NI PUTU EKA SETIAWATI

EFEK SENYAWA ASAM 2-(4-(KLOROMETIL)BENZOILOKSI) BENZOAT TERHADAP AKTIVITAS DAN INDEKS ORGAN TIKUS WISTAR JANTAN SEBAGAI PELENGKAP UJI TOKSISITAS SUBKRONIS NI PUTU EKA SETIAWATI 2443012228 PROGRAM STUDI S1 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS KATOLIK WIDYA MANDALA SURABAYA 2015

ABSTRAK EFEK SENYAWA ASAM 2-(4-(KLOROMETIL) BENZOILOKSI)BENZOAT TERHADAP AKTIVITAS DAN INDEKS ORGAN TIKUS WISTAR JANTAN SEBAGAI PELENGKAP UJI TOKSISITAS SUBKRONIS Ni Putu Eka Setiawati 2443012228 Salah satu turunan asam salisilat yang berfungsi sebagai analgesik adalah asam asetilsalisilat. Penggunaan asetosal dalam jangka waktu yang panjang dapat menimbulkan nyeri epigastrium yang berat, mual, dan bahkan dapat menimbulkan pendarahan lambung. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui penggunaan jangka panjang dari senyawa asam 2-(4- (klorometil)benzoiloksi)benzoat maka dilakukan percobaan uji toksisitas subkronis, berdasarkan Organization for Economic Cooperation and Development (OECD 407). Parameter yang diamati meliputi uji aktivitas, indeks organ dan makroskopis organ lambung pada tikus wistar jantan. Kelompok percobaan dibagi lima kelompok yaitu kelompok kontrol positif dan satelitnya (asam asetilsalisilat 9 mg/20 gbb), kelompok kontrol negatif (PGA 3%), kelompok uji senyawa asam 2-(4- (klorometil)benzoiloksi)benzoat dan satelitnya (9; 18; 27 mg/200 gbb) yang diberikan secara oral untuk jangka waktu 28 hari. Kelompok satelit dibiarkan selama 14 hari setelah perlakuan untuk melihat apakah terjadi perbaikan organ setelah obat dihentikan. Analisis statistik menggunakan SPSS 17 dengan metode one way anova dan uji Tukey, dan didapatkan hasil ada perbedaan bermakna pada organ hati antara satelit asam asetilsalisilat dengan satelit senyawa asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat pada dosis 9mg/200 gbb. Uji aktivitas menunjukkan terjadi penurunan aktivitas motorik dan senyawa asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat dan asam asetilsalisilat memberikan gejala toksisitas berupa penipisan lambung dan terjadi tukak. Kata kunci : asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat, toksisitas subkronis, tikus wistar jantan (Rattus novergicus), indeks organ, asam asetilsalisilat. i

ABSTRACT EFFECT OF 2-(4-(CHLOROMETHYL)BENZOYLOXY) BENZOIC ACID ON THE ACTIVITIES AND INDEX ORGAN OF MALE WISTAR RATS AS A SUPPLEMENT OF SUBCHRONIC TOXICITY TEST Ni Putu Eka Setiawati 2443012228 One of the salicylic acid derivative that functions as an analgesic is acetylsalicylic acid. The use of acetylsalicylic acid in the long term can cause severe epigastric pain, nausea, vomiting, dizziness, sweating and even can cause stomach bleeding. However, further research is conducted to determine the long-term use of the 2-(4-(chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid is then performed experiments subchronic toxicity tests, based Organization for Economic Cooperation and Development (OECD 407). The parameters observed activity test, index organ and macroscopic gastric organs in male Wistar rats. Experimental group divided by five groups: positive control and its satellites (acetylsalicylic acid 9 mg / 20 gbw), negative control group (PGA 3%), the test group of 2-(4- (chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid and its satellites (9; 18; 27 mg / 200 gbw) administered orally for a period of 28 days. Satellite groups were left for 14 days after treatment to watched if there was a repair organ after the drug was stopped. Statistical analysis using SPSS 17 with methods one way ANOVA and Tukey test, and showed significant differences in the liver between satellites with the satellite acetylsalicylic and 2-(4- (chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid at a dose of 9mg / 200 gbw. Activity test showed decreased motor activity and the 2-(4- (chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid and give acetylsalicylic acid toxicity symptoms such as thinning of the stomach and the mucose was thined. Keywords: 2-(4-(chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid, subchronic toxicity, male wistar rats (Rattus novergicus), index organ, acetylsalicylic acid. ii

