RESPON PEMBERIAN EKSTRAK JINTAN HITAM

Transkripsi

1 RESPON PEMBERIAN EKSTRAK JINTAN HITAM (Nigella sativa Linn) TERHADAP KADAR C-Reactive Protein (CRP) PADA TIKUS WISTAR YANG DIINDUKSI VAKSIN HEPATITIS B SKRIPSI PUTRI RAHAYU KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES SURABAYA JURUSAN ANALIS KESEHATAN 2017

2 RESPON PEMBERIAN EKSTRAK JINTAN HITAM (Nigella sativa Linn) TERHADAP KADAR C-Reactive Protein (CRP) PADA TIKUS WISTAR YANG DIINDUKSI VAKSIN HEPATITIS B Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains Terapan PUTRI RAHAYU NIM. P KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES SURABAYA JURUSAN ANALIS KESEHATAN 2017 i

3 LEMBAR PENGESAHAN RESPON PEMBERIAN EKSTRAK JINTAN HITAM (Nigella sativa Linn) TERHADAP KADAR C-Reactive Protein (CRP) PADA TIKUS WISTAR YANG DIINDUKSI VAKSIN HEPATITIS B Oleh : PUTRI RAHAYU NIM. P Skripsi ini telah dipertahankan dihadapan Tim Penguji Skripsi Jenjang Pendidikan Tinggi Diploma 4 Jurusan Analis Kesehatan Politeknik Kesehatan Kemenkes Surabaya Surabaya, Juli 2017 Tim Penguji, Tanda tangan Penguji I : Suliati, S.Pd, S.Si, M.Kes NIP Penguji II : Drs. Syamsul Arifin, ST, M.Kes NIP Penguji III : Evy Diah Woelansari, S.Si, M.Kes NIP Mengetahui, Ketua Jurusan Analis Kesehatan Politeknik Kesehatan Kemenkes Surabaya Drs. Edy Haryanto, M.Kes NIP ii

4 LEMBAR PERSETUJUAN RESPON PEMBERIAN EKSTRAK JINTAN HITAM (Nigella sativa Linn) TERHADAP KADAR C-Reactive Protein (CRP) PADA TIKUS WISTAR YANG DIINDUKSI VAKSIN HEPATITIS B Oleh : PUTRI RAHAYU NIM : P Skripsi ini telah diperiksa dan disetujui isi serta susunannya Sehingga dapat diajukan pada Sidang Skripsi yang Diselenggarakan oleh Jurusan Analis Kesehatan Politeknik Kesehatan Kemenkes Surabaya Surabaya, Juli 2017 Menyetujui : Pembimbing I Pembimbing II Suliati, S.Pd, S.Si, M.Kes NIP Drs. Syamsul Arifin, ST, M.Kes NIP Mengetahui, Ketua Jurusan Analis Kesehatan Politeknik Kesehatan Kemenkes Surabaya Drs. Edy Haryanto, M.Kes NIP iii

5 ABSTRAK Hepatitis B merupakan penyakit peradangan hati yang disebabkan oleh virus hepatitis B. Virus Hepatitis B yang masuk dalam tubuh akan menyerang sel hati dan melakukan replikasi diri yang menyebabkan inflamasi pada hati. Jintan hitam memiliki manfaat sebagai imunomodulator dengan kandungan utama Thymoquinone yang dapat meningkatkan kekebalan tubuh. Thymoquinone dapat meningkatkan aktifitas makrofag melalui Toll-like receptor (TLR) untuk memfagositosis mikroba sehingga tidak menimbulkan inflamasi pada sel. Penentuan kadar CRP merupakan penanda paling mudah adanya inflamasi. Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui respon pemberian ekstrak jintan hitam (Nigella sativa Linn) terhadap kadar C-Reactive Protein (CRP) pada tikus wistar yang diinduksi vaksin Hepatitis B. Jenis Penelitian ini merupakan eksperimental laboratorium. Penelitian dilakukan di Unit Infeksius Pengembangan dan Penelitian Hewan Coba Fakultas Kedokteran Hewan Unair dan Laboratorium Imunoserologi Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Surabaya pada bulan Desember tahun 2016 hingga Juli tahun Sampel penelitian adalah 25 ekor tikus jantan galur Wistar yang dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan yaitu kontrol normal, kontrol negatif, kontrol positif, dosis 75 mg/kgbb, dan dosis 150 mg/kgbb. Hasil penelitian dianalisa menggunakan teknik analisa data deskriptif dan menunjukkan bahwa pemberian ekstrak jintan hitam dosis 75 mg/kgbb dan 150 mg/kgbb sebagai imunomodulator selama 7 hari memberikan respon terhadap kadar CRP pada tikus wistar yang diinduksi vaksin hepatitis B. Kata Kunci : Ekstrak jintan hitam, Hepatitis B, C-Reactive Protein (CRP). v

