PINGKAN MARSEL

UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAN SENYAWA ALKALOID HASIL FRAKSINASI EKSTRAK ETANOL DAUN SENGGUGU (CLERODENDRON SERRATUM L.) DENGAN METODE BRINE SHRIMP LETHALITY TEST PINGKAN MARSEL 2443010160 PROGRAM STUDI S1 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS KATOLIK WIDYA MANDALA SURABAYA 2014

ABSTRAK UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAN SENYAWA ALKALOID HASIL FRAKSINASI EKSTRAK ETANOL DAUN SENGGUGU (CLERODENDRON SERRATUM L.) DENGAN METODE BRINE SHRIMP LETHALITY TEST PINGKAN MARSEL 2443010160 Senggugu (Clerodendron serratum L. Spreng) adalah tanaman yang digunakan dalam pengobatan tradisional dan memiliki banyak aktivitas farmakologi seperti anti inflamasi, antioksidan, hepatoprotektif, antifertilitas, dan antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk menguji pontensi sitotoksisitas dari ekstrak etanol dan senyawa alkaloid hasil fraksinasi ekstrak etanol daun senggugu terhadap larva Artemia salina Leach. Ekstrak didapatkan dengan menggunakan metode maserasi dan senyawa alkaloid dari ekstrak etanol daun senggugu didapatkan dengan metode ekstrasi cair cair. Uji sitotoksisitas dilakukan dengan menggunakan 10 ekor larva Artemia salina Leach di tiap vial dengan konsentrasi 0 ppm, 100 ppm, 200 ppm, 400 ppm, 800 ppm, dan 1600 ppm. Pada hasil uji sitotoksisitas didapatkan nilai LC 50 ekstrak etanol 169,095 ppm dan nilai LC 50 hasil fraksinasi ekstrak etanol daun senggugu 569,824 ppm. Ekstrak etanol dan hasil fraksinasi ekstrak etanol daun senggugu memiliki potensi sitotoksisitas terhadap larva Artemia salina Leach. Kata kunci : Senggugu (Clerodendron serratum L. Spreng), Uji Sitotoksisitas, Brine shrimp lethality test (BSLT) v

ABSTRACT CYTOTOXICITY TEST OF THE ETHANOL EXTRACT AND ALKALOID FRACTIONATED FROM THE ETHANOL EXTRACT OF SENGGUGU (CLERODENDRON SERRATUM L.) LEAVES BY BRINE SHRIMP LETHALITY TEST PINGKAN MARSEL 2443010160 Senggugu (Clerodendron serratum L. Spreng) is a plant used in traditional medicine and has many pharmacological activities such as antiinflammatory, antioxidant, hepatoprotective, antifertilitas, and anticancer. The aim of this research is to test the potential of the cytotoxicity of ethanol and alkaloid compounds from senggugu leaves ethanol extract fractionation towards Artemia salina Leach. The extract obtained done by maceration and the alkaloid compounds from the ethanol extract of senggugu leaves isolated using liquid liquid extraction method. Cytotoxicity test was performed using 10 Artemia salina Leach in each vial at a concentration of 0 ppm, 100 ppm, 200 ppm, 400 ppm, 800 ppm, and 1600 ppm. The cytotoxicity test results obtained LC 50 values of 169.095 ppm (ethanol extract) and 549.252 ppm (the fraction of ethanol leaves extract). Ethanol extract and alkaloid compounds from senggugu leaves ethanol extract have potential cytotoxicity against Artemia salina Leach. Keywords: Senggugu (Clerodendron serratum L. Spreng), Cytotoxicity test, Brine shrimp lethality test (BSLT). vi

