Hayun, Nelly D. Leswara dan Camelia D.P. Masrijal Departemen Farmasi FMIPA-UI, Kampus UI Depok, ABSTRACT

dokumen-dokumen yang mirip
BAB III METODOLOGI PENELITIAN

BAB III METODOLOGI PENELITIAN

PENETAPAN KADAR CAMPURAN PARASETAMOL, PROPIFENAZON DAN KAFEIN DARI SEDIAAN TABLET DENGAN METODE KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (KLT) DENSITOMETRI

PENETAPAN KADAR TRIPROLIDINA HIDROKLORIDA DAN PSEUDOEFEDRINA HIDROKLORIDA DALAM TABLET ANTI INFLUENZA SECARA SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF

BAB III ALAT, BAHAN, DAN CARA KERJA. Alat kromatografi kinerja tinggi (Shimadzu, LC-10AD VP) yang

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN

PRASILIA NOERICA

PENETAPAN KADAR PARASETAMOL DAN TRAMADOL DALAM TABLET ANTI NYERI DENGAN Thin Layer Chromatography (TLC)- SPEKTROFOTODENSITOMETRI ABSTRAK

APRIALIA RIESIANE HARIYANTO

BAB III METODOLOGI PENELITIAN. 3. Bahan baku dengan mutu pro analisis yang berasal dari Merck (kloroform,

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN. Merck, kemudian larutan DHA (oil) yang termetilasi dengan kadar akhir

PHARMACY, Vol.06 No. 01 April 2009 ISSN

PHARMACY, Vol.06 No. 02 Agustus 2009 ISSN Febriyanti Diah Puspita Sari*, Pri Iswati Utami*

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN. 4.1 Spektrum Derivatif Metil Paraben dan Propil Paraben

BAB III METODOLOGI PENELITIAN. Penelitian dilakukan di Laboratorium Kimia Farmasi Analisis Kuantitatif

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

METODE PENELITIAN. Penelitian dilakukan di Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi USU

Analisis Fenobarbital..., Tyas Setyaningsih, FMIPA UI, 2008

BAB III BAHAN DAN CARA KERJA. Laboratorium Bioavailabilitas dan Bioekivalensi, Departemen Farmasi,

BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN

BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN

VALIDASI PENETAPAN KADAR BESI DALAM SEDIAAN TABLET MULTIVITAMIN DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

VALIDASI METODE IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KADAR SIBUTRAMIN HCl DALAM KAPSUL HERBAL PELANGSING SECARA KLT-DENSITOMETRI ANGELINA FAUSTINE

BAB III METODE PENELITIAN. A. Metodologi Penelitian. Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan metodologi

BAB III METODOLOGI PENELITIAN

VALIDASI METODE ANALISA PENETAPAN KADAR EPIGALOKATEKIN GALAT DENGAN KLT DENSITOMETRI

BAB III METODE PENELITIAN. formula menggunakan HPLC Hitachi D-7000 dilaksanakan di Laboratorium

BAB I PENDAHULUAN. Hidrokortison asetat adalah kortikosteroid yang banyak digunakan sebagai

Penetapan Simultan Kadar Fenilpropanolamin Hidroklorida dan Klorfeniramin Maleat dalam Tablet secara Spektrofotometri

BAB III BAHAN DAN CARA KERJA. Isolat Aspergillus flavus NTGA7A4UVE10 hasil penelitian terdahulu

BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN

FAKULTAS FARMASI UNIKA WIDYA MANDALA SURABAYA

IDENTIFIKASI SILDENAFIL SITRAT DALAM KOPI GRENG DAN MINUMAN HERBAL PENAMBAH STAMINA DENGAN METODE KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS KATOLIK WIDYA MANDALA SURABAYA

BAB III METODOLOGI PENELITIAN

BAB III METODE PENELITIAN

KETOPROFEN, PENETAPAN KADARNYA DALAM SEDIAAN GEL DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET-VISIBEL. Fajrin Noviyanto, Tjiptasurasa, Pri Iswati Utami

PHARMACY, Vol.06 No. 03 Desember 2009 ISSN

VALIDASI METODE ANALISIS UNTUK PENETAPAN KADAR TABLET ASAM MEFENAMAT SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

VALIDASI METODE ANALISIS TABLET LOSARTAN MERK B YANG DITAMBAH PLASMA MANUSIA DENGAN KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI FASE TERBALIK

Gambar 1. Alat kromatografi gas

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN. 1. Pembuatan larutan induk standar fenobarbital dan diazepam

