III. METODE PENELITIAN. Penelitian dilaksanakan pada bulan Oktober - November 2012 di Balai. Besar Pengembangan Budidaya Laut (BBPBL) Hanura -Lampung

Transkripsi

1 24 III. METODE PENELITIAN 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian dilaksanakan pada bulan Oktober - November 2012 di Balai Besar Pengembangan Budidaya Laut (BBPBL) Hanura -Lampung dan Uji Proksimat dilaksanakan di Laboratorium THP Politeknik Negeri Lampung. 3.2 Alat dan Bahan Alat Alat-alat yang digunakan dalam penelitian antara lain, selang dan aerasi, toples ukuran 2 L sebanyak 10 buah, toples ukuran 0,5 L sebanyak 48 buah, mikroskop dan mikrometer, sedgewick rafter cell counts, ph meter, pipet tetes, gelas ukur, DO meter, refraktometer, thermometer, planktonnet, tisu dan kertas saring whatmann Bahan a. Media Kultur Media kultur yang digunakan adalah air laut steril yang berasal dari tandon Laboratorium Zooplankton dan pupuk conwy untuk kultur Nannochloropsis sp. b. Hewan Uji Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah Brachionus plicatilis yang berukuran < 100 µm diperoleh dari kultur di Laboratorium Zooplankton.

2 Pakan Alami B. plicatilis Pakan alami B. plicatilis yang diberikan adalah Nannochloropsis sp tanpa Micro Environmental Stress (MES) pada perlakuan A dan Nannochloropsis sp dengan Micro Environmental Stress (MES) pada perlakuan B, C, dan D. MES yang digunakan berupa salinitas yang dinaikkan dan nitrogen yang diturunkan. 3.3 Prosedur Penelitian Persiapan Penelitian a. Sterilisasi Ruangan Sterilisasi ruangan dilakukan dengan membersihkan ruangan kultur kemudian dipel dengan menggunakan karbol. b. Sterilisasi Alat Sterilisasi dilakukan dengan merebus semua alat yang akan digunakan kemudian semua alat tersebut ditiriskan dan didinginkan. Setelah dingin, semua alat disemprot dengan alkohol 70% di semua permukaan baik bagian luar maupun bagian dalam. c. Sterilisasi Media (Air) Air laut yang akan digunakan merupakan air laut yang telah melewati proses radiasi ultraviolet dan ozonisasi. Kemudian air laut tersebut disterilisasi dengan cara direbus hingga air mendidih selama ± 10 menit. Setelah didinginkan, air laut tersebut disaring dengan menggunakan planktonnet ukuran 0,25 μm. Air laut selanjutnya diaerasi selama 24 jam. Air Laut Ultraviolet Ozonisasi Perebusan

3 Penelitian Pendahuluan Penelitian pendahuluan dilakukan untuk mengetahui cara kultur dan pengukuran morfometri B. plicatilis sehingga ketika penelitian berlangsung sudah terbiasa untuk mengkultur dan mengukur morfometri B. plicatilis. Selama penelitian pendahuluan B. plicatilis diberi pakan Nannochloropsis sp tanpa perlakuan MES yang diberikan sebanyak 2 kali pada pagi hari pukul WIB dan siang hari pukul WIB. Nannochloropsis sp diberikan sebagai pakan B. plicatilis dengan perbandingan 50 sel/ml : 1 ind/ ml. B. plicatilis dimasukkan ke dalam toples volume 2 liter dengan kepadatan 30 individu/ml dan diletakkan di atas rak kultur kemudian diberi aerasi. Selama uji pendahuluan, pertumbuhan B. plicatilis diukur dengan mengukur panjang total serta diameter bagian kepala dan perut B. plicatilis (morfometri). Hasil penelitian pendahuluan disajikan oleh Tabel 3. Tabel 3. Hasil pengukuran parameter morfometri rotifer (Brachionus plicatilis) Hari Ke PT (μm) DB (μm) DK (μm) Keterangan: PT : Panjang Total DB : Diameter Badan DK : Diameter Kepala

4 Rancangan Penelitian Rancangan percobaan selama penelitian terdiri dari 4 perlakuan dan 3 kali ulangan dengan analisis data menggunakan Chi-square. Perlakuan tersebut adalah: Perlakuan A: kultur B. plicatilis dengan pemberian pakan Nannochloropsis sp. yang dikultur dengan salinitas 28 ppt dan nitrogen 100%. Perlakuan B : kultur B. plicatilis dengan pemberian pakan Nannochloropsis sp. yang dikultur dengan salinitas 28 ppt dan nitrogen 50 %. Perlakuan C : kultur B. plicatilis dengan pemberian pakan Nannochloropsis sp. yang dikultur dengan salinitas 38 ppt dan nitrogen 100%. Perlakuan D : kultur B. plicatilis dengan pemberian pakan Nannochloropsis sp. yang dikultur dengan salinitas 38 ppt dan nitrogen 50%. Keterangan: Nitrogen 100% adalah kandungan komposisi NaNO gr (pada pupuk conwy) Nitrogen 50% adalah kandungan komposisi NaNO 3 50 gr (pada pupuk conwy) 3.6 Pelaksanaan Penelitian Selama penelitian B. plicatilis dikultur dengan diberi pakan Nannochloropsis sp dengan MES. B. plicatilis dikultur di dalam toples bervolume 2 liter dengan kepadatan ind/ml. Toples yang digunakan dalam penelitian sebanyak 12 buah toples dan masing-masing toples diberi aerasi.

