PENGARUH PEMBERIAN INFUSAN DAUN KELOR (Moringa oleifera) PADA GAMBARAN HISTOPATOLOGI USUS HALUS TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus)

Transkripsi

1 PENGARUH PEMBERIAN INFUSAN DAUN KELOR (Moringa oleifera) PADA GAMBARAN HISTOPATOLOGI USUS HALUS TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) Karya Tulis Ilmiah Untuk Memenuhi Sebagai Syarat Memperoleh Derajat Sarjana Kedokteran OLEH : FITRA ZULFIKAR FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS ISLAM INDONESIA YOGYAKARTA 2016

2 THE EFFECT OF MORINGA (Moringa oleifera) INFUSION ON SMALL INTESTINE HISTOPATOLOGY OF WHITE RATS (Rattus norvegicus) A Scientific Paper Submitted in Partial Fulfillment Of Requirements for the Medical Scholar Degree in Medical Faculty Islamic University of Indonesia Fitra Zulfikar MEDICAL FACULTY ISLAMIC UNIVERSITY OF INDONESIA YOGYAKARTA 2016

3 PENGARUH INFUSAN DAUN KELOR (Moringa oleifera) PADA GAMBARAN HISTOPATOLOGI USUS HALUS PADA TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) Fitra zulfikar¹, Zainuri Sabta Nugraha², Kuswati² ¹Mahaiswa Fakultas Kedokteran Universitas Islam Indonesia ²Departemen Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas Islam Indonesia INTISARI Latar Belakang: Gizi buruk merupakan salah satu masalah kesehatan yang ada di Indonesia. Kekurangan gizi tersebut dapat disebabkan oleh beberapa faktor seperti, kuantitas dan kualitas makanan yang dikonsumsi sehari-hari. Indonesia terkenal dengan keanekaragaman hayati yang berlimpah. Banyak tanaman yang tumbuh dan dibudidayakan karena memiliki banyak manfaat. Salah satunya adalah tanaman kelor (Moringa oleifera) yang didalamnya terkandung zat-zat yang dapat memicu terjadinya proliferasi sel. Terutama sel-sel organ pencernaan, khususnya usus halus karena disana terdapat vili-vili yang berfungsi untuk menyerap sebagian besar nutrisi yang kita konsumsi sehari-hari agar dapat masuk kedalam sel-sel tubuh kita. Tujuan: Untuk mengetahui pengaruh paparan infusan daun kelor (Moringa oleifera) terhadap gambaran histopatologi usus halus pada tikus putih (Rattus norvegicus). Metode: Penelitian ini menggunakan metode penelitian eksperimental dengan berbasis rancangan post test only group design. Subjek penelitian ini adalah tikus putih (Rattus norvegicus) yang memenuhi kriteria inklusi. Subjek berjumlah 10 ekor tikus yang dibagi menjadi 2 kelompok 5 ekor kelompok kontrol dengan pemberian aquades dan 5 ekor kelompok perlakuan dengan pemberian infusa daun kelor 400 mg/kgbb/hari selama 60 hari. Organ yang diamati adalah usus halus dengan pengecatan H.E. Gambaran mikroskopis berupa panjang dan lebar vili usus halus yang terlihat kemudian di ukur dan di bandingkan dengan analisis statistik independent t-test. Hasil: Tidak terdapat perbedaan bermakna pada kelompok perlakuan dibanding kelompok kontrol (panjang vili P = 0,838 dan lebar vili P = 0,928). Kesimpulan: Pemberian infusa daun kelor (Moringa oleifera) tidak berpengaruh terhadap perubahan histopatologi usus halus tikus putih (Rattus norvegicus). Kata Kunci: Infusan daun kelor, Moringa oliefera, Usus halus