OLEH: RISCA MAHARANI

VALIDASI METODE IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KADAR SILDENAFIL SITRAT DALAM SEDIAAN PERMEN KARET CINTA SECARA KLT-DENSITOMETRI YULIANI SO

RINGKASAN. Kata kunci : Optimasi; Fase Gerak; Campuran dalam Sirup; HPLC

VALIDASI METODE ANALISIS PENENTUAN KADAR HIDROKINON DALAM SAMPEL KRIM PEMUTIH WAJAH MELALUI KLT-DENSITOMETRI

PENETAPAN KADAR PARASETAMOL, KAFEIN DAN ASETOSAL DALAM SEDIAAN ORAL SECARA SIMULTAN DENGAN METODE KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)

VALIDASI METODE IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KADAR TADALAFIL DALAM SEDIAAN PERMEN KARET CINTA SECARA KLT-DENSITOMETRI

BAB III METODE PENELITIAN

BAB III METODOLOGI PENELITIAN

BAB III METODE PENELITIAN

ANALISIS BAHAN KIMIA OBAT ASAM MEFENAMAT DALAM JAMU PEGAL LINU DAN JAMU REMATIK YANG BEREDAR DI KOTA MANADO

Spektrum serapan derivat kedua deksklorfeniramin 20 mcg/ml

SIMULTANEOUS DETERMINATION OF PARACETAMOL AND IBUPROFENE MIXTURES BY HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY

4 Hasil dan Pembahasan

BAB 4 HASIL PERCOBAAN DAN BAHASAN

UJI SKRINING DAN DETERMINASI KODEIN DENGAN TLC SPEKTROFOTODENSITOMETRI

BAB III METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan pada Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi

PENENTUAN KUANTITATIF MORFIN DALAM URIN SECARA SPEKTROFOTODENSITOMETRI. N. M. Suaniti dan M. A. Hitapretiwi Suryadhi

PHARMACY, Vol.06 No. 02 Agustus 2009 ISSN ANALISIS KUALITATIF PARASETAMOL PADA SEDIAAN JAMU SERBUK PEGAL LINU YANG BEREDAR DI PURWOKERTO

HASIL DAN PEMBAHASAN. Perhitungan Kadar Kadar residu antibiotik golongan tetrasiklin dihitung dengan rumus:

PENGARUH ph PADA PENETAPAN KADAR NATRIUM BENZOAT DALAM SIRUP MELALUI ISOLASI DENGAN PELARUT ETER SECARA KCKT

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN. a. Pemilihan komposisi fase gerak untuk analisis levofloksasin secara KCKT

STANDARISASI SEDIAAN DAUN SELEDRI (Apium graveolens L.) SECARA KLT- DENSITOMETRI MENGGUNAKAN APIGENIN SEBAGAI PARAMETER

BAB III METODOLOGI PENELITIAN. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Tanah Balai Penelitian

BAB III METODE PENELITIAN

Gambar 2. Perbedaan Sampel Brokoli (A. Brokoli yang disimpan selama 2 hari pada suhu kamar; B. Brokoli Segar).

PHARMACY, Vol.13 No. 02 Desember 2016 ISSN

Lampiran 1. Krim Klorfeson dan Chloramfecort-H

III. METODOLOGI PENELITIAN. Metodologi penelitian meliputi aspek- aspek yang berkaitan dengan

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA RINGKASAN

PHARMACONJurnal Ilmiah Farmasi UNSRAT Vol. 4 No. 4 NOVEMBER 2015 ISSN

BAB 1 PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang Masalah

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

ANALISIS KANDUNGAN PARASETAMOL PADA JAMU PEGAL LINU DI PONTIANAK DENGAN MENGGUNAKAN METODE KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (KLT) DAN SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

PERBANDINGAN MUTU DAN HARGA TABLET AMOKSISILIN 500 MG GENERIK DENGAN NON GENERIK YANG BEREDAR DI PASARAN

Lampiran 1. Sampel Neo Antidorin Kapsul. Gambar 1. Kotak Kemasan Sampel Neo Antidorin Kapsul. Gambar 2. Sampel Neo Antidorin Kapsul

PENGEMBANGAN METODE REFLUKS UNTUK EKSTRAKSI ANDROGRAFOLID DARI HERBA SAMBILOTO (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees)

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2016

Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 2 (1), VALIDASI METODE SPEKTROFOTOMETRI UV PADA ANALISIS PENETAPAN KADAR ASAM MEFENAMAT DALAM SEDIAAN TABLET GENERIK

Deteminasi Tumbuhan Tumbuhan dideterminasi di Herbarium Universitas Andalas (ANDA), Jurusan Biologi FMIPA Universitas Andalas.