5 29 Nannochloropsis sp sebagai pakan alami bagi B. plicatilis dikultur di dalam toples bervolume 0,5 liter. Nannochloropsis sp dikultur sebanyak 12 toples perhari selama 4 hari sesuai jumlah perlakuan dan ulangan kultur B. plicatilis. Nannochloropsis sp diberikan sebagai pakan B. plicatilis pada fase stasioner. Uji penadahuluan yg dilakukan sebelum penelitian menunjukkan Nannochloropsis sp yang dikultur mencapai fase stasioner atau fase puncak pada hari ke 4. Oleh karena itu, kultur Nannochloropsis sp yang dikultur pada hari pertama diberikan sebagai pakan B. plicatilis pada hari ke 4, begitu selanjutnya untuk kultur Nannochloropsis sp diberikan pada hari berikutnya. Nannochloropsis sp sebagai pakan alami B. plicatilis diberikan dengan rasio perbandingan 1:50, yaitu 1 individu B. plicatilis diberikan 50 sel Nannochloropsis sp sebanyak 2 kali sehari pada pukul WIB dan pukul WIB. 3.7 Pengukuran Parameter Parameter yang diamati berupa parameter utama dan parameter pendukung Parameter Utama Parameter utama yang diamati pada penelitian terdiri dari: a. Kepadatan B. plicatilis Kepadatan populasi B. plicatilis di dalam media kultur diukur dengan cara sampling kultur B. plicatilis. Sampling dilakukan dengan cara mengaduk air pada toples kultur dengan menggunakan pipet tetes kemudian diambil sampel sebanyak 1 ml pada bagian tengah air yang telah diaduk. Sampel yang telah diambil kemudian dimasukkan ke dalam sedgewick rafter cell counts dan dihitung di

6 30 bawah mikroskop dengan bantuan hand counter. Hasil yang didapat merupakan kepadatan B. plicatilis per ml. Jika B. plicatilis yang akan dihitung terlalu padat, maka dilakukan pengenceran sebelum perhitungan. Pengenceran dilakukan dengan mengambil 1 ml sampel kemudian dimasukkan ke dalam gelas ukur dan ditambahkan air laut hingga 100 ml. Kemudian dimasukkan ke dalam sedgwick rafter cell counts dan dihitung di bawah mikroskop dengan bantuan hand counter. Hasil yang didapat dikali dengan 10. b. Uji Proksimat Lemak Pengujian kandungan lemak B. plicatilis dilakukan dengan uji proksimat. Pengujian dilakukan dengan metode soxlet Parameter Pendukung Parameter pendukung yang diamati adalah kualitas air berupa salinitas, DO, ph, dan suhu. Pengamatan kualitas air ini dilaksanakan untuk mengkondisikan media kultur rotifer dalam keadaan yang optimal. 3.8 Analisis Data Uji Chi Square (χ 2 ) Pengaruh MES pada Nannochloropsis sp yang diberikan pada B. plicatilis terhadap parameter pengamatan dianalisis dengan menggunakan uji Chi Square (χ 2 ). Pada dasarnya, untuk menguji hipotesis yang bersifat tetap. Uji Chi Square (χ 2 ) digunakan karena data merupakan data diskret (satu kali pengambilan sampel), sebaran cenderung tidak normal karena jumlah sampel yang digunakan

7 31 dalam penelitian kurang dari 30. Uji Chi Square (χ 2 ) dilakukan dengan menggunakan formula berikut: χ 2 ( ) di mana: O i = frekuensi pengamatan (observasi) ke-i E i = frekuensi yang diharapkan mengikuti hipotesis yang dirumuskan (frekuensi harapan ke-i) P = notasi untuk banyaknya sifat yang diamati, banyaknya perlakuan yang dicobakan, dan sebagainya. Nilai Chi Square (χ 2 ) yang diperoleh melalui rumus di atas akan menyebar mengikuti sebaran Chi Square (χ 2 ) dengan derajat bebas sama dengan p-1, di mana p = banyaknya sifat atau perlakuan. Metode pengambilan keputusan untuk Chi Square (χ 2 )adalah: Jika χ 2 hitung > daripada χ 2 tabel maka tolak H 0 Jika χ 2 hitung < daripada χ 2 tabel maka terima H 0

8 32 Sterilisasi ruangan Sterilisasi alat Sterilisasi media Kultur Nannochloropsis sp Kultur dengan MES (B, C, D) Kultur tanpa MES (A) Parameter Utama: 1. Uji Proksimat (Kandungan Lemak Total) 2. Kepadatan Sel B. Plicatilis (A, B, C, D) Analisis Data Parameter Pendukung: 1. Salinitas 2. DO 3. ph 4. Suhu Kesimpulan Gambar 7. Skema pelaksanaan penelitian