KUALITAS MIKROBIOLOGIS SUSU SEGAR SEBAGAI BAHAN BAKU KEJU ESTER BR SEMBIRING

Transkripsi

1 i KUALITAS MIKROBIOLOGIS SUSU SEGAR SEBAGAI BAHAN BAKU KEJU ESTER BR SEMBIRING FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2012 i

2 i PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN SUMBER INFORMASI Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi dengan judul Kualitas Mikrobiologis Susu Segar sebagai Bahan Baku Keju adalah karya saya dengan arahan dari pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi mana pun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir skripsi ini. Bogor, Agustus 2012 Ester Br Sembiring B i

3 ii ABSTRACT ESTER BR SEMBIRING. Presence of Microbiological Quality of Fresh Milk as the Raw Material of Cheese. Under direction of DENNY WIDAYA LUKMAN. The aim of this study was to observe microbiological quality of fresh milk as the raw material of cheese. There were 35 milk samples taken from six farms. The total count of microorganisms, Staphylococcus aureus, and coliforms were examined with plate count method (pour plate method). The result showed that the milk samples from the third farm had the highest number of total plate count ( cfu/ml), the fifth farm showed the highest number of Staphylococcus aureus ( cfu/ml), and of coliform ( cfu/ml). Compared to the maximum number of microbial contamination according to the Indonesia National Standard (SNI ), all the samples (100%) from the six farms were higher than the standard. The high number of Staphylococcus aureus and coliform contamination in milk due to the inadequate personal hygiene practices and the poor cleanliness level of water, cages, and equipment. This condition should be considered as a risk of food contamination that can cause disease for the consumers. Keyword: milk, total plate count, coliform, Staphylococcus aureus ii

4 iii RINGKASAN ESTER BR SEMBIRING. Kualitas Mikrobiologis Susu Segar sebagai Bahan Baku Keju. Dibimbing oleh DENNY WIDAYA LUKMAN. Keju mengandung vitamin A, B, dan D, serta berbagai mineral penting bagi tubuh, seperti fosfor dan kalsium. Bagi kaum vegetarian, keju dapat digunakan sebagai pengganti daging karena kandungan proteinnya yang tinggi, yaitu 70 gram keju mengandung jumlah protein yang sama dengan 100 gram daging. Keju secara umum dibuat dari susu sapi, namun dapat juga dibuat dari susu kambing atau domba. Mayoritas keju dibuat dari susu sapi dengan perlakuan panas atau susu pasteurisasi. Namun dalam proses pembuatan keju, tidak hanya proses perlakuan panas yang mempengaruhi kualitas keju, tetapi juga susu sebagai bahan dasar yang mengandung bermacam-macam mikroorganisme, karena susu segar merupakan bahan pangan yang sangat tinggi gizinya, bukan saja bagi manusia dan hewan, tetapi juga mikroorganisme. Mikroorganisme yang terdapat pada susu mempengaruhi proses pembuatan produk olahan susu dan mempengaruhi keamanan serta kualitasnya, seperti Staphylococcus aureus, koliform, dan Clostridium tyrobutyricum. Staphylococcus aureus hidup di lingkungan hewan dan manusia seperti air, makanan, mukosa hidung, dan kulit manusia atau hewan serta secara alami ada dalam susu dan produk susu. Bakteri penyebab mastitis ini dapat menghasilkan enterotoksin yang tahan panas dan enzim proteolitik serta sangat penting dalam kasus keracunan makanan termasuk kualitas keju. Bakteri koliform dapat membuat perusakan tekstur lebih dini dan rasa tidak enak pada keju dan merupakan ancaman kesehatan masyarakat serta digunakan sebagai mikroorganisme indikator (indicator organism) terhadap adanya kontaminasi feses. Penelitian ini bertujuan untuk menguji kualitas mikrobiologis susu segar yang dipasok sebagai bahan baku keju. Selanjutnya, penelitian ini diharapkan dapat menjadi informasi mengenai kondisi sanitasi kandang, peralatan kandang, lingkungan sekitar kandang, dan higine personal pekerja kandang sebagai masukan dalam rangka pembinaan dan pengawasan pangan asal hewan. Penelitian ini dilakukan dengan pengambilan sampel susu segar dari enam peternakan pemasok susu segar sebagai bahan baku keju dengan jumlah yang berbeda dari setiap peternakan. Jumlah keseluruhan sampel susu segar yaitu 35 sampel yang kemudian diuji kualitas mikrobiologisnya terhadap total plate count, koliform, dan Staphylococcus aureus dengan metode hitungan cawan dengan cara tuang (pour plate method). Hasil pengujian jumlah total mikroorganisme ditemukan bahwa peternakan 3 mememiliki jumlah rata-rata tertinggi ( cfu/ml), terhadap koliform peternakan 5 memiliki jumlah rata-rata tertinggi ( cfu/ml), dan terhadap Staphyloccous aures ( cfu/ml). Tingginya cemaran mikroorganisme tersebut terkait dengan kebersihan lingkungan kandang dan peralatan kandang, kebersihan air yang digunakan untuk kebutuhan peternakan, dan praktik higiene personal yang kurang baik. Kontaminasi yang terjadi berhubungan dengan kondisi kebersihan lingkungan kandang, peralatan kandang, kebersihan air yang digunakan untuk keperluan iii

5 iv peternakan, dan kebersihan pekerja kandang yang kurang baik. Hal ini dapat menyebabkan penurunan kualitas susu dan produk susu seperti keju yang dihasilkan serta dapat menimbulkan penyakit bagi konsumen. Kata kunci: susu, jumlah mikroorganisme, koliform, Staphylococcus aureus iv

6 v Hak Cipta milik IPB, tahun 2012 Hak Cipta dilindungi Undang-Undang Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan atau menyebutkan sumbernya. Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan, penelitian, penulisan karya ilmiah, penyusunan laporan, penulisan kritik, atau tinjauan suatu masalah; dan pengutipan tersebut tidak merugikan kepentingan yang wajar IPB Dilarang mengumumkan dan memperbanyak sebagian atau seluruh karya tulis dalam bentuk apa pun tanpa izin IPB v

7 vi KUALITAS MIKROBIOLOGIS SUSU SEGAR SEBAGAI BAHAN BAKU KEJU ESTER BR SEMBIRING Skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan pada Fakultas Kedokteran Hewan FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2012 vi

8 vii Judul Skripsi : Kualitas Mikrobiologis Susu Segar sebagai Bahan Baku Keju Nama : Ester Br Sembiring NIM : B Disetujui Dr. drh. Denny Widaya Lukman, MSi. Ketua Diketahui drh. H. Agus Setiyono, MS, Ph.D, APVet Wakil Dekan Fakultas Kedokteran Hewan Tanggal Lulus: vii