VALIDASI METODE ANALISIS UNTUK PENETAPAN KADAR METFORMIN HCl DALAM TABLET FLOATING SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN. Linieritas metode analisis kalsium dalam tanah dengan AAS ditentukan

PENETAPAN KADAR MIKONAZOL NITRAT DALAM SEDIAAN KRIM SECARA KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS-DENSITOMETRI RYEKE MEDLIYENI RUFYEDI

LAPORAN PRAKTIKUM. ISOLASI DNA, Isolasi Protein dan PCR (Elektroforesis agarose dan Acrylamic)

ABSTRACT

SEMINAR TUGAS AKHIR ANALISA PENGUKURAN KADAR LARUTAN TEMULAWAK MENGGUNAKAN METODE TLC (THIN LAYER CHROMATOGRAPHY)

OPTIMASI DAN VALIDASI METODE ANALISIS SUKROSA UNTUK MENENTUKAN KEASLIAN MADU PERDAGANGAN MENGGUNAKAN KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN. Fase gerak : dapar fosfat ph 3,5 : asetonitril (80:20) : panjang gelombang 195 nm

Lampiran 1. Gambar Krim yang Mengandung Hidrokortison Asetat dan Kloramfenikol

Validasi metode merupakan proses yang dilakukan

DAFTAR ISI. ABSTRAK... i. ABSTRACT... ii. KATA PENGANTAR... iii. UCAPAN TERIMA KASIH... iv. DAFTAR ISI... v. DAFTAR TABEL... vii

Perbandingan fase gerak Larutan kalium dihidrogen posfat 0,05 M-metanol (60:40) dengan laju alir 1 ml/menit

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI MINYAK ATSIRI DARI SIMPLISIA BASAH DAN SIMPLISIA KERING DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum) Tiara Mega Kusuma, Nurul Uswatun

Harrizul Rivai 1*, Mia Larasaky 2, Zikra Azizah 2. Jurnal Sains dan Teknologi Farmasi Vol. 19 Suplemen 1 (Desember 2017) s58

PENGEMBANGAN METODE PENETAPAN KADAR GLIBENKLAMID DALAM PLASMA DARAH MANUSIA SECARA IN VITRO MENGGUNAKAN KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI

EFEK ph PADA STABILITAS LARUTAN 2,6-BIS(4-SULFONAMIDOBENZILIDENA)SIKLOHEKSANON DIANALISIS SECARA KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS DENSITOMETRI SRI NURASIH

ANALISIS SECARA SIMULTAN PARACETAMOL DAN IBUPROFEN DENGAN KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI

Lampiran 1. Sampel Pulna Forte Tablet

Transkripsi:

ISSN : 1693-9883 Majalah Ilmu Kefarmasian, Vol. IV, No. 2, Agustus 2007, 59-72 PENETAPAN KADAR TRIPROLIDINA HIDROKLORIDA DAN PSEUDOEFEDRINA HIDROKLORIDA DALAM SEDIAAN SIRUP OBAT INFLUENZA SECARA KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS DENSITOMETRI Hayun, Nelly D. Leswara dan Camelia D.P. Masrijal Departemen Farmasi FMIPA-UI, Kampus UI Depok, 16424 ABSTRACT The determination of pseudoephedrine hydrochloride and triprolidine hydrochloride in influenza syrup medicine has been performed using TLC densitometric method. Pseudoephedrine hydrochloride and triprolidine hydrochloride were extracted using chloroform at ph 12 from the syrup, and separated using HPTLC silica Kieselguhr glass plates 60 F 254, 20x10 cm 2 as stationary phase, and a mixture of methanol, ammonia and chloroform (40:2:30) as mobile phase. The plates were analyzed using Camag TLC Scanner 3 with UV-detector at 257 nm for pseudoephedrine hydrochloride and at 290 nm for triprolidine hydrochloride. The results showed that the linearity, limit of detection, and limit of quantitation of the method for pseudoephedrine hydrochloride were 0.9999, 0.0064 µg, and 0.2124 µg respectively; while for triprolidine hydrochloride were 0.9999, 0.0076 µg, and 0.0254 µg respectively. The coefficient of variance (CV) of repeatability for the two substances were less than 2.0%; and the recovery values for pseudoepherine hydrochloride and triprolidine hydrochloride were 99.98 + 1.05% and 99.73 + 1,54% respectively. The result showed that the samples analysed contained pseudoephedrine hydrochloride 94.36% of the labeled ammount, and triprolidine hydrochloride 94.44% of the labeled ammount. Key words : pseudoephedrine hydrochloride, triprolidine hydrochloride, TLC densitometric method. PENDAHULUAN Campuran pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl merupakan salah satu jenis kombinasi dalam formula sirup obat influenza (Anonim, 2005). Metode analisis yang telah digunakan untuk menetapkan kadar kedua komponen itu adalah dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) (Anonim, 2003; Akhtar, 2007), dan spektofotometri derivatif (Hayun et al., 2006). Metode KCKT memerlukan waktu persiapan dan pelaksanaan analisis yang relatif lama dan biaya operasional yang tinggi, sedangkan metode spektrofotometri Corresponding author : E-mail : hayun@farmasi.ui.ac.id 59

