Elin Yulinah S., Joseph I. Sigit, Nurul Fitriyani Kelompok Keahlian Farmakologi, Farmasi Klinik, Sekolah Farmasi, Institut Teknologi Bandung, Bandung

Transkripsi

1 Efek Antiagregasi Platelet Ekstrak Etanol Buah Mengkudu (Morinda citrifolia L.), Rimang Jahe Merah (Zingiber officinale var. Sunti Val.) dan nya ada Mencit Jantan Galur Swiss Webster Elin Yulinah S., Joseh I. Sigit, Nurul Fitriyani Kelomok Keahlian Farmakologi, Farmasi Klinik, Sekolah Farmasi, Institut Teknologi Bandung, Bandung Abstract Antilatelet aggregation effect of noni fruits (Morinda citrifolia L.) and ginger (Zingiber officinale var. Sunti Val.) ethanol extract and its combination has been investigated in Swiss Webster mice. The test substances were given orally during the eriod of 28 days. Antilatelet aggregation effect was tested by measuring bleeding time, coagulation time, and decreasing lasma absorbance to observe latelet aggregation activity before and after addition of ADP as latelet aggregation inducer. Based on the inhibition of lasma absorbance decrease, noni fruits extract at a dose of 100 body weight, ginger extract at a dose of 50 body weight, combination of noni fruits at a dose of 100 body weigfht and ginger extract at dose of 50 body weight as well as combination of each 50 and 25 body showed the effect of latelet aggregation inhibition of % (=0.028); % (=0.020); % (=0.033); and % (=0.016) resectively. The test substances above increased bleeding time of % (<0.001); % (=0.009); % (= 0.003); % (=0.010) resectively and increased coagulation time of % (=0.049); % (=0.035); % (=0.017) and % (=0.010) resectively. There were no significantly differences among the combination extract of 1 dosage each ; of ½ dosage each; and single dosage of the extract in increasing bleeding time, coagulation time, and inhibition of latelet aggregation. Keywords: Antilatelet aggregation, ginger, noni fruits, ADP. Pendahuluan Jahe merah dengan nama latin Zingiber officinale Rosc. Var Sunti Val banyak digunakan dalam camuran jamu dan bahan obat. Jahe merah mengandung minyak atsiri, gingerol, zingerol, shogaol, gingediol, gingerdion, casaisin. Minyak atsirinya mengandung alfa dan beta inen, kumen, kamfen, mirsen, limonen, sineol, beta felandren, -simen, sitral, linalool, borneol, bornil asetat, geraniol, zingiberen, zingiberenol dll. Jahe digunakan masyarakat sebagai ereda sakit keala, menghilangkan bengkak, mengatasi sakit ada menstruasi, antiemetik, diuretik, stimulan, karminatif obat diare ada kolera, disentri dan emenagogum. 1, 2 Buah mengkudu (Morinda citrifolia Linn.) digunakan masyarakat untuk eluruh haid, enurun demam, eluruh dahak, obat batuk, mengatasi hati yang bengkak, obat tuberkulosis, tonikum, enurun tekanan darah, obat kencing manis, disentri, sebagai encahar, astringen, dll. Kandungan kimia mengkudu adalah morindin, 1