9 viii KATA PENGANTAR Segala puji dan syukur sebesar-besarnya penulis panjatkan kepada Tuhan Yesus Kristus atas segala kasih dan karunia-nya yang senantiasa dilimpahkan sehingga karya ilmiah ini dapat diselesaikan. Judul penelitian yang diambil adalah Kualitas Mikrobiologis Susu Segar sebagai Bahan Baku Keju. Terima kasih penulis ucapkan kepada Bapak Dr. drh. Denny Widaya Lukman, MSi. selaku dosen pembimbing yang telah tanpa lelah dan penuh kesabaran membimbing penulis untuk menyelesaikan penulisan ini dengan baik. Ucapan terima kasih juga disampaikan kepada almarhum Papa, Mama, dan kakakkakak tersayang (Rayland, Mega, dan Andryani) serta keluarga besar atas doa, semangat, dan cinta yang selalu diberikan. Selanjutnya ucapan terima kasih penulis ucapkan kepada teman seperjuangan selama penelitian (Wulan, Yuni, dan Adik). Ucapan terima kasih juga disampaikan kepada Raymond atas waktu, perhatian, dan dukungan yang selalu diberikan. Ucapan terima kasih juga disampaikan kepada teman-teman seangkatan Avenzoar 45 yang sama-sama berjuang dalam menempuh pendidikan di Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor (FKH IPB). Penulis menyadari penulisan karya ilmiah ini tidak luput dari kekurangan, untuk itu penulis sangat berterima kasih atas kritik dan saran-saran yang bersifat membangun dari semua pihak demi kesempurnaan karya ilmiah ini. Semoga karya ilmiah ini bermanfaat. Bogor, Agustus 2012 Ester Br Sembiring viii

10 ix RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Kuala, Sumatera Utara pada tanggal 6 September 1990 dari ayah Sadar Sembiring (almh) dan ibu Suasana Br Purba. Penulis merupakan putri keempat dari empat bersaudara. Pendidikan formal penulis dimulai dari SD Negeri , Kabupaten Karo dan lulus pada tahun 2002, dilanjutkan ke SMP ASISI, Kabupaten Karo dan lulus pada tahun Pendidikan SMA penulis selesaikan di SMA Negeri 1 Tigabinanga, Kabupaten Karo dan lulus pada tahun 2008, kemudian melanjutkan ke Institut Pertanian Bogor (IPB) pada tahun yang sama melalui jalur Undangan Seleksi Masuk Institut Pertanian Bogor. Mayor yang dipilih penulis adalah kedokteran hewan di Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor (FKH IPB). Selama menjadi mahasiswa, penulis aktif di Badan Eksekutif Mahasiswa (BEM) FKH IPB serta Himpunan Minat dan Profesi Ruminansia (Himpro Ruminansia) FKH IPB. Penulis juga aktif sebagai Asisten Praktikum Embriologi dan Genetika Perkembangan, Asisten Praktikum Histologi, dan Asisten Praktikum Radiologi. ix

11 x DAFTAR ISI DAFTAR TABEL DAFTAR LAMPIRAN... PENDAHULUAN... 1 Latar Belakang Tujuan TINJAUAN PUSTAKA... 4 Definisi Susu.. 4 Karakteristik Susu.. 4 Penghitungan Jumlah Total Mikroorganisme 5 Karakteristik Koliform... 7 Karakteristik Staphylococcus aureus. 9 BAHAN DAN METODE Waktu dan Tempat Penelitian Pengambilan dan Jumlah Sampel Bahan dan Alat.. 11 Pengujian Jumlah Total Mikroorganisme.. 11 Pengujian Jumlah Koliform Pengujian Jumlah Staphylococcus aureus. 13 Analisis Data.. 14 HASIL DAN PEMBAHASAN Jumlah Mikroorganisme Jumlah Koliform pada Susu Jumlah Staphyloccus aureus pada Susu Pencegahan dan Pengendalian Staphyloccus aureus SIMPULAN DAN SARAN Simpulan Saran DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN xi xii x

12 xi DAFTAR TABEL Halaman 1 Syarat mutu susu segar menurut SNI Tipe komposisi susu (%) dari beberapa spesies Jumlah rataan hasil pengujian total plate count (TPC) dan persentase cemaran mikroba pada sampel susu pemasok untuk pabrik keju 15 4 Jumlah rataan koliform dan persentase cemaran mikroba pada sampel susu pemasok untuk pabrik keju Jumlah rataan Staphyloccous aureus dan persentase cemaran mikroba pada sampel susu pemasok untuk pabrik keju. 22 xi

13 xii DAFTAR LAMPIRAN Halaman 1 Hasil uji total plate count, koliform, dan Staphylococcus aureus dari sampel susu segar. 35 xii

14 1 PENDAHULUAN Latar Belakang Tahun 1998 Indonesia adalah satu-satunya negara di Asia Tenggara yang menghasilkan susu segar dengan jumlah hampir 1 juta kg per hari. Tahun 2009 produksi susu peternakan sapi perah di Indonesia mencapai 19 juta liter dalam setahun (BPSRI 2009). Namun konsumsi susu per kapita per tahun masyarakat Indonesia masih tergolong rendah dibandingkan dengan konsumsi masyarakat negara lainnya. Tahun 2010 konsumsi susu per kapita penduduk Indonesia hanya mencapai 11.9 liter per tahun, sedangkan Thailand 31.7 liter, Filipina 22.1 liter, dan India 42.8 liter (Deptan 2010). Kurangnya pengetahuan masyarakat mengenai manfaat susu dapat menjadi salah satu faktor yang menyebabkan rendahnya konsumsi susu di Indonesia. Hal ini mengakibatkan terjadinya kekurangan gizi dan busung lapar, seperti di daerah Nusa Tenggara Barat dan Nusa Tenggara Timur. Hasil survei tahun 2007 menyebutkan 5.4% anak balita di Indonesia mengalami prevalensi gizi buruk dan kurang gizi sebesar 13%. Faktor lain yang mempengaruhi hingga saat ini konsumsi susu menurun di Indonesia yaitu proses pengolahan susu yang kurang optimal dalam cita rasa, karena sebagian orang tidak menyukai mengonsumsi susu asli, serta adanya lactose intolerance pada manusia yang mengakibatkan individu tersebut tidak dapat mengonsumsi susu yang mengandung laktosa (McSweeney 2009). Telah banyak makanan dan minuman diproduksi yang berbahan dasar susu seperti keju, yoghurt, dan produk fermentasi susu lainnya sebagai usaha untuk meningkatkan produksi dan konsumsi susu. Upaya tersebut dapat membantu masyarakat yang tidak menyukai susu asli dapat memperoleh manfaat susu dengan mengonsumsi produk olahan susu (Jakobsen et al. 2011). Di negaranegara berkembang, program untuk meningkatkan produksi susu telah banyak dilakukan tetapi tidak selalu disertai dengan menjaga kebersihan. Hal tersebut dapat menurunkan kualitas susu dan juga produk-produk yang berbahan dasar susu (Elmoslemany et al. 2010).

