23 BAHAN DAN METODE Waktu dan Tempat Penelitian Pengamatan terhadap sifat rontok bulu dan produksi telur dilakukan sejak itik memasuki periode bertelur, yaitu pada bulan Januari 2011 sampai Januari 2012. Pengamatan ciri-ciri biologis itik hasil persilangan yang meliputi bobot tetas, bobot badan masa starter dan grower, konsumsi dan konversi ransum, warna bulu, dan kualitas telur dilakukan sejak itik menetas, yaitu pada bulan Juli 2010. Kegiatan penelitian dilakukan di laboratorium kandang itik Balai Penelitian Ternak Ciawi-Bogor untuk pengamatan fenotipik dan di Laboratorium Kebidanan dan Reproduksi, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga, Surabaya untuk analisis hormon prolaktin. Materi Penelitian Penelitian ini menggunakan itik AP dan PA, yaitu hasil persilangan antara itik alabio (A) dan itik peking (P). Itik AP adalah persilangan antara itik alabio jantan dengan peking betina, sedangkan itik PA adalah hasil persilangan itik peking jantan dan alabio betina. Rancangan perkawinan silang pada populasi dasar itik Alabio dengan itik Peking secara resiprokal tercantum pada Gambar 6. Generasi P0 Alabio X Peking Alabio X (populasi dasar) Peking Generasi F1 PA PA AP AP Gambar 6 Skema persilangan resiprokal itik alabio dengan itik peking untuk evaluasi pewarisan sifat rontok bulu terkait produksi telur. Tujuan perkawinan silang adalah untuk mengetahui genotipe pada masingmasing populasi itik. Informasi tersebut akan berguna sebagai keluarga acuan (reference family) apabila akan melakukan program pemuliaan lanjutan, terutama secara molekuler pada ternak itik yang berhubungan dengan sifat rontok bulu. Sistem perkawinan untuk menghasilkan keturunan populasi F1 dilakukan dengan IB (Inseminasi Buatan). Nomor pejantan dan nomor induknya dicatat, sehingga diketahui bapak dan induk dari masing-masing individu keturunan F1
24 tersebut. Jumlah populasi masing-masing itik hasil persilangan yang diamati adalah 10 ekor jantan dan 90 ekor betina, sehingga jumlah seluruhnya yang diamati adalah 200 ekor. Jumlah itik alabio dan peking untuk menghasilkan masing-masing persilangan adalah 7 ekor jantan dan 25 ekor betina. Sistem pemeliharaan itik dilakukan secara terkurung sesuai dengan standar operasional yang ada di Balai Penelitian Ternak. Kedua jenis itik dipelihara sejak DOD sampai produksi telur 48 minggu. Jenis pakan yang diberikan untuk kedua populasi itik adalah sama, yaitu ransum komersial dengan kandungan protein 21-22% dan energy metabolic (ME) 2920 kkal/kg pada masa starter, sedangkan pada masa grower digunakan ransum dengan kandungan protein 15-16% dan ME 2500 kkal/kg. Jenis pakan yang diberikan pada masa produksi adalah sama untuk semua itik, yaitu pakan jadi dengan kandungan protein sekitar 18-19% dan ME 2900 kkal/kg, dengan jumlah pemberian 250-300 g/ekor. Air minum diberikan secara ad libitum. Itik-itik tersebut ditempatkan pada kandang brooder sejak menetas sampai umur 4 minggu (masa starter) dan diberi wing band (nomor pada sayap) untuk memudahkan pencatatan karena pengamatan dilakukan pada masingmasing individu itik. Pada masa grower, itik-itik ditempatkan pada kandang litter berukuran 1,5 x 2,5 m yang beralaskan sekam sampai siap produksi. Pada umur 4 bulan (sebelum produksi telur), itik-itik ditempatkan pada kandang individu (cages). Peubah yang diamati adalah ciri-ciri biologis itik, yang meliputi bobot badan yang ditimbang setiap minggu pada masa starter dan setiap 2 minggu pada masa grower, konsumsi dan konversi ransum, warna bulu, dan kualitas telur pertama (bobot telur, bobot kuning telur, bobot putih telur, dan bobot kerabang). Pada periode produksi, peubah yang diamati adalah pola rontok bulu, yang meliputi frekuensi dan waktu mulai terjadinya, lama berhenti bertelur, dan konsentrasi hormon prolaktin yang dikaitkan dengan produksi telur selama 48 minggu. Konsentrasi hormon prolaktin diukur pada periode rontok bulu, periode produksi telur sebelum dan setelah rontok. Waktu mulai terjadi rontok bulu ditentukan berdasarkan hari ketika itikitik tersebut berhenti bertelur dan jatuhnya bulu sayap primer maupun sekunder. Pada penelitian ini dibuat enam kelompok berdasarkan waktu mulai terjadinya