2 JKM. Vol.7 No.2 Februari 2008: - morindon, rokseronin, rubidin, skooletin, asam oktanoat, kalium, vitamin C, vitamin A, terenoid, aserulosid, asam karilat, asam karoat dan rutin. 2, 3 Baik jahe merah mauun mengkudu digunakan untuk bengkak atau radang yang akan berengaruh keada hambatan sintesis tromboksan A2 yang bereran ada agregasi latelet. Platelet terlibat dalam reaksi imunologi dan inflamasi dalam reson terhada luka ada embuluh darah. Agregasi latelet memberi banyak keuntungan bagi organisme, seerti ada hemostasis, fagositosis benda asing, interaksi dengan virus, bakteri atau komleks antigenantibodi. Akan tetai, di lain ihak, agregat latelet daat berbahaya, contohnya adalah trombosis dan embolisme yang daat meningkatkan faktor risiko terjadinya enyakit kardiovaskular. 4 Jika terjadi kerusakan ada embuluh darah maka latelet yang bersirkulasi akan berinteraksi satu sama lain membentuk trombus latelet yang meruakan suatu agregat agregat latelet yang teraktivasi. Agregat latelet ini akan menutui luka/ kerusakan yang terjadi ada embuluh kecil dan mencegah terjadinya kebocoran darah. 5 Pada saat latelet terstimulasi untuk menemel ada dinding embuluh darah maka akan terjadi eleasan isi granul yang akan meningkatkan agregasi dengan latelet yang lain. Agregasi juga ditingkatkan dengan adanya eleasan faktor von Willebrand dari sel endotelial yang meruakan senyawa engikat untuk resetor membran latelet yaitu glikorotein GIb dan fibrinogen. Platelet yang teraktivasi juga meleaskan adenosin difosfat (ADP) dan tromboksan A2 yang akan menarik latelet sehingga menyebabkan erubahan bentuk latelet, eleasan isi granul dan agregasi lebih jauh. Platelet yang teraktivasi selanjutnya akan meleaskan faktor yang menyebabkan terjadinya embekuan darah sehingga terjadi embentukan trombus komleks ada dinding embuluh darah. Trombin sendiri daat menstimulasi lebih jauh eleasan granul latelet dan menarik latelet yang baru. Protein membran latelet GIIb dan GIIIa selanjutnya berinteraksi dengan fibrin dan fibrinogen, suatu roses yang akan menstabilkan trombus yang terbentuk. 5,6 Trombus atau bekuan darah tidak akan menemel ada dinding embuluh darah, tetai terus terbawa atau mengalir dalam aliran darah samai lasmin mencernanya atau tersangkut dalam suatu embuluh darah kecil. Trombus yang menjadi sumbatan dalam embuluh darah disebut embolus dan sering merintangi sirkulasi sehingga terjadi iskhemia dan kerusakan jaringan. Perintangan tersebut disebut tromboemboli. Tromboemboli meruakan salah satu enyebab sakit dan kematian yang banyak terjadi. Kelainan ini sering meruakan enyulit atau menyertai enyakit lain misalnya gagal jantung, diabetes melitus, varises vena dan kerusakan arteri. 4,7 Data statistik WHO dalam laoran kesehatan dunia tahun tahun 2003 menunjukkan bahwa 16,7 juta atau sekitar 29,2% dari total kematian di seluruh dunia disebabkan oleh enyakit kardiovaskular. 8 Senyawa antilatelet seerti asetosal terbukti daat mengganggu roses terjadinya agregasi latelet secara in vitro dan meningkatkan waktu erdarahan secara in vivo. Asetosal menginhibisi sintesis rostaglandin 2

3 Efek Antiagregasi Platelet Ekstrak EtanolBuah Mengkudu (Morinda citrifolia L.), Rimang Jahe Merah (Zingiber officinale var. Sunti Val.) dan nyaada Mencit Jantan Galur Swiss Webster (Elin Yulinah S., Joseh I. Sigit, Nurul Fitriyani) tromboksan A2 melalui asetilasi enzim siklooksigenase sehingga tidak terjadi erubahan bentuk latelet yang mengakibatkan eleasan isi granul dan agregasi. Dosis lazim asetosal adalah mg. 9 Beberaa tanaman herbal yang sering digunakan oleh masyarakat untuk mencegah tromboemboli diantaranya jahe merah dan mengkudu. Penelitian ini bertujuan untuk menguji adanya efek antiagregasi latelet ada ekstrak etanol jahe merah dan ekstrak etanol buah mengkudu serta ingin meneliti aakah dalam kombinasi ekstrak terjadi eningkatan efek. Bahan dan Cara Bahan Mengkudu dieroleh dari kebun di Purwakarta dan jahe merah dari kebun di Pangalengan, air suling, alkohol 70%, natrium sitrat, natrium karboksimetilselulosa, natrium klorida 0,9%, asetosal, ereaksi ADP (Sigma- Aldrich). Alat Pia kailer, mikroiet, tabung sentrifuga (Eendorf), kertas saring, kaas, gunting, alat sentrifuga, jarum oral, sektrofotometer visibel (Sectronic 21-D), restrainer, inset. Hewan Uji Hewan uji yang digunakan adalah mencit jantan galur Swiss Webster berumur 2 3 bulan dan bobot badan g yang dieroleh dari Laboratorium Hewan Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati, Institut Teknologi Bandung. Cara Percobaan Orientasi Dosis Pada orientasi dosis digunakan 6 kelomok yang masing-masing kelomok terdiri dari 3 ekor mencit. Orientasi dosis dilakukan dengan cara memberikan bahan uji, asirin, dan susensi natrium karboksimetilselulosa 0,5% secara oral sehari sekali selama 28 hari berturut-turut. Dosis yang digunakan adalah 50 dan 100 bobot badan untuk setia bahan uji dan 42,25 bobot badan untuk asirin. Parameter yang digunakan yaitu waktu erdarahan yang diukur ada hari ke-7, 14, 21, dan 28 serta enurunan seraan lasma yang diukur ada hari ke-28. Hasil orientasi dosis diolah secara statistik menggunakan uji t-student kemudian diilih dosis yang berbeda bermakna terhada kontrol dan memberikan efek terai yang aling baik untuk digunakan dalam engujian selanjutnya. Pengujian Efek Antiagregasi Platelet. 10 Mencit dibagi menjadi 6 kelomok yang masing-masing kelomoknya terdiri atas 5 ekor mencit. Pengujian dilakukan dengan memberikan bahan uji dengan dosis hasil orientasi secara oral sekali sehari selama 28 hari berturut-turut. ekstrak diberikan ada dosis dengan erbandingan 1 dosis : 1 dosis dan ½ dosis : ½ dosis dari dosis tunggal setia bahan uji. Parameter yang digunakan yaitu waktu endarahan, waktu koagulasi, dan enurunan seraan lasma yang diukur ada hari ke-7, 14, 21, dan 28. Hasil uji diolah secara statistik menggunakan uji t-student. Pengukuran Waktu Pendarahan. 10 Ujung ekor mencit dilukai, darah yang keluar disera dengan kertas enjera. Interval waktu antara timbulnya tetes ertama darah hingga darah berhenti mengalir adalah waktu erdarahan. Pengukuran Waktu Koagulasi. 10 Ujung ekor mencit dilukai, darah yang keluar disera dengan ia 3

