5 BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Tinjauan Umum Darah Darah dalam tubuh berfungsi untuk mensuplai oksigen ke seluruh jaringan tubuh, membawa nutrisi, membersihkan metabolisme dan membawa zat antibodi (sistem imun), keseimbangan cairan, pengaturan suhu, tekanan osmotik dan pengaturan tekanan darah. Volume darah secara keseluruhan sekitar 55% cairan dan 45% sel darah, angka ini dinyatakan dalam nilai hematokrit atau volume sel darah yang dipadatkan yang berkisar antara 40 sampai 47% (Evelyn C, 2002). Darah merupakan bagian penting dari sistem sirkulasi yaitu dalam transport oksigen. Sirkulasi darah adalah sistem transport yang mengantarkan O 2 dan berbagai zat yang diarbsorsi dari traktus gastrointestinal menuju jaringan, serta mengembalikan CO 2 ke paru-paru dan hasil metabolisme lainnya menuju ke ginjal. Sistem sirkulasi berperan dalam pengaturan suhu tubuh dan mendistribusi hormon serta berbagai zat lain yang mengatur fungsi sel darah merupakan pembawa berbagai zat, dipompakan oleh jantung melalui sistem pembuluh darah yang tertutup. Pada mamalia mekanisme pompa tersebut terdiri atas dua sistem pompa yaitu dari ventrikal kiri darah dipompa melalui arteri dan arteriola menuju kapiler dan kapiler darah dikembalikan melalui venula dan vena ke dalam atrium kanan (sirkulasi utama), dari atrium kanan darah mengalir ke ventrikal kanan yang akan memompa darah melalui pembuluh darah paru-paru ini temasuk sirkulasi kecil (mikro sirkulasi) (Wiliam,1998). 5
6 Darah terdiri atas 2 (dua) bagian. Bahan interseluler adalah cairan yang disebut plasma didalamnya terdapat unsur-unsur padat, yaitu sel darah. Volume darah kira-kira merupakan satu per dua belas berat badan atau kira-kira 5 (lima) liter. Sekitar 55 % adalah cairan, sedangkan 45 % sisanya terdiri atas sel darah merah (Evelyn, 2002). B. Plasma Definisi plasma adalah suatu unsur larutan yang berwarna kuning jernih yang diperoleh dengan membiarkan pengumpulan spontan dari unsur figuratif selain itu juga bisa dengan cara pemusingan (Sodikin, 2002). Plasma merupakan bagian penyusun darah di mana komposisinya terdiri atas : air 91%, protein 3% (albumin globulin protombin dan fibrinogen), mineral 0,9% (Na Clorida, Na bikarbonat, garam dari kalsium, fosfat, magnesium, besi dan sebagainya). Sisanya diisi oleh bahan organik seperti glukosa, lemak, urea, asam urat, kreatinin, kolesterol dan asam amino (Evelyn, 2002). Peranan plasma adalah sebagai penyangga darah. Pada saat posisi seseorang duduk suplai oksigen dalam darah lebih tinggi dan terjadi vaso kontraksi (kerja jantung dalam memompa darah lebih kuat), sehingga memungkinkan volume plasma dalam darah meningkat. Pada saat posisi berbaring suplai O2 dalam darah rendah dan terjadi vaso dilatasi (kerja jantung dalam memompa darah dalam keadaan rileks, sehingga memungkinkan volume plasma dalam darah tidak mengalami peningkatan. Plasma diperoleh dengan mencegah proses penggumpalan darah. Senyawa tersebut adalah fibrinogen (Sodikin, 2002).
7 C. Sel darah (Korpuskuli) 1. Sel darah terdiri atas tiga jenis yaitu : a. Eritrosit atau sel darah merah b. Lekosit atau sel darah putih c. Trombosit atau butir pembeku (Evelyn P, 2002). 2. Eritrosit a. Definisi Sel-sel bulat, tidak berinti dan berwarna merah kebiruan homogen, jumlahnya sangat banyak di seluruh lapang pandang. Sel-sel ini yang memberi warna merah pada darah, sehingga dinamai sel darah merah (SDM) atau eritrosit (Sodikin, 2002). b. Fungsi 1. Sel-sel darah merah mentranspor oksigen ke seluruh jaringan melalui pengikatan hemoglobin terhadap oksigen. 2. Hemoglobin sel darah merah berikatan dengan karbondioksida untuk ditranspor ke paru-paru. 3. Sel darah merah berperan penting dalam pengaturan ph darah karena ion bikarbonat dan hemoglobin merupakan buffer asam basa (Sloane, 2004).