derivatif lebih mudah pelaksanaannya dan murah biaya operasionalnya, tetapi tidak dapat diterapkan untuk sediaan sirup. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) - Densitometer (TLC Scanner) merupakan instrumen pengukur densitas bercak hasil pemisahan kromatografi lapis tipis. Instrumen dilengkapi dengan suatu perangkat optik, sumber cahaya dan detektor seperti halnya spektrofotometer (Touchstone dan Dobbins, 1983; Poole dan Khatib, 1987; Touchstone dan Sherma, 1979). Keuntungan utama analisis secara KLT-densitometri adalah memerlukan waktu lebih singkat dan lebih murah biaya operasionalnya dibandingkan KCKT (Jork et al., 1990). Tujuan penelitian ini adalah memperoleh kondisi analisis optimum dan tervalidasi untuk penetapan kadar pseudoefedrina hidroklorida dan triprolidina hidroklorida dalam sediaan sirup obat influenza secara KLT-densitometri. triprolidina HCl 1,25 mg per 5 ml sirup. ALAT TLC-Scanner 3 yang dilengkapi program wincats (Camag), bejana KLT 25x25x10 cm 3 (Camag), mikrokapiler 1,0 µl (Camag), spektrofotometer UV-1601 (Shimadzu), sentrifugator, ph meter, alat pengaduk ultrasonik, timbangan analitik, dan alat-alat gelas. CARA KERJA Pemilihan panjang gelombang optimum detektor Larutan pseudoefedrina HCl 600 ppm dan triprolidina HCl 25 ppm dalam HCl 0,1N masing-masing dibuat kurva serapannya menggunakan spektrofotometer uv-vis pada 200-400 nm dan dicatat λ maksimum yang diperoleh. BAHAN DAN CARA KERJA BAHAN Pseudoefedrina HCl (Mongolia Ertok Qianqi Fupin Ephedrine Factory), triprolidina HCl (Effepl Pharmaceutica), lempeng kaca 20 x 10 cm 2 HPTLC silika gel Kieselguhr 60 F 254 (Merck), metanol p.a. (Mallinckrodt), natrium hidroksida p.a., asam klorida, dan kloroform (Merck), sampel sirup merek dagang yang mengandung pseudoefedrina HCl 30 mg dan Pemilihan fase gerak untuk pemisahan zat uji Larutan baku pseudoefedrina HCl dengan konsentrasi 6000 ppm dan triprolidina HCl dengan konsentrasi 2500 ppm dalam metanol masing-masing ditotolkan 1,0 µl pada lempeng HPTLC yang telah diaktifkan. Lempeng kemudian dielusi 8 cm dan bercak-bercak zat uji pada lempeng dianalisis menggunakan TLC scanner. Elusi menggunakan fase gerak 60 MAJALAH ILMU KEFARMASIAN