4 JKM. Vol.7 No.2 Februari 2008: - kailer selama 30 detik. Pia kailer diatahkan setia interval 15 detik hingga teramati embentukan benang fibrin ada bagian yang diatahkan, waktu koagulasi ditentukan. Pengukuran Penurunan Seraan Plasma. 10 Darah mencit ditambah dengan natrium sitrat 3,18% disentrifuga selama 15 menit. Plasma darah diambil sebanyak 250 μl lalu ditambah natrium klorida 0,9%. Seraan lasma diukur dengan Sectronic 21-D ada anjang gelombang 600 nm. Seraan lasma diukur kembali setelah enambahan 30 μl larutan ADP 5 μm sebagai enginduksi agregasi latelet dan inkubasi selama 20 menit dalam inkubator kocok suhu 37ºC. Penurunan seraan lasma dihitung dengan menghitung selisih seraan lasma sebelum dan setelah emberian larutan enginduksi. Hasil dan Pembahasan Pada engujian ini terdaat tiga arameter yang diamati, yaitu waktu endarahan, waktu koagulasi, dan enurunan seraan lasma. Waktu erdarahan diamati untuk melihat engaruh bahan uji terhada roses embentukan sumbat hemostatik sementara, yaitu roses hemostasis fase latelet. Waktu dari mulai terjadinya luka samai terbentuknya sumbat hemostatik sementara ada daerah yang luka disebut waktu endarahan. Adanya efek ditunjukkan oleh waktu endarahan yang semakin anjang setelah emberian bahan uji. Pengamatan ada waktu koagulasi bertujuan untuk melihat engaruh bahan uji terhada roses embentukan sumbat hemostatik sekunder, yaitu roses hemostasis fase koagulasi. Selama fase koagulasi, berbagai enzim dan roenzim berinteraksi. Aktivasi ada satu roenzim umumnya membentuk suatu enzim yang mengaktivasi suatu roenzim kedua dan seterusnya dalam suatu reaksi berantai. Tahaan dalam fase koagulasi menyebabkan erubahan fibrinogen yang bersirkulasi menjadi fibrin yang tidak larut dan fibrin menutu ermukaan sumbatan latelet. Platelet dierangka di dalam suatu struktur yang sangat berserabut, membentuk suatu bekuan darah yang menutu secara efektif bagian yang terluka dari embuluh. Adanya efek ditunjukkan oleh waktu koagulasi yang semakin anjang setelah emberian bahan uji. ADP meruakan enginduksi utama untuk agregasi latelet, erubahan bentuk latelet, dan sekresi latelet. ADP dan faktor engaktivasi latelet lainnya dileaskan oleh sel-sel endotelial ada daerah yang luka selama fase vaskular. ADP menyebabkan agregasi latelet melalui engikatan ada resetor rotein yang terdaat ada membran latelet. Platelet yang teraktivasi akan meleaskan isi granul yang akan meningkatkan agregasi dengan latelet yang lain. Aktivitas latelet tersebut daat terlihat dari erubahan seraan lasma yang diukur secara turbidimetri ada anjang gelombang 600 nm. Seraan lasma awal menunjukkan kekeruhan lasma yang mengandung latelet yang belum teragregasi. Setelah emberian ADP, seraan lasma akan menurun karena latelet-latelet dalam lasma mulai membentuk agregat kemudian mengenda sehingga kekeruhan lasma berkurang. Pada obat yang berefek antikoagulan akan menghambat 4

5 Efek Antiagregasi Platelet Ekstrak EtanolBuah Mengkudu (Morinda citrifolia L.), Rimang Jahe Merah (Zingiber officinale var. Sunti Val.) dan nyaada Mencit Jantan Galur Swiss Webster (Elin Yulinah S., Joseh I. Sigit, Nurul Fitriyani) enurunan seraan lasma sehingga enurunannya lebih sedikit. Orientasi dosis dilakukan untuk mendaatkan dosis yang memberikan efek terai yang aling efektif sehingga engujian efek kombinasi daat dilakukan bersamaan dengan engujian efek tunggal dalam kondisi yang sama. 5

