UJI TOKSISITAS AKUT SENYAWA ASAM 2-(4-(KLOROMETIL)BENZOILOKSI)BENZOAT PADA TIKUS WISTAR JANTAN MARIA ELISABETH 2443012005 PROGRAM STUDI S1 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS KATOLIK WIDYA MANDALA SURABAYA 2015
ABSTRAK UJI TOKSISITAS AKUT SENYAWA ASAM 2-(4- (KLOROMETIL)BENZOILOKSI)BENZOAT PADA TIKUS WISTAR JANTAN Maria Elisabeth 2443012005 Pada penelitian terdahulu telah dilakukan sintesis asam 2-(4- (klorometil)benzoiloksi)benzoat pada mencit yang berpotensi sebagai analgesik. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian dari senyawa tersebut terhadap gejala-gejala toksisitas akut pada perilaku, bobot badan, dan kerusakan organ pada tikus wistar jantan. Penelitian ini juga bertujuan untuk mengetahui harga LD 50 dari senyawa asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat pada tikus, serta senyawa asam asetilsalisilat sebagai pembanding. Senyawa diberikan secara peroral dengan dosis 2000 mg/kg BB. Uji skrining farmakologi hewan coba dilakukan pada menit ke- 0, 30, 60, 240, 7 hari dan 14 hari setelah pemberian suspensi obat. Kemudian hewan coba dipelihara selama 14 hari dengan diamati perubahan bobot badan tiap minggunya. Pada hari ke-15 dilakukan pembedahan untuk diamati dan ditimbang bobot organ vital dari hewan coba. Hasil penelitian menunjukkan asam 2-(4- (klorometil)benzoiloksi)benzoat dan asam asetilsalisilat memiliki LD 50 oral lebih besar dari 2000 mg/kg berat badan tikus. Senyawa asam 2-(4- (klorometil)benzoiloksi)benzoat dan asam asetilsalisilat memberikan gejala toksisitas berupa penipisan lambung. Hal tersebut menunjukkan bahwa asam 2-(4- (klorometil)benzoiloksi)benzoat memiliki gejala-gejala toksisitas berupa penurunan aktivitas motorik, perubahan bobot organ dan kerusakan organ. Kata kunci : asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat, toksisitas akut, tikus (Rattus norvergicus), LD 50, asam asetilsalisilat i
ABSTRACT ACUTE TOXICITY TEST OF 2-(4- (CHLOROMETHYL)BENZOYLOXY)BENZOIC ACID IN MALE WISTAR RAT Maria Elisabeth 2443012005 In the previous research the synthesis of 2-(4-(chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid in mice which were potentially as analgesic had been carried out. This research was conducted to determine the effect of the compound on the symptoms of acute toxicity in behavior, weight loss and damage to organs of male wistar rat. This study also aimed at determining the LD 50 values of the 2-(4-(chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid and acetylsalicylic acid as the reference compound. Each compound was administered orally at the dose of 2000 mg / kg BW of rat. Pharmacology screening test was performed at minute 0, 30, 60, 240, 7 days and 14 days after the administration of drug suspension. Then the animals were kept for 14 days and the changes in body weight each day were observed. On the 15th day, surgery were performed and the weight of vital organs of the experimental animals was recorded. The results showed that 2-(4-(chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid and acetylsalicylic acid had LD 50 more than 2000 mg/kg BW of rat. The compound 2-(4- (chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid and acetylsalicylic acid showed toxicity symptoms such as stomach mucose has diminished. In conclusion 2-(4- (chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid had a symptoms of acute toxicity in motor activity decreased, weight loss and damage to organs. Keywords : 2-(4-(chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid, acute toxicity test, rat (Rattus norvergicus), LD 50, acetylsalicylic acid ii