6 ABSTRACT Hepatitis B is a liver inflammatory disease caused by hepatitis B virus. Hepatitis B virus that enters the body will attack the liver cells and do self replication that causes inflammation in the liver. Black cumin has benefits as an immunomodulator with the main content of Thymoquinone that can boost immunity. Thymoquinone may increase macrophage activity through Toll-like receptor (TLR) to microbial phagocytosis so as not to inflammate the cells. Determination of CRP levels is the easiest marker of inflammation. The purpose of this study to evaluate the response of the extract of black cumin (Nigella sativa Linn) on levels of C-Reactive Protein (CRP) in Wistar rats induced hepatitis B vaccine. This study was an experimental laboratory. The study was conducted at the Research and Development Unit of Infectious Animal Try Airlangga University Faculty of Veterinary Medicine and the Laboratory of the Department of Health Analyst Imunoserologi Surabaya polytechnic MoH in December 2016 until July The sample was 25 Wistar male rats were divided into 5 groups, namely normal control, negative control, Positive control, dose 75 mg per kilogram of body weight, and dose 150 mg per kilogram of body weight. Results were analyzed using descriptive data analysis techniques and showed that black cumin extract as imunomodulator dose 75 mg per kilogram of body weight and 150 mg per kilogram of body weight for 7 days to respond to the levels of CRP in Wistar rats induced hepatitis B vaccine. Keywords : Black cumin extract, Hepatitis B, C-Reactive Protein (CRP). vi

7 DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL... i LEMBAR PERSETUJUAN... ii LEMBAR PENGESAHAN...iii MOTTO DAN PERSEMBAHAN... iv ABSTRAK... v ABSTRACT... vi KATA PENGANTAR... vii UCAPAN TERIMAKASIH... viii DAFTAR ISI... xi DAFTAR GAMBAR... xiv DAFTAR TABEL... xv DAFTAR LAMPIRAN... xvi BAB 1 : PENDAHULUAN Latar Belakang Rumusan Masalah Tujuan Penelitian Tujuan Umum Tujuan Khusus Batasan Masalah Manfaat Penelitian Manfaat Bagi Institusi Manfaat Bagi Masyarakat Manfaat Bagi Peneliti... 5 BAB 2 : TINJAUAN PUSTAKA Jintan Hitam Sejarah Jintan Hitam Taksonomi Jintan Hitam Nama Lain Jintan Hitam Kandungan Jintan Hitam Senyawa Thymoquinone Manfaat Jintan Hitam Mekanisme Ekstrak Jintan Hitam sebagai Imunomodulator Ekstraksi Metode Maserasi Etanol Hepatitis B Struktur Virus Hepatitis B (HBV) Epidemiologi Virus Hepatitis B (HBV) Imunopatogenesis Virus Hepatitis B Gejala Hepatitis B Pencegahan Virus Hepatitis B Pengobatan Hepatitis B Sistem Imun xi