4 THE EFFECT OF MORINGA (Moringa oleifera) INFUSION ON SMALL INTESTINE HISTOPATOLOGY OF WHITE RATS (Rattus norvegicus) Fitra Zulfikar¹, Zainuri Sabta Nugraha², Kuswati² ¹Student of Medical Faculty, Islamic University of Indonesia ²Department of Anatomy, Medical Faculty, Islamic University of Indonesia ABSTRACT Background: Malnutrition is one of the health problems that exist in Indonesia. Nutritional deficiencies can be caused by several factors, such as, the quantity and quality of the food we consume daily. Indonesia is famous country with it biodiversity. Many plants are grown and cultivated because it has many benefits. One of them are moringa (Moringa oleifera), were contain substances that can trigger cell proliferation. Especially digestive organs like small intestine, because it has many of vili which an ability to absorb most of nutrient that we consume daily to cells in our body. Objective: To determine the effect of moringa (Moringa oleifera) infusion against histopathological picture of the small intestine in white rats (rattus norvegicus). Methods: This study was an experimental used post-test with control group design. The subjects were white rats (Rattus norvegicus) with inclusion criteria. 10 white rats divided into 2 groups wich 5 rats entered to the control group with administration of aquades and 5 others given treated with administration of Moringa leaf infusion of 400 mg/kgbb/day for 60 days. The observed organs tissue is small instestine with H.E. staining. Microscopic picture of the vili of small intestine in length and width form were observed get measured and compared using independent t-test statistical analysis. Results: There s no significant differences in the treatment group than the control group (vili length P=0.838 and width P=0.928). Conclusions: Administration of moringa (Moringa oleifera) infusion has not been affecting the small intestine tissue in white rats (Rattus norvegicus). Keywords: Moringa leaf infusion, Moringa oliefera, Small instestine

5 PENDAHULUAN Gizi buruk merupakan salah satu masalah kesehatan yang masih ada di Indonesia. Sebanyak 54% penyebab kematian bayi dan balita disebabkan oleh keadaan gizi anak yang buruk. Resiko meninggal dari anak yang bergizi buruk 13 kali lebih besar dibandingkan anak yang normal 1. Ada beberapa faktor yang mempengaruhi keadaan gizi. Pertama yaitu, kualitas organ pencernaan. Agar gizi yang ada pada makanan tersebut terserap dengan baik maka organ pencernaan kita harus berfungsi dengan baik. Makanan harus mengalami berbagai perubahan di dalam saluran cerna hingga diperoleh bentuk-bentuk sederhana yang dapat diabsorpsi, untuk selanjutnya dibawa oleh darah atau limfe ke sel sel tubuh. Perubahan perubahan menjadi bentuk sederhana ini dilakukan melalui proses pencernaan di dalam saluran cerna. Salah satu organ yang sangat berperan dalam absorbsi nutrisi atau gizi tersebut adalah usus halus, dimana terdapat vili-vili yang berfungsi untuk menyerap molekulmolekul gizi tersebut agar dapat masuk ke dalam sel 2. Faktor kedua yaitu, kuantitas dan kualitas makanan yang kita konsumsi sehari-hari. Sumbersumber gizi ini dapat kita peroleh dari berbagai jenis makanan baik hewani maupun nabati, Sumber makanan nabati ini terutama sangat berlimpah di Indonesia. Banyak tanaman yang tumbuh dan dibudidayakan karena memiliki manfaat dan nilai ekonomis yang tinggi bagi masyarakat, terutama para petani dan peternak. Salah satu tanaman yang memiliki manfaat ganda, baik sebagai bahan pangan yang bernilai gizi tinggi dan juga memiliki khasiat sebagai obat adalah tanaman kelor (Moringa oleifera) 3. Sebagai pakan ternak, kelor kaya akan nutrisi yang penting. Hasil penelitian menunjukan bahwa penggunaan daun Kelor sebagai pakan ternak meningkatkan berat badan hingga 32% dan produksi susu hingga 43-65% 4. Bila produksi susu di negara-negara berkembang dapat ditingkatkan dengan cara ini, dapat membantu banyak orang yang mengalami defisiensi protein 5. Daun Moringa mengandung asam amino lengkap yang berperan