KATA PENGANTAR Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan rahmat dan karunianya, sehingga skripsi dengan judul Efek Senyawa Asam 2-(4-(Klorometil)Benzoiloksi)Benzoat Terhadap Aktivitas dan Indeks Organ Tikus Wistar Jantan sebagai Pelengkap Uji Toksisitas Subkronis dapat terselesaikan. Penyusunan skripsi ini dimaksudkan untuk memenuhi persyaratan memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. Menyadari bahwa tanpa bantuan dan dukungan dari berbagai pihak skripsi ini tidak dapat terselesaikan dengan baik, maka rasa terima kasih yang sebesar-besarnya disampaikan kepada: 1. Drs. Kuncoro Foe, G.Dip.Sc.,Ph.D sebagai Rektor Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. 2. Martha Ervina, S.Si., M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. 3. Wahyu Dewi Tamayanti, M.Sc., Apt selaku Pembimbing I dan Prof. Dr. Bambang Soekardjo, Apt.,SU selaku Pembimbing II atas kesabaran untuk meluangkan waktu dalam memberikan bimbingan, petunjuk, nasehat dan saran-saran yang membangun untuk terselesaikannya skripsi ini. 4. Angelica Kresnamurti, S.Si., M.Farm., Apt., dan Catherina Caroline, S.Si., M.Si., Apt., sebagai Tim Penguji skripsi yang telah memberikan saran dan masukan berharga guna penyempurnaan skripsi ini. 5. Idajani Hadinoto, S.Si., M.Si., Apt., dalam membimbing, mengarahkan dan memberi nasehat serta motivasinya. iii

6. Dosen-dosen dan staf pengajar yang tidak dapat disebutkan satu per satu, atas ilmu pengetahuan, keahlian dan pengalaman yang telah dibagi. 7. Kepala Laboratorium Kimia Organik Prof. Dr. J.S. Ami Soewandi, Kepala Laboratorium Biomedik Angelica Kresnamurti, S.Si., M.Farm., Apt., dan Kepala Laboratorium Kimia Analisis Dra. Emi Sukarti, M.Si., Apt. 8. Laboran-laboran: Pak Heri, Mas Rendy, Pak Samsul, Pak Anang, Mbak Mega, Mbak Tyas, Mbak Retno, Bu Nina dan Mas Tri yang telah banyak membantu kelancaran proses penelitian, serta doa dan dukungannya. 9. Drh. Rahmat Priyadi atas sumbangsihnya dalam analisis dan penyediaan hewan coba. 10. Laboratorium IPA Terpadu Universitas Negeri Surabaya yang telah banyak membantu dalam pemakaian alat Spektrofotometri Inframerah. 11. Ayah dan Bundaku tercinta (I Wayan Subrata dan Sri Hartini), adikku tersayang (Anggara Putra) yang selalu memberikan kasih sayang, dukungan, motivasi serta doa. 12. Sahabat senasib seperjuanganku: Maria, Martha, Wahyu, Ninik, Mamel, Chaterina, Casey, Cherly terima kasih banyak atas pengorbanan waktu, tenaga dan materi yang tidak bisa diperhitungkan satu per-satu demi skripsi ini. 13. Sahabat-sahabatku tersayang: Gek in, lisna, Susan, Liana, Frisna, Zain, Priska, Devian, Fadal, Adri, Natan, yang telah banyak memberikan dukungan dan motivasi dalam penelitian ini dan terima kasih banyak atas hari-hari yang indah yang kita lewati bersama selama kuliah. iv

14. Teman-teman angkatan 2012: Enda, Ketrin, Septin, Liana, Frisna, Devian, Priska, Zain dan teman-teman lainnya yang tidak bisa disebutkan satu per-satu. Sukses buat kalian semua. 15. Adik-adik angkatan 2013: Isna, Putri elva, Kartika terima kasih atas dukungan dan doanya. 16. Kakak-kakak angkatan: Kak Dikna, kak Sintia, kak Catur, kak Hana terima kasih atas dukungan dan doanya. Skripsi ini jauh dari sempurna dengan keterbatasan pengalaman, pengetahuan maupun pustaka yang ditinjau, penulis menyadari kekurangan dalam penulisan naskah skripsi ini. Oleh karenanya diharapkan saran dan kritik dari semua pihak agar naskah ini dapat lebih sempurna. Akhir kata, semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi masyarakat luas pada umumnya dan bagi dunia kefarmasian pada khususnya. Surabaya, Desember 2015 Penulis v

DAFTAR ISI Halaman ABSTRAK... i ABSTRACT.. ii KATA PENGANTAR... iii DAFTAR ISI... vi DAFTAR GAMBAR ix DAFTAR TABEL x DAFTAR LAMPIRAN. xi BAB I. PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Penelitian... 1 1.2 Rumusan Masalah... 5 1.3 Tujuan Penelitian.... 5 1.4 Hipotesis Penelitian... 5 1.5 Manfaat Penelitian... 6 BAB II. TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Tinjauan tentang Asam Asetilsalisilat... 7 2.2 Asam 2-(4-(Klorometil)Benzoiloksi)Benzoat... 8 2.3 Tinjauan tentang Toksisitas Subkronis... 10 2.4 Tinjauan tentang Hewan Uji... 12 2.5 Skrining Farmakologi... 15 2.6 Uji Kemurnian Hasil Sintesis... 17 2.6.1. Kromatografi Lapis Tipis... 17 2.6.2. Uji Titik Leleh... 18 2.7 Tinjauan tentang Organ Lambung... 19 2.7.1 Anatomi Lambung... 19 vi