6 JKM. Vol.7 No.2 Februari 2008: - Tabel 1 Waktu Pendarahan Mencit ada Orientasi Dosis Waktu Pendarahan (detik) Kel. I II III IV V Ekstrak Mengkudu dosis 50 Mengkudu dosis 100 Jahe merah dosis 50 Jahe merah dosis 100 Pembanding (Asetosal) Kontrol (Sus.Natriun Karboksimetil selulosa 0,5%) ke-0 53,33 5,51 63,67 8,50 47,33 6,51 48,33 12,86 51,67 3,21 56,67 13,87 ke-7 121,33 35,56* 182,33 54,08* 94,33 4,62* 77,00 7,55 128,00 29,14* 56,67 6,81 0,001 0,023 0,116 0,001 0,102 ke ,33 25,89 * 152,33 25,97 * 164,00 40,45 * 127,00 17,78 * 169,67 13,58 * 60,00 9,00 0,005 0,002 0,810 ke ,67 32,15 * 146,33 10,26* 140,67 29,48* 108,67 19,55* 171,67 24,13* 56,67 7,57 0,002 0,002 0,131 ke ,33 29,37* 265,00 26,66* 153,33 5,69* 193,00 44,84* 390,33 62,14* 57,67 9,29 0,001 0,022 0,858 Keterangan : * Berbeda bermakna terhada hari ke-0 ada <0,05 Dosis yang digunakan dalam orientasi dosis meruakan dosis yang lazim digunakan oleh masyarakat dan ada enelitian terdahulu telah terbukti memiliki efek farmakologi. Hasil orientasi dosis menunjukkan ersentase eningkatan waktu endarahan untuk ekstrak mengkudu dosis 50 bb ada hari ke-28 sebesar 208,85 92,23% (=0,058) dan untuk dosis 100 bb sebesar 329,69 86,74% (=0,021). Untuk ekstrak jahe merah, ersentase eningkatan waktu endarahan sebesar 227,25 21,51% (=0,004) ada dosis 50 bb dan 301,53 28,65% (<0,001) ada dosis 100 bb (Tabel 2). Pada arameter enurunan seraan lasma, ersentase erubahan yang terjadi ada ekstrak mengkudu dosis 50 bb dan jahe merah dosis 100 mg kg bb menunjukkan nilai yang tidak berbeda bermakna jika dibandingkan terhada kontrol. Sedangkan untuk ekstrak mengkudu dosis 100 bb dan jahe merah dosis 50 bb menunjukkan nilai yang berbeda bermakna terhada kontrol dengan ersentase erubahan berturut-turut sebesar 47,61 4,12% (=0,001) dan 60,18 13,13% (=0,025) (Tabel 3). Berdasarkan hal-hal tersebut diatas, daat disimulkan bahwa dosis yang akan digunakan dan dikombinasikan lebih lanjut ada engujian efek antiagregasi latelet adalah 100 bb untuk ekstrak 6

7 Efek Antiagregasi Platelet Ekstrak EtanolBuah Mengkudu (Morinda citrifolia L.), Rimang Jahe Merah (Zingiber officinale var. Sunti Val.) dan nyaada Mencit Jantan Galur Swiss Webster (Elin Yulinah S., Joseh I. Sigit, Nurul Fitriyani) mengkudu dan 50 bb untuk ekstrak jahe merah 7

8 JKM. Vol.7 No.2 Februari 2008: - Tabel 2 Persentase Peningkatan Waktu Pendarahan Mencit ada Orientasi Dosis Kel. I II III IV V Ekstrak Mengkudu dosis 50 Mengkudu dosis 100 Jahe merah dosis 50 Jahe merah dosis 100 Pembanding (Asetosal) Kontrol (Sus. Natriun Karboksimetilselulos a 0,5%) ke-7 131,32 78,42 184,06 57,36* 101,86 30,47* 66,55 46,09 146,01 42,34* % Peningkatan Waktu Pendarahan terhada Ke-0 ke-14 ke-21 ke-28 0,073 0,021 0,011 0,069 0, ,34 26,17 * 138,85 19,45 * 257,12 134,41 180,23 99,10 230,35 47,72 * 11,45 35,21 0,011 0,011 0,079 0,085 0,020 Keterangan : * Berbeda bermakna terhada kontrol ada <0,05 73,19 68,52 133,38 41,57* 206,50 106,14 128,12 22,16* 234,40 63,34* 0,152 0,022 0,067 0,014 0, ,85 92,23 329,69 86,74* 227,25 21,51 * 301,53 28,65* 661,63 162,39* 3,43 14,07 0,058 0,021 0,004 0,019 - Tabel 3 Penurunan Seraan Plasma dan Persentase Hambatan Agregasi Platelet ada Orientasi Dosis Kel. I II III IV V Ekstrak Penurunan Seraan Plasma (x 10-3 ) ke-0 ke-28 % hambatan agregasi latelet Mengkudu dosis 50 5,30 1,20 5,00 0,00 0,667 2,78 2,06 0,414 Mengkudu dosis 100 5,70 1,50 3,00 1,00 * 0,015 47,61 4,12 k 0,001 Jahe merah dosis 50 7,70 1,50 3,00 1,00 * 0,034 60,18 13,13 k 0,025 Jahe merah dosis 100 5,70 0,60 4,70 0,60 0,724 17,78 1,92 0,714 Pembanding (Asetosal) 6,70 1,50 1,00 0,00 * 0,023 84,40 3,92 k Kontrol (Susensi Natrium Karboksimetil selulosa 0,5%) 6,00 1,00 5,00 1,00 0,534 16,98 2,87 - Keterangan : * Berbeda bermakna terhada hari ke-0 ada <0,05; k Berbeda bermakna terhada kontrol ada <0,05 8

