ISOLASI, IDENTIFIKASI, DAN UJI SENSITIVITAS Pseudomonas sp. DARI PUS PASIEN RUMAH SAKIT DR. MOEWARDI DAN RUMAH SAKIT KUSTATI SURAKARTA TERHADAP BEBERAPA ANTIBIOTIK SKRIPSI OLEH : FEMI RISNAWATI K 100030062 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2007
ISOLASI, IDENTIFIKASI, DAN UJI SENSITIVITAS Pseudomonas sp. DARI PUS PASIEN RUMAH SAKIT DR. MOEWARDI DAN RUMAH SAKIT KUSTATI SURAKARTA TERHADAP BEBERAPA ANTIBIOTIK SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai Derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta Di Surakarta Oleh : Femi Risnawati K 100030062 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2007 ii
iii
HALAMAN PERSEMBAHAN Mahasuci Allah yang menjadikan gugusan-gugusan bintang di langit dan Dia menjadikan juga padanya matahari dan bulan yang bercahaya. Dia (pula) yang menjadikan malam dan siang silih berganti bagi orang yang ingin mengambil pelajaran atau orang yang ingin bersyukur. ( Q.S Al-Furqaan(25) : 61-62 ) Cukuplah Allah menjadi Penolong kami dan Allah sebaik-baik Pelindung. ( Ali Imran : 173 ) Dan sesungguhnya pertolongan ada bersama kesabaran, jalan keluar ada bersama kesulitan dan bersama kesulitan ada kemudahan. (HR.Ahmad,no.2800) Sesungguhnya hanya orang-orang yang bersabarlah yang dicukupkan pahala tanpa batas. (Az-Zumar : 10) Dengan kerendahan, ketulusan hati dan tanda baktiku skripsi ini Kupersembahkan kepada : @ Allah SWT atas karunia, rahmat, dan hidayah-nya skripsi ini tercipta @ Kedua orang tuaku untuk semua do a dan kasih sayangnya yang tiada batasnya @ Adik-adikku : Septy dan Ida, do a kalian tambahkan kekuatan dalam jiwaku terimakasih atas segalanya @ Teman-teman skripsiku : Ambar, Rofiah, Umni, Rini, Ana, Amel, Arum dan Ari terimakasih atas kerjasama dan dukungannya @ Sahabat-sahabatku : Estu, Evi, Aini, Hana, Eni, Warni, Yani, Anik Srg, terimakasih atas canda dan problema yang ada, kalianlah yang selalu membuat warna-warni duniaku @ Teman-teman dan adik-adik kos wisma kiky @ Teman-teman angkatan 2003 @ Almamater UMS iv
DEKLARASI Saya menyatakan bahwa penelitian / skripsi ini adalah hasil pekerjaan saya sendiri dan sepanjang pengetahuan saya tidak berisi materi yang dipublikasi / ditulis orang lain atau telah dipergunakan dan diterima sebagai persyaratan menyelesaikan studi pada universitas yang lain, kecuali pada bagian-bagian tertentu yang telah dinyatakan dalam teks. Apabila penelitian / skripsi ini adalah jiplakan daripada skripsi orang lain, maka saya siap menerima sanksi secara akademik maupun hukum. Surakarta, Januari 2007 Peneliti ( Femi Risnawati ) v
KATA PENGANTAR Assalamu alaikum Wr. Wb. Alhamdulillah, Segala puji hanya bagi Allah SWT yang senantiasa melimpahkan rahmat dan hidayah-nya kepada semua makhluk-nya. Sholawat serta salam semoga tercurah kepada Nabi Besar Muhammad SAW beserta keluarga, sahabat, tabi in, tabi ut tabi in, dan umatnya yang selalu istiqomah hingga akhir zaman. Dengan segala kekuasaan dan rahmat Allah SWT, akhirnya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul ISOLASI, IDENTIFIKASI, DAN UJI SENSITIVITAS Pseudomonas sp. DARI PUS PASIEN RUMAH SAKIT DR. MOEWARDI DAN RUMAH SAKIT KUSTATI SURAKARTA TERHADAP BEBERAPA ANTIBIOTIK sebagaimana mestinya. Adapun tugas akhir ini dibuat, dimaksudkan untuk melengkapi persyaratan guna memperoleh Derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi di Universitas Muhammadiyah Surakarta. Dengan segenap ketulusan dan kerendahan hati, penulis mengucapkan terima kasih kepada: - Ibu Nurul Mutmainah, M.Si., Apt selaku dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta - Dra. Susi Iravati, Ph.D., Apt selaku pembimbing I yang telah memberikan bimbingan dan arahan selama penelitian sampai penyusunan skripsi ini. vi