15 2 Keju mengandung vitamin A, B, dan D, serta berbagai mineral penting bagi tubuh, seperti fosfor dan kalsium (Jay et al. 2005). Bagi kaum vegetarian, keju dapat digunakan sebagai pengganti daging karena kandungan proteinnya yang tinggi, yaitu 70 gram keju mengandung jumlah protein yang sama dengan 100 gram daging (Winarno dan Ivone 2007). Keju secara umum dibuat dari susu sapi, namun dapat juga dibuat dari susu kambing atau domba. Mayoritas keju dibuat dari susu sapi dengan perlakuan panas atau susu pasteurisasi. Susu yang digunakan dalam pembuatan keju secara umum dipanaskan secara pasteurisasi, yaitu 72 C minimal selama 15 detik atau 63 C selama 30 menit. Selain itu juga dapat digunakan susu dengan pemanasan subpasteurisasi yaitu C minimal 15 detik. Jika yang digunakan susu nonpasteurisasi, keju harus dimatangkan (dengan cara diperam) paling sedikit selama 60 hari pada suhu tidak kurang dari 4 C untuk mengendalikan mikroorganisme patogen (Little et al. 2008). Dalam proses pembuatan keju, tidak hanya proses perlakuan panas yang mempengaruhi kualitas keju, tetapi juga susu sebagai bahan dasar yang mengandung bermacam-macam mikroorganisme. Susu segar merupakan bahan pangan yang sangat tinggi gizinya, bukan saja bagi manusia dan hewan, tetapi juga mikroorganisme (Rasolofo et al. 2011). Susu merupakan pangan yang sangat mudah rusak dan mudah terkontaminasi bakteri sehingga susu menjadi tidak dapat diolah lebih lanjut atau tidak layak lagi dikonsumsi oleh manusia (Jay et al. 2005). Secara alami pada susu ditemukan mikroorganisme, tetapi jumlah mikroorganisme bertambah dengan adanya kontaminasi dari tangan dan baju pemerah, kandang, peralatan dalam proses pemerahan susu (ember, lap, saringan), dan penyakit tertentu pada hewan (Jørgensen et al. 2005). Jumlah mikroorganisme dapat meningkat mencapai 100 kali lipat atau lebih dari jumlah mikroorganisme awal saat susu disimpan pada suhu 25 C dalam waktu yang lama. Peningkatan jumlah mikroorganisme tersebut kurang dari sel per ml pada susu yang berasal dari ambing yang sehat (Chye et al. 2004). Kontaminasi bakteri dimulai saat pemerahan dan dapat berkembang menjadi dua kali lipat setiap setengah jam pada suhu 25 C dan ph (Millogo et al. 2010).

16 3 Mikroorganisme yang terdapat pada susu mempengaruhi proses pembuatan produk olahan susu dan mempengaruhi keamanan serta kualitasnya, seperti Staphylococcus aureus, koliform, dan Clostridium tyrobutyricum (Wron 2006). Staphylococcus aureus hidup di lingkungan hewan dan manusia seperti air, makanan, mukosa hidung, dan kulit manusia atau hewan (Vicosa et al. 2010). Bakteri penyebab mastitis ini dapat menghasilkan enterotoksin yang tahan panas dan enzim proteolitik. Bakteri ini merupakan salah satu bakteri yang dapat menimbulkan keracunan makanan (Forsythe 2000). Bakteri koliform dapat merusak tekstur lebih dini dan rasa tidak enak pada keju (Bennet 2005). Bakteri ini sering digunakan sebagai mikroorganisme indikator (indicator organism) terhadap adanya kontaminasi feses. Keberadaan bakteri ini menandakan adanya kemungkinan mikroorganisme enteropatogenik atau toksigenik atau kedua-duanya yang merupakan ancaman kesehatan masyarakat (Altalhi dan Hassan 2009). Melihat banyaknya bakteri yang dapat mempengaruhi kualitas keju serta dapat menimbulkan masalah kesehatan pada masyarakat khususnya bakteri Staphylococcus aureus dan bakteri koliform, maka perlu dilakukan penelitian terhadap susu segar dari peternakan yang memasok pabrik keju. Tujuan Penelitian ini bertujuan untuk menguji kualitas mikrobiologis susu segar yang dipasok sebagai bahan baku keju.

17 4 TINJAUAN PUSTAKA Definisi Susu Susu murni adalah cairan yang berasal dari ambing sapi sehat dan bersih, yang diperoleh dengan cara pemerahan yang benar, yang kandungan alaminya tidak dikurangi atau ditambah sesuatu apapun dan belum mendapatkan perlakuan apapun. Susu segar merupakan susu murni yang tidak mengalami perlakuan apapun kecuali proses pendinginan tanpa mempengaruhi kemurniannya (BSN 2011). Menurut Gustiani (2009), susu segar yang baik adalah susu yang mengandung zat gizi dalam jumlah yang cukup dan seimbang, tidak mengandung atau bersentuhan dengan barang atau sesuatu yang diharamkan, tidak mengandung agen penyebab penyakit seperti mikroba patogen, antibiotik, logam berat, dan pestisida serta tidak dikurangi atau ditambah sesuatu apa pun. Syarat mutu susu segar menurut SNI tentang Susu Segar dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1 Syarat mutu susu segar menurut SNI tentang Susu Segar No Karakteristik SNI 1 Berat jenis (pada suhu 27.5 ⁰ C) minimum g/ml 2 Kadar lemak minimum 3.0 % 3 Kadar protein minimum 2.8 % 4 Kadar bahan kering tanpa lemak minimum 7.8 % 5 Warna, bau, rasa, kekentalan tidak ada perubahan 6 Derajat keasaman ⁰ SH 7 ph Uji alkohol 70% Negatif 9 Jumlah sel somatis maksimum 4 x 10 5 /ml 10 Residu antibiotika Negatif 11 Cemaran mikroorganime a. Total plate count 1 x 10 6 cfu/ml b. Staphyloccous aureus 1 x 10 2 cfu/ml c. Enterobacteriaceae 1 x 10 3 cfu/ml Karakteristik Susu Susu adalah cairan yang disekresikan oleh kelenjar ambing, berfungsi utama sebagai nutrisi yang kompleks untuk pertumbuhan dan perkembangan bayi

18 5 manusia atau hewan yang baru lahir karena zat gizi yang dikandung sangat lengkap dengan perbandingan sempurna seperti karbohidrat, lemak susu, protein dari asam amino, mineral, dan vitamin. Komposisi susu terdiri dari air (87.20%), protein (3.50%), lemak (3.70%), abu (0.70%), bahan kering (12.80%), dan laktosa (4.90%) (Taylor 1995). Karbohidrat susu sapi terdiri dari laktosa yaitu 5% dan hampir konsisten pada semua breed sapi. Protein susu sebagian besar terdiri dari kasein yaitu 80-85%, jika ph susu menurun menjadi 4.6 maka kasein akan berubah menjadi lapisan endapan, bagian cairan endapan tersebut disebut whey. Kandungan lemak pada susu yaitu 3.5-5% dan bervariasi pada setiap breed serta sebagian besar terdiri dari trigliserida (Jay et al. 2005). Susu antar spesies berbeda-beda tipe komposisinya yang juga dipengaruhi oleh status nutrisi, tahap laktasi, umur, interval menyusui, dan kesehatan seperti mastitis dan penyakit lainnya (McSweeny 2009). Tipe komposisi susu (%) dari beberapa spesies dapat dilihat pada Tabel 2. Tabel 2 Tipe komposisi susu (%) dari beberapa spesies (McSweeny 2009) Spesies Bahan Kering Lemak Protein Laktosa Abu Sapi Kambing Domba Kerbau Penghitungan Jumlah Total Mikroorganisme Mikroorganisme merupakan kelompok organisme mikroskopik yang sangat beragam dapat berupa sel tunggal atau himpunan sel seperti bakteri (Sunatmo 2009). Kualitas mikrobiologi pangan dipengaruhi oleh mikroorganimse awal, kondisi pengolahan, dan kontaminasi setelah pengolahan. Mikroorganisme dapat ditemukan pada tanah, air, dan udara. Mikroorganisme dapat ditemukan sebagai flora normal dalam tubuh dan dapat juga digunakan untuk menimbulkan cita rasa dan sifat fisik pada produk olahan susu. Selain itu, mikroorganisme juga dapat menyebabkan kerusakan produk serta pangan yang tercemar oleh mikroorganisme