8 2.4.1 Sistem Imun terhadap Virus Inflamasi Inflamasi pada Hati C-Reactive Protein (CRP) Sintesis dan Struktur dari CRP Fungsi Biologis CRP Mekanisme Terjadinya CRP Prinsip Dasar Penentuan CRP Tes Aglutinasi Keterkaitan Pemeriksaan Kadar CRP dengan Virus Hepatitis B Keterkaitan Ekstrak Jintan Hitam Terhadap Kadar C-Reactive Protein Hewan Coba Tikus Galur Wistar BAB 3 : KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESIS PENELITIAN Kerangka Konsep Penjelasan Kerangka Konsep Hipotesis Penelitian BAB 4 : METODE PENELITIAN Jenis dan Rancangan Penelitian Tempat dan Waktu Penelitian Populasi dan Sampel Penelitian Populasi Penelitian Sampel Penelitian Variabel Penelitian Variabel Bebas Variabel Terikat Definisi Operasional Variabel Ekstrak Jintan Hitam (Nigella sativa L.) Kadar C-Reactive Protein (CRP) Teknik Pengumpulan Data Alat dan Bahan Penelitian Alat Penelitian Bahan Penelitian Prosedur Penelitian Pembuatan Ekstrak Jintan Hitam (Nigella sativa L.) Penentuan Dosis Ekstrak Jintan Hitam Penentuan Dosis Pemberian Infeksi Virus Hepatitis B pada Tikus Perlakuan Hewan Coba Tikus Adaptasi Hewan Coba Perlakuan Hewan Coba Pemisahan Serum Pemeriksaan Kadar C-Reactive Protein (CRP) Prosedur Pemeriksaan Semi Kuantitatif xii

9 Interpretasi Hasil Teknik Analisa Data Alur Penelitian BAB 5 : HASIL PENELITIAN Penyajian Data Analisa Data BAB 6 : PEMBAHASAN BAB 7 : KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Saran DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN xiii

10 DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1 Biji Jintan Hitam... 6 Gambar 2.2 Struktur Thymoquinone... 9 Gambar 2.3 Struktur Virus Hepatitis B Gambar 2.4 Mekanisme imunitas non spesifik dan spesifik Gambar 2.5 Macam-macam dan fungsi imunitas spesifik Gambar 2.6 Respon imun terhadap Virus Gambar 2.7 Respon inflamasi akut lokal dan sistemik Gambar 2.8 C-Reactive Protein Gambar 2.9 Prinsip dasar uji presipitasi Gambar 2.10 Prinsip dasar penentuan CRP dengan tes aglutinasi Gambar 2.11 Tikus galur Wistar Gambar 3.1 Kerangka Konsep Penelitian Gambar 5.1 Kadar CRP pada Dosis 75 mg/kgbb Gambar 5.2 Kadar CRP pada Dosis 150 mg/kgbb Gambar 5.3 Kadar CRP pada Kontrol Normal Gambar 5.4 Kadar CRP pada Kontrol Negatif Gambar 5.5 Kadar CRP pada Kontrol Positif xiv

11 DAFTAR TABEL Halaman Tabel 2.1 Komposisi kimia dari struktur minyak atsiri Jintan Hitam Tabel 4.1 Konversi dosis hewan percobaan dengan manusia Tabel 4.2 Kadar CRP dengan reaksi positif Tabel 5.1 Hasil Respon Pemberian Ekstrak Jintan Hitam (Nigella sativa Linn) terhadap Kadar C-Reactive Protein (CRP) pada Tikus Wistar yang diinduksi Vaksin Hepatitis B xv

12 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 Surat izin penelitian di kandang hewan coba Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga Surabaya Lampiran 2 Surat balasan izin melakukan penelitian dan penggunaan kandang hewan coba di Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Lampiran 3 Surat ijin penelitian di laboratorium Imunoserologi Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Surabaya Lampiran 4 Surat Izin Ekstraksi di Unit Laboratorium Pengujian Fakultas Farmasi Universitas Airlangga Surabaya Lampiran 5 Hasil Pemeriksaan Kadar CRP Lampiran 6 Surat Keterangan Ethical Clearence Lampiran 7 Kartu Bimbingan Penulisan Skripsi Lampiran 8 Bukti Revisi Skripsi Lampiran 9 Dokumentasi Penelitian xvi