2.7.2 Makroskopis Lambung... 20 2.7.3 Fisiologi Lambung... 21 2.7.4 Patologi Lambung... 21 2.8 Tinjauan tentang Indeks Organ Tikus... 22 2.9 Analisa Statistik... 22 BAB III. METODE PENELITIAN 3.1 Bahan, Alat dan Hewan Coba Penelitian... 24 3.1.1. Bahan penelitian 24 3.1.2. Alat penelitian... 24 3.1.3. Hewan coba... 24 3.2 Pelaksanaan Penelitian...... 25 3.2.1. Uji Kemurnian... 25 3.2.2. Prosedur Uji Toksisitas Subkronis... 27 3.2.3. Uji Toksisitas Subkronis Senyawa Asam 2-(4- (Klorometil)Benzoiloksi)Benzoat... 29 3.2.4. Pelaksanaan Uji Aktivitas... 31 3.2.5. Tinjauan tentang Indeks Organ... 31 3.3 Variabel Penelitian..... 32 3.4 Analisa Statistik... 32 3.5 Hipotesis Statistik... 33 3.5.1. Hipotesis Nol (H 0 )... 33 3.5.2. Hipotesis Alternatif (H A )... 33 3.6 Skema Rancangan Penelitian... 34 3.6.1. Skema Sintesis Senyawa Asam 2-(4- (klorometil)benzoiloksi)benzoat... 34 3.6.2. Skema Uji Kemurnian Senyawa... 35 3.6.3. Skema Uji Toksisitas Subkronis... 36 vii

BAB IV. ANALISIS DATA DAN INTERPRETASI PENEMUAN 4.1 Hasil Pemeriksaan Organoleptis... 37 4.2 Hasil Uji Kemurnian... 37 4.2.1. KLT (Kromatografi Lapis Tipis).. 37 4.2.2. Titik leleh... 40 4.2.3. Uji Senyawa dengan IR... 41 4.3. Uji Toksisitas Subkronis... 42 4.3.1. Pengamatan berat badan. 43 4.3.2. Makroskopis organ lambung.... 48 4.3.3. Indeks Organ... 55 4.3.4. Uji aktivitas...... 60 BAB V. SIMPULAN DAN SARAN 5.1. Simpulan..... 66 5.2. Saran.... 66 DAFTAR PUSTAKA 68 LAMPIRAN.. 75 viii

DAFTAR GAMBAR 2.1. Struktur Asetosal. 7 2.2. Struktur Asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat 9 2.3. Organ Jantung dan Paru-paru Tikus... 13 2.4. Organ Tikus... 14 2.5. Anatomi Lambung 19 2.6. Keadaan Lambung Mencit... 20 3.1. Skema Sintesis Senyawa Asam 2-(4- klorometil)benzoiloksi)benzoate... 34 3.2. Skema Uji kemurnian senyawa... 35 3.3. Skema Uji toksisitas subkronis... 36 4.1. KLT senyawa asam 2-(4- klorometil)benzoiloksi)benzoat... 39 4.2. Spektrum Inframerah (IR) dari asam 2-(4- (klorometil)benzoiloksi)benzoat... 41 4.3. Grafik hubungan antara waktu pengamatan (T) vs berat badan (g) tikus jantan... 46 4.4. Lambung yang menggelembung pada tikus kelompok asam 2- (4-klorometil)benzoiloksi)benzoat.,... 49 4.5. Gambaran makroskopis mukosa lambung tikus... 50 ix

DAFTAR TABEL 2.1. Skoring Keparahan Tukak... 21 3.1. Formula suspensi senyawa uji dan pembanding... 28 3.5 Tabel Berat Badan Tikus... 29 4.1. Hasil Pemeriksaan Organoleptis Asam 2-(4-(klorometil) benzoiloksi) benzoat... 37 4.2. Hasil KLT senyawa asam 2-(4- (klorometil)benzoiloksi)benzoat... 38 4.3. Hasil Uji Titik Leleh Asam 2-(4-(klorometilbenzoiloksi)benzoat... 40 4.4. KarakteristikSpektrumInframerahAsam 2-(4- (klorometil)benzoiloksi)benzoate... 42 4.5. Data penimbangan berat badan tikus kelompok kontrol dan perlakuan...... 44 4.6. Data penimbangan berat badan tikus kelompok satelit... 45 4.7. Hasil Perhitungan Indeks Tukak... 52 4.8. Rata Rata Hasil Indeks Organ Kelompok Kontrol dan Kelompok Perlakuan... 56 x

DAFTAR LAMPIRAN Lampiran Halaman A. Hasil Penimbangan Berat Badan Tikus... 75 B. Hasil Statistik Berat Badan... 79 C. Makroskopik Organ Lambung 88 D. Data Perhitungan Indeks Tukak... 90 E. Hasil Penimbangan Bobot Organ... 92 F. Hasil Statistik Indeks Organ... 100 G. Makroskopik Organ... 115 H. Data Pengamatan Skrining Farmakologi... 118 I. Sertifikat Tikus... 133 xi