campuran metanol, ammonia dan kloroform (80:1,5:20), (60:1,5;40), (45:2:35), (40:2:30) dan (37:2:32); dalam bejana KLT 25x25x10 cm 3 yang dijenuhkan dengan uap fase gerak selama 2 jam. Pengaktifan lempeng dilakukan dengan cara pemanasan dalam oven 110 o C selama 30 menit. Uji Keterulangan Larutan baku pseudoefedrina HCl dengan konsentrasi 3000, 6000 dan 9000 ppm dan triprolidina HCl dengan konsentrasi 1000, 2500 dan 7000 ppm dalam methanol, masingmasing ditotolkan 1,0 µl pada lempeng HPTLC yang telah diaktifkan, masing-masing enam kali penotolan dengan jarak penotolan 1,5 cm. Lempeng kemudian dielusi 8 cm, dan bercak-bercak zat uji dianalisis menggunakan TLC scanner, serta dihitung simpangan baku dan koefisien variasi luas puncak densitogram yang diperoleh. Linearitas, limit deteksi (LOD) dan limit kuantitasi (LOQ) Larutan pseudoefedrina HCl dengan konsentrasi 3000, 5000, 6000, 7000, 9000, dan 10000 ppm dan larutan triprolidina HCl dengan konsentrasi 1000, 2000, 25000, 4000, 7000, dan 10000 ppm dalam metanol, masing-masing ditotolkan 1,0 µl pada lempeng HPTLC yang telah diaktifkan, dengan jarak penotolan 1,5 cm. Lempeng kemudian dielusi 8 cm, bercak-bercak zat uji dianalisis menggunakan TLC scanner, dan dibuat kurva kalibrasi, dianalisis hubungan antara konsentrasi dengan luas puncak densitogram, sehingga didapat persamaan regresi linear y = a + bx beserta nilai koefisien korelasinya. Berdasarkan data kurva kalibrasi ini dilakukan pula perhitungan limit deteksi (LOD) dan limit kuantitasi (LOQ). Pemilihan cara ekstraksi zat uji dalam sampel Sampel ditimbang saksama setara dengan 50,0 ml enam kali, masing-masing ditambah 20 ml NaOH 25% sehingga diperoleh ph 12, diekstraksi dengan 100 ml kloroform (2x40 ml dan 1x20 ml); (1x40 ml dan 3x20 ml); atau (5x20 ml), pengocokan menggunakan vortex 1 menit, dan disentrifugasi 4000 rpm selama 20 menit. Fraksi kloroform dipisahkan dan diuapkan di atas penangas air, serta volume dicukupkan dengan metanol hingga : 50,0 ml, pada ekstraksi untuk analisis pseudoefedrina HCl; atau 5,0 ml, pada ekstraksi untuk analisis triprolidina HCl. Kemudian larutan hasil ekstraksi ditotolkan 1,0 µl pada lempeng HPTLC yang telah diaktifkan masing-masing tiga kali penotolan dengan jarak penotolan 1,5 cm. Lempeng dielusi 8 cm, dan bercakbercak pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl dianalisis meng- Vol. IV, No.2, Agustus 2007 61

gunakan TLC scanner, serta dihitung kadarnya. Penetapan kadar pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl dalam sampel Sampel ditimbang saksama setara dengan 50,0 ml enam kali, tiga sampel diekstraksi dengan cara ekstraksi terpilih untuk pseudoefedrina HCl dan tiga sampel lainnya diekstraksi dengan cara ekstraksi terpilih untuk triprolidina HCl. Larutan hasil ekstraksi ditotolkan 1,0 µl pada lempeng HPTLC yang telah diaktifkan masing-masing tiga kali penotolan dengan jarak penotolan 1,5 cm. Lempeng kemudian dielusi 8 cm, bercak-bercak pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl dianalisis menggunakan TLC scanner, dan dihitung kadarnya. Uji perolehan kembali A. Pseudoefedrina HCl Sampel ditimbang saksama setara dengan 25,0 ml tiga kali, kemudian ditambahkan masingmasing 25,0 ml larutan baku pseudoefedrina HCl 3600, 6000, dan 8400 ppm, diekstraksi dengan cara ekstraksi terpilih untuk pseudoefedrina HCl, hasil-hasil ekstraksi ditotolkan 1,0 µl pada lempeng HPTLC yang telah diaktifkan masing-masing tiga kali penotolan dengan jarak penotolan 1,5 cm. Lempeng kemudian dielusi 8 cm, bercak-bercak pseudoefedrina HCl dianalisis menggunakan TLC scanner, dan dihitung kadar perolehan kembalinya. B. Triprolidina HCl Sampel ditimbang saksama setara dengan 25,0 ml tiga kali, kemudian ditambahkan masingmasing 25,0 ml larutan baku triprolidina HCl 1500, 2500, dan 3500 ppm, diekstraksi dengan cara ekstraksi terpilih untuk triprolidina HCl, hasil-hasil ekstraksi ditotolkan 1,0 µl pada lempeng HPTLC yang telah diaktifkan masing-masing tiga kali penotolan dengan jarak penotolan 1,5 cm. Lempeng kemudian dielusi 8 cm, bercak-bercak triprolidina HCl dianalisis menggunakan TLC scanner, dan dihitung kadar perolehan kembalinya. HASIL DAN PEMBAHASAN Pemilihan panjang gelombang optimum detektor Untuk membuat kurva serapan, larutan pseudoefedrina HCl dibuat dengan konsentrasi 600 ppm, sedangkan triprolidina HCl dibuat dengan konsentrasi 25 ppm. Hal ini disebabkan E1%, 1cm pseudoefedrina HCl = 0,8, sedangkan E1%, 1 cm triprolidina HCl = 347 (Moffat, 1986). Panjang gelombang (λ) maksimum pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl masing-masing 257 dan 290 nm (Gambar 1). Pada λ 290 nm pseudoefedrina HCl tidak memberikan serapan, sedangkan pada λ 257 nm serapan triprolidina HCl minimum, sehingga pengukuran luas puncak densitogram bercak kedua zat uji ini dilakukan pada λ maksimum masing-masing. 62 MAJALAH ILMU KEFARMASIAN