19 6 patogen atau penghasil toksin dan dapat menjadi wahana transmisi penyakit (Lukman 2009). Pengujian mikrobiologi dilakukan untuk mengetahui ada atau tidaknya risiko yang berbahaya dalam pakan atau produk olahan yang disebabkan oleh mikroorganisme tertentu dan untuk menilai manajemen keamanan pangan serta mutu pangan berdasarkan hazard analysis critical control points (HACCP). Pengujian mikrobiologi meliputi pengujian kuantitatif dengan penghitungan dan pengujian kualitatif dengan mendeteksi ada atau tidaknya mikroorganimse pada susu, produk olahan susu, dan bahan pangan lainnya (Jasson et al. 2010). Salah satu cara pengujian jumlah mikroorganisme pada susu yaitu metode hitungan cawan atau jumlah total mikroorganisme (total plate count). Selain pada susu, pengujian ini juga dapat digunakan pada bahan pangan lainnya seperti daging. Prinsip pengujian ini yaitu jika satu sel bakteri ditumbuhkan pada media agar, maka akan tumbuh menjadi satu koloni yang nampak dengan mata (Lukman 2009). Penghitungan dari pengujian ini yaitu berdasarkan jumlah koloni yang tumbuh di media agar. Pertumbuhan mikroorganisme yang membentuk koloni dapat dianggap bahwa setiap koloni yang tumbuh berasal dari satu sel, maka dengan menghitung jumlah koloni dapat diketahui penyebaran bakteri yang ada pada bahan pangan asal hewan dan hasil olahannya. Pengujian jumlah total mikroorganisme merupakan cara yang paling sensitif dalam menghitung jumlah total cemaran mikroorganisme, karena pada pengujian ini hanya sel yang masih hidup yang dihitung dan dapat digunakan untuk isolasi serta identifikasi mikroba lainnya, khususnya koloni yang tumbuh dari satu sel mikroba dengan penampakan pertumbuhan spesifik. Menurut Widyastika (2008) pengujian jumlah total mikroorganisme juga memiliki kelemahan, yaitu: a. Hasil perhitungan tidak menunjukkan jumlah sel mikroorganisme yang sebenarnya, karena beberapa sel yang berdekatan mungkin membentuk suatu koloni. b. Media dan kondisi yang berbeda mungkin menghasilkan nilai yang berbeda. c. Mikroorganisme yang ditumbuhkan harus dapat tumbuh pada media padat dan membentuk koloni yang kompak dan jelas serta tidak menyebar.

20 7 d. Memerlukan persiapan dan waktu inkhubasi beberapa hari atau hingga pertumbuhan koloni dapat dihitung. Karakteristik Koliform Bakteri koliform adalah bakteri berbentuk batang yang memiliki sifat anaerob fakultatif dan termasuk bakteri gram negatif. Sumber energi untuk pertumbuhan koliform berasal dari oksidasi senyawa organik (Wron 2006). Pertumbuhan bakteri yang bersifat heterotrof ini hanya memakan waktu yang singkat yaitu 15 menit sampai 20 menit. Menurut Supardi dan Sukamto (1999), selang waktu yang dibutuhkan bagi sel untuk membelah menjadi dua kali lipat tergantung pada media, suhu, ketersedian oksigen, dan ph. Koliform termasuk kelompok psikotrofik yang mengalami pertumbuhan minimum pada suhu -10 C, optimum pada suhu C, dan maksimum pada suhu 24 C (Garbutt 1997). Mekanisme untuk mendapatkan energi bakteri yang memiliki flagela peritrikus ini terdapat dua cara, yaitu apabila ada oksigen, energi diperoleh secara respirasi aerob dan apabila tidak ada oksigen maka energi diperoleh secara fermentasi anaerob. Bakteri yang termasuk kelompok koliform yaitu Escherichia coli, Edwarsiella, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Arizona, Providentia, dan Pseudomonas. Koliform dapat dibagi menjadi dua kelompok, yaitu koliform fekal seperti Escherichia coli dan non-fekal seperti Enterobacter aerogenes (Garbutt 1997). Escherichia coli memproduksi indol dan asam di dalam medium glukosa tetapi tidak memproduksi asetoin. Bakteri yang tidak dapat menggunakan sitrat sebagai sumber karbon ini dapat memproduksi karbondioksida dan hidrogen dengan perbandingan 1:1. Bakteri ini berperan dalam sintesis vitamin K serta secara normal ditemukan di dalam saluran pencernaan manusia dan hewan berdarah panas, sehingga sering terdapat dalam feses karena itu disebut bakteri fekal (Wron 2006). Adapun klasifikasi Escherichia coli menurut Songer dan Post (2005) yaitu: Kingdom : Bacteria Filum : Proteobacteria Kelas : Gamma Proteobacteria

21 8 Ordo : Enterobacteriales Famili : Enterobacteriaceae Genus : Escherichia Spesies : Escherichia coli Enterobacter aerogenes memproduksi asam lebih sedikit, membentuk asetoin, tetapi tidak membentuk indol. Bakteri ini memproduksi karbondioksida dan hidrogen dengan perbandingan 2:1 dan dapat menggunakan sitrat sebagai sumber karbon. Enterobacter aerogenes dapat ditemukan di dalam air, limbah dan juga pada saluran pencernaan hewan berdarah panas serta dapat menginfeksi saluran kemih (Sunatmo 2009). Bakteri ini dapat memproduksi gas lebih banyak dari pada Escherichia coli sehingga sering menyebabkan kerusakan susu, keju, dan makanan lainnya. Enterobacter aerogenes ditemukan pada tanaman atau hewan yang telah mati dan sering menimbulkan lendir pada makanan (Winarno 1993). Menurut Supardi dan Sukamto (1999), koliform termasuk bakteri yang dapat mengubah karbohidrat melalui glikolisis. Proses yang tidak mengharuskan adanya oksigen ini merupakan proses perombakan karbohidrat menjadi asam piruvat yang akan diubah lagi menjadi asam laktat melalui fermentasi. Terbentuknya asam laktat tersebut menyebabkan turunnya ph sehingga susu menjadi asam dan menurunkan kualitas susu serta produk berbahan dasar susu. Uji koliform dilakukan sebagai indikasi sanitasi pada proses pengolahan bahan pangan. Adanya jumlah yang besar dari koliform dalam suatu bahan pangan sangat tidak diinginkan dan menandakan sanitasi yang tidak baik. Jumlah koliform dalam susu segar yang diperbolehkan menurut SNI tentang Susu Segar adalah 20 cfu/ml. Karakteristik Staphylococcus aureus Bakteri Staphylococcus aureus merupakan bakteri berbentuk bulat yang terdapat dalam bentuk tunggal, berpasangan, tetrad atau berkelompok seperti buah anggur. Nama dari Staphylococcus sendiri berasal dari bahasa Yunani yang terdiri dari kata staphyle dan coccos, yang berarti seperti kelompok anggur dan berbentuk kokus (bulat), sedangkan nama aureus berasal dari bahasa Latin

