SILFIANA NISA PERMATASARI FAKULTAS FARMASI UNIKA WIDYA MANDALASURABAYA

Transkripsi

1 UJI SITOTOKSIK (Brine Shrimp Lethality Test) SENYAWA ASAM O-(3-KLOROMETILBENZOIL)SALISILAT DAN ASAM O-(4-KLOROMETILBENZOIL)SALISILAT MENGGUNAKAN LARVA UDANG Artemia Salinaa Leach SILFIANA NISA PERMATASARI FAKULTAS FARMASI UNIKA WIDYA MANDALASURABAYA 2011

2

3

4

5 ABSTRAK UJI SITOTOKSIK (Brine Shrimp Lethality Test) SENYAWA ASAM O-(3-KLOROMETILBENZOIL)SALISILAT DAN ASAM O-(4-KLOROMETILBENZOIL)SALISILAT MENGGUNAKAN LARVA UDANG Artemia Salina Leach Silfiana Nisa Permatasari Pada penelitian terdahulu telah dilakukan sintesis asam O-(3- klorometilbenzoil)salisilat dan asam O-(4-klorometilbenzoil)salisilat yang berpotensi aktif sebagai analgesik. Penelitian lanjutan ini, dilakukan untuk mengetahui efek toksik dari senyawa tersebut dengan menggunakan metode BST (Brine Shrimp Lethality Test) terhadap larva udang Artemia salina Leach yang dibandingkan dengan asam asetilsalisilat. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui LC 50 dari senyawa asam O-(3- klorometilbenzoil)salisilat, asam O-(4-klorometilbenzoil)salisilat dan asam asetilsalisilat. Dalam penelitian ini, setiap senyawa dibuat 5 konsentrasi berbeda yang diperoleh dari uji pendahuluan asam O-(3- klorometilbenzoil)salisilat yaitu 300 ppm, 350 ppm, 400 ppm, 450 ppm dan 500 ppm sedangkan asam O-(4-klorometilbenzoil)salisilat yaitu 250 ppm, 300 ppm, 350 ppm, 400 ppm dan 450 ppm dan sebagai pembanding digunakan asam asetilsalisilat yang dibuat dengan konsentrasi 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 300 ppm dan 350 ppm, masing-masing dilakukan tiga kali replikasi. Tiap senyawa tersebut diujikan pada larva udang Artemia salina Leach dengan waktu pengamatan selama 24 jam. Dari hasil perhitungan LC 50 senyawa asam O-(3-klorometilbenzoil)salisilat, asam O-(4- klorometilbenzoil)salisilat, dan asam asetilsalisilat dengan metode probit analisis adalah 404,49 ppm, 332,53 ppm, dan 255,60 ppm. Berdasarkan harga LC 50 yang didapatkan menunjukkan bahwa asam O-(3- klorometilbenzoil)salisilat kurang toksik dan asam asetilsalisilat lebih toksik jika dibandingkan dengan asam O-(4-klorometilbenzoil)salisilat. Kata kunci : asam O-(3-klorometilbenzoil)salisilat, asam O-(4- klorometilbenzoil)salisilat, uji toksisitas, larva udang Artemia salina Leach, LC 50 i

6 ABSTRACT CYTOTOXICITY ASSAY (Brine Shrimp Lethality Test) OF O-(3-CHLOROMETHYLBENZOYL)SALICYLIC ACID AND O-(4-(CHLOROMETHYLBENZOYL)SALICYLIC ACID USING Artemia Salina Leach LARVAE Silfiana Nisa Permatasari In the previous research the synthesis of O-(3- chloromethylbenzoyl)salicylic acid and O-(4-chloromethylbenzoyl)salicylic acid which were potentially active as analgesic had been carried out. Further research was conducted to determine the toxic effect of these compounds using the method of BST (Brine Shrimp Lethality Test) against Artemia salina Leach larvae and the compounds were compared with acetylsalicylic acid. This study aims to determine the LC 50 of O-(3- klorometilbenzoil)salicylic acid, O-(4-klorometilbenzoil)salicylic acid and acetylsalicylic acid. In this study, each compound was made into five different concentrations, which were obtained from the preliminary assay of O-(3-chloromethylbenzoyl)salicylic acid, the concentrations were 300 ppm, 350 ppm, 400 ppm, 450 ppm and 500 ppm, while the O-(4- chloromethylbenzoyl)salicylic acid concentrations were 250 ppm, 300 ppm, 350 ppm, 400 ppm and 450 ppm. For comparison acetylsalicylic acid was made into concentration of 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 300 ppm and 350 ppm. Each compound was tested on Artemia salina Leach larvae for 24 hours. The value of LC 50 of O-(3-chloromethylbenzoyl)salicylic acid, O-(4- chloromethylbenzoyl)salicylic acid and acetylsalicylic acid were 404,49 ppm, 332,53 ppm, and 255,60 ppm respectively. Based on the LC 50 obtained, the O-(3-chloromethylbenzoyl)salicylic acid was less toxic and acetylsalicylic acid was more toxic compared to O-(4- chloromethylbenzoyl)salicylic acid. Key words : O-(3-chloromethylbenzoyl)salicylic acid, O-(4- chloromethylbenzoyl)salicylic acid, toxicity assay, Larvae shrimp of Artemia salina Leach, LC 50 ii