Gambar 1. Kurva serapan pseudoefedrina HCl 600 ppm (A) dan triprolidina HCl 25 ppm (B) dalam HCl 0,1N. Panjang gelombang (λ) maksimum pseudoefedrina HCl 257 nm dan triprolidina HCl 290 nm. Pemilihan fase gerak untuk pemisahan zat uji Data Rf pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl hasil elusi menggunakan lempeng HPTLC silika gel Kieselguhr 60 F 254 (Merck) dan fase gerak campuran metanol, amonia dan kloroform (80:1,5:20), (60:1,5;40), (45:2:35), (40:2:30) dan (37:2:32) dapat dilihat pada Tabel 1. Fase gerak campuran metanol, amonia dan kloroform (40:2:30) menghasilkan pemisahan terbaik, sehingga fase gerak ini dipilih sebagai fase gerak pada percobaan berikutnya (Gambar 2-3). Tabel 1. Rf Pseudoefedrina HCl dan Triprolidina HCl dengan berbagai fase gerak. Fase gerak Perbandingan Rf Pseudoefedrina Triprolidina HCl HCl Metanol + amonia + 80:1,5:20 0,92 0,80 kloroform 60:1,5:40 0,89 0,65 45:2:35 0,83 0,62 40:2:30 0,65 0,36 37:2:32 0,54 0,48 Vol. IV, No.2, Agustus 2007 63

Gambar 2. Densitogram baku pseudoefedrina HCl. Fase diam lempeng kaca HPTLC silika gel Kieselguhr 60 F254, 20 x 10 cm 2, fase gerak campuran metanol, amonia, dan kloroform (40:2:30). Rf pseudoefedrina HCl 0,65. Gambar 3. Densitogram baku triprolidina HCl. Fase diam lempeng kaca HPTLC silika gel Kieselguhr 60 F254, 20 x 10 cm 2, fase gerak campuran metanol, amonia, dan kloroform (40:2:30). Rf triprolidina HCl 0,36. 64 MAJALAH ILMU KEFARMASIAN

Tabel 2. Hasil uji keterulangan pseudoefedrina HCl Kandungan Rata-rata Simpangan Koefisien zat uji pada bercak Luas puncak baku variasi (µg) densitogram (KV) bercak (%) 3,00 285,11 0,2938 0,1030 6,00 496,07 0,3204 0,0646 9,00 707,84 0,4688 0,0662 Tabel 3. Hasil uji keterulangan triprolidina HCl Kandungan Rata-rata Simpangan Koefisien zat uji pada bercak Luas puncak baku variasi (µg) densitogram (KV) bercak (%) 1,00 3502,36 0,3592 0,0103 2,50 4108,80 0,7043 0,0171 7,00 5930,81 0,8190 0,0138 Uji Keterulangan Hasil uji keterulangan analisis baku pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl menunjukkan metode ini mempunyai presisi yang baik, dengan nilai koefisien variasi (KV) lebih kecil dari 2% (Tabel 2-3). Linearitas, limit deteksi (LOD) dan limit kuantitasi (LOQ) Hasil analisis hubungan luas puncak densitogram pseudoefedrina HCl pada konsentrasi 3000-10000 ppm dan triprolidina HCl 1000-10000 ppm menghasilkan persamaan Gambar 4. Kurva kalibrasi pseudoefedrina HCl Vol. IV, No.2, Agustus 2007 65