KATA PENGANTAR Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang MahaEsa yang telah memberikan rahmat dab karunianya, sehingga skripsi dengan judul UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAN SENYAWA ALKALOID HASIL FRAKSINASI EKSTRAK ETANOL DAUN SENGGUGU (CLERODENDRON SERRATUM L.) DENGAN METODE BRINE SHRIMP LETHALITY TEST dapat terselesaikan. Penyusunan skripsi ini dimaksudkan untuk memenuhi persyaratan untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. Penulis mengucapkan terima kasih kepada pihak pihak yang telah membantu selama proses pembuatan naskah skripsi ini: 1. Sumi Wijaya., S.Si., Ph.D., Apt. sebagai dosen pembimbing I dan DR. Ratna Megawati, SKG., MFT sebagai dosen pembimbing II yang telah banyak meluangkan waktu dan tenaga dalam memberikan bimbingan, serta senantiasa memberikan saran, dukungan moral serta petunjuk yang sangat berguna hingga terselesaikannya skripsi ini. 2. Prof. Dr. Bambang Soekardjo, SU., Apt. sebagai ketua penguji dan Lisa Soegianto, S.Si., M.Sc., Apt. sebagai penguji II yang telah memberikan bimbingan, serta senantiasa memberikan saran, dukungan moral serta petunjuk yang sangat berguna hingga terselesaikannya skripsi ini. 3. Stephanie Devi Artemisia, S.Si., M.Si., Apt. sebagai penasehat akademik yang telah membantu saya selama masa perkuliahan berlangsung. 4. Martha Ervina, S.Si., M.Si., Apt dan Sumi Wijaya, S.Si., Ph.D., Apt selaku dekan dan ketua prodi S1 Fakultas Farmasi Universitas Katolik vii

Widya Mandala Surabaya, yang telah menyediakan fasilitas dan pelayanan yang baik selama pengerjaan skripsi ini. 5. Kedua orang tua saya yang telah memberikan dukungan secara materi, moral dan spiritual juga memberikan semangat agar skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik. 6. Seluruh dosen Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya yang telah memberikan ilmu tentang kefarmasian. 7. Bu Tyas, Pak Samsul, Pak Didik, Pak Rendy dan seluruh laboran yang telah membantu dalam pengerjaan skripsi ini hingga selesai. 8. Teman teman Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya, khususnya Yulita Maya, Ika Lestari, Ika Puspita, Ria, Komang Yogi, Laras, Dwi Suci, Sheila Ayu, Handayani, Rahajeng, Fitri, Hasnyah, dan Maulana yang telah menemani selama masa perkuliahan hingga penyelesaian skripsi ini. 9. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu. Dengan keterbatasan pengalaman, pengetahuan maupun pustaka yang ditinjau, penulis menyadari kekurangan dalam penulisan naskah skripsi ini. Akhir kata penulis sangat mengharapkan kritik dan saran agar naskah skripsi ini dapat lebih disempurnakan. Surabaya, 11 Oktober 2014 Penulis viii

DAFTAR ISI Halaman Halaman Judul... i Halaman Pengesahan... ii Lembar Persetujuan Publikasi Karya Ilmiah...iii Lembar Pernyataan Karya Ilmiah Non Plagiat... iv ABSTRAK... v ABSTRACT... vi KATA PENGANTAR... vii DAFTAR ISI... ix DAFTAR TABEL... xii DAFTAR GAMBAR... xiii DAFTAR LAMPIRAN... xv BAB I PENDAHULUAN... 1 1.1 Latar Belakang Masalah... 1 1.2 Perumusan Masalah... 6 1.3 Tujuan... 7 1.4 Manfaat Hasil... 7 BAB II TINJAUAN PUSTAKA... 8 2.1 Tinjauan tentang Tanaman Senggugu... 8 2.1.1 Taksonomi Tanaman Senggugu... 8 2.1.2 Morfologi... 9 2.1.3 Nama Lokal dan Sinonim Senggugu... 9 2.1.4 Kandungan Kimia... 9 2.1.5 Khasiat... 9 2.1.6 Efek Farmakologi Tanaman... 10 2.2 Tinjauan tentang Simplisia... 10 2.3 Tinjauan tentang Ekstraksi... 11 2.3.1 Metode Ekstraks... 11 2.4 Parameter Standarisasi Simplisia/Ekstrak... 14 2.4.1 Parameter Non Spesifik... 14 2.4.2 Parameter Spesifik... 17 2.5 Tinjauan tentang Alkaloid... 18 2.5.1 Klasifikasi Alkaloid... 19 2.5.2 Sifat Fisika-Kimia Alkaloida... 20 ix