7 KATA PENGANTAR Puji dan syukur kepada Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat-nya, sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik. Skripsi ini saya susun untuk memenuhi syarat kelulusan di Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. Terwujudnya proposal skripsi ini tidak lepas dari bantuan berbagai pihak yang telah mendorong dan membimbing penulis, baik tenaga, ide ide, maupun pemikiran. Oleh karena itu dalam kesempatan ini saya ingin mengucapkan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada : Prof. Dr. Bambang Soekardjo, SU., Apt., selaku Pembimbing I dan Catherina Caroline, S.Si., M.Si., Apt., selaku Pembimbing II atas kesabarannya untuk meluangkan waktu dalam memberikan bimbingan, petunjuk, nasehat, dan saran-saran yang membangun untuk terselesaikannya skripsi ini. Prof. Dr. Siswandono, MS., Apt., dan DR. Ratna Megawati Widharna, SKG, MFT., sebagai Tim Penguji skripsi yang telah memberikan saran dan masukan berharga guna penyempurnaan skripsi ini. Prof. Dr. J.S. Ami Soewandi sebagai Rektor Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. Martha Ervina, S.Si., M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya atas bantuan dan dukungan selama ini. Catherina Caroline, S.Si., M.Si., Apt., selaku Sekretaris Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya dan Dosen iii

8 wali, atas bimbingan, nasehat dan bantuan selama menjadi mahasiswa Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. Henry Kurnia S., S.Si., M.Si., Apt., selaku koordinator laboratorium Ilmu Instrumen dan Staf Laboratorium Ilmu Instrument yang telah banyak memberikan bantuan. Dosen-dosen dan Staf pengajar yang tidak dapat disebutkan satu per satu, atas ilmu pengetahuan, keahlian dan pengalaman yang telah dibagi. Laboran-laboran: Mbak Mega, Pak Samsul, Bu Nina, Mas Didik, yang telah banyak membantu kelancaran proses penelitian, serta doa dan dukungannya. Bapak Abror, selaku staf pelaksana stasiun lapangan praktek pembenihan, Akademi Perikanan Sidoarjo, atas pemberian ijin untuk melaksanakan penelitian di Pembenihan Akademi Perikanan Sidoarjo, Lamongan. Bapak Azis, selaku karyawan di Pembenihan Akademi Perikanan Sidoarjo, Lamongan, atas bantuan dan bimbingan selama penelitian ini berlangsung. Ayah, Mama (Eddy & Retno), dan Abang tercinta (Wira) yang selalu memberikan kasih sayang, dukungan dan motivasi serta doa. Restari Handayani, Riwahning Palutfi dan semua teman-teman yang tidak dapat disebutkan satu per satu, terima kasih buat dukungan dan doanya. Kru Apotek Jelita, Mbak Fida, Mbak Fury, Juni, dan semua yang tidak dapat disebut satu per satu, terima kasih buat dukungan dan doanya. iv

9 Sahabat senasib seperjuanganku : Merry, Angel, Senny, Devy, Savitri, terima kasih banyak untuk persahabatan yang seru dan canda tawa di hidupku. Seluruh teman-teman angkatan 2007, terima kasih banyak untuk kerja sama dan hari-hari yang menyenangkan selama ini dan semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu-persatu yang juga berperan dalam kelancaran penyusunan naskah skripsi ini. Saya menyadari bahwa susunan dan materi yang terkandung dalam skripsi ini belumlah sempurna. Untuk itu saran dan krtitik yang bersifat membangun, terutama dari rekan-rekan dosen Fakultas Farmasi, sangat saya harapkan demi penyempurnaan skripsi ini. Akhir kata, semoga skripsi ini dapat bermanfat bagi dunia kefarmasian pada khususnya dan masyarakat luas pada umumnya. Terima kasih. Surabaya, Juni 2011 Silfiana Nisa Permatasari v