13 BAB 1 PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Hepatitis B merupakan penyakit peradangan hati yang disebabkan oleh virus hepatitis B atau yang sering dikenal dengan HBV. Menurut WHO, sekitar 2 miliar penduduk dunia pernah terpajan virus hepatitis B dan kira-kira 240 juta dari jumlah tersebut merupakan karier hepatitis B. Setiap tahun, 600 ribu pasien hepatitis B diantaranya meninggal karena komplikasi akut dan kronik. Penyakit ini masih menjadi masalah kesehatan di dunia, prevalensi tinggi ditemukan di negara berkembang, termasuk Indonesia. Di Indonesia, prevalensi angka karier hepatitis B pada populasi penduduk yang sehat diperkirakan dapat mencapai 20 % dari penduduk Indonesia (Elliot dkk., 2013). Penyakit hepatitis B masih menjadi salah satu penyebab kematian tertinggi akibat dari kegagalan fungsi hati. Penyebaran dan penularan virus hepatitis B 10 kali lebih cepat dibandingkan dengan virus HIV. Virus hepatitis B dapat menular secara langsung melalui darah, air mani, atau cairan tubuh yang lain (Andareto, 2015). Setiap manusia memiliki imunitas atau resistensi terhadap suatu penyakit terutama infeksi yang berbeda-beda. Sistem imun diperlukan tubuh sebagai pertahanan dari adanya benda asing yang masuk dalam tubuh (Bratawidjaja & Rengganis, 2010). Respon imun tubuh kita akan bekerja ketika tubuh terpapar benda asing seperti bakteri, virus, atau mikroorganisme lainnya. Ketika virus hepatitis B masuk kedalam tubuh manusia, virus langsung menyerang sel hati dan melakukan 1

14 2 replikasi diri. Hal ini dapat menyebabkan inflamasi pada hati dan memicu respon imun tubuh kita untuk memberikan tanda dan gejala adanya infeksi hepatitis B (Andareto, 2015). Salah satu pemeriksaan yang digunakan untuk membantu mengetahui adanya proses inflamasi adalah pemeriksaan C-Reactive Protein atau CRP. Kadar CRP dapat meningkat lebih cepat dalam waktu 6 jam setelah terjadinya reaksi inflamasi atau kerusakan jaringan, dalam waktu jam akan didapatkan nilai puncaknya (Handojo, 2004). CRP adalah suatu alfa globulin yang ada dalam serum ketika terjadi inflamasi sebagai respons imunitas non spesifik. Kadar CRP ditemukan hampir selalu meningkat pada pasien demam reumatik, artritis reumatoid, infeksi bakterial akut, hepatitis virus. Kadar CRP dapat kembali normal bila pengobatan imunosupresif berhasil (Widdman, 1995). Resolusi World Health Assembly (2010) merekomendasikan adanya upaya komprehensif dalam pencegahan dan kontrol hepatitis virus. Upaya tersebut antara lain dengan mencegah penularan melalui penyuluhan kesehatan ke masyarakat dan mengembangkan vaksin dengan teknologi terbaru. Upaya pencegahan lainnya yang bisa dilakukan oleh masyarakat salah satunya adalah dengan memanfaatkan tanaman herbal untuk mencegah terjadinya inflamasi sehingga dapat berfungsi sebagai imunomodulator hepatitis B (Kemenkes, 2014). Salah satu tanaman herbal yang sudah digunakan sebagai obat sejak 2000 hingga 3000 SM, bahkan sejak masa kejayaan Islam dan sudah dikenal oleh banyak masyarakat adalah jintan hitam atau Nigella sativa Linn yang biasa dikenal habatussauda (Puspaningtyas, 2013). Jintan hitam memiliki beberapa manfaat, salah satunya adalah sebagai imunomodulator dengan kandungan utama