22 9 yaitu gold yang berarti bahwa bakteri ini tumbuh dalam koloni besar yang berwarna kuning (Cook dan Cook 2005). Bakteri ini merupakan salah satu penyebab foodborne diseases berupa keracunan makanan (Gaman dan Sherrington 1992). Adapun klasifikasi Staphylococcus aureus menurut Songer dan Post (2005) yaitu: Kingdom : Protista Divisio : Protophyta Kelas : Schizomycetes Ordo : Eubacteriales Famili : Enterobacteriaceae Genus : Staphylococcus Spesies : Staphylococcus aureus Pertumbuhan Staphylococcus aureus dipengaruhi oleh faktor dari kombinasi lingkungan fisik seperti suhu, ph, dan air (Charlier et al. 2009), mempunyai suhu optimum pada C, bahkan beberapa strain dapat tumbuh pada suhu rendah yaitu C dan pada ph dengan ph optimum (Bennet 2005). Bakteri gram positif ini menghasilkan enterotoksin yang tahan panas yang ketahanan panasnya melebihi sel vegetatifnya, serta dilepaskan ke dalam makanan selama bakteri tumbuh dan memperbanyak diri dalam makanan (Jay 1996). Karena itu, walaupun bakteri ini mudah mati dengan pemanasan suhu 66 C selama 10 menit, enterotoksin tersebut masih dapat bertahan pada suhu 100 C selama 30 menit (Cliver dan Riemann 2003). Berdasarkan serologis enterotoksin tersebut dapat dibedakan menjadi tujuh tipe yaitu SEA, SEB, SEC, SEC2, SEC3, SED, dan SEE (Forsythe 2000). Tipe A dan D banyak ditemukan dalam makanan. Batas maksimum Staphylococcus aureus dalam produk keju menurut SNI tentang Susu Segar adalah 1 x 10 2 cfu/ml dengan uji toksin enterotoksin negatif. Staphylococcus aureus umumnya disebarkan oleh para pengelola pangan, selama pengolahan, pemasakan, dan penyiapannya. Sumber kontaminasi Staphylococcus aureus pada susu segar dapat berasal dari lingkungan seperti air, tanah, tanaman, tangan pemerah, kandang, puting, pakaian, peralatan pemerahan, batuk atau bersin, dan rambut manusia (Jørgensen et al. 2005). Makanan yang

23 10 tercemar oleh Staphylococcus biasanya menunjukkan bahwa galur Staphylococcus di dalam makanan yang tercemar sama dengan ada pada tubuh orang yang menangani pangan tersebut (Pelczar dan Chan 2008). Keju yang dibuat dari susu mentah atau kurang baik perlakuannya juga dapat menyebabkan masalah keracunan makanan. Selama periode 5 tahun terakhir, Staphylococcus aureus menyebabkan 5.1% wabah keracunan makanan di Eropa dan di Italia menyebabkan 4 orang meninggal dari 233 wabah yang dilaporkan (Normanno et al. 2005). Upaya pencegahan untuk mengurangi risiko bahaya Staphylococcus aureus yang mencemari bahan pangan, maka pengelola pangan dan peternakan harus memperhatikan higiene personal dengan baik (Gaman dan Sherrington 1992).

24 11 BAHAN DAN METODE Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian dilakukan mulai 23 Februari sampai dengan 11 Maret Sampel susu diambil di peternakan pemasok susu untuk pabrik keju. Pengujian Mikrobiologi dilakukan di Laboratorium Kesehatan Masyarakat Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor, Bogor. Pengambilan dan Jumlah Sampel Sampel susu diambil di tempat penampungan yang berasal dari 6 peternakan pemasok susu untuk pabrik keju dengan jumlah yang berbeda-beda dari setiap peternakan. Sampel diambil dari pemerahan pagi dan sore. Peternakan 1 sebanyak 4 sampel, peternakan 2, 6 sampel, peternakan 3, 8 sampel, peternakan 4, 4 sampel, peternakan 5, 12 sampel, dan peternakan 6, 1 sampel. Jumlah keseluruhan sampel yang diperiksa sebanyak 35 sampel. Volume sampel minimal 500 ml. Setiap sampel dimasukkan ke dalam kantong plastik steril, kemudian kantong plastik diberi label dan disimpan dalam cool box berisi es. Bahan dan Alat Bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu sampel susu sapi, plate count agar (Acumedia 7157A), Vogel Johnson agar (Oxoid CM0641), violet red bile agar (M049S Himedia), buffered pepton water (BPW) 0.1% (Pronadisa Cat ), dan alkohol 70%. Alat yang digunakan adalah kantong plastik sampel steril, cool box, cawan petri (Normax, diameter 10 cm), tabung reaksi (Iwaki Pyrex volume 15 ml), sumbat tabung reaksi, pipet volumetrik ukuran 1 ml, 2 ml, 5 ml, dan 10 ml (Iwaki Pyrex), kertas label, spidol marker, tissue, kain lap, gunting steril, pengocok tabung (Vortex mixer VM-1000), pembakar bunsen, inkubator (Memmert INB 500), dan counter untuk menghitung koloni.

25 12 Pengujian Jumlah Total Mikroorganimse Pengujian jumlah total mikroorganisme menggunakan metode hitungan cawan dengan cara tuang (pour plate method). Sebanyak 1 ml sampel dipindahkan dari 10 0 ke dalam larutan 9 ml BPW 0.1% untuk didapatkan pengenceran Dengan cara yang sama dibuat pengenceran 10-2, 10-3, 10-4, dan Pengujian ini dimulai dari pengenceran 10-3 sampai Selanjutnya dimasukkan sebanyak 1 ml suspensi dari setiap pengenceran ke dalam cawan Petri, kemudian dituang 10 ml sampai dengan 15 ml plate count agar yang sudah didinginkan hingga suhu 45 C pada masing-masing cawan. Suspensi dan plate count agar dihomogenkan dengan cara cawan diputar ke depan dan ke belakang atau membentuk angka delapan dan didiamkan sampai memadat. Kemudian diinkubasikan pada suhu 37 ºC selama 24 jam dengan posisi terbalik. Cawan Petri yang mengandung jumlah koloni 25 sampai dengan 250 dipilih untuk penghitungan koloni. Penghitungan koloni dilanjutkan pada cawan Petri dengan pengenceran yang lebih tinggi bila pada cawan Petri dengan pengenceran terendah berisi < 25 koloni dan atau > 250 koloni. Namun, jika seluruh cawan Petri memiliki jumlah kurang dari 25, dicatat jumlah sebenarnya dari tingkat pengenceran terkecil. Semua koloni yang tumbuh dihitung dalam setiap cawan Petri. Rumus perhitungan jumlah total mikroorganisme: Jumlah total mikroorganisme (cfu/ml) = jumlah koloni x faktor pengenceran * * Faktor pengenceran = Pengujian Koliform Pengujian koliform menggunakan metode hitungan cawan dengan cara tuang (pour plate method). Sebanyak 1 ml sampel dari 10 0 dipindahkan ke dalam larutan 9 ml BPW 0.1% untuk didapatkan pengenceran Dengan cara yang sama dibuat pengenceran 10-2, 10-3, dan Pengujian ini dimulai dari pengenceran 10-2 sampai Selanjutnya dimasukkan sebanyak 1 ml suspensi dari setiap pengenceran ke dalam cawan Petri, kemudian dituang 10 ml sampai