- Peni Indrayudha, S.F, Apt selaku pembimbing II yang telah memberikan bimbingan dan arahan selama penelitian sampai penyusunan skripsi ini. - Triastuti R, M.Si selaku penguji I - Nurcahyanti W, S.Si., M.Biomed., Apt selaku penguji II dan ketua sidang - Bapak dan ibu dosen Fakultas Farmasi ilmu, bimbingan dan pengalaman yang diberikan serta seluruh staf karyawan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta - Pimpinan dan staf karyawan laboratorium biologi Fakultas Farmasi - Pimpinan dan staf karyawan RSUD Dr. Moewardi dan RSU Islam Kustati Surakarta yang telah memberikan ijin dan bantuan dalam pengambilan sampel - Keluarga yang telah memberikan dukungan baik materi maupun doa untuk kesuksesan dan kemudahan penulis menyelesaikan skripsi ini. - Pihak-pihak terkait yang tidak bisa penulis sebutkan satu persatu Penulis mengakui bahwa masih banyak kekurangan maupun kelemahan dalam penulisan skripsi ini. Untuk itu, penulis berterima kasih atas kritik dan saran yang diberikan demi perbaikan skripsi ini. Wassalamu alaikum Wr. Wb. Surakarta, Januari 2007 Penulis vii
DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL.. HALAMAN PENGESAHAN HALAMAN PERSEMBAHAN HALAMAN DEKLARASI.. KATA PENGANTAR.. DAFTAR ISI.. DAFTAR GAMBAR... DAFTAR TABEL... DAFTAR LAMPIRAN INTISARI. i iii iv v vi viii x xi xii xiii BAB 1 PENDAHULUAN A. Latar Belakang Masalah... 1 B. Perumusan Masalah... 5 C. Tujuan Penelitian... 5 D. Tinjauan Pustaka... 5 1. Infeksi dan Pus... 5 2. Taksonomi Pseudomonas... 9 3. Tumor dan Kanker... 12 4. Identifikasi Bakteri 13 5. Antibiotik 15 6. Resistensi Antibiotik 22 viii
7. Uji Aktivitas Antibiotik 24 8. Media 27 9. Sterilisasi... 30 BAB II METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian... 33 B. Bahan dan Alat... 33 C. Jalannya Penelitian..... 33 1. Pengambilan Sampel... 33 2. Isolasi dan Identifikasi Bakteri... 34 3. Pembuatan Suspensi Bakteri... 35 4. Uji Sensitivitas Bakteri... 35 D. Cara Analisis.... 36 BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil Pengambilan Sampel... 41 B. Hasil Isolasi dan Identifikasi Bakteri... 42 C. Hasil Uji Sensitivitas Pseudomonas sp... 45 BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan..... 54 B. Saran...... 55 DAFTAR PUSTAKA. 56 LAMPIRAN 59 ix
DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Struktur Ciprofloxasin 17 Gambar 2. Struktur Cefotaxim. 18 Gambar 3. Struktur Oxasilin. 19 Gambar 4. Struktur Gentamisin 20 Gambar 5. Struktur Imipenem.. 21 Gambar 6. Skema identifikasi bakteri Pseudomonas sp dari pus. 37 Gambar 7. Skema pembuatan preparat dan pengecatan Gram. 38 Gambar 8. Skema uji biokimia P. aeruginosa dan Pseudomonas sp (non aeruginosa).. 39 Gambar 9. Skema pembuatan suspensi bakteri 39 Gambar 10. Skema uji sensitivitas Pseudomonas sp 40 x