9 Efek Antiagregasi Platelet Ekstrak EtanolBuah Mengkudu (Morinda citrifolia L.), Rimang Jahe Merah (Zingiber officinale var. Sunti Val.) dan nyaada Mencit Jantan Galur Swiss Webster (Elin Yulinah S., Joseh I. Sigit, Nurul Fitriyani) Hasil engujian efek antiagregasi latelet dengan arameter waktu endarahan menunjukkan adanya eningkatan waktu erdarahan mencit yang bermakna sejak hari ke-7 ada semua kelomok ekstrak uji jika dibandingkan terhada hari ke-0. Akan tetai, eningkatannya cenderung fluktuatif ada setia engukuran (Tabel 4). Sedangkan untuk asetosal yang digunakan sebagai embanding waktu endarahannya selalu meningkat dari engukuran yang sebelumnya. Pengukuran waktu endarahan kelomok kontrol ada hari ke-21 menunjukkan adanya eningkatan yang berbeda bermakna terhada hari ke-0, akan tetai, eningkatan tersebut tidak berbeda dengan kelomok yang lain. Waktu endarahan ekstrak uji yang diberikan secara tunggal memiliki rofil yang miri dengan rofil waktu endarahan ekstrak uji yang diberikan secara kombinasi (ggambar 1). Hal ini mengindikasikan tidak adanya erbedaan antara emberian tunggal dengan kombinasi. Waktu Pendarahan (detik) ke- 35 Mengkudu dosis 100 merah (100 : 50 ) Pembanding (Asetosal dosis 42,25 ) Jahe merah dosis 50 merah (50 : 25 ) Kontrol (CMC-Na) Gambar 1 Grafik rofil waktu endarahan mencit setelah diberi bahan uji. 9

10 JKM. Vol.7 No.2 Februari 2008: - Tabel 4 Waktu Pendarahan Mencit ada Pengujian Efek Antiagregasi Platelet Kel I II III Ekstrak Mengkudu dosis 100 Jahe merah dosis 50 merah (100 : 50 ) ke-0 54,98 1,82 61,10 19,21 50,06 17,69 ke-7 157,00 20,92* 157,84 32,71* 169,38 47,50* Waktu Pendarahan (detik) ke-14 ke-21 0,007 0, ,66 15,13* 202,8 38,71* 261,68 14,98* 0, ,74 29,49* 225,29 56,38* 247,90 67,42* 0,006 0,004 ke ,74 28,82* ,59* 310,72 41,10* IV merah (50 : 25 ) 58,42 16,02 152,52 19,96* 240,54 33,10* 0, ,76 58,53* 0, ,16 10,59* V Pembanding (Asetosal) Kontrol (Sus. Natrium Karboksimetilselulos a 0,5%) 56,34 6,76 50,62 8, ,25* 57,48 10,41 0,002 0, ,26 8,97* 52,86 7,16 0, ,32 74,30 * 51,80 7,38* 0, ,20 50,89 * 54,56 6,51 0,337 Keterangan : * Berbeda bermakna terhada hari ke-0 ada <0,05 Waktu endarahan mencit ada setia engukuran kemudian dihitung ersentase eningkatannya terhada waktu endarahan sebelum diberi bahan uji. Pada hasil erhitungan, ersentase eningkatan tertinggi ditunjukkan oleh kombinasi ekstrak mengkudu dan jahe merah dengan dosis masing-masing 100 dan 50 bb yaitu sebesar 552,03 182,23% (=0,003), bila dibandingkan terhada asetosal (811,38 140,66, <0,001), nilai tersebut relatif lebih rendah (Tabel 5). Hal ini mengindikasikan efek eningkatan waktu endarahan yang dihasilkan oleh semua ekstrak uji tidak sebesar efek yang dihasilkan oleh asetosal. Setelah diuji statistik, ersentase kenaikan waktu endarahan mencit ada emberian ekstrak mengkudu dan jahe yang diberikan secara tunggal dan kombinasi tidak menunjukkan adanya erbedaan yang bermakna. Parameter yang selanjutnya diukur adalah waktu koagulasi yang menggambarkan roses hemostasis sekunder. Hasil engujian dengan arameter waktu koagulasi menunjukkan adanya eningkatan waktu koagulasi mencit ada semua kelomok ekstrak uji setelah emberian selama 28 hari (Tabel 6). 10

11 Efek Antiagregasi Platelet Ekstrak EtanolBuah Mengkudu (Morinda citrifolia L.), Rimang Jahe Merah (Zingiber officinale var. Sunti Val.) dan nyaada Mencit Jantan Galur Swiss Webster (Elin Yulinah S., Joseh I. Sigit, Nurul Fitriyani) Tabel 5 Persentase Peningkatan Waktu Pendarahan Mencit ada Pengujian Efek Antiagregasi Platelet % Peningkatan Waktu Pendarahan terhada ke-0 Kel. Ekstrak ke ke-7 ke-14 ke I II III IV Mengkudu dosis 100 Jahe merah dosis 50 mengkudujahe merah (100 : 50 ) mengkudujahe merah (50 : 25 ) 185,84 39,83* 189,10 145,52 236,66 48,20* 177,81 82,75* 0,054 0, ,10 23,69* 262,61 133,22* 445,36 128,36* 360,34 227,11* 0,012 0,001 0, ,82 49,39* 309,37 171,02* 431,05 222,73* 369,92 230,73* 0,016 0,012 0, ,83 42,36* 409,40 190,69* 552,03 182,23* 441,67 209,46* 0,009 0,003 0,010 V Pembanding (Asetosal) 228,90 61,78* 0, ,27 67,85* 584,18 96,21* 811,38 140,66* Kontrol (Sus.Natrium Karboksimetilselulosa 0,5%) 13,64 9,72-5,14 10,73-4,73 23,54-9,18 15,84 - Keterangan : * Berbeda bermakna terhada kontrol ada <0,05 Kel. I Tabel 6 Waktu Koagulasi Mencit ada Pengujian Efek Antiagregasi Platelet Waktu Koagulasi (detik) Ekstrak ke- ke-0 7 ke-14 ke-21 ke-28 Mengkudu dosis ,38 10,57 59,06 5,72* 0,026 62,66 4,80 * 0,021 59,76 10,29 0,201 64,24 5,86 * 0,028 II Jahe merah dosis 50 47,00 8,52 62,18 12,48* 0,033 54,98 13,07 0,351 57,94 11,20 0,151 69,10 13,63 * 0,014 III merah 49,32 (100 : 4,84 50 ) 61,54 12,21* 0,012 59,28 12,93 0,202 53,00 9,34 0,549 68,38 8,07 * 0,007 IV merah 43,26 (50 : 9,68 25 ) 58,04 6,80* 0,027 58,36 6,20 * 0,048 58,82 10,57 0,116 66,58 4,56 * 0,001 V Pembanding (Asetosal) 43,26 6,85 58,98 5,35 * 0,019 58,70 6,28 * 0,039 65,04 14,53 0,051 79,10 10,15 * 0,003 Kontrol (Sus. Natrium Karboksimetilselulos a 0,5%) 43,18 2,29 43,36 6,91 0,775 43,88 2,40 0,735 Keterangan : * Berbeda bermakna terhada hari ke-0 ada <0,05 48,88 8,87 0,226 46,88 4,66 0,092 11

12 JKM. Vol.7 No.2 Februari 2008: - Waktu Koagulasi (detik) ke- 35 Mengkudu dosis 100 merah (100 : 50 ) Pembanding (Asetosal dosis 42,25 ) Jahe merah dosis 50 merah (50 : 25 ) Kontrol (CMC-Na) Gambar 2 Grafik rofil waktu koagulasi mencit setelah diberi bahan uji. Hal ini menunjukkan adanya efek antikoagulan ada semua ekstrak uji. Persentase tertinggi ditunjukkan oleh ekstrak jahe merah dosis 50 bb yaitu sebesar 69,10 13,63% (=0,014). Pada Gambar 2 daat dilihat rofil waktu koagulasi semua kelomok ekstrak. Pemberian ekstrak secara tunggal dan kombinasi memiliki rofil yang berbeda, meskiun demikian, ada hari ke-28 semua kelomok ekstrak menunjukkan nilai yang berdekatan. Pada arameter waktu koagulasi ini, dihitung ula ersentase eningkatan waktu koagulasi. Pada hasil erhitungan terlihat bahwa semua bahan uji menunjukkan ersentase eningkatan yang berbeda bermakna terhada kontrol (Tabel 7). Jika dibandingkan dengan ersentase eningkatan waktu endarahan, maka ersentase eningkatan waktu koagulasi tidak sebesar ersentase eningkatan waktu endarahan. Hal ini menunjukkan bahwa kemungkinan semua ekstrak uji lebih memengaruhi roses-roses yang terjadi ada hemostasis rimer dariada hemostasis sekunder. Pada hasil engukuran seraan lasma setelah emberian ekstrak uji sehari sekali selama 28 hari berturutturut, terlihat bahwa enurunan seraan lasma semua kelomok ekstrak lebih kecil ada setia engukuran dibandingkan terhada enurunan seraan ada kelomok kontrol yang berarti ekstrak uji daat mencegah terjadinya agregasi latelet (Tabel 8 dan Gambar 3). 12

13 Efek Antiagregasi Platelet Ekstrak EtanolBuah Mengkudu (Morinda citrifolia L.), Rimang Jahe Merah (Zingiber officinale var. Sunti Val.) dan nyaada Mencit Jantan Galur Swiss Webster (Elin Yulinah S., Joseh I. Sigit, Nurul Fitriyani) Tabel 7 Persentase Peningkatan Waktu Koagulasi Mencit ada Pengujian Efek Antiagregasi Platelet % Peningkatan Waktu Koagulasi terhada ke-0 Kel Ekstrak ke- ke ke-7 14 ke I II III IV Mengkudu dosis 100 Jahe merah dosis 50 merah (100 : 50 ) merah (50 : 25 ) 24,36 29,99 37,97 45,84 26,15 30,13 38,46 28,03* 0,126 0,124 0,109 0,028 30,04 20,22* 20,41 37,92 21,57 30,02 41,72 41,50 0,033 0,347 0,227 0,099 25,57 38,24 23,93 19,14 9,21 26,79 44,02 51,90 0,533 0,428 0,793 0,272 33,52 22,55 * 48,56 29,26 * 39,40 18,71* 58,42 25,85* 0,049 0,035 0,017 0,010 V Pembanding (Asetosal) Kontrol (Sus. Natrium Karboksimetilselulos a 0,5%) 39,09 24,73* 0, ,05 27,88* 2,01 9,95 0,038-49,67 14,78* 13,34 20,95 0,015-86,34 34,83 * 8,53 8,52 0,006 - Keterangan : * Berbeda bermakna terhada kontrol ada <0, Penurunan Seraan Plasma ke- 35 Mengkudu dosis 100 merah (100 : 50 ) Pembanding (Asetosal dosis 42,25 ) Jahe merah dosis 50 merah (50 : 25 ) Kontrol (CMC-Na) Gambar 3 Grafik rofil enurunan agregasi latelet dengan metode enambahan ADP 13

14 JKM. Vol.7 No.2 Februari 2008: - Kel I II III IV Tabel 8 Penurunan Seraan Plasma Darah Mencit ada Pengujian Efek Antiagregasi Platelet Penurunan Seraan Plasma (x10-3 ) Ekstrak ke-0 ke-7 ke-14 ke-21 ke-28 Mengkudu dosis 100 Jahe merah dosis 50 4,40 1,50 5,60 1,10 merah 4,60 (100 : 1,10 50 ) merah 5,00 (50 : 25 1,60 ) 4,00 2,00 4,40 1,10 3,40 1,80 4,00 1,00* 0,704 0,070 0,342 0,035 2,60 0,90 2,60 0,50 2,00 0,00 2,60 0,90 0,053 0,001 0,007 0,061 1,40 0,90* 1,60 0,50* 2,00 0,70 1,60 0,50* 0,028 0,019 0,005 1,40 0,50* 1,40 0,90* 1,60 0,50* 1,00 0,70* 0,009 0,006 0,005 0,019 V Pembanding (Asetosal) 4,80 1,10 1,40 0,50* 0,003 1,00 0,70* 0,007 0,40 0,50* 0,003 0,60 0,50* 0,001 Kontrol (Sus. Natrium Karboksimetil selulosa 0,5%) 4,60 0,90 5,60 1,10 0,230 3,40 1,10 0,033 3,80 1,80 0,242 4,40 1,50 0,847 Keterangan : * Berbeda bermakna terhada hari ke-0 ada <0,05 Penurunan seraan lasma ada setia engukuran dicatat, kemudian dihitung ersentase erubahannya terhada enurunan seraan lasma sebelum diberi erlakuan yang menggambarkan hambatan agregasi latelet. Hambatan agregasi latelet ada mencit yang diberi ekstrak mengkudu dosis 100 bb, ekstrak jahe merah dosis 50 bb, kombinasi ekstrak mengkudu dan jahe merah dengan dosis masing-masing 100 dan 50 bb serta 50 dan 25 bb berturut-turut sebesar 66,67 11,79% (=0,028); 72,67 18,62% (=0,020); 63,00 18,27% (=0,033); dan 77,14 19,24% (=0,016) ada hari ke-28 (Tabel 9 dan Gambar 4). Dengan demikian, kombinasi ekstrak mengkudu dan jahe merah dengan dosis masing-masing 50 dan 25 bb daat menghambat agregasi latelet lebih baik dari ada emberian tunggalnya sedangkan kombinasi ekstrak mengkudu dan jahe merah dengan dosis masing-masing 100 dan 50 bb memiliki efek yang lebih rendah dari emberian tunggalnya. Meskiun demikian, tidak terdaat erbedaan yang bermakna antara emberian tunggal dan kombinasi setelah dilakukan uji statistik. 14