10 DAFTAR ISI ABSTRAK... ABSTRACT KATA PENGANTAR.... DAFTAR ISI.... DAFTAR LAMPIRAN..... DAFTAR TABEL.... DAFTAR GAMBAR BAB 1 PENDAHULUAN... 2 TINJAUAN PUSTAKA Tinjauan tentang Asam Asetilsalisilat Tinjauan tentang Asam O-(3-klorometilbenzoil)salisilat Tinjauan tentang Asam O-(4-klorometilbenzoil)salisilat Tinjauan tentang Larva Artemia salina Leach Uji Sitotoksisitas Tinjauan tentang Metode Brine Shrimp Lethality Test (BST) Tinjauan tentang Uji Kemurnian untuk Analisis Senyawa 3 METODOLOGI PENELITIAN Bahan dan Alat Penelitian Larva Udang Artemia salina Leach Tahapan Penelitian Variabel Penelitian Analisis Data Skema Kerja... vi Halaman i ii iii vi viii ix xi

11 4 HASIL PERCOBAAN DAN BAHASAN Hasil Analisis Hasil Uji Pendahuluan Hasil Uji Sitotoksisitas SIMPULAN Simpulan Alur Penelitian Selanjutnya... DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN vii

12 DAFTAR LAMPIRAN A B Lampiran Contoh Perhitungan Pembuatan Larutan Uji... Analisis Probit viii

13 DAFTAR TABEL Tabel Halaman 2.1. Harga Faktor Retardasi (Rf) Asam O-(3- klorometilbenzoil)salisilat Harga Faktor Retardasi (Rf) Asam O-(4- klorometilbenzoil)salisilat Hasil Pemeriksaan Organoleptis Asam O-(3- klorometilbenzoil)salisilat dan Asam O-(4- klorometilbenzoil)salisilat Hasil KLT Senyawa Asam O-(3-klorometilbenzoil)salisilat dan Asam O-(4-klorometilbenzoil)salisilat Hasil KLT Senyawa Asam O-(3-klorometilbenzoil)salisilat dan Asam O-(4-klorometilbenzoil)salisilat dengan Perbandingan Fase Gerak yang Lain Hasil Pemeriksaan Titik Leleh Senyawa Asam O-(3- klorometilbenzoil)salisilat Hasil Pemeriksaan Titik Leleh Senyawa Asam O-(4- klorometilbenzoil)salisilat Hasil Pengamatan Faktor-faktor Luar Hasil Pengamatan Pengaruh dari Keasaman Media Air pada Senyawa Asam O-(3-klorometilbenzoil)salisilat dan Asam O-(4-klorometilbenzoil)salisil Hasil Pengamatan Konsentrasi Tertinggi DMSO pada Kematian Larva Artemia Salina Leach (n = 10) Hasil Pengamatan Kontrol Negatif (n=10) Hasil Uji Pendahuluan LC 50 Asam Asetilsalisilat terhadap Larva Udang Artemia Salina Leach (n=10) Hasil Uji Pendahuluan LC 50 Asam O-(3- klorometilbenzoil)salisilat terhadap Larva Udang Artemia Salina Leach (n=10) ix

14 4.12. Hasil Uji Pendahuluan LC 50 Asam O-(4- klorometilbenzoil)salisilat terhadap Larva Udang Artemia Salina Leach (n=10) Hasil Uji Sitotoksisitas Senyawa Asam Asetilsalisilat (n=10) Hasil Uji Sitotoksisitas Senyawa Asam O-(3- klorometilbenzoil)salisilat (n=10) Hasil Uji Sitotoksisitas Senyawa Asam O-(3- klorometilbenzoil)salisilat (n=10) x

15 DAFTAR GAMBAR Gambar Halaman 1.1. Struktur yang menggambarkan asam O-(3- klorometilbenzoil)salisilat Struktur yang menggambarkan asam O-(4- klorometilbenzoil)salisilat Struktur yang menggambarkan molekul asam asetilsalisilat Morfologi Artemia salina Leach Lapisan pada kista Artemia salina Leach Artemia dewasa jantan (kiri) dan betina (kanan) Proses penetasan kista yang normal Reproduksi Artemia salina Leach Siklus hidup Artemia salina Leach Bentuk nauplius Artemia salina Leach Pengamatan noda KLT asam O-(3- klorometilbenzoil)salisilat dengan menggunakan lampu UV 254 nm Pengamatan noda KLT asam O-(4- klorometilbenzoil)salisilat dengan menggunakan lampu UV 254 nm Hasil KLT senyawa asam O-(3-klorometilbenzoil dan asam O-(4-klorometilbenzoil)salisilat di bawah sinar UV 254 nm dengan perbandingan yang baru Larva Artemia salina Leach xi