6 dalam merangsang sintesis protein dan mencegah defisiensi protein. Daun Moringa mempunyai kandungan Zeatin yang merupakan hormon pertumbuhan dalam tanaman. Daun kelor terbukti meningkatkan pertumbuhan dan produksi tomat ketika tanaman tomat disemprotkan ekstrak Moringa 6. Hal ini menunjukan bahwa kandungan zeatin dalam daun Moringa mempunyai efek yang mirip dengan hormon pertumbuhan. Penelitian lain yang menggunakan ekstrak metanol daun kelor, didapatkan bahwa pemberian daun kelor dengan dosis yang relatif tinggi pada tikus menunjukkan penurunan berat badan, meskipun tidak signifikan. Hasil yang sama juga ditemukan penurunan berat badan tikus yang diberikan ekstrak air daun kelor dibandingkan dengan grup kontrol yang diberikan distilled water 7. Hal tersebut bertentangan dengan teori-teori sebelumnya di atas, oleh sebab itu, hal ini menjadi salah satu perhatian peneliti untuk melakukan studi ini. METODE PENELITIAN Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan berbasis rancangan posttest only group design. Pengamatan preparat dilakukan oleh 1 orang pembaca untuk masing-masing preparat, dengan menggunakan mikroskop cahaya Olympus CX 21. Penelitian ini dilakukan di laboratorium Terpadu Fakultas Kedokteran Universitas Islam Indonesia dan telah mendapatkan persetujuan Komite Etik Fakultas Kedokteran Universitas Islam Indonesia. Nomor: 29/Ka.Kom.Et/70/KE/I/2016. Sampel yang diambil pada penelitian ini adalah tikus putih (Rattus norvegicus) galur Sprague- Dawley yang dikembangkan oleh Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Islam Indonesia yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi. Kriteria inklusi pada penelitian ini adalah tikus yang sehat dan tidak cacat, berumur 1 bulan dan memiliki berat gram. Kriteria eksklusi mencakup tikus mati dalam penelitian dan tikus sakit dalam penelitian. Jumlah sampel menurut World Health Organization adalah minimal 5 ekor tiap kelompok. Pada penelitian ini digunakan 10 ekor tikus yang dibagi menjadi 2 kelompok,

7 yaitu kelompok kontrol dan kelompok perlakuan dengan masingmasing kelompok terdiri dari 5 ekor tikus. Pembuatan Infusa Daun Kelor Proses pembuatan infusa daun kelor dilakukan dengan metode infundasi. Keuntungan dari proses ini agar bahan aktif di dalam sel cepat larut karena sel akan mengalami lisis sehingga bahan aktif di dalamnya keluar. Cara pembuatan infusa daun kelor adalah: 1. Serbuk daun kelor yang telah di timbang dengan berat tertentu di campur air dalam panci sesuai konsenterasi yang diinginkan. 2. Kemudian dipanaskan dengan pemanas air selam 15 menit, dihitung mulai suhu dalam panci 90 o C sambil sesekali diaduk. 3. Infusa disaring selagi panas dengan kain fannel. 4. Untuk mencukupi kekeurangan air, ditambahkan air mendidih melalui ampasnya sehingga diperoleh infusa yang dikehendaki. Adaptasi Hewan Coba Tikus uji diadaptasi dengan cara memasukkan tikus kedalam kandang selama 7 hari tanpa adanya pemberian infusan daun kelor. Perlakuan pada Hewan Coba Pemberian infusan dilakukan pada kelompok perlakuan dengan dosis 400mg/kgBB/hari secara oral sebagai pengganti air minum pada pukul sampai esok pagi pukul sebanyak 50 cc dan dilakukan pengecekan. Jika didapatkan sisa dihitung volumenya dan dicatat. Pemberian minum infusa dilakukan setiap hari selama 60 hari. Dekapitasi dan Pengambilan Jaringan Usus Halus Sampel diambil dari tikus putih pada hari ke-60 dengan cara pengambilan jaringan usus halus tikus dengan teknik perfusi transkardial. Sebelumnya tikus dibius menggunakan inhalasi eter. Perfusi dilakukan dengan menggunakan 0,2% paraformaldehid dalam phosphate buffer (PB) 0,1 M dengan ph 7,4 pada suhu 37 0 C, dengan kecepatan antara ml/menit sebagai pre-rinse, dilanjutkan dengan