26 13 dengan 15 ml agar violet red bile. Suspensi dan agar violet red bile dihomogenkan dengan cara cawan diputar ke depan dan ke belakang atau membentuk angka delapan dan didiamkan sampai memadat. Setelah agar violet red bile memadat, dituang lagi 3-4 ml agar violet red bile cair 45 ºC-48 ºC (overlay) di atas permukaan agar yang telah memadat sebelumnya dan dibiarkan memadat kembali. Kemudian diinkubasikan pada suhu 37 ºC selama 24 jam sampai dengan 48 jam pada posisi terbalik. Cawan Petri yang mengandung jumlah koloni 25 sampai dengan 250 dipilih untuk penghitungan koloni. Penghitungan koloni dilanjutkan pada cawan Petri dengan pengenceran yang lebih tinggi bila pada cawan Petri dengan pengenceran terendah berisi < 25 koloni dan atau > 250 koloni. Namun, jika seluruh cawan Petri memiliki jumlah kurang dari 25, dicatat jumlah sebenarnya dari tingkat pengenceran terkecil. Koloni berwarna merah keunguan dikelilingi oleh zona merah dengan diameter koloni 0.5 mm. Semua koloni yang tumbuh dihitung dalam setiap cawan Petri. Rumus perhitungan jumlah mikroba sama seperti rumus perhitungan pengujian jumlah total mikroorganisme. Pengujian Staphylococcus aureus Pengujian Staphylococcus aureus menggunakan metode hitungan cawan dengan cara tuang (pour plate method). Sebanyak 1 ml sampel dipindahkan dari 10 0 ke dalam larutan 9 ml BPW 0.1% untuk didapatkan pengenceran Dengan cara yang sama dibuat pengenceran 10-2, 10-3, dan Pengujian ini dimulai dari pengenceran 10-2 sampai Selanjutnya dimasukkan sebanyak 1 ml suspensi dari setiap pengenceran ke dalam cawan Petri, kemudian dituang 10 ml sampai dengan 15 ml Vogel Johnson agar. Suspensi dan Vogel Johnson agar dihomogenkan dengan cara cawan diputar ke depan dan ke belakang atau membentuk angka delapan dan didiamkan sampai memadat. Kemudian diinkubasikan pada suhu 37 ºC selama 24 jam sampai dengan 48 jam pada posisi terbalik. Cawan Petri yang mengandung jumlah koloni 25 sampai dengan 250 dipilih untuk penghitungan koloni. Penghitungan koloni dilanjutkan pada cawan Petri dengan pengenceran yang lebih tinggi bila pada cawan Petri dengan pengenceran

27 14 terendah berisi < 25 koloni dan atau > 250 koloni. Namun, jika seluruh cawan Petri memiliki jumlah kurang dari 25, dicatat jumlah sebenarnya dari tingkat pengenceran terkecil. Koloni Staphylococcus aureus pada Vogel Johnson agar mempunyai ciri khas bundar, licin dan halus, konveks, diameter 2 mm sampai dengan 3 mm, berwarna abu-abu sampai hitam pekat, dikelilingi zona opak, dengan atau tanpa zona luar yang terang (clear zone). Tepi koloni putih dan dikelilingi daerah yang terang. Konsistensi koloni seperti mentega atau lemak jika disentuh oleh ose. Galur non-lipolitik memiliki sifat koloni sama seperti di atas, tetapi tidak dikelilingi zona opak dan zona luar yang terang. Semua koloni yang tumbuh dihitung dalam setiap cawan Petri. Rumus perhitungan jumlah mikroba sama seperti rumus perhitungan pengujian jumlah total mikroorganisme. Analisis Data Hasil pengujian laboratorium terhadap uji jumlah total mikroorganisme, koliform, dan Staphylococcus aureus yang berupa data kualitatif dianalisis secara deskriptif.

28 15 HASIL DAN PEMBAHASAN Jumlah Total Mikroorganisme Jumlah rata-rata mikroorganisme pada sampel susu yang diperiksa adalah cfu/ml pada sampel susu pagi dan cfu/ml pada sampel susu sore. Hal tersebut (100%) melebihi batas jumlah mikroorganisme yang ditetapkan dalam SNI tentang Batas Maksimum Cemaran Mikroorganisme (BMCM) yaitu sebesar cfu/ml. Sampel susu pagi memiliki kandungan mikroorganisme lebih besar dari sampel susu sore. Sampel susu dari peternak 3 menunjukkan jumlah rata-rata mikroorganisme tertinggi dibandingkan dengan sampel susu dari peternak lain. Jumlah rata-rata mikroorganisme pada sampel susu dari masing-masing peternak secara rinci dapat dilihat pada Tabel 3. Tabel 3 Jumlah rataan hasil pengujian jumlah total mikroorganisme dan persentase cemaran mikroba pada sampel susu pemasok untuk pabrik keju Pemerahan Pagi Pemerahan Sore Jumlah Jumlah sampel Peternakan Rataan + simpangan baku sampel yang Rataan + simpangan baku yang (cfu/ml) melebihi (cfu/gml) melebihi BMCM BMCM 1 (n=2,2) (0.%) (0%) 2 (n=4,2) (50.0%) (100%) 3 (n=3,5) (100%) (80.0%) 4 (n=4) (0%) (n=12) (41.7%) (n=1) (0%) - 0 Rata-rata (n=35) (34.6%) (66.7%) BMCM = batas maksimum cemaran mikroba menurut SNI Nomor SNI tentang batas maksimum cemaran mikroorganisme pada susu segar BMCM pada susu segar = 10 6 cfu/ml Rataan nilai pengujian jumlah mikroorganisme yang tinggi pada semua sampel susu yang diperiksa menunjukkan gambaran populasi mikroorganisme yang tumbuh sangat tinggi. Jumlah mikroorganisme yang diperoleh hanya

29 16 merupakan estimasi dan terdapat kemungkinan bahwa jumlah mikroorganisme yang diperoleh lebih banyak dari pada mikroorganisme sesunguhnya (Lukman 2009). Secara normal susu yang baru dikeluarkan dari ambing mengandung mikroorganisme dalam jumlah yang sedikit yaitu berkisar ratusan sampai ribuan cfu/ml. Namun jumlah mikroorganisme akan bertambah dengan adanya kontaminasi yang berasal dari tanah, air, udara, debu, peralatan pemerahan, dan pekerja (Magadan et al. 2010). Rataan jumlah mikroorganisme pada sampel susu pagi lebih tinggi daripada susu sore. Hal tersebut disebabkan oleh waktu antara pemerahan dan penerimaan susu di pabrik keju pada pagi hari lebih lama dari pada susu sore dan susu tidak disimpan pada suhu dingin. Kondisi tersebut mengakibatkan mikroorganisme tumbuh secara cepat dengan melakukan pembelahan sel dari satu sel menjadi dua sel dalam waktu tertentu yang disebut waktu generasi (Lukman et al. 2009). Menurut Hayes dan Boor (2001), sumber kontaminasi mikroorganisme dapat diklasifikasikan menjadi tiga yaitu lingkungan yang meliputi air, tanah, tanaman, dan kandang, tubuh sapi, dan juga peralatan pemerahan. Sumber kontaminasi dari hewan dapat berasal dari puting yang tidak dibersihkan sebelum pemerahan, yaitu meningkatkan jumlah mikroorganisme pada susu mencapai koloni/ml (Sanjaya et al. 2007). Kontaminasi tersebut dapat berupa sedimen susu yang merupakan debris atau reruntuhan kotoran yang bisa melewati saringan susu dan ditunjukkan dengan hasil pemeriksaan jumlah total mikroorganisme yang tinggi. Sumber kontaminasi dari hewan juga dapat berasal dari ambing yang sakit, kondisi tersebut dapat meningkatkan jumlah mikroorganisme pada susu mencapai koloni/ml (Jørgensen et al. 2005). Selain itu, tingginya jumlah mikroorganisme pada sampel susu pagi juga dapat disebabkan adanya kontaminasi udara dalam kandang. Menurut Sanjaya et al. (2007), kontaminasi udara di dalam kandang dapat meningkatkan jumlah mikroorganisme dalam susu sekitar koloni/ml. Sumber kontaminasi mikroorganisme pada susu juga dapat berasal dari peralatan pemerahaan yang kontak dengan susu seperti ember, milk can, tabung penghisap dari mesin pemerahan, milk pipelines, dan bulk tanks. Peralatan pemerahan yang tidak dibersihkan dengan benar dapat meninggalkan residu