8 3. Lekosit a. Definisi Sel-sel yang berinti, dengan bentuk inti dan sitoplasma bermacam-macam, yang dapat dijumpai di sana-sini dalam lapang pandang. sel-sel ini tidak memberi warna merah pada darah, dinamai sel darah putih atau lekosit (Sodikin, 2002). b. Fungsi Lekosit berfungsi untuk melindungi tubuh terhadap invasi benda asing, termasuk bakteri dan virus (Sloane, 2004). 4. Trombosit a. Definisi kepingan kepingan yang berasal dari sitoplasma megakariosit, yaitu suatu sel besar berinti banyak yang terdapat dalam sumsum tulang yang berfungsi melindungi pembuluh darah terhadap kerusakan endotel akibat trauma trauma kecil yang terjadi sehari hari dan mengawali penyembuhan luka pada dinding pembuluh darah. (Evelyn P, 2002) b. Fungsi Trombosit berfungsi dalam hemostatis (penghentian perdarahan) dan memperbaiki pembuluh darah yang robek (Sloane, 2004).
9 D. Hematokrit 1. Definisi Hematokrit terdiri dari 2 perkatan yaitu :Haem yang berarti darah, Krinein yang berarti memisahkan. Nilai hematokrit ialah volume eritrosit dalam 100 ml darah yang dinyatakan dalam % volume darah. Biasanya nilai hematokrit ditentukan dengan darah kapiler atau darah vena (Gandasoebrata, 2008). Hematokrit merupakan salah satu metode yang paling teliti dan simpel dalam deteksi dan mengukur derajat anemia atau polisitemia. Nilai hematokrit juga digunakan untuk menghitung nilai eritrosit rata-rata (Wirawan, 1996). 2. Prinsip dan Pengukuran Hematokrit Penetapan nilai hematokrit dapat dilakukan dengan cara mikro atau cara makro. Cara makro digunakan tabung wintrobe yang mempunyai diameter dalam 2,5 3 mm, panjang 110 mm dengan skala interval 1 mm sepanjang 100 mm. Volume tabung adalah 1 ml. Cara mikro digunakan pipet kapiler yang panjangnya 75 mm dan diameter dalam 1 mm. Pipet hematokrit ada 2 jenis, ada yang dilapisi antikoagulan Na 2 EDTA atau heparin dibagian dalamnya dan ada tanpa antikoagulan. Pipet yang mengandung antikoagulan heparin mempunyai tanda garis melingkar warna merah, sedangkan pipet kapiler tanpa antikoagulan mempunyai tanda garis melingkar warna biru. Pipet kapiler dengan atikoagulan dipakai apabila menggunakan darah kapiler. Pipet kapiler tanpa antikoagulan dipakai bila menggunakan darah vena (Wirawan, 1996).
10 Metode makro, menggunakan centrifuge yang cukup besar, untuk memadatkan sel-sel darah merah dengan memakai centrifuge diperlukan ratarata 30 menit. Pada metode mikro menggunakan centrifuge mikro hematokrit yang mencapai kecepatan yang jauh lebih tinggi, maka dari itu lamanya pemusingan dapat diperpendek Harga normal nilai hematokrit untuk laki-laki 40-48 volume% dan untuk wanita 37-43 volume% (Gandasoebrata, 2008). 3. Standar baku pemeriksaan Hematokrit Prosedur pemeriksaannya adalah : sampel darah dimasukkan ke dalam tabung kapiler sampai 2/3 volume tabung. Salah satu ujung tabung ditutup dengan dempul (clay) lalu di centrifuge selama 5 10 menit (Adang, 2009), sedangkan menurut (Gandasoebrata, 2008) waktu centrifuge 3 5 dengan kecepatan 13.000 rpm. Tinggi kolom eritrosit diukur dengan alat pembaca hematokrit, nilainya dinyatakan dalam volume%. 4. Lapisan Buffy Coat Lapisan ini terdiri dari lekosit dan trombosit yang berwarna kelabu kemerahan atau keputih-putihan. Dalam keadaan normal tingginya lapisan buffy coat 0,1 mm sampai dengan 1 mm. Tinggi 0,1 mm kira-kira sesuai dengan 1000 lekosit per mm3. Tinggi buffy coat yang masih dalam range normal belum berarti benar, misalnya kalau ada limfosit yang pada umumnya lebih kecil dari granulosit. Tingginya lapisan buffy coat merupakan perkiraan saja terhadap ada tidaknya lekositosis (Gandasoebrata, 2008).