8 larutan fiksatif 2% paraformaldehid dalam PB 0,1 M, ph 7,4 dengan suhu 4 0 C selama 20 menit dengan kecepatan yang sama. Perfusi transkardial dilakukan dengan membuka rongga dada dengan melakukan insisi linea mediana pada dinding abdomen, dilanjutkan insisi sepanjang linea axilaris sampai dinding thoraks terbuka dan jantung terlihat. Ventrikel kiri jantung diinsisi kemudian kanula dimasukkan hingga mencapai aorta ascenden. Kanula difiksasi dengan penjepit ateri. Dilakukan insisi atrium kanan untuk mengeluarkan darah. Cairan perfusi PBS dialirkan melalui kanula. Agar usus halusmendapatkan perfusi sepenuhnya maka dilakukan jepitan pada aorta descendens. Perfusi PBS dilanjutkan sampai darah yang keluar melalui atrium kanan tampak jernih dan arteri mamaria interna disekitar sternum tampak putih karena terisi cairan jernih. Kemudian dimasukkan cairan fiksatif selama 20 menit. Fiksasi yang baik dapat diamati melalui tanda-tanda dimana ekstremitas superior tampak kaku, arteri mamaria interna tampak jernih dan terjadi perubahan warna pada bola mata yang sebelumnya tampak merah menjadi putih. Setelah perfusi transkardial sempurna maka dilakukan dekapitasi, kemudian pengambilan jaringan usus halus tikus. Jaringan usus halus tersebut diambil secara hari-hati dan difiksasi dengan larutan 2% paraformaldehid dalam PB 0,1 M dengan ph 7,4 pada suhu 4 0 C selama 24 jam. Metode Analisis Data Data yang diperoleh berupa angka pengukuran panjang dan lebar vili usus halus yang di hitung oleh peneliti untuk membandingkan hasil pengukuran antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan menggunakan analisa statistik independent t-test.

9 HASIL PENELITIAN Berikut adalah rangkuman hasil pengukuran panjang dan lebar vili usus halus selama penelitian dalam bentuk tabel dan gambar. Tabel 1. Kenaikan berat badan subjek penelitian Kelompok Kontrol Perlakuan Subj ek Kenaikan Berat Badan (gram) K1 83 K2 92 K3 77 K4 31 K5 52 P1 92 P2 94 P3 79 P4 94 P5 93 Gambar 1. Panjang vili usus halus tikus P1 Gambar 2. Lebar vili usus halus tikus P1 Tabel 2. Rerata kenaikan berat badan subjek penelitian Tabel 3. Hasil Pengamatan Usus Halus KODE Panjang Vili (µm) Lebar Vili Atas (µm) K1 213,9 66,7 K2 313,5 128,2 K3 253,8 101,0 K4 166,5 41,2 K5 178,1 78,0 P1 275,0 82,3 P2 - - P3 184,2 68,2 P4 199,5 55,3 P5 179,0 86,3 Gambar 3. Panjang vili usus halus tikus K1 Gambar 4. Lebar vili usus halus tikus K1

10 PEMBAHASAN Pada pengamatan secara mikroskopis terdapat sedikit perbedaan panjang dan lebar vili antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan, namun hal ini tidak bermakna, karena secara statistik tidak ditemukan perbedaan yang signifikan antar kelompok, dengan nilai P masing-masing, panjang vili P = 0,838 dan lebar vili P = 0,928. Hal ini dapat disebabkan oleh beberapa faktor, pertama: Tidak dapat terbacanya preparat P2 sehingga kelompok yang dibandingkan berkurang. Dan yang kedua: Diperlukan perhitungan ulang dosis yang tepat untuk pembuatan infusa daun kelor (Moringa oleifera) dikarenakan kenaikan berat badan tikus putih (Rattus norvegicus) belum mendapatkan hasil yang sesuai dengan harapan peneliti. Dalam beberapa penelitian lain juga didapatkan hasil yang berbeda-beda terkait efek dari pemberian ekstrak daun kelor (Moringa oleifera) pada tikus putih (Rattus norvegicus). Sebuah penelitian mengungkapkan bahwa dari minggu pertama pemberian ekstrak etanol daun kelor pada hewan untuk empat minggu, ditemukan ada perubahan signifikan dalam berat badan hewan kelompok I (kontrol) dibandingkan dengan kelompok II, III dan IV 8. Pada penelitian lain tidak ditemukan perbedaan signifikan secara statistik (p 0,05) pada berat badan dengan hewan sepanjang percobaan dilaksanakan 9. Dalam penelitian ini juga didapatkan kenaikan berat badan tikus, namun secara statistik tidak mengalami kenaikan yang signifikan. Selama pengamatan dalam penelitian ini, pada minggu pertama pemberian infusa daun kelor (Moringa oleifera) hewan coba tikus putih (Rattus norvegicus) mengalami penurunan asupan makanan. Namun, asupan makanan hewan coba perlahan meningkat sehingga pada akhirnya tidak tampak pengurangan berat badan hewan coba. Kenaikan berat badan tersebut dapat dikarenakan kandungan nutrisi yang ada pada daun kelor seperti yang telah dilaporkan dalam sebuah penelitian menunjukkan bahwa semua Moringa oleifera dapat berfungsi sebagai suplemen makanan. Moringa oleifera