2.6 Tinjauan tentang Kanker... 20 2.7 Tinjauan tentang Kromatografi... 21 2.8 Tinjauan tentang Kromatografi Lapis Tipis... 22 2.9 Larva Artemia salina Leach... 23 2.9.1 Klasifikasi Artemia salina Leach... 23 2.9.2 Perkembangan dan Siklus Hidup... 25 2.10 Metode Brine Shrimp Lethality Test... 27 2.10.1 Tinjauan Mengenai Uji Sitotoksisitas... 28 BAB III METODE PENELITIAN... 30 3.1 Jenis Penelitian... 30 3.2 Bahan Tanaman dan Bahan Kimia... 30 3.2.1 Bahan Tanaman... 30 3.2.2 Bahan Kimia... 30 3.3 Alat-alat Penelitian... 31 3.4 Rancangan Penelitian... 31 3.5 Tahapan Penelitian... 32 3.5.1 Penyiapan sampel... 32 3.5.2 Penetapan Standarisasi Simplisia... 32 3.5.3 Pembuatan Ekstrak... 37 3.5.4 Penetapan Standarisasi Ekstrak... 37 3.5.5 Fraksinasi Senyawa Alkaloid dari Ekstrak Etanol... 40 3.5.6 Uji Alkaloid dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT)... 40 3.6 Uji Sitotoksisitas dengan Menggunakan Metode BLST... 41 3.6.1 Penyiapan Air Laut Buatan... 41 3.6.2 Penyiapan Larva Artemia salina Leach... 41 3.6.3 Pembagian Kelompok Perlakuan... 41 3.6.4 Skema Pembagian Kelompok Perlakuan... 43 3.6.5 Uji Sitotoksisitas... 45 3.7 Analisis Data... 46 3.8 Skema Kerja Penelitian... 47 3.9 Skema Ekstraksi... 48 3.10 Skema Fraksinasi... 49 3.11 Skema Penetas Telur Artemia... 50 3.12 Skema Uji Sitotoksisitas... 51 x

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 52 BAB V SIMPULAN DAN SARAN... 71 5.1 Simpulan... 71 5.2 Saran... 71 DAFTAR PUSTAKA... 72 xi

DAFTAR TABEL Halaman Tabel 4.1. Hasil standarisasi simplisia kering daun senggugu... 52 Tabel 4.2 Hasil pemeriksaan skrining fitokimia simplisia daun senggugu... 53 Tabel 4.3 Hasil pemeriksaan standarisai ekstrak etanol daun senggugu... 54 Tabel 4.4 Hasil pemeriksaan skrining fitokimia ekstrak etanol daun senggugu... 55 Tabel 4.5 Hasil kromatografi lapis tipis dengan eluen kloroform metanol (9,5:0,5)... 57 Tabel 4.6 Hasil kromatografi lapis tipis dengan eluen kloroform metanol (1:4)... 58 Tabel 4.7 Nilai LC 50 dengan metode BSLT... 59 xii

DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1 Daun senggugu (Clerodendro serratum L. Spreng... 8 Gambar 2.2 Artemia salina Leach... 23 Gambar 2.3 Siklus hidup Artemia salina Leach... 26 Gambar 2.4 Perkembangan nauplii dari telur sampai menjadi nauplii siap uji... 27 Gambar 4.1 Ekstrak kental daun senggugu... 53 Gambar 4.2 Tahapan fraksinasi alkaloid... 55 Gambar 4.3 Hasil fraksinasi senyawa alkaloid ekstrak etanol daun senggugu yang telah diuapkan... 56 Gambar 4.4 Hasil kromatografi lapis tipis dengan eluen kloroform metanol (9,5:0,5)... 57 Gambar 4.5 Hasil kromatografi lapis tipis dengan eluen kloroform metanol (1:4)... 58 Gambar L6.1 Hasil skrining fitokimia simplisia golongan senyawa tanin... 92 Gambar L6.2 Hasil skrining fitokimia simplisia golongan senyawa terpenoid... 92 Gambar L6.3 Hasil skrining fitokimia simplisia golongan senyawa steroid... 92 Gambar L6.4 Hasil skrining fitokimia simplisia golongan senyawa saponin... 93 Gambar L6.5 Hasil skrining fitokimia simplisia golongan senyawa alkaloid... 93 Gambar L6.6 Hasil skrining fitokimia simplisia golongan senyawa flavonoid... 93 xiii

Gambar L6.7 Hasil skrining fitokimia simplisia golongan senyawa kuinon... 94 Gambar L7.1 Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol golongan senyawa tanin... 95 Gambat L7.2 Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol golongan senyawa terpenoid... 95 Gambar L7.3 Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol golongan senyawa steroid... 95 Gambar L7.4 Hasil skrining fitokimia esktrak etanol golongan senyawa saponin... 96 Gambar L7.5 Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol golongan senyawa alkaloid... 96 Gambar L7.6 Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol golongan senyawa flavonoid... 96 Gambar L7.7 Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol golongan senyawa kuinon... 97 Gambar L10.1 Tempat penetasan telur Artemia... 105 Gambar L10.2 Garam krosok... 105 Gambar L10.3 Media hidup telur Artemia... 105 Gambar L10.4 Baku induk ekstrak etanol dan fraksi kloroform... 106 Gambar L10.5 Pembagian kelompok perlakuan ekstrak etanol... 106 Gambar L10.6 Pembagian kelompok perlakuan fraksi kloroform... 106 Gambar L13.1 Kurva hubungan nilai probit vs log konsentrasi ekstrak etanol daun senggug... 115 Gambar L14.1 Kurva hubungan nilai probit vs log konsentrasi fraksi kloroform daun senggugu... 118 xiv

DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1 Hasil pemeriksaan determinasi simplisia daun senggugu... 83 Lampiran 2 Hasil pemeriksaan standarisasi non spesifik simplisia serbuk daun senggugu... 84 Lampiran 3 Hasil pemeriksaan standarisai spesifik simplisia serbuk daun senggugu... 86 Lampiran 4 Hasil pemeriksaan standarisasi non spesifik ekstrak kental daun senggugu... 88 Lampiran 5 Hasil pemeriksaan standarisai spesifik ekstrak kental daun senggugu... 90 Lampiran 6 Hasil gambar skrining fitokimia simplisia senggugu... 92 Lampiran 7 Hasil gambar skrining fitokimia ekstrak etanol daun senggugu... 95 Lampiran 8 Uji sitotoksisitas tehadap ekstrak etanol dan hasil pengamatan dengan metode BSLT... 98 Lampiran 9 Uji sitotoksisitas terhadap fraksi ektrak etanol dan hasil pengamatan dengan metode BSLT... 101 Lampiran 10 Penetasan Telur Artemia dan pembagian kelompok perlakuan... 105 Lampiran 11 Fraksinasi alkaloid dan hasil... 107 Lampiran 12 KLT... 112 Lampiran 13 Perhitungan data statistik SPSS 17.0 analisis probit terhadap ekstrak etanol daun senggugu... 113 Lampiran 14 Perhitungan data statistik SPSS 17.0 analisis probit terhadap fraksi ekstrak etanol daun senggugu... 116 xv