30 17 sehingga menjadi media pertumbuhan mikroorganisme mencapai > 10 6 koloni/ml (Hayes dan Boor 2001). Menurut Chambers (2002), kontaminasi mikroorganisme lainnya dapat berasal dari air yang digunakan untuk membersihkan peralatan dan kontainer pengangkut susu. Sumber kontaminasi dapat berasal dari air sumur, danau, dan sungai yang digunakan tanpa mendapat perlakuan terlebih dahulu. Mikroorganisme yang dapat mengontaminasi susu karena penggunaan air yang tercemar yaitu koliform, Clostridium, dan Streptococcus. Anderson et al. (2009) menambahkan bahwa pakan juga dapat menjadi sumber kontaminasi potensial karena beberapa patogen dapat bertahan beberapa bulan pada pakan yang kering seperti Salmonella. Susu segar dapat mengandung mikroorganisme seperti Salmonella sp., Escherichia coli O157, Listeria monocytogenes, Lactobacillus sp., Streptococcus sp., Stapylococcus sp., dan Micrococcus spp. Mikroorganisme tersebut dapat menimbulkan penyakit dan menurunkan kualitas susu yang berakibat perubahan dan penyingkiran susu karena terjadi pengasaman dan penggumpalan susu (Chye et al. 2004). Mikroorganisme yang mengontaminasi susu dikelompokkan menjadi dua, yaitu mikroorganisme patogen dan mikroorganisme pembusuk. Mikroorganisme patogen meliputi Stapylococcus aureus, Escherichia coli, dan, Salmonella sp., sedangkan mikroorganisme pembusuk antara lain adalah Micrococcus sp., Pseudomonas sp., dan Bacillus sp. (Oliver et al. 2005). Mikroorganisme patogen dan apatogen dapat berkembang dalam susu karena susu memiliki kandungan zat gizi yang tinggi dan lengkap. Mikroorganisme patogen dapat menjadi sumber zoonosis dan menimbulkan gangguan kesehatan masyarakat (foodborne illnes) bila mikroorganisme tersebut mengontaminasi susu dan produk berbahan dasar susu. Mikroorganisme apatogen bila mengontaminasi susu dan produk berbahan dasar susu akan menjadi cepat rusak, bau tengik, dan kualitasnya menurun (Sanjaya et al. 2007). Susu segar dapat menjadi sumber terjadinya foodborne illness yang terkait dengan konsumsi susu segar atau tidak dipasteurisasi, susu yang tidak dipanaskan dengan baik atau susu yang tercemar kembali setelah pemanasan. Tahun di Amerika Serikat terjadi 45 wabah foodborne illness dan 1007 orang sakit yang disebabkan mengonsumsi susu yang tidak dipasteurisasi atau keju yang

31 18 dibuat dari susu yang tidak dipasteurisasi. Susu yang tidak dipasteurisasi dan produk berbahan dasar susu yang dibuat dari susu yang tidak dipasteurisasi dapat menimbulkan gangguan kesehatan masyarakat dan kematian, seperti Shiga toksin yang dihasilkan oleh Escherichia coli (Omiccioli et al. 2009). Jumlah Koliform pada Susu Jumlah rata-rata koliform pada sampel susu yang diperiksa adalah cfu/ml pada sampel susu pagi dan cfu/ml pada sampel susu sore. Jumlah tersebut melebihi Batas Maksimum Cemaran Mikroorganisme (BMCM) yang ditetapkan dalam SNI tentang Batas Maksimum Cemaran Koliform pada susu segar yaitu 20 cfu/ml. Sampel susu pagi memiliki jumlah koliform lebih besar dari sampel susu sore. Sampel susu dari peternak 5 menunjukkan jumlah rata-rata koliform tertinggi dibandingkan dengan sampel susu dari peternak lain. Jumlah rata-rata mikroorganisme pada sampel susu dari masing-masing peternak secara rinci dapat dilihat pada Tabel 4. Tabel 4 Jumlah rataan koliform dan persentase cemaran mikroba pada sampel susu pemasok untuk pabrik keju Pemerahan Pagi Pemerahan Sore Jumlah Jumlah sampel Peternakan Rataan + simpangan sampel yang Rataan + simpangan yang baku (cfu/ml) melebihi baku (cfu/gml) melebihi BMCM BMCM 1 (n=2,2) (100%) (100%) 2 (n=4,2) (100%) (100%) 3 (n=3,5) (100%) (100%) 4 (n=4) (100%) (n=12) (100%) (n=1) (100%) - 0 Rata-rata (n=35) (100%) (100%) BMCM = batas maksimum cemaran mikroba menurut SNI Nomor SNI tentang batas maksimum cemaran mikroorganisme pada susu segar BMCM koliform pada susu segar = 20 cfu/ml

32 19 Tingginya rata-rata kontaminasi koliform pada semua sampel susu dapat disebabkan oleh adanya kontaminasi yang berasal dari air yang digunakan dalam peternakan dan kurangnya kebersihan di dalam kandang. Air yang terkontaminasi koliform dapat terjadi karena air terkontaminasi dengan feses hewan atau manusia. Menurut Manning (2010), air yang terkontaminasi koliform merupakan sumber kontaminasi yang paling penting di sebuah peternakan karena bakteri ini dapat bertahan hidup dalam sedimen air selama enam bulan, bahkan dapat bertahan hidup sepanjang musim dingin. Air yang telah terkontaminasi dapat bercampur dengan air tanah dan menjadi sumber penularan ke tanaman dan rumput yang dimakan oleh ternak melalui sistem irigasi serta mengontaminasi sumber air yang berada di sekitar peternakan. Faktor lain yang menyebabkan tingginya jumlah koliform pada semua sampel susu (100%) yaitu jarak peternakan yang dekat dengan pemukiman penduduk, sehingga meningkatkan penyebaran dan kontaminasi pada air yang berasal dari pembuangan dan penampungan kotoran manusia yang terlalu dekat dengan sumur, danau atau sungai sebagai sumber air (Winarno 1993). Tingginya jumlah koliform pada enam peternakan tersebut menunjukkan tingkat kontaminasi fekal yang tinggi pada susu. Hal ini disebabkan karena bakteri ini merupakan mikroflora normal yang hidup pada saluran pencernaan mahluk hidup berdarah panas dan dapat berada di lingkungan melalui feses (Ayu et al. 2005). Kesalahan dalam pemerahan dan penyimpanan susu yang tidak menggunakan rantai dingin.juga dapat meningkatkan jumlah bakteri di tempat penampungan susu atau kendaraan penampung susu (Altalhi dan Hassan 2009). Escherichia coli sebagai salah satu anggota dari koliform akan tumbuh aktif dalam suhu sekitar 37 C. Organisme ini dapat menyebabkan pembusukan yang cepat pada susu karena mampu melakukan fermentasi laktosa pada suhu sekitar 35 C. Escherichia coli dapat mengakibatkan penurunan kualitas susu dan produk berbahan dasar susu sebagai sumber protein karena mampu mendegradasi protein (Donnenberg 2002). Susu atau produk olahan susu yang terkontaminasi oleh Escherichia coli bila dikonsumsi akan menyebabkan gejala gastritis seperti muntah, diare, dan dapat disertai demam. Escherichia coli O15:H7 merupakan salah satu serotipe dari Escherichia coli yang menghasilkan Shiga toksin. Toksin