DAFTAR TABEL Tabel 1. Perolehan isolat P.aeruginosa dan Pseudomonas sp (non aeruginosa)... 45 Tabel 2. Hasil uji sensitivitas isolat Pseudomonas sp (non aeruginosa) dan P. aeruginosa 47 Tabel 3. Persentase sensitivitas P. aeruginosa dan Pseudomonas sp (non aeruginosa) di Rumah Sakit Dr. Moewardi terhadap antibiotik. 48 Tabel 3. Persentase sensitivitas P. aeruginosa dan Pseudomonas sp (non aeruginosa) di Rumah Sakit Kustati terhadap antibiotik... 48 xi
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Komposisi media untuk uji mikrobiologi... 60 Lampiran 2. Tabel komposisi cat gram... 65 Lampiran 3. Tabel Identifikasi Enterobacteriaceae dengan Uji Biokimia.. 66 Lampiran 4. Tabel sampel dari Rumah Sakit Dr. Moewardi Surakarta... 68 Lampiran 5. Tabel sampel dari Rumah Sakit Kustati Surakarta... 70 Lampiran 6. Gambar goresan sampel pus dalam media agar darah dan Mc. Conkey... 72 Lampiran 7. Gambar sel batang Gram negatif dengan pengecatan Gram Dengan perbesaran 40 X 10... 73 Lampiran 8. Gambar P. aeroginosa dan Pseudomonas sp (non aeruginosa) dalam uji biokimiawi... 74 Lampiran 9. Gambar hasil uji sensitivitas Pseudomonas sp terhadap beberapa antibiotik... 75 Lampiran 10. Alat-alat uji mikrobiologi... 76 Lampiran 11. Zona diameter hambatan antibiotik standar... 80 Lampiran 12. Surat keterangan pengambilan sample di Rumah Sakit Dr. Moewardi... 84 xii
INTISARI Penggunaan antibiotik yang terus meningkat dan tidak terkendali dengan baik, menyebabkan timbulnya strain bakteri yang resisten terhadap berbagai jenis antibiotik. Pseudomonas termasuk bakteri yang tersebar luas di lingkungan, beberapa diantaranya merupakan bakteri patogen yang penting bagi manusia, menyebabkan sejumlah infeksi yang meliputi infeksi luka, infeksi saluran kemih dan septikemia, serta resisten terhadap banyak antibiotik. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui persentase infeksi yang disebabkan Pseudomonas sp. (non aeruginosa) dan P. aeruginosa serta mengetahui tingkat sensitivitas isolat bakteri tersebut dari sampel pus pasien Rumah Sakit Dr. Moewardi dan Rumah Sakit Kustati Surakarta terhadap antibiotik Ciprofloxasin, Gentamisin, Oxasilin, Cefotaksim, dan Imipenem sehingga diketahui antibiotik yang poten terhadap bakteri tersebut. Dalam penelitian ini dilakukan isolasi dan identifikasi bakteri Pseudomonas sp dari pus pasien, kemudian dilakukan uji sensitivitas isolat tersebut terhadap beberapa antibiotik dengan menggunakan metode Difusi Kirby Bauer. Disk antibiotik yang digunakan pada penelitian ini adalah Ciprofloxacin 5μg, Gentamisin 10μg, Oxasilin 5μg, Cefotaksim 30μg, dan Imipenem 10μg. Kriteria sensitif atau resisten ditentukan berdasarkan diameter hambatan di sekitar disk antibiotik yang dibandingkan dengan zona diameter antibiotik standar. Sampel pus dari 27 pasien di Rumah Sakit Dr. Moewardi Surakarta diperoleh 6 isolat P. aeruginosa yang menunjukkan sensitivitas terhadap Cefotaksim 16,7%, Gentamisin dan Ciprofloxasin 50% serta Imipenem 100% dan diperoleh 5 isolat Pseudomonas sp (non aeruginosa) yang memiliki persentase sensitivitas terhadap Oxasilin dan Cefotaksim 20%, Gentamisin dan Ciprofloxasin 40% serta Imipenem 80%. Delapan belas sampel dari Rumah Sakit Kustati diperoleh 2 isolat P. aeruginosa yang menunjukkan 100% sensitif terhadap Imipenem, sedangkan 1 isolat Pseudomonas sp (non aeruginosa) memiliki persentase sensitivitas terhadap Gentamisin, Ciprofloxasin dan Imipenem masingmasing 100%. Kata kunci: Oxasilin, Cefotaksim, Gentamisin, Ciprofloxasin, Imipenem, Pseudomonas sp, Resistensi, Sensitivitas, Rumah Sakit xiii