15 3 Thymoquinone yang dapat meningkatkan kekebalan tubuh (Akrom & Fatimah, 2015). Menurut (Marlinda, 2015) dari beberapa artikel review yang dilakukan, pemberian ekstrak etanol jintan hitam pada mencit dapat meningkatkan titer antibodi yang merupakan sistem imun spesifik pada dosis 50 mg/kgbb, 100 mg/kgbb, dan 200 mg/kgbb, serta dapat meningkatkan jumlah sel leukosit yang merupakan sistem imun non spesifik. Kedua sistem imun tersebut sangat berperan penting untuk melindungi tubuh dari serangan mikroorganisme, maka penggunaan ekstrak etanol jintan hitam sangat efektif untuk meningkatkan sistem imun. Selama ini pencegahan penyakit hepatitis B yang sudah diterapkan di lingkungan kita, hanya sebatas dengan menggunakan vaksin hepatitis B dan penyuluhan kesehatan. Pencegahan dengan menggunakan tanaman herbal masih kurang diterapkan oleh masyarakat Indonesia. Seharusnya memanfaatkan tanaman herbal atau bagiannya adalah salah satu cara yang paling murah dan mudah didapatkan. Salah satunya adalah jintan hitam yang sudah dikenal oleh masyarakat Indonesia sebagai habatussauda, yaitu obat dari segala penyakit. Senyawa thymoquinone yang terkandung dalam ekstrak jintan hitam sangat menarik untuk diteliti mengenai perannya dalam meningkatkan sistem imun sehingga dapat menghambat terjadinya inflamasi akibat masuknya virus hepatitis B ke dalam tubuh. Pemeriksaan kadar CRP yang sering digunakan untuk melihat adanya inflamasi dapat dijadikan tolak ukur keberhasilan apakah ekstrak jintan hitam dapat digunakan sebagai alternatif pencegahan untuk virus hepatitis B atau tidak.

16 4 Berdasarkan latar belakang tersebut peneliti ingin melakukan penelitian secara in vivo dan in vitro mengenai respon pemberian ekstrak jintan hitam terhadap kadar CRP pada tikus wistar yang diinduksi vaksin Hepatitis B. 1.2 Rumusan Masalah Berdasarkan latar belakang yang telah dijelaskan sebelumnya, maka peneliti dapat merumuskan masalah yaitu Bagaimana Respon Pemberian Ekstrak Jintan Hitam (Nigella sativa Linn) terhadap Kadar C-Reactive Protein (CRP) pada Tikus Wistar yang Diinduksi Vaksin Hepatitis B? 1.3 Tujuan Penelitian Tujuan Umum Mengetahui respon pemberian ekstrak jintan hitam (Nigella sativa Linn) terhadap kadar C-Reactive Protein (CRP) pada tikus wistar yang diinduksi vaksin Hepatitis B Tujuan Khusus 1. Menganalisa respon pemberian ekstrak jintan hitam dosis 75 mg/kgbb sebagai imunomodulator yang diberikan selama 7 hari terhadap kadar CRP pada tikus wistar yang diinduksi vaksin Hepatitis B. 2. Menganalisa respon pemberian ekstrak jintan hitam dosis 150 mg/kgbb sebagai imunomodulator yang diberikan selama 7 hari terhadap kadar CRP pada tikus wistar yang diinduksi vaksin Hepatitis B. 1.4 Batasan Masalah Batasan masalah dalam penelitian ini adalah sebagai berikut : 1. Jintan hitam atau Nigella sativa Linn yang digunakan adalah biji jintan hitam yang diambil ekstraknya.

17 5 2. Hewan coba yang digunakan adalah tikus jantan galur wistar berusia 2-3 bulan dengan berat badan gram. 3. Virus yang digunakan adalah virus hepatitis B yang diperoleh dari vaksin hepatitis B. 1.5 Manfaat Penelitian Manfaat bagi institusi Dapat digunakan sebagai referensi bagi peneliti selanjutnya untuk penelitian dengan bahan atau metode penelitian yang sejenis Manfaat bagi masyarakat Dapat memberikan informasi ilmiah tentang manfaat ekstrak jintan hitam dan cara pencegahan virus hepatitis B Manfaat bagi peneliti Dapat mengetahui respon pemberian ekstrak jintan hitam (Nigella sativa Linn) terhadap kadar C-Reactive Protein (CRP) pada tikus wistar yang diinduksi vaksin Hepatitis B.