KATA PENGANTAR Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat rahmat dan karunianya, sehingga skripsi yang berjudul Uji Toksisitas Akut Senyawa Asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat pada Tikus Wistar Jantan sebagai salah satu persyaratan untuk memperoleh gelar sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya dapat diselesaikan dengan baik. Skripsi ini tidak akan selesai tanpa bantuan dan kerjasama dari pihak lain, maka pada kesempatan ini saya ucapkan terimakasih yang sebesar-besarnya disampaikan kepada : 1. Tuhan Yesus Kristus yang selalu menyertai dan membimbing dalam kehidupan saya, keluarga dan hingga terselesaikannya pendidikan saya; 2. Drs. Kuncoro Foe, G.Dip,Sc. Ph.D., selaku Rektor Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya, atas kesempatan yang diberikan untuk menempuh pendidikan di Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya; 3. Martha Ervina, M.Si., Apt., Selaku Dekan Fakultas Farmasi yang selalu mendukung dan memberikan kesempatan kepada saya untuk menempuh pendidikan hingga selesai; 4. Sumi Wijaya, M.Si., Ph.D., Apt. selaku ketua Prodi S1 Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya yang telah membantu dalam kelancaran perkuliahan maupun dalam menyelesaikan skripsi ini; 5. Angelica Kresnamurti, M.Farm., Apt, selaku ketua tim penguji dan Catherine Caroline, M.Si., Apt., selaku tim penguji yang telah memberikan masukan dan saran untuk penyelesaian skripsi ini; iii
6. Wahyu Dewi Tamayanti, M.Sc., Apt., selaku pembimbing yang telah meluangkan waktu dan tenaga untuk memberikan bimbingan, pengarahan dan semangat hingga terselesaikannya skripsi ini; 7. Bambang Soekardjo, Prof. Dr., Apt, SU., selaku pembimbing dan juga kepala laboratorium penelitian Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya yang telah memberikan fasilitas, bantuan dalam penyusunan naskah skripsi ini dan selalu memberikan semangat hingga terselesaikannya skripsi ini; 8. Catherine Caroline, M.Si., Apt. selaku penasehat akademik, terima kasih untuk seluruh saran dan bantuannya selama berada dalam bangku kuliah; 9. Seluruh Dosen Pengajar serta Staf Tata Usaha Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya yang telah mendidik selama menuntut ilmu di bangku kuliah; 10. Bapak Rendy, Bapak Dwi, Bapak Samsul, Bapak Heri, Bapak Anang selaku laboran yang telah membantu dalam peminjaman alat dan pengerjaan skripsi ini; 11. Keluarga saya yang selalu mendukung dan memanjatkan doa untuk keberhasilan dalam menjalani pendidikan di Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala; 12. Seluruh tim proyek toksisitas Ekka, Wahyu Pradipta, Martha T., Ninik, Melan, Christian Casey, Catherine dan Ardian selaku sahabat yang selalu membantu dalam penelitian termasuk dalam penyusunan skripsi ini; 13. Illona Pondaag dan Bryan Kevin Alviano yang selalu membantu dan mendukung saya dalam penelitian hingga terselesaikannya skripsi ini. Akhir kata dengan keterbatasan pengalaman, pengetahuan maupun pustaka yang ditinjau, penulis menyadari kekurangan dalam iv
penulisan naskah skripsi ini. Semoga penelitian ini dapat memberikan sumbangan yang bermanfaaat bagi semua pihak yang membutuhkan, serta penulis sangat mengharapkan kritik dan saran agar naskah skripsi ini dapat lebih disempurnakan penyusunan skripsi ini; Surabaya, 16 Desember 2015 Penulis v