Gambar 5. Kurva kalibrasi triprolidina HCl regresi linier y = 70,59x + 72,68 dengan koefisien korelasi (r) = 0,9999 untuk pseudoefedrina HCl, dan y = 404,7 x + 3097,5 dengan koefisien korelasi (r) = 0,9999 untuk triprolidina HCl ; limit deteksi (LOD) dan limit kuantitasi (LOQ) untuk bercak pseudoefedrina HCl berturut-turut 0,0064 µg dan 0,2124 µg; sedangkan untuk bercak triprolidina HCl berturut-turut 0,0076 µg dan 0,0254 µg (Tabel 4-5; dan Gambar 4-5). Pemilihan cara ekstraksi zat uji dalam sampel Kondisi ekstraksi dengan penambahan natrium hidroksida hingga ph12, diekstraksi 1x40 ml dan 3x20 ml, pengocokan dengan vortex 1 menit, dan disentrifugasi 4000 rpm Tabel 4. Data dan perhitungan limit deteksi (LOD) dan limit kuantitasi (LOQ) pseudoefedrina HCl Kandungan Luas puncak zat uji pada bercak densitogram y (AU) (y-y ) 2 (µg) y(au) 3,02 285,82 285,86 0,0020 5,01 426,34 426,34 0 5,96 493,62 493,40 0,0474 6,99 565,91 566,11 0,0404 9,05 711,53 711,53 0 9,98 777,19 777,18 0,0001 Σ = 0,0900 r = 0,9999 LOD = 0,0064 µg y = 70,591 x + 72,68 LOQ = 0,2124 µg 66 MAJALAH ILMU KEFARMASIAN

Tabel 5. Data dan perhitungan limit deteksi (LOD) dan limit kuantitasi (LOQ) triprolidina HCl Kandungan Luas puncak zat uji pada bercak densitogram y (AU) (y-y ) 2 (µg) y(au) 1,0 3501,60 3502,2 0,3600 1,98 3900,18 3898,81 1,8879 2,49 4105,48 4105,20 0,0767 4,04 4731,14 4732,49 1,8171 7,00 5930,47 5930,40 0,0049 9,99 7140,71 7140,45 0,0660 Σ = 4,2127 r = 0,9999 LOD = 0,0076 µg y = 404,7 x + 3097,5 LOQ = 0,0254 µg Tabel 6. Hasil ekstraksi pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl dari sampel dengan berbagai kondisi. No. Ekstraksi Kadar (%) kloroform Pseudoefedrina HCl Triprolidina HCL 1 2x40 ml, 1x20 ml 91,19 91,89 2 1x40 ml, 3x20 ml 94,19 95,85 3 5x20 ml 84,16 69,18 Tabel 7. Hasil penetapan kadar pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl dalam sampel. Kadar Luas puncak Kadar hasil Kadar Kadar dari Zat Uji pada label densitogram penetapan rata-rata label (%) (mg/ml) (AU) (mg/ml) (mg/ml) Pseudoefedrina 6,00 471,7928 5,6539 5,6614 + 94,36 HCI 473,2534 5,6746 0,0115 471,9198 5,6557 Triprolidina HCl 0,25 4049,7406 0,2353 0,2361 + 94,44 4042,4173 0,2335 0,0031 4066,4910 0,2394 Vol. IV, No.2, Agustus 2007 67

selama 20 menit, menghasilkan kadar pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl terbesar (Tabel 6). Kondisi ini dipilih sebagai kondisi ekstraksi pada percobaan berikutnya. Penetapan kadar pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl dalam sampel Rf puncak densitogram dan spektrum serapan bercak hasil ekstraksi sama dengan Rf puncak densitogram dan spektrum serapan bercak baku pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl (Gambar 6-9). Kadar rata-rata pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl dalam sampel masing-masing 5,6514 + 0,0115 mg/ ml dan 0,2361 + 0,0031 mg/ml, atau 94,36 dan 94,44 % dari yang tertulis pada label (Tabel 7). Sirup pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl, menurut USP 26-NF 21 harus mengandung tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl yang tertulis pada label (Anonim, 2003). Uji perolehan kembali Uji perolehan kembali (UPK) dilakukan untuk mengetahui akurasi metode ini. Uji ini dilakukan dengan menggunakan metode adisi, karena komposisi lengkap dari sampel tidak diketahui. Hasil UPK pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl dari sirup obat influenza pada rentang kadar 80-120 % dari yang tertulis pada label adalah 100,26 % untuk pseu- Gambar 6. Densitogram pseudoefedrina HCl dari sampel. Fase diam lempeng kaca HPTLC silika gel Kieselguhr 60 F254 20 x 10 cm 2, fase gerak campuran metanol, ammonia, dan kloroform (40:2:30). 68 MAJALAH ILMU KEFARMASIAN

Gambar 7. Densitogram triprolidina HCl dari sampel. Fase diam lempeng kaca HPTLC silika gel Kieselguhr 60 F254 20 x 10 cm 2, fase gerak campuran metanol, ammonia, dan kloroform (40:2:30). Gambar 8. Perbandingan spektrum serapan bercak pseudoefedrina HCl dari sampel dan baku. Vol. IV, No.2, Agustus 2007 69