33 20 tersebut dapat menimbulkan kerusakan pada lapisan usus, diare berdarah, dan sindrom hemolitik uremik yang ditandai dengan anemia hemolitik, serta gagal ginjal (Johnson 2002). Escherichia coli juga dapat mengontaminasi sayur dan buah-buahan akibat penggunaan manur sebagai pupuk (Bhunia 2008). Menurut Armstrong (2008), saat dalam pencernaan bakteri ini akan melintasi perut dan bagian pencernaan yang pada akhirnya akan masuk pada bagian paling bawah dari saluran gastrointestinal terutama pada bagian hubungan antara ileum dan kolon. Kontaminasi dan infeksi Escherichia coli juga dapat terjadi secara langsung dari manusia ke manusia melalui kontak dengan manusia yang telah terinfeksi. Sebuah penelitian di Bangladesh menemukan 11% dari kontak individu yang terinfeksi dapat menimbulkan infeksi kepada individu lain khususnya anak-anak. Sumber infeksi Escherichia coli dapat berasal dari feses. Menurut Manning (2010), 1 gram feses mengandung 10 juta bakteri. Escherichia coli dalam jumlah sel saja dapat menimbulkan penyakit klinis sehingga praktik kebersihan dan kondisi lingkungan yang tidak sehat dapat menjadi faktor terjadinya penularan. Escherichia coli dapat menimbulkan penyakit intestinal atau ekstraintestinal dari hasil ekspresi multiplikasi faktor virulensi (VFs), yaitu adhesion, toksin, siderophores, dan sistem ekskresi. Faktor-faktor tersebut berperan dalam menurunkan imunitas, menimbulkan inflamasi, dan juga luka pada permukaan saluran pencernaan tetapi tidak berperan dalam proses replikasi (Johnson 2002). Escherichia coli dapat menyebabkan infeksi sistemik (koliseptikemia) dan infeksi pada saluran pencernaan (kolibasilosis enterik). Bakteri ini menyerang secara sistemik melalui aliran darah, paru-paru, dan umbilikal. Tingkat keparahan penyakit akan sesuai dengan rendahnya tingkat gamaglobulin dalam darah. Infeksi pada saluran pencernaan terjadi melalui oral, kemudian berkolonisasi pada usus serta menghasilkan toksin yang dapat menimbulkan diare, gangguan absorbsi pada usus kecil, dan pada mukosa kolon (Atlas 2006). Selain Escherichia coli, anggota dari koliform yang menimbulkan gastritis yaitu Hafnia dan Edwardsiella (Sides 2006).

34 21 Anggota koliform yang lain yang dapat mencemari susu dan menimbulkan kerugian pada peternak yaitu seperti Serratia. Mikroorganisme tersebut dapat menimbulkan warna merah atau merah jambu pada susu, Pseudomnas synxantum menyebabkan susu menjadi kuning dan juga bau yang tidak enak pada lapisan krim, dan Pseudomnas syncyanea dapat menimbulkan warna biru pada susu. Hal ini dapat mengakibatkan penyingkiran terhadap susu (Sanjaya et al. 2007). Selain pada susu, perubahan warna juga dapat terjadi pada produk olahan berbahan dasar susu, karena mikroorganisme tersebut membentuk pigmen yang merubah warna produk berbahan dasar susu seperti keju (Dwidjoseputro 1994). Koliform dapat membuat susu berlendir, tengik, susu pecah, asam, dan menimbulkan bau (Winarno 1993). Hal tersebut membuat susu sebagai bahan keju tidak layak digunakan karena akan menghasilkan keju yang memiliki aroma dan rasa yang tidak baik serta menimbulkan rekahan atau lubang pada keju. Hal tersebut terjadi karena koliform dapat memfermentasi laktosa menjadi asam dan gas (Ayu et al. 2005). Kadar koliform pada air yang digunakan untuk usaha peternakan maksimal 1 cfu/ml atau dapat dilakukan klorinasi dengan konsentrasi 50 ppm bila jumlah koliform melebihi batas tersebut (Effendi 2003). Menurut Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 416 Tahun 1990 tentang Syarat-Syarat dan Pengawasan Kualitas Air, air bersih merupakan air yang digunakan untuk keperluan seharihari, memenuhi syarat kesehatan, dapat diminum bila sudah dimasak, maksimal total koliform adalah 0 MPN/100 ml, dan fekal koliform maksimal 0 MPN/100 ml. Jumlah Staphylococcus aureus pada Susu Jumlah rata-rata Staphylococcus aureus pada sampel susu yang diperiksa adalah cfu/ml pada sampel susu pagi dan cfu/ml pada sampel susu sore, yang berarti melebihi jumlah Batas Maksimum Cemaran (BMCM) yang ditetapkan SNI tentang Batas Maksimum Cemaran Staphylococcus aureus pada susu segar yaitu 100 cfu/ml. Sampel susu pagi memiliki jumlah Staphylococcus aureus lebih besar daripada sampel susu sore. Sampel susu dari peternak 5 menunjukkan jumlah rata-rata Staphylococcus aureus tertinggi dibandingkan dengan sampel susu dari peternak lain. Jumlah rata-rata

35 22 mikroorganisme pada sampel susu dari masing-masing peternak secara rinci dapat dilihat pada Tabel 5. Tabel 5 Jumlah rataan Staphylococcus aureus dan persentase cemaran mikroba pada sampel susu pemasok untuk pabrik keju Peternakan Pemerahan Pagi Rataan + simpangan baku (cfu/ml) Jumlah sampel yang melebihi BMCM Pemerahan Sore Rataan + simpangan baku (cfu/gml) Jumlah sampel yang melebihi BMCM 1 (n=2,2) (100%) (100%) 2 (n=4,2) (100%) (100%) 3 (n=3,5) (100%) (100%) 4 (n=4) (100%) (n=12) (100%) (n=1) (0%) - 0 Rata-rata (n=35) (96.1%) (100%) BMCM = batas maksimum cemaran mikroba menurut SNI Nomor SNI tentang batas maksimum cemaran mikroorganisme pada susu segar BMCM Staphyloccus aureuspada susu segar = 10 2 cfu/ml Kontaminasi Staphylococcus aureus yang tinggi pada sampel susu dapat disebabkan adanya kontaminasi yang berasal dari pekerja, sehingga bakteri ini bertambah jumlahnya dan menimbulkan kontaminasi pada susu. Rataan jumlah mikroorganisme pada sampel susu pagi lebih tinggi daripada susu sore. Hal tersebut disebabkan oleh waktu antara pemerahan dan penerimaan susu di pabrik keju pada pagi hari lebih lama dari pada susu sore, dan susu tidak disimpan pada suhu dingin. Kondisi tersebut mengakibatkan mikroorganisme tumbuh secara cepat dengan melakukan pembelahan sel dari satu sel menjadi dua sel dalam waktu tertentu yang disebut waktu generasi (Lukman et al. 2009). Tingginya kontaminasi Staphylococcus aureus pada semua sampel susu dapat disebabkan kurangnya higiene personal pekerja saat melakukan pemerahan, seperti pemerah tidak mencuci tangan sebelum melakukan pemerahan atau mencuci tangan tidak menggunakan sabun. Menurut Cretenet et al. (2011), keberadaan Staphylococcus aureus pada susu dan produk susu menunjukkan