DAFTAR ISI Halaman ABSTRAK... i ABSTRACT.. ii KATA PENGANTAR..... iii DAFTAR ISI... vi DAFTAR TABEL.. ix DAFTAR GAMBAR.. x DAFTAR LAMPIRAN... xi BAB I. PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang Penelitian... 1 1.2. Rumusan Masalah... 4 1.3. Tujuan Penelitian.... 4 1.4. Hipotesis Penelitian... 5 1.5. Manfaat Penelitian... 5 BAB II. TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Tinjauan tentang Asam Salisilat... 6 2.2. Tinjauan tentang Asam Asetilsalisilat (Asetosal)... 7 2.3. Tinjauan Asam 2-(4-(Klorometil)Benzoiloksi)Benzoat 9 2.4. Tinjauan tentang Uji Toksisitas Akut. 11 2.5. Tinjauan tentang LD 50... 11 2.6. Tinjauan tentang Tikus... 13 2.7. Skrining Farmakologi... 14 2.8. Tinjauan tentang Rekristalisasi..... 16 2.9. Tinjauan tentang Uji Kemurnian Senyawa Hasil Sintesis 17 2.9.1. Tinjauan tentang Titik Leleh... 17 2.9.2. Tinjauan tentang Kromatografi Lapis Tipis... 17 2.10. Tinjauan tentang Organ... 19 vi
2.10.1. Tinjauan tentang Lambung... 19 2.11. Tinjauan tentang Indeks Organ Tikus... 22 2.12. Tinjauan tentang Analisa Statistik... 23 BAB III. METODE PENELITIAN 3.1. Bahan, Alat dan Hewan Coba Penelitian... 25 3.1.1. Bahan penelitian 25 3.1.2. Alat penelitian... 25 3.1.3. Hewan coba... 25 3.2. Pelaksanaan Penelitian........ 26 3.2.1. Uji Kemurnian Senyawa... 26 3.2.2. Pengujian Toksisitas Akut... 27 3.3. Pengamatan Makroskopis Organ... 30 3.4. Skema Rancangan Penelitian..... 32 3.4.1. Skema Uji Kemurnian Senyawa... 32 3.4.2. Skema Sintesis Senyawa... 33 3.4.3. Skema Uji Toksisitas Akut... 24 BAB IV. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN 4.1. Hasil Pemeriksaan Organoleptis... 35 4.2. Hasil Uji Kemurnian Senyawa... 35 4.2.1. Hasil Kromatografi Lapis Tipis... 35 4.2.2. Hasil Uji Senyawa Titik Leleh...... 37 4.2.3. Hasil Uji Senyawa dengan Uji IR.... 38 4.3. Hasil Pengamatan Uji Toksisitas Akut.... 40 4.3.1. Hasil Pengamatan Berat Badan.... 40 4.3.2. Hasil Makroskopis Organ Lambung... 42 4.3.3. Hasil Pengamatan Indeks Organ... 45 4.3.4. Hasil Uji Skrining Farmakologi... 46 vii
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Simpulan..... 55 5.2. Saran.... 55 DAFTAR PUSTAKA 56 LAMPIRAN.. 60 viii
DAFTAR TABEL Tabel 2.1. Potensi Ketoksikan Akut Senyawa Uji... 13 2.2. Skoring Keparahan Tukak (Gusdinar et al, 2009)... 20 3.1. Formula Suspensi Senyawa Uji dan Pembanding 28 4.1. Hasil Pemeriksaan Organoleptis Senyawa..... 35 4.2. Hasil KLT Asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat... 36 4.3. Hasil Uji Titik Leleh Asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat 38 4.4. Hasil Uji IR... 39 4.5. Data Penimbangan Bobot Hewan Coba... 41 4.6. Hasil Perhitungan Indeks Tukak... 44 4.7. Hasil Analisa Statistik Indeks Organ... 46 4.8. Data Skrining Farmakologi Kelompok Kontrol... 47 4.9. Data Skrining Farmakologi... 49 4.10. Data Skrining Farmakologi Kelompok Asetosal... 51 ix
DAFTAR GAMBAR Gambar Halaman 2.1. Struktur Asam Salisilat... 6 2.2. Struktur Asam Asetilsalisilat... 7 2.3. Struktur 2-(4(klorometil)benzoiloksi)benzoat... 9 2.4. Anatomi Lambung (Despopoulos and Silbernagl, 2003) 19 2.5. Keadaan Lambung... 20 2.6. Organ Dalam Tikus... 22 3.1 Skema Uji Kemurnian Senyawa... 32 3.2 Skema Sintesis Senyawa... 33 3.3 Skema Uji Toksisitas Akut... 34 4.1 KLT senyawa asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat 37 4.2 Hasil IR Senyawa... 39 4.3 Gambaran Makroskopis Mukosa Lambung Tikus... 43 x
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran A. Sertifikat Tikus... 60 B. Hasil Penimbangan Bobot Badan Hewan Coba... 61 C. Makroskopis Organ Keseluruhan... 62 D. Hasil Pengamatan Makroskopik Lambung... 65 E. Hasil Penimbangan Bobot Organ Hewan Coba... 68 F. Hasil Uji Skrining Farmakologi Hewan Coba.. 71 G. Hasil Analisa Statistik Berat Badan Hewan Coba... 74 H. Hasil Statistik Indeks Organ Hewan Coba... 79 xi