Gambar 9. Perbandingan spektrum serapan bercak triprolidina HCl `dari sampel dan baku. Tabel 8. Hasil uji perolehan kembali pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl dari sirup obat influenza Kadar (mg/ml) Zat Uji Luas puncak Hasil Rata2 Kadar Perolehan densitogram penetapan Hasil seharusnya Kembali (AU) penetapan (%) Pseudo- 408,896 4,7629 efedrina 403,956 4,6929 4,7296 4,6308 102,13 HCl 406,779 4,7329 470,988 5,6425 469,793 5,6255 5,6435 5,8308 96,79 472,400 5,6625 578,240 7,1618 576,828 7,1418 7,1618 7,0308 101,86 579,651 7,1818 Rata-rata (%) 100,26 Tripro- 3915,292 0,2021 lidina 3899,108 0,1981 0,2014 0,1931 104,29 HCl 3923,384 0,2041 4101,408 0,2481 4113,546 0,2511 0,2491 0,2431 102,68 4101,408 0,2481 4259,202 0,2871 4263,248 0,2881 0,2898 0,2931 98,87 4287,524 0,2941 Rata-rata (%) 101,95 70 MAJALAH ILMU KEFARMASIAN

doefedrina HCl dan 101,95 % untuk triprolidina HCl. Dari hasil ini menunjukkan bahwa metode ini mempunyai akurasi yang baik. UPK dilakukan dengan cara adisi karena formula sampel sirup yang dianalisis tidak diketahui. Data hasil UPK dapat dilihat pada Tabel 8. KESIMPULAN Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan dapat diambil kesimpulan bahwa metode KLTdensitometri dapat digunakan untuk penetapan kadar pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl dalam sediaan sirup obat influenza dengan kondisi sebagai berikut : pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl diekstraksi dengan kloroform pada ph 12 dari sirup, dipisahkan menggunakan fase diam lempeng HPTLC silika Kieselguhr 60 F 254, 20x10 cm 2 dan fase gerak campuran metanol, ammonia dan kloroform (40:2:30). Linieritas, presisi dan akurasi memenuhi persyaratan. LOD dan LOQ untuk pseudofedrina HCl 0,0064 µg dan 0,2124 µg, untuk triprolidina HCL 0,0076 µg dan 0,0254 µg. Kadar rata-rata pseudoefedrina HCl dan triprolidina HCl dalam sampel memenuhi persyaratan USP 26-NF 21. DAFTAR ACUAN Anonim. 2005. Informasi Spesialite Obat Indonesia, volume 40. Jakarta: Ikatan Sarjana Farmasi Indonesia, 327 338. Anonim. 2003. United States Pharmacopoeia 26-NF 21. Rockville : United States Pharmacopeial Convention, Inc., 579 581, 878 885, 1588 1591, 1897 1901. Akhtar, M.J. 2007. High Performance Liquid Chromatographic Assay for the Determination of Paracetamol, Pseudoephedrine Hydrochloride and Triprolidine Hydrochloride. http://www. sciencedirect.journal of pharmaceutical and biomedical analysis. Vol 12, No. 3, p.379-382. January 10 th, 2007, at 14: 30. Hayun et al., 2006. Penetapan Kadar Triprolidina Hidroklorida dan Pseudoefedrina Hidroklorida dalam tablet antiinfluenza secara Spektrofotometri Derivatif. Majalah Ilmu Kefarmasian, Vol 3, No. 2, Agustus 2006. Jork, H., Funk, W., Fischer, W. and Wimmer, H. 1990. Thin-Layer Chromatography, Reagents and Detection Methods. Weinheim : VCH Verlagsgesellschaft mbh, 3-7. Moffat, A.C. 1986. Clarke s Isolation and Identification of Drugs, 2 nd edition. London : The Pharmaceutical Press, 1187, 1328. Poole, C.F. and Khatib, S. 1987. Quantitative Thin Layer Chromatography. In Katz E. Quantitative Analysis Using Chromatogaphy Techniques, Chapter 6. Norwalk: John Wiley & Sons, Ltd, 441-442. Vol. IV, No.2, Agustus 2007 71

Touchstone, J.C. and Sherma, J.1979. Densitometry in Thin Layer Chromatography Practice and Applications. New York : John Wiley & Sons, Ltd., 128-129. Touchstone, J.C. and Dobbins, J.C. 1983. Practice of Thin Layer Chromatography. 2 nd edition. New York : John Wiley & Sons, Inc., 315. 72 MAJALAH ILMU KEFARMASIAN