15 Efek Antiagregasi Platelet Ekstrak EtanolBuah Mengkudu (Morinda citrifolia L.), Rimang Jahe Merah (Zingiber officinale var. Sunti Val.) dan nyaada Mencit Jantan Galur Swiss Webster (Elin Yulinah S., Joseh I. Sigit, Nurul Fitriyani) Kel. I II III IV Tabel 9 Persentase Hambatan Agregasi Platelet ada Pengujian Efek Antiagregasi Platelet % hambatan agregasi latelet Ekstrak ke-7 ke-14 ke-21 ke-28 Mengkudu dosis 100 Jahe merah dosis 50 5,00 48,45 20,19 18,33* merah 17,00 (100 : 50 68,33 ) merah 10,23 (50 : 25 47,12 ) 0,296 0,049 0,265 0,219 36,67 24,72 53,43 4,80* 54,00 12,99* 41,61 30,76 0,486 0,034 0,034 0,381 63,33 24,72* 71,95 5,71* 53,00 23,11 66,95 10,92* 0,043 0,021 0,097 0,027 66,67 11,79* 72,67 18,62* 63,00 18,27* 77,14 19,24* 0,028 0,020 0,033 0,016 V Pembanding (Asetosal) 70,00 11,06* 0,003 75,33 24,89* 0,009 89,33 15,35* 0,005 88,00 10,95* 0,011 Kontrol (Sus. Natrium Karboksimetilselulos a 0,5%) 0-26,33 19,59-19,00 32, Keterangan : * Berbeda bermakna terhada kontrol ada <0, % hambatan agregasi latelet I II III IV V Kelomok ke-7 ke-14 ke-21 ke-28 15

16 JKM. Vol.7 No.2 Februari 2008: - Gambar 4 Grafik ersentase hambatan agregasi latelet dengan metode enambahan ADP 16

17 Efek Antiagregasi Platelet Ekstrak EtanolBuah Mengkudu (Morinda citrifolia L.), Rimang Jahe Merah (Zingiber officinale var. Sunti Val.) dan nyaada Mencit Jantan Galur Swiss Webster (Elin Yulinah S., Joseh I. Sigit, Nurul Fitriyani) Keterangan : I = Mengkudu dosis 100 bb II = Jahe merah dosis 50 bb III = merah (100 : 50 mg /kg bb) IV = marah (50 : 25 bb) V = Pembanding (Asetosal dosis 42,25 bb) = Kontrol (Susensi Natrium Karboksimetilselulosa 0,5%) Kesimulan Hasil engujian menunjukkan bahwa ekstrak mengkudu dosis 100 bb, ekstrak jahe merah dosis 50 bb, kombinasi ekstrak mengkudu 100 mg/bb dan jahe merah 50 bb serta ekstrak mengkudu 50 dan ekstra jahe merah 25 bb daat meningkatkan waktu endarahan, waktu koagulasi secara bermakna (<0,05). Pada uji anti agregasi latelet dengan dengan mengukur seraan (metode emberian ADP), kombinasi ekstrak mengkudu 100 bb dan ekstrak jahe merah 50 bb tidak menunjukkan erbedaan secara statistik dengan kombinasi ekstrak mengkudu 50 bb dan ekstrak jahe 25 bb serta tidak berbeda dengan masingmasing ekstrak tunggalnya tetai kecenderungan efek lebih besar ada kombinasi ekstrak jahe merah 25 bb dan ekstrak mengkudu 50 bb. Pada enggunaannya daat disarankan emakaian kombinasi ekstrak jahe 25 bb dengan ekstrak mengkudu 50 bb atau ekstrak tunggal masingmasing jahe 50 bb dan ekstrak mengkudu 100 bb. Daftar Pustaka 1. Tang W. Eisenbrand. Chinese Drugs of Plant Origin Chemistry Pharmacology and Use in raditional and Modern Medicine, Berlin: Sringer-Verlag, Perry LM. Medicinal Plant of East and Southeast Asia. Massachusetts: The MIT Press, Saludes MJG, Franzblau SG, Aguinaldo A.M. Antitubercular constituents from the Hexan Fraction of Morinda citrifolia Linn (Rubiaceae). Phytotheray Res. 2002: 16(7): Packham MA. Mustard JF. Platelet Reactions, in: Disorders of Hemostasis, New York: Grune and Stratton, 1971; Martini FH. Fundamental of Anatomy and Physiology, 4 th ed. New Jersey: Prentice Hall International Inc., 1998; Mutschler E. Dinamika Obat, ed. V, terjemahan Mathilda BW. Anna SR., Bandung: Penerbit ITB, 1991;198, Corwin EJ. Handbook of Pathohysiology, 2 nd ed., New York: Liincott Williams & Wilkins, 2000; htt:// ublications/fact/cdv/, diakses tanggal 29 Mei Hardman J. Goodman & Gilman s : The Pharmacological Basis of Theraeutics, 10 th ed, London: Macmillan Publ. Co, 2001; , Vogel H.G. Drug Discovery and Evaluation, Pharmacological Assays, 2 nd ed., Berlin: Sringer, 2002; ,

18 18 18