11 4. Antikoagulan yang sering dipakai untuk pemeriksaan hematokrit Pemeriksaan laboratorium hematologi, sering dipergunakan antikoagulan yaitu zat untuk mencegah pembekuan darah a. EDTA (Ethylene Diamine Tetra Acetat) EDTA adalah jenis antikoagulan yang paling sering digunakan dalam pemeriksaan laboratorium hematologi. Cara kerja EDTA yaitu mengikat ion kalsium sehingga terbentuk garam kalsium yang tidak larut. (Gandasoebrata, 2008). Kalsium adalah salah satu faktor pembekuan darah sehingga tanpa kalsium tidak terjadi pembekuan darah. Takaran pemakaiannya 1-1,5 mg EDTA untuk setiap 1 ml darah. Bila takaran berlebihan akan menyebabkan eritrosit mengkerut, yang akan mempengaruhi hasil pemeriksaan terutama pemeriksaan mikro hematokrit (Wirawan, 1996). b. Heparin Heparin adalah antikoagulan yang terpilih untuk pemeriksaan Osmotic Fragility Test (OFT). Heparin tidak dipergunakan untuk membuat apusan darah tepi karena hasil pewarnaan (cara wright) akan menghasilkan preparat yang terlalu biru (gelap) Heparin berfungsi seperti antitrombin, tidak berpengaruh terhadap bentuk eritrosit dan lekosit. Heparin kurang banyak dipakai karena mahal harganya. Tiap 1 mg heparin menjaga membekunya 10 ml darah. Heparin boleh dipakai sebagai larutan atau bentuk kering (Gandasoebrata, 2008).
12 5. Faktor- Faktor yang mempengaruhi hematokrit secara invivo a. Eritrosit Faktor ini sangat penting pada pemeriksaan hematokrit karena eritrosit merupakan sel yang diukur dalam pemeriksaan tersebut. Hematokrit dapat meningkat pada polisitemia yaitu peningkatan jumlah sel darah merah dan nilai hematokrit dapat menurun pada anemia yaitu penurunan kuantitas sel-sel darah merah dalam sirkulasi. (M Wintrobe, 1974) b. Viskositas Darah Efek hematokrit terhadap viskositas darah adalah makin besar prosentase sel darah maka makin tinggi hematokritnya dan makin banyak pergeseran diantara lapisan-lapisan darah, pergeseran ini yang menentukan viskositas. viskositas darah meningkat secara drastis ketika hematokrit meningkat (Guyton, 1995). c. Plasma Pemeriksaan hematokrit plasma harus pula diamati terhadap adanya ikterus atau hemolisis. Keadaan fisiologis atau patofisiologis pada plasma dapat mempengaruhi pemeriksaan hematokrit (Widmann, 1992). 6. Faktor-faktor yang mempengaruhi hematokrit secara invitro a. Pemusingan / sentrifugasi Penempatan tabung kapiler pada lubang jari-jari centrifuge yang kurang tepat dan penutup yang kurang rapat dapat menyebabkan hasil pembacaan hematokrit tinggi palsu. Kecepatan putar centrifuge dan pengaturan waktu dimaksudkan agar eritrosit memadat secara maksimal.
13 Waktu harus diatur secara tepat. Pemakaian microcentrifuge dalam waktu yang lama mengakibatkan alat menjadi panas sehingga dapat mengakibatkan hemolisis dan nilai hematokrit menjadi rendah palsu (Wirawan, 1996). b. Antikoagulan Penggunaan antikoagulan Na 2 EDTA/ K 2 EDTA lebih dari kadar 1,5 mg/ ml darah mengakibatkan eritrosit mengkerut sehingga nilai hematokrit akan rendah (Wirawan, 1996). c. Pembacaan yang tidak tepat d. Bahan pemeriksaan tidak dicampur hingga homogen sebelum pemeriksaan dilakukan e. Tabung hematokrit tidak bersih dan kering (Wirawan, 1996). f. Suhu dan waktu penyimpanan sampel Sebaiknya sampel disimpan pada 4 0 C selama 24 jam memberikan nilai hematokrit yang lebih tinggi (Gandasoebrata, 2008). 7. Manfaat pemeriksaan hematokrit dalam klinik Warna plasma yang diperoleh dari pemusingan yang berwarna kuning atau kuning tua baik dalam keadaan fisiologis atau patofisiologis, merupakan indikasi naiknya bilirubin dalam darah misal pada infeksi hepatitis. Plasma yang berwarna merah merupakan indikasi adanya hemolisis dari eritrosit (Sacker dan Richard, 2003). Peningkatan hematokrit bisa didapat pada diagnosa kelainan darah, seperti polisitemia. Penurunan hematokrit bisa didapatkan pada penyakit anemia, ditandai dengan penurunan jumlah eritrosit dan kuantitas hemoglobin, nilai
14 hematokrit juga digunakan untuk menghitung nilai eritrosit rata-rata (Wirawan, 1996). E. Hipotesis Ha : ada perbedaan hasil pemeriksaan hematokrit mikro metode dengan waktu centrifuge yang berbeda Ho : tidak ada perbedaan hasil pemeriksaan hematokrit mikro metode dengan waktu centrifuge yang berbeda.