt H-14) Terhadap Jentik Anopheles maculatus (penelitian laboratorium). 10(3); Blondine Ch..P. dan Damar T.B Pengendalian Vektor (Larva) Demam Berdarah Dengue, Malaria dan Filariasis Menggunakan Strain Lokal Bacillus thuringiensis varietas israelensis. Jurnal Kedokteran YARSI. 8(1), Chilcott, C.W, Wigley P.J Technical note an Improved Method for Differential Staining of Bacillus thuringiensis crystals. Letters in Applied Microbio logy. 7: DepKes RI WHO. Pencegahan dan Penanggulangan Penyakit Demam Dengue dan Demam Berdarah Dengue, Jakarta. 8. Finney, D.J., Probit Analysis, 3rd, ed., Cambridge Univ. Press. London. 9. Kemas, A.H Rancangan Percobaan Teori dan Aplikasi. Rajawali Press, Jakarta. 10. Leodegario E. Padua, Michio Ohba, Keio Aizawa The Isolate of Bacillus thuringiensis Serotype 10 with a Highly Preferential Toxicity to Mosquito Larvae, Journal of Invertebrata Pathology. 36: Mulla, M.S., Darwazeh, A.M., C. Aly, Laboratory and Field Studies on New Formulations of Two Microbial Control Agent Mosquitoes. Bull Soc.Vector Ecol. 11(2) : Nasir, M Metode Penelitian, Ghalia Indonesia, Jakarta, Soesanto, Prospek Bacillus thuringiensis dalam Pengendalian Hama, Kumpulan Makalah Seminar Bacillus thuringiensis, Komisi Pestisida, Departemen Pertanian,Jakarta. 14. WHO Data Sheet on the Biologial Control Agent Bacillus thuringiensis serotype H-14. WHO/ VBC/ WHO Informal Consultation of Bacterial Formulations for Cost Effective Vector Control in Ende mic Area. WHO/VBC? Jurnal Vektora Vol. V No. 1, Juni