11 juga telah dilaporkan mengandung profil mineral penting dan merupakan sumber protein, vitamin, B-carotene dan asam amino 10. ekstrak air daun kelor relatif aman digunakan pada dosis 1500 mg/kgbb ke bawah, akan tetapi lama pengunaan harus tetap di perhatikan. Hal ini dikarenakan adanya temuan kenaikan kadar ureum dan kreatinin hingga dua kali lipat dibandingkan dengan kelompok kontrol 9. dengan adanya data-data penelitin yang masih bertentangan maka diperlukan penelitian lanjutan terkait daun kelor ini. Keterbatasan Penelitian Adapun keterbatasan dalam penelitan ini 1. Tidak dapat terbacanya preparat P2 sehingga kelompok yang dibandingkan berkurang. 2. Diperlukan perhitungan ulang dosis yang tepat untuk pembuatan infusa daun kelor (Moringa oleifera) dikarenakan kenaikan berat badan tikus putih (Rattus norvegicus) belum mendapatkan hasil yang sesuai dengan harapan peneliti. KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan tentang pengaruh pemberian infusa daun kelor (Moringa oleifera) terhadap usus halus tikus (Rattus norvegicus), maka dapat diambil kesimpulan bahwa: Tidak terdapat perubahan gambaran histopatologi usus halus tikus putih (Rattus norvegicus) setelah pemberian infusa daun kelor (Moringa oleifera) Saran 1. Diperlukan penelitian lebih lanjut mengenai gambaran kerusakan seluler yang terjadi pada usus halus ketika pemberian infusa daun kelor. 2. Diperlukan penelitian lebih lanjut mengenai dosis aman Infusa daun kelor yang diberikan secara sonde. DAFTAR PUSTAKA 1. World Health Organization, (1997). WHO Global Database On Child Growth and Malnutrision. Geneva. 2. Sherwood, Lauralee. (2007) Fisiologi Manusia; dari sel ke sistem, edisi ke-6. Jakarta: EGC.

12 3. Kurniasih,, Khasiat dan Manfaat Daun Kelor. Batul, Yogyakarta: Pustaka Baru Press. 4. Mathur, B., 2006, Moringa for Cattle Fodder and Plant Growth, Kansas: Tree of Life. 5. Foidl N., Makkar H., Becker K., In The Miracle Tree: The Multiple Uses of Moringa: Wageningen, Netherlands. pp Culver, M., et al.,2012, Effect of Moringa Extract on Growth and Yield of Tomato, Greener Journal of Agricultural Sciences,Vol. 2 (5): Adedapo, A. A., Mogbojuri, O. M., Emikpe, B. O Safety evaluations of the aqueous extract of the leaves of Moringa oleifera in rats. Journal of Medicinal Plants Research Vol. 3(8), pp , 1 Agustus Ekudina V. o., Ebeye O. A., Oladele A. A., Osham G. O., Hepatotoxic and nephrotoxic Effect of Moringa Oleifera Leaves. Journal of Natural Sciences Research. Vol. 5, No.3, Awodele, Olufunsho., Oreagba, Ibrahim Adekunle., Odoma, Saidi., Teixeira da Silva, Jaime A., Osunkalu, Vincent Oluseye. 2012, Toxicologial evaluation of the aqueous leaf extract of Moringa oleifra Lam. (Moringacea), Journal of Ethano pharmacology, 139 (2012) Anwar F., Latir S., Ashraf M., Gilan A., Moringa oleifera a food plant with multiple medicinal uses. Phytotherapy Research. 21: