DAFTAR ISI ABSTRAK... KATA PENGANTAR... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR LAMPIRAN... i ii iii v vi ix BAB I PENDAHULUAN... 1 1.1 Latar Belakang... 1 1.2 Rumusan Masalah... 6 1.3 Batasan Masalah... 6 1.4 Tujuan Penelitian... 7 1.5 Manfaat Penelitian... 7 BAB II KAJIAN PUSTAKA... 9 2.1 Kulit Sapi... 9 2.2 Proses Pembuatan Kerupuk Kulit.. 15 2.2.1. Kandungan Kerupuk Kulit 17 2.3. Dampak Konsumsi Kerupuk Rambak Berbahan Dasar Limbah Kulit Sapi... 19 2.4. Enzim Protease... 22 2.5. Bacillus subtilis dan Bacillus pumilus... 25 2.6. Produksi Protease Dari Bacillus subtilis dan Bacillus pumilus... 31
2.7. Analisis Kadar Protein Berdasarkan..... 32 2.8. Pengukuran Pertumbuhan Bakteri... 33 BAB III. METODE PENELITIAN... 36 3.1 Objek dan Lokasi Penelitian... 36 3.2 Alat dan Bahan... 36 3.2.1 Alat... 36 3.2.2 Bahan... 36 3.3 Bagan Alir... 38 3.4 Prosedur Kerja... 39 3.4.1 Pertumbuhan B.subtilis dan B.pumilus... 3.4.2 Produksi Protease dari Bacillus subtilis... 39 39 3.4.3 Pengujian Aktivitas protase secara Kuantitatif dari Bakteri bacillus pumilus dan bacillus subtilis... 40 3.4.4 Optimasi Kondisi Proses Unhairing... 40 3.5 Analisis Kualitas Kulit... 41 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 42 4.1 Hasil Optimasi ph Media Pembiakan bakteri Bacillus pumilus... 41 4.2 Hasil Uji Aktivitas Enzim Protease Bacillus pumilus dan Bacillus subtilis... 47 4.3 Hasil Uji Unhairing Bacillus subtilis dan Bacillus pumilus... 51
4.4 Hasil Optimasi Unhairing Meliputi Volume dan Waktu Inkubasi... 54 4.4.1 Hasil Optimasi Volume Ekstrak Kasar Protease Terhadap Unhairing Kulit Sapi... 54 4.4.2 Hasil Pemilihan Waktu Perendaman Terbaik Pada Proses Unhairing Kulit Sapi... 4.5. Hasil Analisis Kadar Protein Dengan Metode Kjehdal... BAB V KESIMPULAN DAN SARAN... 57 59 61 5.1 Kesimpulan... 61 5.2 Saran... 62 DAFTAR PUSTAKA... 63 LAMPIRAN... 67 RIWAYAT HIDUP... 74
Tabel 2.1 Tabel 2.2 DAFTAR TABEL Asam amino... Mikroba penghasil protease ekstraseluler... 14 26 Tabel 2.3 Enzim protease yang dihasilkan oleh Bacillus sp. 27 Tabel 2.4 Klasifikasi Bacillus subtilis... 29 Tabel 4.1 Hasil uji optimasi ph media produksi Bacillus pumilus... 43 Tabel 4.2 Hasil uji Aktivitas protease dari B.subtilis Sp. dan B. pumilus... 48 Tabel 4.3 Hasil uji unhairing kulit sapi dengan penambahan protease Bacillus subtilis dan Bacillus pumilus... 52 Tabel 4.4 Hasil optimais volume ekstrak protease pada unhairing kulit sapi... 56 Tabel 4.5 Hasil Pemilihan Waktu Perendaman Terbaik dari 18;20;22 dan 24 jam untuk unhairing kulit. 57 Tabel 4.6 Hasil analisis kadar protein total dengan metode Kjehdal 59
DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Bagian kulit sapi yang dihilangkan pada proses unhairing... 10 Gambar 2.2 Susunan α-helik pada keratin... 11 Gambar 2.3 Ikatan disulfida pada sistin... 12 Gambar 2.4 Ikatan Sulfida yang dibentuk pada rantai panjang kolagen... 13 Gambar 2.5 Diagram alir pembentukan kerupuk rambak secara konvensional 16 Gambar 2.6 Reaksi Na 2 S dan Ca(OH) 2 pada proses unhairing... 17 Gambar 2.7 Posisi Substrat Pada Sisi Aktif Enzim... 23 Gambar 2.8 Mekanisme katalitik serin protease... 25 Gambar 2.9 Subtilisin... 30 Gambar 2.10 Bentuk Permukaan Bacillus pumilus... 31 Gambar 2.11 Gambar 2.12 Gambar 3.1 Gambar 4.1 Perhitungan sel dengan metode turbidimetri... Hemasitometer yang dapat digunakan untuk perhitungan total count Bagan alir penelitian. Kurva hasil optimasi ph media pada pertumbuhan Bacillus pumilus... 34 35 38 43 Gambar 4.2.1 Pertumbuhan Bacillus pumilus pada medium komersial. 46 Gambar 4.3 Reaksi hidrolisis kasein... 50
Gambar 4.4 Pembentukan kompleks Cu 2+ dengan fenol dan indol pada asam amino tyrosin dalam larutan alkali menyebabkan reduksi ion Cu 2+... 50 Gambar 4.5 Hasil Uji Unhairing Kulit Sapi dengan penambahan Bacillus pumilus dan Bacillus subtilis... 51 Gambar 4.6 Mekanisme putusnya ikatan sulfide pada sistin... 53 Gambar 4.7 Hasil optimasi volum ekstrak protease pada unhairing kulit sapi... 55 Gambar 4.8 Hasil penentuan waktu perendaman terbaik pada unhairing kulit sapi... 58
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 Kurva Standar Tyrosin... 68 Lampiran 2 Hasil Uji Aktivitas Enzim... 69 Lampiran 3 Analisis Morfologi 70 Lampiran 4 Hasil Analisis Biokimia... 71 Lampiran 5 Foto-Foto Penelitian...... 72 Lampiran 6 Hasil Analisis Kjehdal. 73