25 rontok bulu, yaitu hari ke < 60, 61-120, 121-180, 181-240, 241-300, dan > 300 yang dihitung sejak itik pertama kali bertelur. Lamanya berhenti bertelur dihitung berdasarkan jumlah hari itik-itik tersebut mulai berhenti bertelur sampai bertelur kembali. Pada penelitian ini dibuat lima kelompok lamanya berhenti bertelur, yaitu < 30, 31-60, 61-90, 91-120, dan > 120 hari. Produksi telur dinyatakan dengan persen, yaitu banyaknya butir telur yang dihasilkan seekor itik selama 48 minggu dibagi jumlah hari selama 48 minggu dikali 100%. Pengamatan produksi telur dilakukan selama 48 minggu dengan pertimbangan bahwa pemeliharaan selama 48 minggu sudah dapat memberikan informasi keunggulan produksi seekor individu itik. Selanjutnya, itik-itik dibiarkan mengalami rontok bulu secara alami untuk melakukan regenerasi saluran reproduksinya sebelum memasuki siklus produksi berikutnya. Pengamatan lamanya berhenti bertelur dan produksi telur dilakukan secara individu setiap hari. Cara pengukuran hormon prolaktin dilakukan sesuai Yanhendri (2007), yaitu sampel darah itik sebanyak 3 ml diambil dari pembuluh darah vena yang ada di sayap dengan syringe, kemudian disimpan dalam tabung steril selama 7-8 jam dan tabung dalam kondisi miring sekitar 30 C. Setelah darah terpisah antara serum dan plasma, kemudian serum dipindahkan ke tabung lain yang lebih kecil. Kemudian disentrifuse selama 5 menit dengan kecepatan 2500 rpm untuk membersihkan serum dari gumpalan sel-sel darah. Sampel serum ini disimpan pada suhu -20 C untuk digunakan dalam pengukuran kadar hormon prolaktin. Aktivitas sekresi hormon prolaktin pada itik terjadi malam hari, yaitu pada saat tidak ada cahaya, termasuk cahaya matahari (Djojosoebagjo, 1996) sehingga pengambilan sampel darah disesuaikan dengan kondisi fisiologi alami itik tersebut, yaitu sekitar pukul 21.00 WIB. Metode pengukuran yang digunakan adalah enzim immunoassay (ELISA) teknik fase padat dengan menggunakan kit Avian Prolactin atau Luteotropic Hormone (PRL/LTH) ELISA yang diproduksi oleh Cusabio Biotech China. Pengambilan sampel darah itik dilakukan dalam 3 periode, yaitu periode rontok bulu, periode produksi telur sebelum rontok bulu, dan periode produksi telur sesudah rontok bulu. Periode sebelum rontok bulu
26 adalah 7-9 minggu setelah bertelur pertama dan periode setelah rontok bulu adalah 4-5 minggu setelah bertelur kembali, sedangkan pada periode rontok bulu adalah 2-3 hari setelah lepasnya bulu sayap. Analisis Data Analisis sidik ragam (ANOVA) digunakan untuk penentuan signifikansi pengaruh waktu mulai terjadinya rontok bulu pada produksi telur 48 minggu, pengaruh kondisi, yaitu rontok bulu, produksi telur sebelum dan sesudah rontok pada konsentrasi hormon prolaktin, pengaruh genotipe itik pada produksi telur, pengaruh kejadian rontok pada kualitas telur pertama dan pengaruh bobot badan pada kedua genotipe itik. Persamaan ANOVA sebagai berikut : Keterangan : y ij = Peubah yang diamati µ = rataan umum α i = pengaruh perlakuan ke-i ε ij = galat y ij = µ + α i + ε ij Analisis berikutnya adalah melakukan scatter plot antara peubah sifat rontok bulu dengan produksi telur pada kelompok itik yang mengalami rontok bulu. Keterkaitan sifat rontok bulu dengan produksi telur dapat dianalisis dengan korelasi dan regresi (Mattjik & Sumertajaya 2000). Analisis yang sama dilakukan antara konsentrasi hormon prolaktin pada periode rontok bulu dengan produksi telur 48 minggu. Nilai koefisien korelasi akan menentukan hubungan antara kedua peubah tersebut, sedangkan nilai koefisien regresi akan menentukan jumlah perubahan produksi telur, apabila terjadi perubahan dalam konsentrasi hormon prolaktin. Persamaan regresinya sebagai berikut : y = a + bx Keterangan : a = intersep, b = koefisien regresi produksi telur terhadap lamanya berhenti bertelur, x = lamanya berhenti bertelur karena rontok bulu (hari), y = produksi telur (%)
27 Koefisien regresi dihitung dengan rumus : b yx = XY - ( X) ( Y)/n X 2 - ( X) 2 /n Koefisien korelasi dihitung dengan rumus : r p = XY - ( X)( Y) /n X 2 - ( X) 2 /n Y 2 - ( Y) 2 /n ½ Pengaruh peubah bebas pada peubah tak bebas secara simultan dilakukan uji F dengan software SAS 9.0, sedangkan untuk melihat pengaruh peubah bebas secara parsial diuji dan dihitung dengan t-student (Mattjik & Sumertajaya 2000). Selanjutnya, ditentukan persamaan regresi, nilai koefisien determinasi (R 2 ) dan Kuadrat Tengah Galat (KTG). Nilai koefisien determinasi yang semakin besar dan nilai KTG yang semakin kecil menunjukkan model regresi semakin baik. Perhitungan heterosis dilakukan untuk pendugaan keunggulan itik hasil persilangan dibandingkan dengan tetuanya. Nilai heterosis dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut (Noor 2010) : AP - ½ (AA + PP) Heterosis AP = x 100 % ½ (AA + PP) PA - ½ (AA + PP) Heterosis PA = x 100 % ½ (AA + PP) Keterangan : AP = rataan peubah (produksi telur atau lama berhenti bertelur) AP PA = rataan peubah (produksi telur atau lama berhenti bertelur) PA AA = rataan peubah (produksi telur atau lama berhenti bertelur) alabio PP = rataan peubah (produksi telur atau lama berhenti bertelur ) peking
28 Perhitungan nilai heterosis hanya dilakukan pada peubah lama berhenti bertelur dan produksi telur, karena dua peubah tersebut yang sangat mempengaruhi sifat rontok bulu.